鼠伤寒沙门菌

摘要： 旨在制备基于碳量子点(carbon quantum dots, CDs)的免疫荧光探针,初步建立鼠伤寒沙门菌的快速检测方法,以柠檬酸和尿素作为碳源,利用微波法对碳量子点制备的微波时间、透析袋规格等条件进行了优化,再使用化学偶联法将碳量子点与鼠伤寒沙门菌抗体结合制备免疫荧光探针C-IgG,使之借助抗原抗体特异性结合和荧光实现对鼠伤寒沙门菌的检测,最后通过荧光信号对探针的特异性及灵敏度进行检测。结果显示:微波时间为5 min,透析袋规格为MWCO=1 000时能获得粒径3~11 nm的理想碳量子点;该碳量子点激发波长为408 nm,紫外吸收峰位于337 nm,傅里叶变换红外光谱显示其含有羟基、羧基、氨基等常见官能团;制备的免疫荧光探针C-IgG能在短时间内特异性结合沙门菌并在荧光显微镜不同光束下呈多色荧光点,灵敏度为10;CFU/mL。结果表明:改变微波时间和透析袋规格可制备出粒径3~11 nm,表面多功能基团,用于鼠伤寒沙门菌检测的碳量子点,为进一步探索基于碳量子点的免疫荧光探针在鼠伤寒沙门菌检测中的应用提供了参考。

摘要： 【目的】为沙门菌致病机制的全面阐释提供理论指导。【方法】利用λ-Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌mgtC基因缺失突变株SM△mgtC,对其进行生长特性、酸性应激、多粘菌素B敏感性、生物被膜检测、细胞感染和小鼠体内毒力试验,分析mgtC基因在鼠伤寒沙门菌致病机制中的重要作用。【结果】基因缺失株SM△mgtC与亲本菌株和回补菌株相比,生长速度无明显差异,mgtC基因缺失不影响沙门菌的生长特性;在酸应激和多粘菌素B作用条件下,SM△mgtC存活率显著低于亲本菌株,且mgtC基因缺失降低了鼠伤寒沙门菌生物被膜的形成能力;基因缺失株SM△mgtC失去在鼠源巨噬细胞内大量增殖的能力,同时SM△mgtC在小鼠体内的毒力也显著低于亲本菌株。【结论】mgtC基因通过影响鼠伤寒沙门菌的抗酸能力、多粘菌素B耐受性、生物被膜形成能力,从而影响沙门菌在体内、外的毒力。本研究为进一步阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制奠定了基础。

摘要： 目的探讨酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用及其对小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的影响。方法将酪酸梭菌(1.5×10^(10) CFU·L^(-1))和体积分数5%的无菌糯米粉放入到100 mL胰蛋白胨大豆肉汤,于37°C条件下培养48 h,配制酪酸梭菌-糯米复合发酵液,采用显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液和酪酸梭菌悬液中酪酸梭菌,琼脂打孔体外抑菌圈法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液及其稀释液(1:2、1:4、1:8、1:16)对鼠伤寒沙门菌的抑制作用,显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、磷酸盐缓冲液(PBS)、四环素对鼠伤寒沙门菌的抑制作用。应用200μL鼠伤寒沙门菌悬液(1×10^(12) CFU·L^(-1))对60只雄性6周龄ICR小鼠进行灌胃,每日1次,连续灌胃7 d构建鼠伤寒沙门菌感染小鼠模型,将鼠伤寒沙门菌感染小鼠随机分为糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组、PBS阴性对照组、四环素阳性对照组,每组10只,分别给予酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、PBS、体积分数0.2%四环素各200μL灌胃,每日1次,连续灌胃21 d,应用显微镜平板菌落计数方法检测小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌株数,酶联免疫吸附测定法检测肠道内sIgA表达水平,监测小鼠食物摄取量和体质量,计算体质量增加率。结果培养24 h后,酪酸梭菌-糯米复合发酵液中酪酸梭菌菌落数显著多于酪酸梭菌悬液(P0.05)。第0、7、14天,6组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数比较差异无统计学意义(P>0.05);第21天,四环素阳性对照组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组(P<0.05)。第28天,四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组和糯米发酵液组,四环素阳性对照组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组,酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于四环素阳性对照组(P<0.05)。酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,四环素阳性对照组小鼠肠道内sIgA水平显著高于酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,无细胞发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于糯米发酵液组和PBS阴性对照组(P<0.05)。四环素阳性对照组和糯米发酵液组小鼠的食物摄取量高于酪酸梭菌悬液组、PBS阴性对照组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组(P<0.05);酪酸梭菌悬液组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组、四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组(P<0.05),四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组(P<0.05);四环素阳性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于四环素阳性对照组、糯米发酵液组(P<0.05)。结论酪酸梭菌-糯米复合发酵液可显著抑制鼠伤寒沙门菌生长,提高机体免疫力,这为多重耐药鼠伤寒沙门菌感染膳食干预策略的制定提供了新的思路和依据。

