齿瓣石斛

摘要： 目的:探讨齿瓣石斛水提取物(DDWE)对环磷酰胺(CTX)诱导的免疫抑制模型小鼠的影响。方法:将CTX免疫抑制模型小鼠随机分组,连续灌胃给药30 d后,检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、脾淋巴细胞增殖能力、脾脏指数、T淋巴细胞亚群与外周血细胞数量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-2(IL-2)的水平。结果:与模型组相比,DDWE各剂量组不同程度加强巨噬细胞吞噬功能与淋巴细胞增殖能力,剂量依赖性提高脾指数、白细胞数、CD4^(+)/CD8^(+)水平以及血清中IgG、IgA、IgM、TNF-α与IL-2水平。结论:DDWE通过加强免疫细胞活性,促进免疫细胞因子的产生与释放,起到增强CTX免疫抑制小鼠免疫功能的作用。

摘要： 以齿瓣石斛茎、花为主原料,采用正交实验及感官评分确定齿瓣石斛面膜液最优配方,通过体外实验测定其保湿率、自由基清除率及酪氨酸酶活性抑制率.结果显示,齿瓣石斛面膜液具有较好的保湿、清除自由基及抑制酪氨酸酶活性的作用,说明齿瓣石斛面膜具有一定的保湿、抗氧化及美白作用.

摘要： 目的 研究齿瓣石斛对SD大鼠的胚胎毒性与致畸毒性.方法 孕SD鼠随机分为4组,分别为齿瓣石斛4.5(低剂量)、9.0(中剂量)、18.0(高剂量)g/kg剂量组和阴性对照组,每组大于17只.在受孕的第7～16 d,每天经口给予受试物,实验期间记录孕鼠的一般状况、体重,于受孕第20 d剖检孕鼠,检查孕鼠的体重及妊娠情况,胎鼠的体重、身长、尾长与外观、骨骼、内脏的畸形情况.结果 各剂量组孕鼠增重、活胎率、吸收胎率、活胎体重、身长及尾长与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).各剂量组和阴性对照组胎鼠的外观、骨骼及内脏未见畸形.结论 在本实验条件下,未发现齿瓣石斛对SD大鼠的胚胎毒性和致畸毒性.

摘要： 本研究通过正交试验设计的方法, 对生产中齿瓣石斛产量形成的主要制约因素进行分析, 包括基质中木屑直径、基质含水量、光照条件、施肥情况以及农药使用状况.结果表明, 以上5种因素均能显著影响齿瓣石斛的茎长和鲜重产量;在齿瓣石斛种植过程中, 控制基质中木屑直径1 cm、含水量25％及栽培管理中遮阳85％、混施牛粪+复合肥以及用75％百菌清防治病虫害是提高齿瓣石斛产量的有效途径, 该生产管理体系简易、高效、丰产.

摘要： [Objective] The research aimed to study the changes of polysaccharide content and content of alcohol-soluble extract in fresh Dendrobium devonianum at different altitudes and different harvesting time.[Method] The polysaccharides content and alcohol-soluble extracts contents from Dendrobium devonianum were extracted by the method of circulating water bath heating.The chemical reaction was used to develop the color reaction and form the complexes.The content of polysaccharides in Dendrobium samples was determined by ultraviolet spectrophotometry.The contents of alcohol-soluble extracts in Dendrobium samples were determined by the difference method.[Result] Dendrobium devonianum was influenced by altitude and harvesting time.The content of polysaccharides and alcohol-soluble extracts from Dendrobium devonianum were significantly different at different altitudes and harvesting time.In the west of Yunnan suitable for planting Dendrobium devonianum,the higher the elevation,the higher the content of polysaccharides and alcohol-soluble extracts contained from Dendrobium devonianum;The longer the harvesting time,the polysaccharide content from Dendrobium devonianum showed a decreasing tendency,but the change was not obvious;on the contrary,the content of alcohol-soluble extract gradually increased.[Conclusion] The study provides a reference for the cultivation and harvesting of Dendrobium devonianum.%[目的]研究不同海拔、不同采收时间齿瓣石斛鲜条内的多糖含量以及醇溶性浸出物含量变化规律.[方法]采用循环水浴加热法提取齿瓣石斛中的多糖、醇溶性浸出物,并进一步运用化学试剂反应显色以及形成络合物;采用紫外分光光度法对石斛样品中的多糖含量进行测定,用差量法对石斛样品中的醇溶性浸出物含量进行测定.[结果]齿瓣石斛受海拔、采收时间的影响较大,不同海拔、不同采收时间所测齿瓣石斛所含多糖含量及醇溶性浸出物含量变化较大.在适宜种植齿瓣石斛的滇西地区,海拔越高,齿瓣石斛所含多糖及醇溶性浸出物含量越高;采收时间越长,齿瓣石斛所含多糖含量呈减少的趋势,但变化不明显,相反醇溶性浸出物含量却逐渐增加.[结论]该研究为齿瓣石斛种植和采收提供参考.

