人细小病毒B19

摘要： 目的探讨肾移植术后供者来源性人细小病毒B19(HPV-B19)感染的防治策略。方法回顾性分析2019年1月至2021年8月首都医科大学附属北京友谊医院收治的6例肾移植术后早期高度怀疑供者来源性HPV-B19感染导致纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)患者的临床诊治经过。结果6例(3对)患者肾脏分别来源于同一供者。患者均于移植后早期出现严重贫血,HPV-B19 DNA检测阳性,骨髓穿刺确诊为PRCA。6例患者均接受输血治疗,在调整免疫抑制方案或剂量的同时,使用大剂量静脉注射免疫球蛋白(IVIG)(总剂量1.5~2.0 g/kg)。6例患者贫血均得到明显改善,网织红细胞计数出现逆转性升高为PRCA改善的最早表现。治疗期间所有患者肾功能稳定,未发生明显不良反应。随访过程中,6例患者病情平稳,HPV-B19 DNA仍持续阳性(低水平),IgG抗体持续阴性。4例患者随访超过1年,IgM抗体转为阴性,转阴时间为10~12个月,其余患者IgM抗体仍为阳性。结论肾移植术后严重的HPV-B19感染可导致PRCA,及时采取治疗措施安全有效。鉴于移植后早期HPV-B19感染存在供者来源可能性,建议供者捐献前筛查HPV-B19。对于阳性供者,其器官经移植后应严密监测受者感染情况并及时采取防治措施。

摘要： 目的对一起由人细小病毒B19(HPV-B19)引发的疑似医院感染暴发事件进行调查分析。方法采用流行病学调查方法和环境卫生学监测,对2021年5月12—19日某三甲医院重症监护病房(ICU)护理人员发生的皮疹事件进行调查,分析其发生的可能因素,并采取有效的控制措施。结果在HPV-B19感染并噬血细胞综合征患者住院期间,ICU共有50名医护人员,其中医生11名,护理人员39名。11名护理人员(22.0%)于患者出院后第5天开始相继出现皮疹。皮疹部位主要为双下肢(100.0%),皮疹多为红色丘疹(45.5%),同时伴有关节痛(72.7%)、浅表淋巴结肿大(63.6%)、乏力(54.5%),肌肉酸痛(45.5%)等。11名护理人员均为女性,平均年龄(27.82±2.6)岁。9名进行了HPV-B19 DNA和(或)特异性抗体IgM检测,结果均阳性。均予复方甘草酸苷片、氯雷他定、岗梅感冒颗粒口服等对症治疗,皮疹持续时间5~60 d。其中1例妊娠者未发生流产,定期产检监测,未发现胎儿异常。自5月19日采取控制措施后未发现相关病例。结论此次事件是ICU疑似HPV-B19医院感染暴发事件,临床医生需加强对该病毒的正确认识,落实感染防控措施,以避免医院感染暴发事件的发生。

摘要： 目的总结心脏移植术后发生人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV B19)感染患者的护理方法,为此类患者的观察及护理提供经验。方法回顾性总结11例原位心脏移植后发生人HPV B19感染患者的观察及护理要点。结果11例患者临床症状消失,全部顺利出院,未发生院内HPV B19感染传播。结论心脏移植术后发生HPV B19感染使护理难度大大增加,采取有效的护理措施有利于促进患者康复并降低院内传播风险。

摘要： 目的 了解麻风疹疑似病例中人细小病毒B19的感染情况.方法 采用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Im-munosorbent Assay,ELISA),对1195例麻疹风疹疑似病例血清进行人细小病毒B19 IgM抗体检测,并分析检测结果.结果 1195份排除了麻疹风疹感染的麻疹风疹疑似病例血清中,检测出22份B19 IgM抗体阳性,阳性发病时间集中在4～10月,其中发病9d阳性率最高.结论 在排除了麻疹风疹感染的麻疹风疹疑似病例血清中,能够筛查出人细小病毒B19病毒感染,为进一步对发热出疹症候群确定病原提供了依据,为最佳采样时间窗提供参考.

