人类胚胎干细胞

摘要： 目的 探讨人类胚胎干细胞(ESCs)分化为神经细胞的关键性靶基因及分子机制,为临床靶向治疗神经康复患者提供分子理论依据.方法 基于GEO数据平台芯片,采用单细胞测序方法(scRNA-seq),利用R语言从多分子维度(单细胞差异基因、蛋白互作网络和基因通路等)分析人类ESCs分化过程中的关键Marker基因并利用质控和数据过滤、PCA、TSNE分析、细胞轨迹分析、GO富集分析、KEGG富集分析、KEGG通路分析等论证Marker基因调控人类ESCs分化作用机制.结果 GO功能富集分析结果为:Marker基因在胚层分化、细胞外基质和信号转导中作用显著;Marker基因互作网络及KEGG通路显示了特征性纤维连接蛋白1(FN1)、同源域蛋白(NANOG)、生长因子受体结合蛋白2(GRB2)为关键基因;KEGG通路分析显示:(1)FN1在调控细胞外基质通路中作用显著;(2)NANOG、GRB2在调控干细胞多能性信号通路作用显著.结论 FN1可能通过调控细胞外基质通路介导人类ESCs基质环境的变化;NANOG、GRB2上调在干细胞多能性信号通路中高表达介导人类ESCs定向分化为神经组织.

摘要： 人类胚胎干细胞系(hESC)来源于着床前的人类体外受精(IVF)胚胎,它的可塑性以及能够无限自我更新的能力允许其在体外产生无限数量的不同类型细胞,从而为基础研究和再生医学开辟新的途径.目前为止,已经可以使用多种方法建立和扩大hESC,并使其分化为特定的细胞以发挥功能.系统介绍人类胚胎干细胞分离、培养及分化为特定细胞系的各种策略,并从单细胞、突触传递以及神经回路等层面着重概述hESC诱导分化的神经细胞在体外研究中的功能;分析讨论hESC所面临的问题及其未来的发展,旨在通过不同视角阐述hESC的功能,为读者提供最新的研究进展.

摘要： 人类胚胎干细胞作为生物技术发展的产物,在医疗、商业和科技创新等领域显示出巨大的价值潜能.对于人类胚胎干细胞专利垄断性的不合理利用,将会限制该领域的持续发展,故有必要参照专利强制许可制度,有区别地明确适用的具体情形.同时,在加强国际合作与构建第三方定价的共同作用下,推动我国人类胚胎干细胞专利技术的发展.

摘要： 人类胚胎干细胞技术蕴含着巨大的医疗价值,但因为人类胚胎干细胞的获取需要破坏人类胚胎,涉及基本的伦理道德,所以其专利适格性一直备受争议.欧洲对人胚胎干细胞相关发明的专利制度与我国类似,均持比较保守的态度,但是从近年来案例来看,欧洲对于该领域研究的严苛的态度有所缓和,对我国人类胚胎干细胞专利性研究有一定借鉴意义.

摘要： 随着以人类胚胎干细胞为代表的生物技术的发展,实用性标准在专利审查中具有更为重要的现实意义.美国、欧盟及英国的专利实用性标准及其在人类胚胎干细胞发明中的适用为我国提供了域外借鉴.我国专利实用性标准有可实施性、再现性、有益性等,与其他国家相比标准较高.我国应当合理界定专利实用性标准,使其与科技政策相结合,并且与相关产业竞争力相适应.

摘要： 人类胚胎干细胞技术的研究涉及基本伦理道德,同时也具有巨大的医疗价值,其专利适格性历来备受争议,欧美和中国对此规定有较大不同.近年来,三者的立法和实践发生了明显变化,具体表现在对“人类胚胎”概念界定、人类胚胎的获得和使用方式三个方面.当前,中国干细胞产业亟待发展,但现有立法对人类胚胎干细胞技术的专利适格性限制过于严苛,建议把“人类胚胎”概念限定在拥有发育成人的内在能力的胚胎范围内;把破坏人类胚胎作为认定工业或商业目的的应用的前提,把以诊断或治疗为目的并对胚胎有益处的发明创造排除在“破坏”胚胎的范围.

摘要： 生物医学技术对21世纪的社会影响深远,其重点内容人类胚胎干细胞的研究及其应用技术对科学研究和医疗发展有着重大的意义,如何对人类胚胎干细胞研究及成果进行法律保护,是当前各国面临的重大难题.结合专利保护优势,《专利法》新颖性、创造性和工业实用性的含义变革、科技的进步和经济的需求,其认为《专利法》是人类胚胎干细胞研究者保护劳动成果的首选法律.在分析境内外立法实践基础上,认为应明确人类胚胎干细胞研究及其成果的专利保护的合法性,并明确“不可专利”的客体范围,进行相关法律制度设计,以利于有效地保护发明创造、刺激生物技术的研究、促进国家科学技术的迅速发展.

