人成骨细胞

摘要： 目的 研究不同浓度Ca2+对人成骨细胞迁移与成骨分化的影响,探讨促进迁移与成骨合适的Ca2+浓度及相关机制.方法 设置Ca2+浓度,Transwell检测成骨细胞迁移;CCK-8法评估成骨细胞增殖;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞成骨分化相关基因的表达;茜素红染色检测成骨分化生成的矿化结节.钙敏感受体(CaSR)拮抗剂拮抗后,观察Ca2+对人成骨细胞迁移与成骨分化的影响.结果 在迁移实验中,2、4、6 mmol·L-1的Ca2+在3个时间点(8、16、24 h)都能明显地促进人成骨细胞的迁移,10 mmol·L-1的Ca2+在8 h时明显抑制迁移.2～10 mmol·L-1 Ca2+能促进人成骨细胞的增殖、成骨分化与矿化,8、10 mmol·L-1的Ca2+诱导的矿化作用更明显.CaSR拮抗降低Ca2+诱导的人成骨细胞迁移与成骨分化作用.结论 低浓度Ca2+有利于人成骨细胞迁移,高浓度Ca2+有利于人成骨细胞分化,4、6 mmol·L-1的Ca2+能较明显地同时诱导人成骨细胞迁移与成骨分化,Ca2+-CaSR通路参与相应的信号传导.

摘要： 目的:观察氟、砷联合作用对体外培养人成骨细胞活性的影响,从而探讨氟、砷对骨的作用,砷是否对氟骨病有一定的影响。方法:体外培养人成骨细胞,氟对人成骨细胞的作用终浓度分别为10 mg/L、1 mg/L、0.1 mg/L、0 mg/L,砷对人成骨细胞的作用终浓度分别为1 mg/L、0.1 mg/L、0.01 mg/L、0 mg/L,相互交叉作用于人成骨细胞,观察细胞形态变化。结果:砷浓度为1 mg/L与各浓度氟联合作用时,各组细胞全部死亡。砷浓度为0.1 mg/L与各浓度氟联合作用于人成骨细胞,可见部分细胞死亡,细胞形态较完整,可见细胞核,周围少量细胞碎片。砷浓度为0.01 mg/L、砷浓度为0 mg/L与氟浓度为10 mg/L联合作用于人成骨细胞时,显微镜内可见少量细胞死亡及少许细胞碎片。其余联合实验组镜下可见较多人成骨细胞,轮廓清晰,细胞核完整,未见明显细胞碎片。结论:氟砷联合作用时,对人成骨细胞毒性一定程度的增加。

摘要： [目的]复制过氧化氢诱导人成骨细胞氧化损伤模型，探讨狭鳕鱼皮胶原肽保护作用机制。[方法]以人成骨细胞为研究对象，将对数生长期的细胞分为6组：正常对照组、H2 O2损伤组、胶原蛋白肽低（100μg／mL）、中（300μg／mL）、高（600μg／mL）浓度组、阳性对照组（300μg／mL维生素 E），CCK －8法检测成骨细胞的存活率，酶联免疫法检测细胞培养液中 SOD、 MDA 的含量，PCR 技术检测Foxo3amRNA的表达水平，Western blot技术检测Sir1t 、Foxo3a的蛋白表达水平。[结果]与模型组相比，胶原肽组细胞存活率及 SOD的水平升高，MDA含量下降，Foxo3amRNA及蛋白表达水平下降，Sirt1蛋白表达水平上升。[结论]300μmol／L H2 O2可成功复制成骨细胞氧化损伤模型；一定浓度的胶原蛋白肽能降低MDA的含量，提高SOD水平，并具有抗氧化损伤功能，胶原肽对成骨细胞的保护作用可能与下调 Foxo3a和上调Sirt1的表达水平有关。%Objective] The aim was to investigate the protective mechanism of collagen peptide from pollock skin by establishing the H2O2 in-duced human osteoblasts oxygen damaged model.[Method] Human osteoblast cells in logarithmic growth phase were divided into four groups:normal control group, H2O2 induced oxygen damaged group, collagen peptide low (100 μg/mL), medium(300 μg/mL) and high(600 μg /mL) does group, positive control group(300 μg/mL VitE).CCK-8 method was performed to determine the survival rate of osteoblasts cells.The con-tent of SOD and MDA were detected by enzymic method.The expression levels of Foxo3 mRNA was determined by PCR, Western Blot was used to detect the protein expression levels of Fox3o and Sir1t .[Result] Compared with the control group, the survival rate of osteoblasts cells, the level of SOD and the expression of Sirt1 protein in model group was increased, while the content of MDA, the expression of Foxo3a mRNA and Foxo3a protein were declined significantly.[Conclusion] The osteoblasts oxygen damaged model was established induced by 300 μmol/L H2O2. A certain concentration of collagen peptide could reduce the content of MDA and increase the content of SOD against oxygen damage .The mecha-nism might be related to down-regulating the expression of Foxo3a and up-regulating the expression of Sirt1.