摘要： 目的:探讨Toll样受体3,7,9(Toll -like receptor3,7,9)与人细小病毒B19(parvovirus B19,B19)在桥本氏甲状腺炎发病中作用及相关性.方法:选取2019年1月-2020年12月我院35例确诊为单纯桥本甲状腺炎患者(观察组)、10例甲状腺腺瘤旁患者(对照组)作为研究对象.取两组患者甲状腺组织,均进行连续切片免疫组织化学方法检测TLR3、TLR7、TLR9以及B19,观察并分析两组患者甲状腺组织TLR3、TLR7、TLR9以及B19水平以及TLR3、TLR7、TLR9与B19的相关性.结果:观察组甲状腺组织B19抗原阳性表达率为80.00%,对照组甲状腺组织B19抗原阳性表达率为0.00%,差异显著(P＜0.05);观察组甲状腺组织TLR3抗原阳性表达率为82.86%,对照组甲状腺组织TLR3抗原阳性表达率为0.00%,差异显著(P＜0.05);观察组甲状腺组织TLR9抗原阳性表达率为85.71%,对照组甲状腺组织TLR9抗原阳性表达率为0.00%,差异显著(P＜0.05);两组甲状腺组织TLR7均呈阴性表达;B19抗原的阳性表达与TLR3、RLR9的阳性表达存在显著的正相关关系(P＜0.05).结论:TLR3、TLR9以及B19的表达可能是导致桥本氏甲状腺炎发生、发展的重要因素,而TLR3、TLR9的表达可能是B19感染诱导所导致的.

摘要： 目的总结小儿先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)术后人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV-B19)感染患儿的临床特点、治疗及转归。方法回顾性分析2019年6月至2021年6月广东省人民医院儿科重症监护室(pediatric intensive care unit,PICU)确诊的CHD术后HPV-B19感染患儿的临床表现、诊断及治疗。结果10例HPV-B19感染患儿中,男4例,女6例;年龄为0.84(0.3~9.0)岁;体质量为9.0(3.5~14.5)kg。10例患儿均出现发热,高热为主,无伴有明显中毒症状,同时伴发贫血突然加重。2例躯干弥漫充血性皮疹;4例轻度贫血,6例中度贫血;4例白细胞减少,2例粒细胞缺乏,1例粒细胞减少;5例血小板减少;1例血细胞三系减少;3例骨髓增生减低;3例单纯红系增生减低。于术后第12.8(7~23.0)天分别行定量聚合酶链反应(qPCR)检测呈阳性。9例给予静脉输注丙种球蛋白(intravenous injection of gamma globulin,IVIG)治疗,输注量466.7(300~700)mg·kg^(-1)·d^(-1),疗程2~5 d,另外1例仅需输注浓缩红细胞及对症治疗;8例应用IVIG后于第4.4(2~9)天(内热退,3例第4.3(2~7)天血小板恢复正常,4例第5.3(3~8)天白细胞恢复正常,4例第12.5(5~17)天血红蛋白逐渐恢复,5例应用IVIG前输注了浓缩红细胞血红蛋白无继续下降;8例第13.0(7~23)天动态检测HPV-B19病毒载量,7例应用IVIG后定量聚合酶链反应检测提示HPV-B19拷贝数下降,1例拷贝数降为0 copies/mL,1例应用IVIG前检测提示拷贝数仍升高。治愈出院9例,1例死于心源性休克。结论小儿CHD术后早期不明原因发热伴白细胞减少、贫血加重者,应警惕感染HPV-B19;确诊后尽早使用IVIG有助于促进康复。

摘要： 目的 探讨肾移植术后人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV-B19)感染导致单纯红细胞再生障碍性贫血(pure red cell aplasia,PRCA)的临床表现、检查、诊断和治疗方法.方法 回顾性分析2016年5月～2019年2月我院收治的3例肾移植术后HPV-B19感染所致PRCA病人的临床诊治经过和转归.结果 3例病人均无特异性表现.确诊为HPV-B19感染后均接受对症治疗并1～2周的静脉输注免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG).贫血均得到纠正.其中1例2个月后再次出现贫血并HPV-B19 DNA(+),给与调整免疫抑制剂并再次IVIG治疗,治疗效果明显.随访至今,病人移植肾功能无异常,未出现复发.结论 肾移植术后HPV-B19感染所致PRCA主要表现为贫血相关症状,诊断依据血常规、骨髓细胞学检查和免疫学检查;治疗需调整免疫抑制剂,同时进行IVIG治疗,复发时同等强度治疗依然有效.