摘要： With the development of science and technology ,research of human embryonic stem cells has conducted in clinical trials ,which has an irreplaceable significance for the development of medicine .However ,a series of ethical issues are inevitably aroused ,including respect to the embryos ,safety of the subjects ,and the issues of cloning .The main reason is the lack of the cognition of responsibilities of the researchers .Ethics of responsibility provides a new dimension and ethical guidance for addressing such ethical issues in this technological era .Therefore ,it is necessary to stand on the perspective of ethics of responsibility to clear the main responsibilities of the parties and fulfill the responsibilities through self‐discipline and external control .Meanwhile ,it will provide some reference and related laws for the research of embryonic stem cells .%目前，人类胚胎干细胞的研究已经进入临床试验阶段，对医疗事业的发展有着不可替代的重要意义。但不可避免地引发了一系列伦理问题，包括对胚胎和受试者的尊重性问题，临床试验的安全性问题以及克隆问题。究其主要原因，是与试验相关的责任主体的责任感以及责任认识缺失有关。责任伦理作为科技时代的伦理观，为解决上述伦理问题提供了新的维度和伦理指导，因此有必要站在责任伦理的视角，明确各方主体的责任，通过自律和他律落实主体责任，为人类胚胎干细胞的研究和相关法律完善提供借鉴。

摘要： The use of biological material for biotechnology applications and research raises the question of sources .Should we use human stem cells or embryonic stem cells ?For human stem cells ,since 1994 ,the French law considers the human body is inviolable and cannot be subject of property that means no trade and no patent .In Europe ,the Oviedo convention (Council of Europe) on human rights and biomedicine says :it is up to each country to authorize the embryo research . There are differences among countries in Europe ,from a total ban to an approval of the research with nuclear transfer . Regarding commercialization of cells and patentability ,the European directive on legal protection of biological inventions says :biotechnology inventions are essential for the development of the community ;only adequate protection can make them profitable and facilitate trade .%生物技术的研究与应用中所使用的生物材料涉及其来源问题。是否应该使用人类干细胞或胚胎干细胞？关于人类干细胞，法国于1994年即规定人体不可侵犯且不是财产，人体不能买卖，也不能成为专利。在欧洲，欧洲理事会《关于人权与生物医学公约》规定：由每个国家自行批准是否可以进行胚胎研究。从完全禁止到允许核移植研究，欧洲各国之间存在差异。关于细胞商业化及专利的问题，欧盟《关于生物技术发明的法律保护指令》提到：生物技术发明对社会的发展至关重要，只有充分的保护才可以使其获利，并促进贸易。

摘要： 随着人类胚胎干细胞研究的深入，一些顽症的治愈成为可能的同时，避免了器官移植所带来的免疫排斥这一难题，但也引发了一系列与生命有关的伦理问题，这是当代生命伦理面临的一个巨大难题。现就从如何看待人类胚胎入手，分析人类胚胎干细胞研究带来伦理问题的原因，阐明了为人类胚胎干细胞的研究制定严格的伦理规范、伦理程序及完备的法制化保障的必要性。%With the in-depth research of human embryonic stem cells, a variety of chronic and stubborn diseases can be cured,and at the same time,it can avoid severe organ transplantation immune rejection. But the research caused a series of ethical issues related to the life, and is a big problem of the contemporary bioethics. This article will start from how to view human embryos, analyzes the cause of the ethical problems brought by human embryonic stem cell research, clarify the necessity of establishing strict ethical norms, ethical procedures and a perfect legal safeguard system for human embryonic stem cell research.

摘要： 目前人类胚胎干细胞研究的争议性非常大，本文结合医学界对人类胚胎干细胞的研究，利用“行动者—网络”理论模式的独特视角，建构了行动者网络并确认了网络涵盖的行动者，分析人类胚胎干细胞研究与发展的影响因素，进一步分析了各种应对策略，由此深化认识了行动者网络理论在人类胚胎干细胞研究中的理论和现实意义。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于DNA适体的分离胚胎干细胞和表面固定胚胎干细胞的方法。所述DNA适体与胚胎干细胞具有很强的结合特性和稳定性。该适体的获得是应用SELEX技术和流式细胞法的结合，以胚胎干细胞为靶目标，从随机文库中筛选出能与其特异性结合的DNA适体。该适体通过体外合成，无批间差异、合成成本低，与胚胎干细胞的结合具有高亲和力和选择性，无免疫原性或毒性作用，具有极大的应用价值。

摘要： 本发明涉及生物技术领域、具体涉及新的胚胎干细胞培养体系以及采用本发明所述培养体系提高胚胎干细胞建系效率的方法。本发明所述培养体系包括：DMEMF12、N‑2supplement、B‑27supplement、β‑巯基乙醇、谷氨酰胺、胰岛素、牛血清白蛋白、双抗(青霉素+链霉素)、Pd0325901、Chir99021、白血病抑制因子(LIF)、Knockout Serum Replacement(KoSR)、P53inhibitor、Y‑27632、P38MAPK inhibitor和Forskolin。本发明新型的培养体系及其方法既能保证得到稳定的胚胎干细胞系，又能够显著性提高胚胎干细胞的建系效率，同时还能维持胚胎干细胞的多能性，使其始终处于优良的生长状态，从而更好地推动胚胎干细胞在转基因和疾病模型领域的广泛应用。