摘要： 目的 探讨大黄酸哌嗪雌酚酮(rhein-piperizinyl-estrone,LC)对人成骨样MG-63细胞增殖活性的影响及其相关分子机制.方法 在原工作基础上,以兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究对象,分别应用MTT法和流式细胞术,观察LC对MG-63细胞的增殖活性和细胞周期分布的影响.利用前期构建的ERα或ERβ稳定高抑制表达的MG-63细胞株,应用免疫印迹技术,对LC的作用机制和可能的信号通路进行研究.结果 与对照组相比,LC可明显促进MG-63细胞的增殖活性,该作用具有剂量依赖性;可调节细胞周期分布,使G1期细胞比例减少、G2 +S期细胞比例增加,进而促进细胞生长.进一步研究发现,ER阻断剂ICI 182,780可完全阻断LC的促增殖作用,提示LC是经ER途径对MG-63的增殖活性发挥作用的;利用ERα或ERβ高抑制表达的稳定细胞株,证实LC的促增殖作用是由ERα和ERβ共同介导的;该作用与Ras/MEK/ERK、PI3K/Akt信号通路的激活密切相关.结论 LC可经ERα和ERβ共同介导对人成骨细胞的促增殖作用,有望成为治疗绝经后骨质疏松症的新型骨靶向雌激素类药物.