摘要： YY/T 1645-2019人细小病毒B19 Ig G抗体检测试剂盒本标准规定了人细小病毒B19 Ig G抗体检测试剂盒的要求、试验方法、标签和说明书、包装、运输和贮存。本标准适用于以酶联免疫法、化学发光法等为原理,定性检测人体血清/血浆中人细小病毒B19 Ig G抗体的试剂盒。标准修订状况:本标准为首次制定。

摘要： 目的 建立人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准.方法 收集并筛选人细小病毒核酸阳性和阴性血浆样本,建立人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品,溯源至世界卫生组织第三代人细小病毒B19核酸国际标准品,并对参考品稳定性和均匀性进行考核.结果 建立的国家参考品包括阳性参考品8份、阴性参考品10份、精密度参考品2份和最低检出限参考品2份.经溯源标定,最低检出限参考品L1与L2的浓度分别为2.4×103 IU/mL与2.4×102 IU/mL;参考品均匀性符合要求,室温(25°C)放置24 h、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性.国家参考品的质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,精密度要求两个浓度水平的Ct值或定量值变异系数均不高于5.0％,最低检出限要求浓度为2.4×103 IU/mL的L1应为人细小病毒B19核酸阳性,浓度为2.4×102 IU/mL的L2可为阳性或阴性.结论 建立了人细小病毒B19核酸检测试剂国家参考品,可用于企业试剂研发的质量控制及评价.

摘要： 目的：构建人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体,获得大量表达的VP1蛋白.rn 方法：从本科保存的人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段,将该片段业克隆人表达载体pRSETA,构建VP1-pRSETA表达载体,并转化至感受态大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导使蛋白表达,在不同表达时间收获细菌,给予不同诱导剂浓度及在小同温度下进行诱导表达,利用蛋白电泳检测VP1蛋白表达情况;超声裂解诱导表达的细菌,收集上清和沉淀进行蛋白电泳,分析表达蛋白的溶解性.rn 结果：成功构建了融合蛋白VP1-pRSETA的重组表达质粒,表达的融合蛋白经15％SDS-PAGE电泳证实大小为2.2kd。rn 结论：获得人细小病毒B19中围株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及制备单克隆抗体和疫苗有重要意义.

摘要： 目的：构建人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体,获得大量表达的VP1蛋白.rn 方法：从本科保存的人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段,将该片段业克隆人表达载体pRSETA,构建VP1-pRSETA表达载体,并转化至感受态大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导使蛋白表达,在不同表达时间收获细菌,给予不同诱导剂浓度及在小同温度下进行诱导表达,利用蛋白电泳检测VP1蛋白表达情况;超声裂解诱导表达的细菌,收集上清和沉淀进行蛋白电泳,分析表达蛋白的溶解性.rn 结果：成功构建了融合蛋白VP1-pRSETA的重组表达质粒,表达的融合蛋白经15％SDS-PAGE电泳证实大小为2.2kd。rn 结论：获得人细小病毒B19中围株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及制备单克隆抗体和疫苗有重要意义.

摘要： 目的：构建人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体,获得大量表达的VP1蛋白.rn 方法：从本科保存的人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段,将该片段业克隆人表达载体pRSETA,构建VP1-pRSETA表达载体,并转化至感受态大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导使蛋白表达,在不同表达时间收获细菌,给予不同诱导剂浓度及在小同温度下进行诱导表达,利用蛋白电泳检测VP1蛋白表达情况;超声裂解诱导表达的细菌,收集上清和沉淀进行蛋白电泳,分析表达蛋白的溶解性.rn 结果：成功构建了融合蛋白VP1-pRSETA的重组表达质粒,表达的融合蛋白经15％SDS-PAGE电泳证实大小为2.2kd。rn 结论：获得人细小病毒B19中围株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及制备单克隆抗体和疫苗有重要意义.

摘要： 目的：构建人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体,获得大量表达的VP1蛋白.rn 方法：从本科保存的人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段,将该片段业克隆人表达载体pRSETA,构建VP1-pRSETA表达载体,并转化至感受态大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导使蛋白表达,在不同表达时间收获细菌,给予不同诱导剂浓度及在小同温度下进行诱导表达,利用蛋白电泳检测VP1蛋白表达情况;超声裂解诱导表达的细菌,收集上清和沉淀进行蛋白电泳,分析表达蛋白的溶解性.rn 结果：成功构建了融合蛋白VP1-pRSETA的重组表达质粒,表达的融合蛋白经15％SDS-PAGE电泳证实大小为2.2kd。rn 结论：获得人细小病毒B19中围株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及制备单克隆抗体和疫苗有重要意义.