摘要： 目的 观察齿瓣石斛对大鼠的亚慢性毒性.方法 80只大鼠随机分为阴性对照组及齿瓣石斛低、中、高剂量组(4.5、9.0、18.0 g/kg),每组20只,连续给药90 d.其间观察大鼠一般情况(饮水、进食、毛色、行为、粪便、尿液),记录体质量和进食量,计算食物利用率;实验中期(第7周)和末期检测血常规(血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及分类)、血液生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、胆固醇、甘油三酯、血糖、尿素氮、肌酐);实验末期取主要脏器计算脏体比,进行组织病理学检查.结果 齿瓣石斛对大鼠一般情况、体质量、进食量、食物利用率、血常规、血液生化指标、脏体比无明显影响,主要脏器色泽、大小、形态结构无明显异常,显微镜下未发现明显组织病理学变化.结论 齿瓣石斛在90 d内对大鼠无明显亚慢性毒性,安全剂量为18.0 g/kg.

摘要： 目的 探讨齿瓣石斛的急性毒性和遗传毒性.方法 20只ICR小鼠灌胃3次,每次间隔4h,观察7d,考察对小鼠的急性毒性;选用TA97a、TA98、TA1o0、TA1024株组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌在加和不加S9两种条件下设齿瓣石斛5个剂量组(32、160、800、4 000、20 000 μg/皿)行Ames试验;按齿瓣石斛5.0、10.0、20.0 g/kg进行小鼠精子畸形试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验考察遗传毒性.结果 齿瓣石斛对小鼠经口最大耐受量大于45.0 g/kg;Ames试验显示,在加和不加S9时各剂量组回变菌落数与溶剂对照组相似;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果均为阴性.结论 在本实验条件下,齿瓣石斛属无毒级物质,未见遗传毒性.

摘要： 为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题.通过比对石斛药材ITS及trnL-trnF序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别.结果在退火温度为61°C、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带.本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的最低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1％、1％和5％.表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛.%This study was designed to establish a multiplex allele-specific polymerase chain reaction method for simultaneous identification of Dendrobium huoshanense,D.officinale and D.devonianum,which may resolve identification problems of caulis dendrobii.Internal transcribed spacer sequences and trnL-trnF sequences of the Dendrobium species were aligned by BioEdit software,then specific SNPs of the three species were analyzed for designing allele-specific primers and the multiplex allele-specific PCR reaction system was established.The different origin of Dendrobium huoshanense,D.officinale and D.devonianum was amplified and identified by the sizes of respective band.The results showed that 584 bp,397 bp and 211 bp bands could be amplified by D.devonianum,Dendrobium officinale and Dendrobium huoshanense respectively,when the annealing temperature was 61 °C and the number of cycles was 35.The limit of detection (LOD) of D.devonianum and D.huoshanense were both 1.2 ng,while D.officinale was low than 0.24 ng.The detection limit of adulterates in D.devonianum,D.devonianum and D.huoshanense mixture sample was 1％,1％ and 5％ respectively.This result suggests that the method of multiplex allele-specific PCR is useful to identify D.huoshanense,D.officinale and D.devonianum is accurate and specific.