摘要： Objective:To investigate the effect of MT01 on the differentiation of osteoblasts under infected condition through determining the expression level of collagen Ⅰ (Col Ⅰ )mRNA in MG63 cells treated with Porphyromonas gingivalis (Pg).Methods:The cultured MG63 cells were divided into blank control,MT01,Pg, and MT01+Pg groups.MT01 at a concentration of 1 mg·L-1 was added into the MG63 cells,and the cells were incubated for 3 h.The cells treated with PBS (1 mg·L-1 )were used as control group.Then Pg (MOI=100∶1) was added.Real-time PCR was used to detect the expression levels of ColⅠ mRNA in MG63 cells at 2,4,6,8, 12 and 24 h after incubation.Results:Compared with blank control group,the levles of ColⅠ mRNA in the MG63 cells in MT01 and MT01 + Pg groups had no significant changes at 2 and 4 h (P > 0.05);the Col Ⅰ mRNA expression levels in MT01 group at 8,12 and 24 h were increased (P < 0.05 or P < 0.01).Compared with Pg group,the expression levels of ColⅠ mRNA in MT01+ Pg at 2 and 4 h were decreased,but the expression levels of ColⅠ mRNA were increased at 6,8,12 and 24 h (P <0.05 or P <0.01).Conclusion:MT01 can up-regulate the expression level of Col Ⅰ mRNA in the infected MG63 cells; MT01 could promot the differentiation of osteoblasts under infected condition.%目的：检测单链寡脱氧核苷酸 MT01作用下牙龈卟啉单胞菌（Pg）感染成骨细胞 MG63中Ⅰ型胶原（ColⅠ）mRNA 表达水平，探讨 MT01对感染状态下成骨细胞成骨向分化的影响。方法：体外培养的 MG63细胞分为空白对照组、MT01组、Pg 组和 MT01＋ Pg 组。按分组情况进行相应处理，加入 MT01（质量浓度1 mg·L－1），以1 mg·L－1 PBS 作对照共孵育3 h 后，以100∶1的感染复数（MOI）加入 Pg 悬液共培养。4组细胞分别孵育2、4、6、8、12和24 h 后采用 RT-PCR 法检测 MG63细胞中 ColⅠ mRNA 表达水平。结果：与空白对照组比较，MT01和 MT01＋Pg 组 MG63细胞中 ColⅠ mRNA 表达水平在2和4 h 时无明显变化（P ＞0.05），8、12和24 h 时 MT01组细胞中 ColⅠ mRNA 表达水平明显升高（P ＜0.05或 P ＜0.01）；与 Pg 组比较，2和4 h 时 MT01＋Pg 组细胞中 ColⅠ mRNA 呈低表达，6、8、12和24 h 时 ColⅠ mRNA 表达水平升高（P ＜0.05或 P ＜0.01）。结论：MT01上调感染状态下 MG63细胞中 ColⅠ mRNA 的表达水平，MT01可促进感染状态下成骨细胞成骨向分化。

摘要： 背景：雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少,其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的：分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法：实验分3组：空白对照组（即hFOB 1.19,未感染任何反转录病毒）、阴性对照组（即含无效干扰片断雌激素受体β-shRNA-nc）、最佳RNAi组（即ERβ-sh RNA-3）。将前期最佳RNAi组的雌激素受体β-shRNA反转录病毒载体感染人成骨细胞,通过抗性筛选并扩大培养,利用MTT法检测雌激素受体β稳定抑制后对细胞增殖的影响;随后在雌激素干预下,通过Western blot技术检测雌激素受体β蛋白表达的稳定抑制效率,并使用半定量RT-PCR和Western blot技术检测雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。结果与结论：①成功筛选出稳定感染ERβ-shR NA-3反转录病毒载体的人成骨细胞,MTT法检测显示雌激素受体β稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响（P〉0.05）;②在雌激素干预下,雌激素受体β蛋白的抑制率为（93.11±0.57）%（P〈0.05）,且雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1 mR NA和蛋白的上调率分别为（26.65±3.81）%和（23.79±3.76）%,骨形态发生蛋白2 mRNA和蛋白的上调率分别为（16.62±1.71）%和（18.08±3.20）%（均P〈0.05）;③结果提示雌激素受体β可能通过调控转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2的表达在骨代谢中发挥作用。

摘要： 背景：雌激素受体β基因参与骨代谢的研究较少，其对骨代谢的具体调节机制仍不清楚。目的：分析雌激素受体β基因沉默对人成骨细胞转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。方法：实验分3组：空白对照组(即hFOB 1.19，未感染任何反转录病毒)、阴性对照组(即含无效干扰片断雌激素受体β-shRNA-nc)、最佳RNAi组(即ERβ-shRNA-3)。将前期最佳RNAi组的雌激素受体β-shRNA反转录病毒载体感染人成骨细胞，通过抗性筛选并扩大培养，利用MTT法检测雌激素受体β稳定抑制后对细胞增殖的影响；随后在雌激素干预下，通过Western blot技术检测雌激素受体β蛋白表达的稳定抑制效率，并使用半定量RT-PCR和Western blot技术检测雌激素受体β稳定抑制后对转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2表达的影响。结果与结论：①成功筛选出稳定感染ERβ-shRNA-3反转录病毒载体的人成骨细胞，MTT法检测显示雌激素受体β稳定抑制后对细胞的增殖没有明显影响(P>0.05)；②在雌激素干预下，雌激素受体β蛋白的抑制率为(93.11±0.57)%(P0.05). Under the interference of estrogen, the silencing efficiency of ERβprotein was (93.11±0.57)%(P<0.05), and after ERβsilencing, the expressions of TGF-β1 and BMP-2 were increased by (26.65±3.81)%and (16.62±1.71)%at mRNA level, and increased by (23.79±3.76)%and (18.08±3.20)%at protein level (both P<0.05). In conclusion, ERβmay play an important role in bone metabolism by regulating the expressions of TGF-β1 and BMP-2.

