eNOS

摘要： 急性肺损伤(ALI)作为呼吸系统疾病,可引起肺部的严重炎症。NO作为人体重要的信使分子,对炎症具有调节作用,而NO的产生离不开eNOS的催化作用。本文就近年来有关NO、eNOS功能及其与急性肺损伤相关性文章作一综述,为急性肺损伤基础研究及临床诊治与预防提供新的思路与参考。

摘要： 目的探讨Apelin/APJ系统及eNOS在胚胎停育患者绒毛组织中的表达和临床意义。方法选择2018年3月—2018年12月于山西医科大学第二医院妇产科门诊的20例不明原因胚胎停育病人为研究组,20例正常早期妊娠要求流产的女性为对照组。采用免疫组织化学法检测两组绒毛组织中的Apelin、Apelin受体APJ和eNOS的表达,采用荧光实时定量PCR方法检测2组绒毛组织中Apelin、APJ和eNOS mRNA的相对表达量。结果两组女性在年龄、停经天数、妊娠次数等相比,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化方法检测结果显示研究组绒毛组织中Apelin、APJ及eNOS的表达水平均较对照组低(P<0.05)。荧光实时定量PCR方法检测显示研究组绒毛组织中Apelin、APJ及eNOS mRNA的相对表达量较对照组低(P<0.05)。结论Apelin、APJ及eNOS在胚胎停育病人绒毛组织中低表达,有可能导致胚胎血管减少,进而可能影响胚胎的生长发育。

摘要： 目的 探讨达格列净(DAPA)对高糖环境下体外培养的大鼠内皮祖细胞(EPCs)功能的影响。方法 采用荧光染色法对SD大鼠骨髓来源EPCs进行鉴定。以EPCs为研究对象,设立对照组(CG组)、高糖组(HG组)、高糖+DAPA组(GD组)、高糖+DAPA+LY294002组(GDL组)。分别采用MTT法、流式细胞术、小管形成实验检测EPCs细胞活力、凋亡、形成小管能力。应用Western blot检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路相关蛋白表达。结果 与CG组相比较,HG组EPCs细胞活力、形成小管能力、磷酸化AKT(p-AKT)和磷酸化eNOS(p-eNOS)的蛋白表达以及p-AKT/AKT和p-eNOS/eNOS比值均降低(P<0.05),而EPCs的凋亡率增加(P<0.05);与HG组相比较,GD组EPCs的细胞活力、形成小管能力、p-AKT和p-eNOS的蛋白表达以及p-AKT/AKT和p-eNOS/eNOS比值均增加(P<0.05),而EPCs的凋亡率降低(P<0.05);与GD组相比较,GDL组EPCs的细胞活力、形成小管能力、p-AKT和p-eNOS的蛋白表达以及p-AKT/AKT和p-eNOS/eNOS比值均降低(P<0.05),而EPCs的凋亡率增加(P<0.05)。结论 DAPA可通过AKT/eNOS途径保护EPCs免受高糖诱导的功能损害。

摘要： 目的:研究丹贝益肺汤对博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化及肺血管重塑的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(甲泼尼龙,4.2 mg/kg)和丹贝益肺汤高(15.2 g/kg)、中(7.6 g/kg)、低剂量(3.8 g/kg)组,每组20只。除正常组外,其余各组均采用雾化吸入BLM诱导肺纤维化,成模后连续灌胃给药20 d。取各组大鼠肺组织行HE、Masson染色,光镜观察肺组织炎性改变及纤维化程度;ELISA检测血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)和血管性血友病因子(vWF)水平。结果:与模型组比较,各给药组大鼠肺组织炎性改变和纤维化程度明显减轻,丹贝益肺汤高剂量组肺组织炎性改变和纤维化程度与阳性组接近。ELISA检测结果显示各给药组eNOS水平明显增高,血管增生指标ET-1、vWF水平均明显下降(P均<0.05);其中高剂量组上述指标变化显著于阳性组(P均<0.05)。结论:丹贝益肺汤可剂量依赖性减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化程度,提高血清eNOS水平,抑制ET-1、vWF表达,调节肺血管重塑是其部分作用机制。

摘要： 目的探讨缺血预处理(IP)是否减轻兔动脉穿刺引起的内皮损伤。方法将兔分为对照组、缺血预处理组(IP组)、股动脉穿刺组(P组)和缺血预处理+股动脉穿刺组(IP-P组)。用免疫组化测定血管内皮组织磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和一氧化氮合成酶(eNOS)的相对表达量,蛋白印迹法(Western blot)检测p-AKT和p-eNOS的表达,RT-qPCR检测eNOS mRNA相对表达量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆一氧化氮(NO)含量。结果IP-P组血管内皮中PI3K、AKT和eNOS的相对表达量高于P组,低于IP组(P<0.05)。IP-P组p-AKT和p-eNOS的相对表达量高于P组(P<0.05)。IP-P组eNOS的相对表达量高于P组,低于IP组(P<0.05)。IP-P组血浆NO含量高于P组,低于IP组(P<0.05)。结论IP可以促进兔血管内皮eNOS磷酸化和NO合成,这可能是动脉穿刺前IP减少内皮损伤的机制之一。