摘要： 目的:通过正交实验对齿瓣石斛多糖的提取工艺进行优化研究.方法:采用苯酚-硫酸法考察提取容积、提取时间、提取次数、提取温度等因素时多糖提取的影响,通过正交试验找出最佳提取工艺.结果:多糖提取的最佳条件,提取温度100°C、提取时间1h、提取次数2次、料液比1∶25.结论:该工艺简单合理,多糖提取率高.

摘要： 目的：建立齿瓣石斛HPLC特征图谱.rn 方法：采用Zorbax SB-Aq色谱柱;流动相为乙腈-0.2％甲酸水溶液(梯度洗脱);检测波长分别为270 nm及340 nm;柱温为35°C;流速为1.0mL·min-1.rn 结果：在270hm检测波长条件下,齿瓣石斛标示出34个特征共有峰,10批样品的相似度为0.919～0.968;在340 nm检测波长条件下,专属性地检出10个黄酮类特征共有峰,10批样品的相似度为0.882～0.981.齿瓣石斛鲜品检出与齿瓣石斛基本一致的特征共有峰,相似度大于0.9.部分市售齿瓣石斛不同程度掺假兜唇石斛.rn 结论：方法准确可靠,重复性好,为齿瓣石斛的质量控制提供了方法依据.

摘要： 本发明公开齿瓣石斛的质量检测方法，包括：1)以ITS‑26SE和ITS‑17SE为引物，进行测序，以鉴定待测石斛药材的品种；2)对样本容量为n的样本进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；3)对样本分别进行指纹图谱检测，获取齿瓣石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；4)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中的其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，通过Lasso方法筛选变量建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱模型。通过一代测序及特征指纹图谱，精确地鉴别和控制齿瓣石斛药材的质量。

摘要： 本发明涉及一种齿瓣石斛纯种相近度的判断和检测方法，所述判断方法的建立过程为，S1：采集与基因测序结论一致的齿瓣石斛样本，测定每个样本的茎第三节间长；S2：对样本茎第三节间长变量进行正态性检验；S3：标准区间：若步骤S2中所得到的结果为服从正态分布，则按照正态分布总体计算公式得出均值的95％置信区间和标准差的95％置信区间；该置信区间便能够作为鉴别未知样本纯净度的标准范围。根据实际采集的数据建立的判断标准为：均值的95％置信区间和标准差的95％置信区间分别为：(28.7833，30.5697)和(4.7839，6.0569)，被测齿瓣石斛样本只需要与该区间对比便可。本发明能够通过齿瓣石斛形态学相关的特征来鉴别其品种的纯净度，从而可以简单地判断人工种植的齿瓣石斛其价值大小或是否存在；其鉴别的准确率高，具有重要的现实意义。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛精制多糖及其制备方法和应用，齿瓣石斛精制多糖的制备方法包括：齿瓣石斛先用水提取，提取液浓缩后添加乙醇醇沉，沉淀用水溶解后脱蛋白，干燥得粗多糖，粗多糖经离子交换柱纯化得到半精制多糖，半精制多糖再经凝胶柱纯化后得到齿瓣石斛精制多糖。该齿瓣石斛精制多糖具有增强免疫，缓解体力疲劳的作用，安全有效，可用于制备增强免疫力和缓解体力疲劳的药物和功能性食品中，还可作为TLR4激动剂在制备添加到疫苗中的免疫佐剂，和TLR4相关的抗肿瘤药物的应用。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，包括：1)对样本容量为n的样本分别进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；2)对样本分别进行指纹图谱检测，获取齿瓣石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；3)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，建立小分子成分与指纹图谱线性回归模型；4)通过变量相关系数指标表征自变量对回归建模的贡献程度建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱。本发明实现了化学小分子成分含量的关联性分析，能有效鉴别、控制以及评价齿瓣石斛药材的质量。