摘要： Objective:In this research ,we took an insight into the influence of different glucose concentrations on hu-man Osteoblast cell,hoping to give an explanation to the mechanism of the osteoporosis(OP)caused by diabetes mellitus (DM). Methods:Four culture media of different glucose concentration(5. 5 ,10,20 or 40 mmol/ L)were set up for this study . Human Osteoblast cell was cultured in these media successively for 3 ~ 12 d,and then the proliferation rate of cells,secretion of ALP and HGP,percentage of apoptosis cells were observed and measured . Results:within a certain glu-cose concentration,the elevated glucose concentration prompted the proliferation of Osteoblast cells,but the activities of Osteoblast cells were not correspondent with the cell number . On the contrary,the secretion of ALP and HGP of the Osteo-blast cells were decreased . The apoptosis of the cells was promoted . Conclusion:From our study,we confirmed the hyper-glycemia can inhibit the secretion ability of Osteoblast cells.%目的：观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨细胞的影响，探讨糖尿病致骨质疏松症可能的发病机制。方法将4种不同浓度葡萄糖（5.5，10，20，40 mmol/ L）的培养基培养人成骨细胞，培养3~12 d。观察葡萄糖对细胞增殖、凋亡及对细胞分泌碱性磷酸酶（ALP）和骨钙素（HGP）能力的影响。结果在一定浓度范围内，葡萄糖浓度越高，细胞增殖越明显，细胞分泌 ALP 和 HGP 的能力下降，细胞凋亡率增加。结论高糖环境对人成骨细胞分泌能力有抑制作用。

摘要： 【目的】研究葛根素对人成骨细胞经典的雌激素反应元件（estrogen response element,ERE）基因转录途径的调控作用。【方法】将人成骨样MG-63细胞分为5组,分别加入不同终浓度的葛根素（0.01、0.1、1μmol/L）、雌二醇0.1μmol/L或二甲基亚砜处理,通过荧光素酶报告基因检测、RT-PCR及Western blotting等方法,研究葛根素对人成骨细胞经典的ERE基因转录途径、雌激素受体（estrogen receptor,ER）亚型及p160家族共激活因子表达的调控作用。【结果】葛根素可促进人成骨细胞经典的ERE通路的活化,并上调其ERα、ERβ及类固醇受体共激活因子（steroid receptor coactivator,SRC）-1表达水平。【结论】葛根素可通过经典的基因组作用机制即ERE基因转录途径对成骨细胞发挥作用,其作用可能与其上调ERα、ERβ及SRC-1共激活因子的表达有关。

摘要： 目的:观察葛根素对体外培养老年女性骨质疏松症骨折患者体外分离培养的成骨细胞分化的影响.方法:采集老年女性骨质疏松症股骨颈骨折行人工股骨头置换术中取下的股骨颈松质骨,采用骨组织块法原代培养成骨细胞.观察不同浓度(0、0.01、0.1、1 μmol/L)葛根素对成骨细胞表达碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)的影响,并比较各组成骨细胞钙化能力的大小.结果:0.01～1.00 μmol/L的葛根素随着浓度增加,成骨细胞表达ALP、OC活性呈增强趋势,各浓度组两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05);随葛根素浓度增高,成骨细胞钙化结节数量也明显增加,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:葛根素呈浓度依赖性促进成骨细胞表达ALP、OC并能提高成骨细胞的钙化能力.