摘要： 目的探讨微小RNA-214(miR-214)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)轴参与糖尿病大鼠肾损伤的作用机制。方法探讨糖尿病大鼠肾组织miR-214及尿白蛋白的动态变化:将雄性SD大鼠随机分为对照组和链脲菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病模型组,检测各组大鼠第0、1、2、6周肾组织miR-214及尿白蛋白变化。探讨miR-214/eNOS轴参与糖尿病大鼠肾损伤的分子机制:雄性SD大鼠随机分为对照组,STZ组,STZ+Scrambled anti-miR组,STZ+anti-miR-214组,STZ+Scrambled anti-miR+eNOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)组和STZ+anti-miR-214+L-NAME组。STZ诱导为糖尿病后13周检测各组大鼠体重、肾重与空腹血糖并收集血、尿与肾组织标本;ELISA法检测尿白蛋白和肾皮质eNOS蛋白水平;PAS染色评估肾组织病理学改变;qRT-PCR检测肾皮质TGF-β1、MCP-1与肾小球eNOS mRNA的表达。结果糖尿病大鼠肾组织miR-214表达显著升高,且早于蛋白尿1周出现;抑制miR-214促进糖尿病大鼠肾小球eNOS mRNA与肾皮质eNOS蛋白表达,伴随蛋白尿和肾脏病理损伤显著减轻及肾皮质TGF-β1与MCP-1水平下降;eNOS抑制剂L-NAME阻断了anti-miR-214的肾保护作用。结论miR-214/eNOS轴参与糖尿病大鼠肾损伤的分子机制,抑制miR-214可减轻糖尿病肾损伤。

摘要： 目的:对比健康人与冠心病慢性心衰患者子午时辰的一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)及B型脑钠尿肽(BNP)水平,探索冠心病慢性心衰患者内环境分子昼夜的节律变化及最佳用药时间点.方法:选取冠心病慢性心衰患者60例作为观察组,选取同时期健康人60例作为对照组;于子时(23:00至1:00)和午时(11:00至13:00)分别提取研究对象右手肘静脉血清,采用Griess法检测血清NO的水平,ELISA法测血清eNOS、ET-1和BNP的水平.结果:两组子时血清的NO、eNOS浓度均较午时明显降低(P<0.05),观察组子时、午时血清NO、eNOS浓度均较对照组低(P<0.05).两组子时血清的ET-1、BNP浓度均较午时明显升高(P<0.05),观察组子时、午时血清ET-1、BNP浓度均较对照组高(P<0.05).结论:健康人与冠心病慢性心衰患者子时血清的NO、eNOS浓度均较午时明显降低,而ET-1、BNP浓度较午时明显升高,且以冠心病慢性心衰患者变化更显著,与人体生理节律变化一致,并与子午流注理论基本相符,可为临床上冠心病慢性心衰患者最佳用药时间点提供参考.

摘要： 目的 研究生理及尿毒症状态下剪切力对静脉内皮细胞中,KLF2和eNOS表达的影响,探讨导致静脉内皮细胞功能紊乱的机制.方法 分别在生理状态和尿毒症状态下,在平行板流动腔内模拟不同剪切力,用剪切力作用各组静脉内皮细胞4、12、24 h.采用免疫组化荧光染色技术和实时荧光定量PCR技术检测KLF2及eNOS的表达情况.结果 在生理状态下,KLF2明显受剪切力作用调节,高强度剪切力和生理强度剪切力会上调KLF2的表达,而低强度剪切力和振荡剪切力会下调KLF2的表达,但随作用时间的延长,KLF2的表达也会有所上调.在尿毒症状态下,KLF2表达明显被抑制,即使再给予高剪切力作用,KLF2水平也不及正常生理状态;在低剪切力及振荡剪切力作用下,KLF2表达更明显地被抑制.KLF2主要在细胞核内表达,随着剪切力的作用,KLF2也在细胞质中表达,而eNOS主要在细胞质和细胞核内呈颗粒样表达.结论 动静脉内瘘术后在尿毒症环境及振荡剪切力的多重因素作用下,KLF2和eNOS的表达受到抑制,可能是导致静脉内皮细胞功能紊乱、内膜增生、自体动静脉内瘘失功发生和发展的主要机制.

