人肝癌HepG2细胞

摘要： 目的 探究鬼针草总黄酮(TFB)对人肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)的影响。方法 取鬼针草,用80%乙醇回流提取,制得TFB。利用棕榈酸体外诱导HepG2细胞复制IR模型,考察低、中、高质量浓度(20、40、80 mg/L)TFB对细胞葡萄糖消耗量的影响;以二甲双胍为阳性对照,考察低、中、高质量浓度(20、40、80 mg/L)TFB对细胞中胰岛素受体底物1(IRS-1)、c-Jun氨基端激酶(JNK)和蛋白激酶C(PKC)表达的影响。采用分子对接技术探讨槲皮素、槲皮苷等8个TFB主要活性成分与IRS-1、JNK、PKC蛋白的相互作用。结果 TFB低、中、高质量浓度组细胞的葡萄糖消耗量均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组细胞中的IRS-1、JNK蛋白的表达量均显著降低,PKC蛋白的表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,TFB低、中、高质量浓度组和二甲双胍阳性对照组能上调IRS-1、JNK蛋白的表达并下调PKC蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。TFB中的海生菊苷与IRS-1蛋白的分子对接能量打分值为-7.9 kcal/mol(1 kcal=4.816 kJ),海生菊苷、芦丁与JNK蛋白的分子对接能量打分值均为-9.3kcal/mol,槲皮苷与PKC蛋白的分子对接能量打分值为-4.9 kcal/mol,成分与蛋白间的相互作用包括形成氢键、疏水键等。结论TFB对HepG2细胞IR有显著的改善作用,其机制可能与调节IRS、JNK、PKC蛋白的表达有关;海生菊苷、芦丁和槲皮苷可能是改善IR的潜在活性成分。

摘要： 为明确芡实壳醇提物对SGC7901及HepG2细胞体外抑制作用及机制。该研究采用75%乙醇对芡实壳超声提取,采用福林酚法测定醇提物总酚含量,采用CCK-8法检测醇提物对SGC7901和HepG2细胞的增殖作用抑制率并计算IC50值,使用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期、细胞线粒体膜电位及胞内钙离子浓度。结果表明,醇提物对SGC7901和HePG2细胞具有增殖抑制作用,浓度为200μg/mL的醇提物作用细胞48 h后,抑制率分别为92.63%和72.40%。细胞周期检测表明,浓度为200~800μg/mL的醇提物可使SGC7901细胞阻滞于G0/G1期;浓度为50~200μg/mL的醇提物可使HepG2细胞阻滞于S期。细胞线粒体膜电位测定表明,醇提物可使SGC7901和HePG2细胞线粒体膜电位下降且具浓度依赖性,醇提物浓度为200μg/mL时,细胞线粒体膜电位相较对照组分别下降21.92%和53.81%。细胞钙离子浓度测定表明,醇提物可使SGC7901和HePG2细胞内钙离子浓度升高且具浓度依赖性,醇提物浓度为200μg/mL时,胞内钙离子浓度相较对照组分别上升21.85%和14.14%。实验表明芡实壳醇提物可抑制SGC7901和HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与细胞线粒体膜电位降低及胞内钙离子浓度升高有关。

摘要： 目的:研究穿心莲内酯对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法:采用CCK-8法检测人肝癌HepG2细胞增殖活力,采用流式细胞仪检测人肝癌HepG2细胞的凋亡情况,采用Transwell实验检测穿心莲内酯对HepG2细胞迁移能力的影响。结果:随着穿心莲内酯质量分数的增加及作用时间的延长,HepG2肝癌细胞活力逐渐下降;与0 mg/L穿心莲内酯对比,各穿心莲内酯组的吸光度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在穿心莲内酯质量分数0~25 mg/L范围内,随着质量分数增加,HepG2肝癌细胞凋亡率(Q2+Q3)不断增加;在穿心莲内酯质量分数为25 mg/L时,凋亡率达到(12.70±1.78)%。经过穿心莲内酯作用48 h,0 mg/L穿心莲内酯组的HepG2肝癌细胞穿过半透膜进入下室的细胞数明显多于其他各给药组;与低剂量组对比,高剂量组HepG2肝癌细胞穿过半透膜进入下室的比例明显减少。结论:穿心莲内酯可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖和迁移,并可促进其凋亡。