摘要： 本发明公开了一种类胚胎干细胞先驱细胞群，该细胞群是通过系统性筛选人类间叶基质干/先驱细胞并通过选自于由CD34、CD117、CD133、CD201及GloboH所组成的群组的细胞抗原进行细胞分选，而从人类组织中分离，以及将该分选的细胞培养于添加至少一或多种类固醇及一或多种生长因了的培养基中。本发明的细胞会表达CD34并于初代具有球状细胞聚落生成，且会表现表达多能性类胚胎干细胞(ESCs)的特征。

摘要： 本发明公开了一种提高2C‑like细胞的小鼠胚胎干细胞诱导培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法，第一步是从小鼠ESCs培养体系中去除胎牛血清，使小鼠ESCs仍保持原有的多能性特征。第二步是利用视黄酸（RA）在不含有胎牛血清的培养液中提高小鼠ESCs中2C‑like细胞的比例，结果从对照组的0.2%提高到3.3%。本发明利用特定的诱导方法提高了小鼠ESCs中2C‑like细胞比例，并通过实验手段验证了小鼠ESCs在不含有胎牛血清的培养液中2C‑like基因表达水平和蛋白水平，对哺乳动物全能干细胞研究提供新思路。

摘要： 公开了通过调节O

摘要： 本发明公开了一种提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法，第一步将小鼠2i/L‑ESCs用N2B27中添加白血病抑制因子（LIF培养液）进行诱导获得只依赖LIF的小鼠胚胎干细胞（L‑ESCs），并鉴定了其多能性。第二步是将小鼠2i/LIF‑ESCs培养体系换成15%胎牛血清中添加白血病抑制因子的培养液(S/L培养液)，培养5天后，再替换成LIF培养液进行培养，高效率得到L‑ESCs。更换S/L培养液的主要目的是为了提高小鼠ESCs的DNA甲基化水平，这样可有效提高LIF依赖性ESCs的重编程效率。本发明首先诱导了只依赖LIF的小鼠ESCs，并鉴定了其特性；其次利用特定的诱导方法提高了LIF依赖性小鼠ESCs重编程效率，对哺乳动物多能干细胞体外培养提供新思路。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于DNA适体的分离胚胎干细胞和表面固定胚胎干细胞的方法。所述DNA适体与胚胎干细胞具有很强的结合特性和稳定性。该适体的获得是应用SELEX技术和流式细胞法的结合，以胚胎干细胞为靶目标，从随机文库中筛选出能与其特异性结合的DNA适体。该适体通过体外合成，无批间差异、合成成本低，与胚胎干细胞的结合具有高亲和力和选择性，无免疫原性或毒性作用，具有极大的应用价值。

摘要： 本发明是一种维持小鼠胚胎干细胞Naive状态的低表达Lin28的小鼠胚胎干细胞的制备方法。该方法是将序列表中序列1的Lin28干扰序列构建在RNAi‑ReadypSIREN‑RetroQ干扰载体中，获得含有RNA‑Lin28干扰重组质粒；并通过脂质体（Lipofactamine2000）转染的方法将RNA‑Lin28干扰重组质粒转染到小鼠胚胎干细胞D3中，并通过重组载体上含有的抗药物筛选基因嘌呤霉素(puromycin)通过加入药物进行筛选并建立转基因细胞系，以所述转基因细胞进行小鼠胚胎干细胞Naive状态的各种指标监控，发现Lin28表达降低对小鼠胚胎干细胞Naive状态维持起到促进作用。本发明的方法能在转基因小鼠胚胎干细胞中内稳定干扰Lin28表达，显著提高维持小鼠胚胎干细胞Naive状态的能力。

摘要： 本发明涉及生物技术领域、具体涉及新的胚胎干细胞培养体系以及采用本发明所述培养体系提高胚胎干细胞建系效率的方法。本发明所述培养体系包括：DMEMF12、N-2supplement、B-27supplement、β-巯基乙醇、谷氨酰胺、胰岛素、牛血清白蛋白、双抗(青霉素+链霉素)、Pd0325901、Chir99021、白血病抑制因子(LIF)、Knockout Serum Replacement(KoSR)、P53inhibitor、Y-27632、P38MAPK inhibitor和Forskolin。本发明新型的培养体系及其方法既能保证得到稳定的胚胎干细胞系，又能够显著性提高胚胎干细胞的建系效率，同时还能维持胚胎干细胞的多能性，使其始终处于优良的生长状态，从而更好地推动胚胎干细胞在转基因和疾病模型领域的广泛应用。

摘要： 本发明涉及用于人类胚胎干细胞体外培养的饲养细胞层，以及用该饲养细胞层体外培养人类胚胎干细胞的方法。本发明提供的饲养细胞层是由人成纤维细胞构成的。并且用该饲养细胞层体外培养人类胚胎干细胞时的培养液为KNOCK－OUTEMEM+KNOCK－OUTSR。本发明成功采用人成纤维细胞作为饲养细胞，充分解决了原有培养系统中有小鼠细胞参与的不利因素。