摘要： 目的:观察人成骨细胞与硫酸钙/胶原膜复合型多孔生物支架降解产物的生物相容性.rn 方法:将第2代人成骨细胞分别置于硫酸钙/胶原膜复合型多孔生物支架降解产物浸提液及含体积分数10％新生牛血清DMEM培养液中培养,培养第1,3,5,7天以MTT法检测两组细胞增殖曲线,联合会推荐法测定细胞碱性磷酸酶活性,考马氏亮蓝微板法测定总蛋白.rn 结果与结论:在硫酸钙/胶原膜复合型多孔生物支架降解产物浸提液中培养人成骨细胞的增殖速度略高于在含体积分数10％新生牛血清DMEM培养液中培养的细胞,但差异无显著性意义(P＞0.05).两组碱性磷酸酶活性、总蛋白合成及碱性磷酸酶/总蛋白都随时间递增而增加,两组不同时间点上述指标差异均无显著性意义(P＞0.05).表明硫酸钙/胶原膜复合型多孔生物支架降解产物既不影响人成骨细胞的增殖生长,也不影响其正常生理功能,具有较好的生物相容性.

摘要： 笔者用实验方法对不同剂量人甲状旁腺素氨基端片段连续刺激对人成骨肉瘤细胞系SaoS-2细胞的影响进行了研究,文章对此做了介绍.

摘要： 笔者用实验方法对不同剂量人甲状旁腺素氨基端片段连续刺激对人成骨肉瘤细胞系SaoS-2细胞的影响进行了研究,文章对此做了介绍.

摘要： 笔者用实验方法对不同剂量人甲状旁腺素氨基端片段连续刺激对人成骨肉瘤细胞系SaoS-2细胞的影响进行了研究,文章对此做了介绍.

摘要： 笔者用实验方法对不同剂量人甲状旁腺素氨基端片段连续刺激对人成骨肉瘤细胞系SaoS-2细胞的影响进行了研究,文章对此做了介绍.

摘要： 本发明的课题在于，提供一种制备可用于骨缺损的修复和对骨吸收、骨折或骨质疏松症等的治疗、没有癌变危险性的成骨细胞的方法。作为解决所述的课题的方案，提供一种制备成骨细胞的方法，其特征在于，将哺乳动物的经分化的体细胞，在培养基中在选自由(1)他汀化合物、(2)酪蛋白激酶1抑制剂、(3)cAMP诱导剂及(4)组蛋白甲基转移酶抑制剂构成的组中的至少1种化合物的存在下进行培养，将所述体细胞变换为成骨细胞。

摘要： 本发明涉及从哺乳动物的体细胞制备成骨细胞的方法以及通过所述方法制备的成骨细胞，所述方法包括向体细胞中导入骨相关基因或骨相关基因的表达产物以及重编程相关基因或重编程相关基因的表达产物，或者独立地向体细胞中导入重编程相关基因或重编程相关基因的表达产物，所述骨相关基因包括选自Runx2(R)、Osterix(O)和Dlx5(D)中的至少一种，所述重编程相关基因包括选自Oct家族、c‑Myc(M)、L‑Myc(L)、Klf家族、Lin‑28和Sox2中的至少一种。

摘要： 本发明提供通过活体外分化多能干细胞获得的间充质细胞群。多能间充质细胞可依次分化成更特殊化的细胞类型如成骨细胞，具有的性质使它们适合于个体中再构成肌骨骼细胞功能。本公开所述组合物、方法和技术可用于多种商业上重要的诊断、药物筛选和治疗应用。