摘要： 为初步研究落地生根冻干粉(BPFP)对人癌细胞增殖的影响,应用CCK-8实验检测不同质量浓度BPFP对人肝癌HepG2细胞、人脑胶质瘤U87细胞和人前列腺癌DU145细胞增殖的影响;用Hoechst凋亡试剂盒检测不同质量浓度BPFP对细胞凋亡的影响.实验结果显示:BPFP对HepG2、U87和DU145细胞生长均有一定的抑制作用;BPFP作用48 h对HepG2细胞增殖抑制作用明显,抑制率在82％以上,其抑制程度与时间呈依赖性,但与剂量不呈依赖性;质量浓度为150μg/mL以上作用48 h对U87细胞增殖抑制明显,增殖抑制率大于80％;质量浓度为250μg/mL作用48 h对DU145增殖抑制作用最强,达到100％.BPFP作用24 h对HepG2、U87和DU145细胞凋亡均有一定的促进作用.实验结果提示,BPFP对HepG2、U87和DU145细胞的增殖有抑制作用,可能与BPFP能促进细胞凋亡有关.

摘要： 为初步研究落地生根冻干粉(BPFP)对人癌细胞增殖的影响,应用CCK-8实验检测不同质量浓度BPFP对人肝癌HepG2细胞、人脑胶质瘤U87细胞和人前列腺癌DU145细胞增殖的影响;用Hoechst凋亡试剂盒检测不同质量浓度BPFP对细胞凋亡的影响.实验结果显示:BPFP对HepG2、U87和DU145细胞生长均有一定的抑制作用;BPFP作用48 h对HepG2细胞增殖抑制作用明显,抑制率在82%以上,其抑制程度与时间呈依赖性,但与剂量不呈依赖性;质量浓度为150μg/mL以上作用48 h对U87细胞增殖抑制明显,增殖抑制率大于80%;质量浓度为250μg/mL作用48 h对DU145增殖抑制作用最强,达到100%.BPFP作用24 h对HepG2、U87和DU145细胞凋亡均有一定的促进作用.实验结果提示,BPFP对HepG2、U87和DU145细胞的增殖有抑制作用,可能与BPFP能促进细胞凋亡有关.

摘要： 探究黑果枸杞花青素在体外对人肝癌HepG2细胞增殖和自噬的影响.利用CCK-8法测定细胞活力,EdU和细胞划痕试验检测细胞增殖和迁移效果,RT-PCR和Western blot检测增殖和自噬相关基因的mRNA和蛋白表达.结果显示,黑果枸杞花青素可有效抑制人肝癌HepG2细胞的增殖和迁移;上调增殖因子(LATS1、LATS2和MOB1)和自噬因子(Beclin-1、LC3-Ⅱ和AMPK),并下调增殖因子YAP的mRNA水平;下调自噬因子p-mTOR和细胞周期因子CDK4,并上调自噬因子p-AMPK和LC3-Ⅱ的蛋白表达.由此推测黑果枸杞花青素可在体外抑制人肝癌HepG2细胞增殖和迁移,并促进入肝癌HepG2细胞发生自噬.

摘要： 目的:研究阿魏酸对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.方法:采用CCK-8法筛选阿魏酸的给药浓度;采用Western blot法筛选白细胞介素6(IL-6)诱导磷酸化信号转导蛋白及转录激活子3(p-STAT3)蛋白高表达的HepG2细胞模型的最佳造模浓度.将HepG2细胞分为空白对照组、模型组、阿魏酸组(0.5 mmol/L)和阳性对照组(p-STAT3抑制剂C188-9,10μmol/L),除空白对照组外,模型组加入IL-6、各给药组加入IL-6和相应药物分别进行培养.采用CCK-8法、Transwell法和Annexin V-FITC/PI双染色法分别检测各组细胞存活率、侵袭数和早期、晚期凋亡率;采用Western blot法检测各组细胞中p-STAT3、胱天蛋白酶3(cas-pase-3)、锌指蛋白(ZBP-89)和波形蛋白(vimentin)的表达水平.基于PDB蛋白数据库,以STAT3高度相似晶体结构1BG1为对接模板,以Tyr705周围的区域为假定的结合口袋,进行阿魏酸与STAT3蛋白的分子对接分析.结果:选择以0.5 mmol/L阿魏酸干预HepG2细胞48 h作为后续实验条件,以50 ng/mL IL-6为造模条件.与空白对照组比较,模型组细胞侵袭数和p-STAT3/STAT3比值、vimentin蛋白表达水平均显著增加或升高(P<0.05或P<0.01),细胞晚期凋亡率和caspase-3蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,阿魏酸组和阳性对照组细胞存活率、侵袭数、p-STAT3/STAT3比值和vimentin蛋白表达水平均显著减少或降低(P<0.05或P<0.01),细胞早期凋亡率(阿魏酸组除外)、晚期凋亡率和caspase-3、ZBP-89(阳性对照组除外)蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01).分子对接结果表明,阿魏酸的羧酸基团与Asn581、Lys591分别存在1.9?、2.0?的氢键作用,结合能为-4.4 kcal/mol.结论:阿魏酸可能通过与STAT3磷酸化位点直接结合来抑制p-STAT3的活性;并可通过STAT3依赖性途径上调caspase-3蛋白表达,或可通过STAT3非依赖性途径上调ZBP-89蛋白表达,进而下调vimentin蛋白表达,从而抑制HepG2细胞的增殖、侵袭与凋亡.