摘要： 目的 基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidro-side,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制.方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用.不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L-1)共孵育48 h诱导EndMT.采用Western blot检测VE-cadherin、α-SMA、KLF4及eNOS的蛋白水平,划痕修复实验检测细胞迁移能力,硝酸还原酶法检测细胞内NO水平,细胞免疫荧光技术检测KLF4表达及定位.(2)基于KLF4/eNOS信号,研究SAL抑制EndMT的信号机制.采用siRNA技术实现细胞内KLF4的沉默,Western blot检测VE-cadherin与α-SMA,KLF4及eNOS的蛋白水平.结果(1)SAL上调Hcy诱导的VE-cadherin及下调α-SMA的表达,降低细胞迁移能力,上调eNOS/NO信号轴水平,并抑制KLF4的表达及向胞核转位.(2)沉默KLF4可下调 α-SMA及KLF4的表达,上调VE-cadherin和eNOS的表达.与SAL+siKLF4组比较,SAL组及siKLF4组对表型标志物的作用无明显差异.结论 SAL抑制Hcy诱导的EndMT,其作用与调节KLF4/eNOS信号途径有关.

摘要： 目的 观察Zeste同源复合物2(EZH2)基因表达对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞炎症反应的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),加入不同浓度(0、25、50、100μg/mL)ox-LDL作用12、24 h,采用ELISA法检测细胞上清白细胞介素6(IL-6)水平;结果 显示,100μg/mL ox-LDL作用后上清IL-6水平升高最明显(P均0.05).与空白A组比较,实验A组、阳性对照A组、阴性对照A组上清IL-6水平及细胞TNF-α、e-NOS、IL-8 mRNA表达均升高,实验A组升高更明显(P均0.05).与空白B组比较,实验B组、阳性对照B组、阴性对照B组上清IL-6水平及细胞TNF-α、e-NOS、IL-8 mRNA表达均升高,阳性对照B组、阴性对照B组升高更明显(P均0.05).结论 EZH2过表达可通过靶向调节炎症因子TNF-α、e NOS、IL-8、IL-6而促进ox-LDL诱导内皮细胞炎症反应,抑制EZH2表达则具有相反作用.

摘要： 本文采用病例对照,研究106乙肝后肝硬化患者eNOS基因内含子4处VNTR多态性,并与108例正常人进行对照,分析与肝硬化门脉高压的关系.

摘要： 本文采用病例对照,研究106乙肝后肝硬化患者eNOS基因内含子4处VNTR多态性,并与108例正常人进行对照,分析与肝硬化门脉高压的关系.

摘要： 本文采用病例对照,研究106乙肝后肝硬化患者eNOS基因内含子4处VNTR多态性,并与108例正常人进行对照,分析与肝硬化门脉高压的关系.

摘要： 本文采用病例对照,研究106乙肝后肝硬化患者eNOS基因内含子4处VNTR多态性,并与108例正常人进行对照,分析与肝硬化门脉高压的关系.

摘要： 本发明提供了ENO1基因启动子区甲基化位点及其在制备早期诊断和预后评估食管癌的试剂盒中的应用，属于疾病诊断及预后评级技术领域；ENO1基因启动子区甲基化位点如SEQ ID No.1所示，提取食管鳞癌和癌旁正常样本组织DNA，经亚硫酸氢盐修饰后采用飞行质谱法检测ENO1基因启动子区CpG位点的甲基化频率，同时采用免疫组化检测食管鳞癌和癌旁正常组织样本中ENO1蛋白的表达；研究发现食管鳞癌中ENO1基因启动子区低甲基化且ENO1蛋白高表达，且其低甲基化的患者预后不良，ENO1可促进食管癌细胞的糖酵解水平，促进其增殖并抑制凋亡；检测ENO1基因的甲基化水平用于食管鳞癌的早期诊断和预后评价的试剂。

摘要： 本发明提供两株分泌烯醇化酶ENO1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏编号分别为：CCTCCNO:C2020150和CCTCCNO:C2020151，保藏日期为：2020年9月6日。本发明还提供由上述的杂交瘤细胞株产生的烯醇化酶ENO1单克隆抗体，在制备抑制宫颈癌迁移或宫颈癌细胞增殖的药物中的应用。本发明首次将ENO1基因克隆入真核表达载体，表达和纯化出ENO1蛋白。应用ENO1蛋白免疫小鼠，通过杂交瘤技术成功制备并筛选出高效价ENO1mAb，并测序获得其可变区基因序列。本发明的ENO1mAb具有较好的安全性和抗宫颈癌效果，有望应用于临床肿瘤治疗。