摘要： 由于齿瓣石斛多糖粘性高，高活性多糖段分子量大，所以在其分离纯化以及结构解析方面存在一定难度。为此本发明公开了一种分离提纯齿瓣石斛均一多糖的方法，先用分步醇沉方法进行分离，然后经凝胶柱纯化，能够得到纯净的齿瓣石斛的均一多糖。另外，本发明还采用多光谱解析鉴定了齿瓣石斛均一多糖的骨架结构，能够对该多糖的一级结构准确鉴定，明确齿瓣石斛中的主要多糖为乙酰基葡甘露聚糖。

摘要： 本发明公开了一种在茶树上直接播种齿瓣石斛种子培育种苗的方法。将胶膜菌(Tulasnella sp.)，制成真菌悬浮液，然后与野外采集的齿瓣石斛种子混匀制成种子‑真菌悬浮液。用保鲜膜在茶树树干上缠绕1至3圈，将种子‑真菌悬浮液均匀分散注入保鲜膜和树干之间的空隙位置，并在播种点附近扎孔。本发明简化了幼苗生产过程，明显降低生产成本，提高种苗量和幼苗回归到自然环境中后的存活率和幼苗生长速度，具有很好的环境适应性；当地居民在采集茶叶的同时可以收获石斛产品，起到增收的效果；不需要额外占用土地、建造栽培设施和化肥农药的使用，仅需要极低的制作种子‑真菌悬浮液的成本投入，具有很高的推广应用价值。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛共生种苗的人工繁育方法。将胶膜菌(Tulasnella sp.)，CGMCC No.9551通过放大发酵培养，过滤菌丝体加适量无菌水并用匀浆机打碎制成真菌悬浮液，加入齿瓣石斛种子制成种子‑真菌悬浮液，用椰糠、树叶和树皮制成育苗基质，每平方米基质喷洒50～500ml的种子‑真菌悬浮液，并保持育苗基质的含水量在50％～90％，至45天时即可获得大量共生幼苗。本发明能够显著缩短种子成苗时间，降低育苗成本，一次性获得较大量的齿瓣石斛幼苗，提高共生幼苗的生长速度及移植到自然环境中的存活率均要高于非共生萌发幼苗。该方法实现了齿瓣石斛种子获取种苗的新途径，具有重要的现实推广和应用价值。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛种子和共生真菌混合播种的育苗方法。将胶膜菌(Tulasnella sp.)，CGMCC No.9551经活化、发酵培养后制成真菌粉，然后与齿瓣石斛种子、普通干苔藓碎片混匀，得到混合播种包。育苗时将混合播种包提前浸水后用保鲜膜固定在茶树树干上即可，45～50天即可达到80％的成苗率。本发明技术成本低，易操作，具有更高的种群萌发率，幼苗生长更快，更健壮。播种包方便储存及运输，整个过程简单易学，在齿瓣石斛仿生态栽培产业化方面具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛精制多糖及其制备方法和应用，齿瓣石斛精制多糖的制备方法包括：齿瓣石斛先用水提取，提取液浓缩后添加乙醇醇沉，沉淀用水溶解后脱蛋白，干燥得粗多糖，粗多糖经离子交换柱纯化得到半精制多糖，半精制多糖再经凝胶柱纯化后得到齿瓣石斛精制多糖。该齿瓣石斛精制多糖具有增强免疫，缓解体力疲劳的作用，安全有效，可用于制备增强免疫力和缓解体力疲劳的药物和功能性食品中，还可作为TLR4激动剂在制备添加到疫苗中的免疫佐剂，和TLR4相关的抗肿瘤药物的应用。

摘要： 本发明公开了一种齿瓣石斛的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，包括：1)对样本容量为n的样本分别进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；2)对样本分别进行指纹图谱检测，获取齿瓣石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；3)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，建立小分子成分与指纹图谱线性回归模型；4)通过变量相关系数指标表征自变量对回归建模的贡献程度建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱。本发明实现了化学小分子成分含量的关联性分析，能有效鉴别、控制以及评价齿瓣石斛药材的质量。