摘要： 目的 乙型肝炎病毒(HBV)是原发性肝癌发生发展的重要诱因,乙肝病毒x蛋白(HBx)是HBV引起疾病过程中的关键致病基因.探讨益气化瘀解毒方对HBV相关性肝癌中HBx表达的影响.方法 实验分为空白对照组、益气化瘀解毒方组、重楼皂苷I组、二甲双胍组、益气化瘀解毒方加重楼皂苷I组、益气化瘀解毒方加二甲双胍组,以HBV质粒转染HepG2的受体细胞(HepG 2.2.15)作为观察对象,免疫印迹法(Western blot,WB)、实时荧光定量PCR法检测不同药物组对HepG 2.2.15细胞中HBx基因蛋白和mRNA表达水平的影响;重楼皂苷I作为益气化瘀解毒方中的一部分,并通过分子对接验证重楼皂苷I对肝癌的影响.结果 益气化瘀解毒方组、重楼皂苷1组、二甲双胍组、益气化瘀解毒方加重楼皂苷I组、益气化瘀解毒方加二甲双胍组组均能不同程度下调HBx、mRNA表达(P<0.01);分子对接结果表明重楼皂苷I与HBx有较好的亲和性.结论 益气化瘀解毒方可通过下调关键致癌基因HBx的方式来抑制肝癌的发生,从而对肝癌起到一定的治疗作用,重楼皂苷I可能为该方的主要活性成分.

摘要： 目的:探讨澳洲茄边碱对人肝癌HepG2细胞生长和凋亡的影响,并研究其潜在作用机制.方法:考察0(空白组)～12μmol/L澳洲茄边碱作用24、48 h对HepG2细胞存活率的影响,0(空白组)、6μmol/L澳洲茄边碱作用10 d对细胞克隆形成的影响,0(空白组)、4、6、8μmol/L澳洲茄边碱作用24 h对细胞凋亡率和细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)mRNA表达量以及Bcl-2、剪切的caspase-3(cleaved caspase-3)蛋白表达量和磷酸化腺苷一磷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)/AMPKα的影响.考察AMPK抑制剂compound C对经6μmol/L澳洲茄边碱作用24 h后细胞中AMPKα、Bcl-2蛋白表达量的影响.结果:与空白组比较,1～12μmol/L澳洲茄边碱作用24、48 h均可显著降低细胞存活率(P<0.05),且有浓度依赖趋势,其半数抑制浓度分别为8.310、7.996μmol/L;经6μmol/L澳洲茄边碱作用10 d后细胞的克隆形成率显著降低(P<0.05).6、8μmol/L澳洲茄边碱作用后细胞凋亡率和细胞中Bax、caspase-3 mRNA及cleaved caspase-3蛋白(除8μmol/L外)表达量、p-AMPKα/AMPKα(除8μmol/L外)均显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达量均显著降低(P<0.05),部分指标变化有浓度依赖性.compound C可以抑制AMPKα蛋白表达并逆转澳洲茄边碱对Bcl-2蛋白的抑制作用.结论:澳洲茄边碱可以抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡,作用机制可能与激活AMPK信号通路有关.

摘要： 目的:观察新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡.结果:新健脾理气方对HepG2细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性.Hoechst33258染色后荧光显微镜观察发现,新健脾理气方能明显诱导HepG2细胞凋亡.Annexin V-FITC/PI法检测发现,HepG2细胞早期凋亡率与新健脾理气方有剂量依赖关系,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05),表明新健脾理气方能促进HepG2细胞凋亡.结论:新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导其凋亡.其具体分子机制有待进一步研究.

摘要： 目的:观察新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡.结果:新健脾理气方对HepG2细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性.Hoechst33258染色后荧光显微镜观察发现,新健脾理气方能明显诱导HepG2细胞凋亡.Annexin V-FITC/PI法检测发现,HepG2细胞早期凋亡率与新健脾理气方有剂量依赖关系,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05),表明新健脾理气方能促进HepG2细胞凋亡.结论:新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导其凋亡.其具体分子机制有待进一步研究.