摘要： 本发明提供了一种ENO2单克隆抗体及其制备方法和应用，涉及单克隆抗体技术领域。本发明提供了所述单克隆抗体11D7的重链和轻链的可变区的互补决定区序列，基于所述序列可将可变区序列构建到抗体表达载体上，转染细胞表达获得重组单克隆抗体。本发明得到的单克隆抗体载体易于保存，易于抗体生产过程质量控制；也方便对抗体做一系列的改造，更深入的研究，更广泛的应用。

摘要： 本发明涉及METTL3/ALKBH5/ENO1调控轴作为靶位点在制备治疗肺腺癌药物中的应用。本发明首次证实肺腺癌中“METTL3/ALKBH5/ENO1”调控轴的存在，该调控轴是肺腺癌治疗领域的一种非常有价值的潜在靶点，有助于通过多个节点的干预彻底打破促进肿瘤发生发展的恶性循环，更有效抑制肿瘤进展，此外METTL3/ALKBH5/ENO1调控轴还可作为临床上预测肺腺癌患者的分子标志物。本发明还证实了甲基化抑制剂DAA，糖酵解抑制剂2DG、ENOblock可作为安全高效的肺腺癌治疗药物。

摘要： 本发明提供了ENO1基因启动子区甲基化位点及其在制备早期诊断和预后评估食管癌的试剂盒中的应用，属于疾病诊断及预后评级技术领域；ENO1基因启动子区甲基化位点如SEQ ID No.1所示，提取食管鳞癌和癌旁正常样本组织DNA，经亚硫酸氢盐修饰后采用飞行质谱法检测ENO1基因启动子区CpG位点的甲基化频率，同时采用免疫组化检测食管鳞癌和癌旁正常组织样本中ENO1蛋白的表达；研究发现食管鳞癌中ENO1基因启动子区低甲基化且ENO1蛋白高表达，且其低甲基化的患者预后不良，ENO1可促进食管癌细胞的糖酵解水平，促进其增殖并抑制凋亡；检测ENO1基因的甲基化水平用于食管鳞癌的早期诊断和预后评价的试剂。

摘要： 本发明提供了一种ENO2单克隆抗体1C5及其制备方法和应用，涉及单克隆抗体技术领域。本发明公开了所述单克隆抗体1C5的重链和轻链的可变区的互补决定区序列，基于所述序列，可将可变区序列构建到抗体表达载体上，转染细胞表达获得重组单克隆抗体。本发明得到的单克隆抗体1C5载体易于保存，易于抗体生产过程质量控制；本发明所述单克隆抗体1C5，可以识别ENO2蛋白，具有生物学活性，可用于ENO2抗原检测等其它科学研究，具有非常好的应用价值和非常重要科研指导意义。

摘要： 本发明提供了一种ENO2单克隆抗体及其制备方法和应用，涉及单克隆抗体技术领域。本发明提供了所述单克隆抗体11D7的重链和轻链的可变区的互补决定区序列，基于所述序列可将可变区序列构建到抗体表达载体上，转染细胞表达获得重组单克隆抗体。本发明得到的单克隆抗体载体易于保存，易于抗体生产过程质量控制；也方便对抗体做一系列的改造，更深入的研究，更广泛的应用。

摘要： 本发明公开了一种过表达Eno3基因的载体及其制备方法和应用，涉及分子生物技术和基因工程领域。本发明提供了一种能够稳定有效过表达Eno3基因的载体，发现过表达Eno3基因能够调控细胞的代谢能力，并能够有效调节细胞凋亡和纤维化相关基因的表达水平，能够应用于制备提高细胞代谢和凋亡等过程的药物中，为相关疾病的治疗和研究提供更多方向，具有较高的实际应用的价值。

摘要： 本发明公开了一种荧光增强型锌离子检测荧光探针ENO及其制备方法和应用，该荧光增强型锌离子检测荧光探针ENO以色酮‑3‑甲醛和异喹啉酰肼为荧光基团，其结构如下式I所示。本发明的荧光增强型锌离子检测荧光探针ENO对锌离子拥有很强的选择性，响应时间快，低检出限以及肉眼可见的颜色变化，而且在环境水溶液和细胞锌离子检测中具有良好的应用。本发明以色酮‑3‑甲醛和异喹啉酰肼为荧光基团，通过缩合反应制备希夫碱型荧光探针ENO，该荧光探针制备方法简单，原料易得，所得产品为淡黄色固体粉末，易于存储。

摘要： 本发明公开了ENO3在肾癌诊断及治疗中的应用。本发明提供了检测ENO3的试剂在制备诊断肾癌/预测肾癌预后/预测肿瘤分期的产品中的应用及一种诊断肾癌/预测肾癌预后/预测肿瘤分期的产品，本发明还提供了一种用于治疗肾癌的药物组合物、ENO3在制备治疗肾癌的药物组合物中的应用以及一种筛选治疗肾癌的候选药物的方法。