摘要： 本发明涉及一种利用Runx2和小分子化合物诱导人成纤维细胞重编程成骨细胞的方法，特别是一种利用Runx2基因表达及小分子化合物CHIR99021和/或小分子化合物forskolin，在地塞米松存在的条件下诱导人成纤维细胞转分化为成骨细胞的方法，属细胞生物学与组织工程领域。它包括：构建携带Runx2‑GFP的慢病毒浸染人皮肤成纤维细胞，之后利用小分子化合物5～10μMCHIR99021和10μMforskolin在地塞米松的存在的条件下，进行人成纤维细胞的转分化，7～１５天以后，更换成骨细胞诱导液进行诱导，5～20天后可将其诱导为成骨细胞的方法。本发明可以简单快速地获得成骨细胞，用于骨代谢性疾病，骨折等的细胞治疗。本发明的药物组合也可用于组织工程骨的研发和生产。为基础研究带来便捷，为临床应用带来前景。

摘要： 本发明的课题在于，提供一种制备可用于骨缺损的修复和对骨吸收、骨折或骨质疏松症等的治疗、没有癌变危险性的成骨细胞的方法。作为解决所述的课题的方案，提供一种制备成骨细胞的方法，其特征在于，将哺乳动物的经分化的体细胞，在培养基中在选自由(1)他汀化合物、(2)酪蛋白激酶1抑制剂、(3)cAMP诱导剂及(4)组蛋白甲基转移酶抑制剂构成的组中的至少1种化合物的存在下进行培养，将所述体细胞变换为成骨细胞。

摘要： 本发明涉及从哺乳动物的体细胞制备成骨细胞的方法以及通过所述方法制备的成骨细胞，所述方法包括向体细胞中导入骨相关基因或骨相关基因的表达产物以及重编程相关基因或重编程相关基因的表达产物，或者独立地向体细胞中导入重编程相关基因或重编程相关基因的表达产物，所述骨相关基因包括选自Runx2(R)、Osterix(O)和Dlx5(D)中的至少一种，所述重编程相关基因包括选自Oct家族、c-Myc(M)、L-Myc(L)、Klf家族、Lin-28和Sox2中的至少一种。

摘要： 本发明提供通过活体外分化多能干细胞获得的间充质细胞群。多能间充质细胞可依次分化成更特殊化的细胞类型如成骨细胞，具有的性质使它们适合于个体中再构成肌骨骼细胞功能。本公开所述组合物、方法和技术可用于多种商业上重要的诊断、药物筛选和治疗应用。

摘要： 本发明提供通过活体外分化多能干细胞获得的间充质细胞群。多能间充质细胞可依次分化成更特殊化的细胞类型如成骨细胞，具有的性质使它们适合于个体中再构成肌骨骼细胞功能。本公开所述组合物、方法和技术可用于多种商业上重要的诊断、药物筛选和治疗应用。

摘要： 本发明涉及一种促进人源脐带间充质干细胞向成骨细胞分化的诱导方法，包括如下步骤：包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤和干细胞向软骨细胞分化的诱导步骤；所述干细胞向软骨细胞分化的诱导步骤包括采用无血清培养基重悬传代培养至P

摘要： 本发明涉及一种利用Runx2和小分子化合物诱导人成纤维细胞重编程成骨细胞的方法，特别是一种利用Runx2基因表达及小分子化合物CHIR99021和/或小分子化合物forskolin，在地塞米松存在的条件下诱导人成纤维细胞转分化为成骨细胞的方法，属细胞生物学与组织工程领域。它包括：构建携带Runx2-GFP的慢病毒浸染人皮肤成纤维细胞，之后利用小分子化合物5～10μMCHIR99021和10μMforskolin在地塞米松的存在的条件下，进行人成纤维细胞的转分化，7～１５天以后，更换成骨细胞诱导液进行诱导，5～20天后可将其诱导为成骨细胞的方法。本发明可以简单快速地获得成骨细胞，用于骨代谢性疾病，骨折等的细胞治疗。本发明的药物组合也可用于组织工程骨的研发和生产。为基础研究带来便捷，为临床应用带来前景。