摘要： 目的：构建人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体,获得大量表达的VP1蛋白.rn 方法：从本科保存的人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段,将该片段业克隆人表达载体pRSETA,构建VP1-pRSETA表达载体,并转化至感受态大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导使蛋白表达,在不同表达时间收获细菌,给予不同诱导剂浓度及在小同温度下进行诱导表达,利用蛋白电泳检测VP1蛋白表达情况;超声裂解诱导表达的细菌,收集上清和沉淀进行蛋白电泳,分析表达蛋白的溶解性.rn 结果：成功构建了融合蛋白VP1-pRSETA的重组表达质粒,表达的融合蛋白经15％SDS-PAGE电泳证实大小为2.2kd。rn 结论：获得人细小病毒B19中围株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及制备单克隆抗体和疫苗有重要意义.

摘要： 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研究通过B19病毒XA株VP1基因克隆、表达、蛋白纯化、免疫动物、蛋白质生物质谱分析技术，初步揭示我国B19病毒XA株基因变异对表达蛋白的抗原位点和免疫学特性的影响，从而为进一步研究B19病毒的致病机理及预防疫苗提供重要的基础资料。

摘要： 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研究通过B19病毒XA株VP1基因克隆、表达、蛋白纯化、免疫动物、蛋白质生物质谱分析技术，初步揭示我国B19病毒XA株基因变异对表达蛋白的抗原位点和免疫学特性的影响，从而为进一步研究B19病毒的致病机理及预防疫苗提供重要的基础资料。

摘要： 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研究通过B19病毒XA株VP1基因克隆、表达、蛋白纯化、免疫动物、蛋白质生物质谱分析技术，初步揭示我国B19病毒XA株基因变异对表达蛋白的抗原位点和免疫学特性的影响，从而为进一步研究B19病毒的致病机理及预防疫苗提供重要的基础资料。

摘要： 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研究通过B19病毒XA株VP1基因克隆、表达、蛋白纯化、免疫动物、蛋白质生物质谱分析技术，初步揭示我国B19病毒XA株基因变异对表达蛋白的抗原位点和免疫学特性的影响，从而为进一步研究B19病毒的致病机理及预防疫苗提供重要的基础资料。

摘要： 人细小病毒B19(简称HPVB19)，可引起急性再障危象，急性血小板减少性紫瘢、关节炎、胎儿水肿、孕妇流产、死胎等多种疾病，我国B19病毒基因有特征性变异，VP1基因变异对表达蛋白的结构及免疫的影响，需要进一步探讨。本研究通过B19病毒XA株VP1基因克隆、表达、蛋白纯化、免疫动物、蛋白质生物质谱分析技术，初步揭示我国B19病毒XA株基因变异对表达蛋白的抗原位点和免疫学特性的影响，从而为进一步研究B19病毒的致病机理及预防疫苗提供重要的基础资料。

摘要： 本发明公开了貉细小病毒弱毒疫苗株及其在制备貉细小病毒弱毒疫苗中的用途。所述貉细小病毒弱毒疫苗株，命名为HB‑F69，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.14339。试验表明该疫苗株作为疫苗使用时，安全、有效，可有效预防貉细小病毒性肠炎的发生，且经过连续5代动物接种实验，证明该疫苗株无毒力返强。因此，本发明所述的貉细小病毒弱毒疫苗株在防治貉细小病毒性肠炎领域将具有广阔的应用前景。

摘要： 貉细小病毒株及其应用、貉细小病毒灭活疫苗及其制备方法，属于疫苗制备技术领域。本发明针对目前貉细小病毒灭活疫苗安全性以及免疫效果差的问题，提供了一种貉细小病毒株，所述病毒株为貉细小病毒RDPV‑HeB17毒株，保藏编号为：CGMCC NO.15483。将RDPV‑HeB17毒株接种于F81细胞，培养至细胞出现病变后，冻存即成病毒液，病毒经BEI灭活后，加入氢氧化铝胶制成灭活疫苗，可用于预防貉细小病毒性肠炎。