摘要： 目的:观察新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色及荧光显微镜观察细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡.结果:新健脾理气方对HepG2细胞增殖有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性.Hoechst33258染色后荧光显微镜观察发现,新健脾理气方能明显诱导HepG2细胞凋亡.Annexin V-FITC/PI法检测发现,HepG2细胞早期凋亡率与新健脾理气方有剂量依赖关系,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05),表明新健脾理气方能促进HepG2细胞凋亡.结论:新健脾理气方对人肝癌HepG2细胞的增殖有抑制作用,并能诱导其凋亡.其具体分子机制有待进一步研究.

摘要： 一种具有抗人肝癌HepG2细胞活性的TB类衍生物合成方法，属于TB类衍生物合成方法。本发明采用不同的醛基取代‑TB衍生物与邻羟基苯乙酮类化合物发生羟醛缩合反应，得到TB‑查尔酮类化合物；不同的醛基取代的TB衍生物与苯二胺在硅磺酸(SSA)的催化下经缩合反应得到TB‑苯并咪唑类化合物，再以TB‑查尔酮类化合物为原料控制不同的反应条件，得到一系列TB‑黄酮类化合物。初步研究了这两种不同类型的TB类衍生物对抗人肝癌HepG2细胞的活性，从中筛选得到了6个抗人肝癌HepG2细胞活性优良的产物，为将其开发为抗肝癌新药打下了基础。优点：反应产率较高。反应条件温和，操作简单，反应时间特别短，产率高，后处理简便。反应绿色环保，经济高效，具有极高的实际应用价值。

摘要： 一种2,8‑二芳基(氨基)朝格尔碱衍生物的合成方法，属于朝格尔碱衍生物的合成方法。2,8‑二芳基(氨基)朝格尔碱衍生物包括：2(8)‑三芳基吡啶(三吡啶)朝格尔碱(TB)衍生物、2,8‑二芳基朝格尔碱(TB)衍生物和2‑芳基‑8‑氨基朝格尔碱(TB)衍生物；分别通过Suzuki反应将三芳基吡啶、三吡、苯基、菲基或蒽基等片断引入TB骨架；通过Ullmann反应将咔唑、二苯胺或吩噻嗪引入TB骨架，得到了新型2,8‑二芳基(氮)朝格尔碱(TB)衍生物。所有产物的抗人肝癌HepG2细胞活性，从中筛选得到了4个抗人肝癌HepG2细胞活性优良的产物。将吩噻嗪、咔唑等具有生理活性的片断引入TB骨架，首次设计合成了2,8‑二芳基(氨基)朝格尔碱衍生物，希望通过二者的强强联合筛选到具有抗肝癌活性的化合物。

摘要： 本发明涉及一种油酸诱导的人肝癌细胞系HepG2氧化应激模型的建立方法，所述方法采用油酸体外诱导处理人肝癌细胞系HepG2。本发明方法采用油酸体外诱导处理HepG2，油酸最适浓度为1mmol/L，与现有技术相比，本发明方法摒弃了以往用H2O2诱导细胞产生氧化应激，首次使用油酸建立诱导氧化应激模型，通过考察细胞存活率和细胞内ROS水平，确定了油酸的最佳使用浓度和细胞孵育时间。此方法操作容易、氧化效果较好、成本较低，可帮助建立氧化应激模型，为后续研究抗氧化机制提供理论参考依据，可帮助细胞培养和建立氧化应激模型的研究人员比较顺利的完成HepG2细胞的培养和氧化应激模型的建立。

摘要： 本发明涉及一种葡萄糖诱导的人肝癌细胞HepG2糖尿病模型的制备方法及应用，属于生物技术领域。该方法于37°C，5％CO2恒温培养箱中，培养HepG2细胞至贴壁长满80％‑90％，按细胞浓度1×105个/mL接种于96孔板，细胞生长至96孔板底部50‑70％时，不完全培养基饥饿培养4h后，加入终浓度30‑120mM葡萄糖诱导24‑48h建立糖尿病细胞模型。本发明建立了葡萄糖诱导的体外糖尿病细胞模型，通过高浓度葡萄糖刺激，HepG2细胞存活率显著下降，模型组细胞存活率为对照组的35‑75％，该方法简单易行，可用于探讨药物对糖代谢的影响，提高对降糖药物筛选的速度，对糖尿病的研究具有深远的意义。

摘要： 本发明公开了一种用于检测人耐药肝癌细胞株HepG2/ADM的核酸适配体及检测试剂盒，该核酸适配体包括核酸适配体H1，核酸适配体H1的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的DNA片段。检测试剂盒为包括用于检测人耐药肝癌细胞株HepG2/ADM的核酸适配体的试剂盒。本发明的核酸适配体和试剂盒可灵敏、简便、高效、特异性地识别和检测人耐药肝癌细胞株HepG2/ADM，核酸适配体具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。该核酸适配体还为耐药细胞耐药相关物质的发现、癌症的临床诊断与分型、耐药机制研究以及逆转耐药性提供了全新的思路和方法。

摘要： 本发明公开了青蒿素在制备抗人肝癌HepG2和Huh7细胞药物的应用，通过抑制人肝癌HepG2细胞和Huh7细胞的增殖，和/或，调整人肝癌HepG2细胞和Huh7细胞内的miRNA表达谱实现。所述青蒿素浓度≤100μM；所述药物的剂型为冲剂或胶囊。本发明还公开了一种含青蒿素的抗人肝癌HepG2和Huh7细胞药物冲剂、一种含青蒿素的抗人肝癌HepG2和Huh7细胞药物胶囊及其制备方法。在青蒿素药物作用下，抑制人肝癌HepG2细胞和Huh7细胞的增殖，调控人肝癌HepG2细胞和Huh7细胞中miRNA表达谱变化，发现潜在调控肝癌的miRNA，为青蒿素在肝癌治疗策略发展中奠定基础。

摘要： 本发明公开了一种青蒿琥酯在制备治疗AKT/mTOR信号通路激活的人肝癌HepG2细胞的药物中的应用。所述青蒿琥酯能够降低p‑AKT、p‑S6、c‑Myc的表达，进而抑制人肝癌HepG2细胞增殖。本发明中首次发现青蒿琥酯对人肝癌HepG2细胞具有增殖抑制作用，并呈现良好的时间和浓度依赖性，青蒿琥酯能够通过抑制AKT/mTOR通路的P‑AKT、P‑S6、c‑Myc的表达，进而抑制人肝癌HepG2细胞增殖；因此，青蒿琥酯可以作为抑制AKT/mTOR信号通路的激活，阻滞G2/M期候选药物进行研究和开发。

摘要： 本发明公开了一种人肝癌细胞HepG2电转染的方法，该法主要采用等渗透压的电转染缓冲液，对人肝癌细胞HepG2进行一次放电，通过脉冲电场和脉冲磁场交替作用及与等渗透压组合，使细胞膜透性增加，膜强度减弱，使得外源分子更容易进入细胞质中，从而提高转染效率。实际测试表明，应用本发明HepG2细胞转染pmaxGFP(绿色荧光蛋白)细胞学实验转染效率达到45％左右。同时，本发明可以减少试剂购买及运输的过程，缩短实验操作时间，降低了研究成本，为人肝癌细胞HepG2后续研究提供了简便的细胞转染方式。

摘要： 一种具有抗人肝癌HepG2细胞活性的TB类衍生物合成方法，属于TB类衍生物合成方法。本发明采用不同的醛基取代-TB衍生物与邻羟基苯乙酮类化合物发生羟醛缩合反应，得到TB-查尔酮类化合物；不同的醛基取代的TB衍生物与苯二胺在硅磺酸(SSA)的催化下经缩合反应得到TB-苯并咪唑类化合物，再以TB-查尔酮类化合物为原料控制不同的反应条件，得到一系列TB-黄酮类化合物。初步研究了这两种不同类型的TB类衍生物对抗人肝癌HepG2细胞的活性，从中筛选得到了6个抗人肝癌HepG2细胞活性优良的产物，为将其开发为抗肝癌新药打下了基础。优点：反应产率较高。反应条件温和，操作简单，反应时间特别短，产率高，后处理简便。反应绿色环保，经济高效，具有极高的实际应用价值。

摘要： 本发明在人肝癌细胞系HepG2/C3A中同时稳定表达激活型的AKT1和激活型的MEK1，首次获得可在无血清添加和无生长因子添加的完全化学成分限定培养基中生长的人肝癌细胞群C3A810。利用该细胞群作为反应器成功重组表达人血清白蛋白（human serum albumin，HSA），表明该细胞可作为包括人血清白蛋白在内的血浆蛋白药物、人血清白蛋白融合的细胞长效细胞因子等多种人用重组蛋白药物的反应器。