摘要： 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。

摘要： 本发明涉及一种快速鉴定鹅细小病毒与樱桃谷鸭源细小病毒的双重PCR方法，主要是设计并筛选了新的特异性引物，优化了反应过程中的各种参数，利用本组引物建立的针对鹅细小病与樱桃谷鸭源细小病毒的双重PCR方法特异性强、敏感性高，可以快速准确地进行鹅细小病毒和新型樱桃谷鸭源细小病毒的鉴定。本发明建立的双重PCR方法重复性好、可信度高，同时又价格低廉、操作相对简单，适用于大规模流行病学调查。本发明经过1500份样品的检测证明具有很好的可信度，并且只需要普通PCR仪即可进行，由于引物合成价格已经非常便宜，本专利反应成本与普通PCR反应相差无几，实验操作也相对简单，适用于目前我国的畜牧业生产实际。

摘要： 一株貉细小病毒性肠炎病毒LN株、貉细小病毒性肠炎灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品领域。本发明的一株貉细小病毒性肠炎病毒LN株，该毒株已于2018年12月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC NO.16627。本发明的貉细小病毒性肠炎灭活疫苗其有效活性成分为貉细小病毒性肠炎病毒LN株。本发明采用细胞全悬浮技术制备貉细小病毒性肠炎灭活疫苗，可抵御貉细小病毒强毒攻击，保护率在91.7％以上，能有效预防貉病毒性肠炎，免疫有效期6个月，解决了现有疫苗免疫貉子存在的效果不理想，采用转瓶培养疫苗存在的过程复杂、周期长、质量不稳定、批间差异大、副反应高的问题。

摘要： 本发明属于PCR检测领域，具体涉及一种番鸭细小病毒、鹅细小病毒和禽腺病毒4型的三重PCR检测方法，S1、根据番鸭细小病毒、鹅细小病毒和禽腺病毒4型的基因保守序列，分别设计3对特异性扩增引物；S2、提取番鸭细小病毒、鹅细小病毒和禽腺病毒4型DNA；S3、将S2中获取的所有的DNA混合后进行PCR扩增；S4、通过电泳检测S3中的PCR产物。本发明建立的三重PCR检测方法，能同时检测番鸭细小病毒、鹅细小病毒和禽腺病毒4型，三种病毒核酸模板的最低检测量分别为2pg/μL、20pg/μL和2pg/μL。

摘要： 本发明涉及疫苗技术领域，特别涉及一种复制缺陷型犬细小病毒包装载体、复制缺陷型重组犬细小病毒及制备与应用。所述的复制缺陷型犬细小病毒包装载体，包括载体ITR质粒和辅助质粒，其中，载体ITR质粒包含核心元件ITR‑P‑EGFP‑TS‑ITR，其核苷酸序列如SEQID NO.1所示，辅助质粒包含核心蛋白基因NS‑VP，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该包装载体进一步共同转染细胞，得到复制缺陷型CPV‑2重组病毒，该重组病毒既能将外源基因转导入宿主细胞中进行表达，又不会复制出子代病毒，具有很高的安全性。

摘要： 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。

摘要： 本发明公开了貉细小病毒弱毒疫苗株及其在制备貉细小病毒弱毒疫苗中的用途。所述貉细小病毒弱毒疫苗株，命名为HB‑F69，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC NO.14339。试验表明该疫苗株作为疫苗使用时，安全、有效，可有效预防貉细小病毒性肠炎的发生，且经过连续5代动物接种实验，证明该疫苗株无毒力返强。因此，本发明所述的貉细小病毒弱毒疫苗株在防治貉细小病毒性肠炎领域将具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明提供一种番鸭细小病毒（MDPV）和鹅细小病毒（GPV）双重实时荧光定量PCR检测引物及方法，其中，MDPV引物序列如下：上游引物P1：TAATGGTGGCAGGAATGCACAGTTC，下游引物P2：TGTTACCATGATGTCTGAAAT；GPV引物序列如下：上游引物P3：GAGGTAGACAGCAACAGAAA，下游引物P4：GCTCGTCCGTGACCATA。目前，还没有基于SYBR Green II的双重实时荧光定量PCR检测引物及方法可以同时将GPV各种基因亚型完全地和MDPV区分开来的相关研究报道和发明专利，本发明的建立可填补相关领域空白。