摘要： 为探究鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)Ⅵ型分泌系统(T6SS)分泌的效应蛋白Rhs对该菌生物学特性的影响,本研究利用Red同源重组技术构建了鼠伤寒沙门菌rhs1和rhs2基因缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2,同时构建了基因回补菌株C-Δrhs1和C-Δrhs2,并经PCR和测序鉴定正确后,测定了鼠伤寒沙门菌亲本株和缺失株的遗传稳定性、生长曲线,结果显示,缺失株经过多次传代后仍然具有稳定的遗传性;Rhs效应因子缺失对细菌的生长未造成明显影响。进一步利用各菌株感染Hela细胞,对菌株黏附力和侵袭力进行测定,结果显示,与亲本株相比,缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2对Hela细胞的黏附力无明显影响,但侵袭力分别提高了4.9倍和3.4倍。利用各菌株感染RAW264.7巨噬细胞,检测各株菌在RAW264.7细胞内的存活力,结果显示缺失株CVCC541Δrhs1和CVCC541Δrhs2在RAW264.7细胞内存活力分别提高了7.8倍和5.9倍。将各菌经株腹腔注射感染小鼠,检测其对小鼠的半数致死量(LD_(50)),结果显示,亲本株的LD_(50)为2.53×10^(6) cfu/mL,缺失株CVCC541Δrhs1、CVCC541Δrhs2的LD_(50)分别为1.31×10^(7) cfu/mL和5.40×10^(6) cfu/mL,LD_(50)分别下降了5.2倍和2.1倍。本研究首次证实效应蛋白Rhs会影响鼠伤寒沙门菌的侵袭力和细胞内的生存能力,同时也会降低细菌的毒力,在鼠伤寒沙门菌感染过程中发挥了作用,该结果为阐释鼠伤寒沙门菌的致病机制提供了参考。

摘要： 为研究复方白头翁散对鹅源沙门菌优势流行株的抑制效果。2017年5月-2018年7月共收集扬州、滁州和泰州等10个地区送检的病死鹅的肝脏、胆汁和盲肠内容物等病料共计214份,随即进行沙门菌的分离鉴定。结果显示:沙门菌分离率为23.4%(50/214),其中鼠伤寒沙门菌占60%(30/50),为优势血清型;药敏试验结果显示,36株沙门菌具多重耐药性,其中鼠伤寒沙门菌占20株;结晶紫染色试验结果显示,86.7%(26/30)的鼠伤寒沙门菌能够形成生物被膜;体外试验结果显示,复方白头翁散对鼠伤寒沙门菌最小抑菌浓度(MIC)范围为23.44~375.00 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)范围为46.87~375.00 mg/mL;93.75 mg/mL复方白头翁散可抑制此26株细菌生物被膜的形成。结果表明鼠伤寒沙门菌是鹅源沙门菌优势血清型,也是感染鹅的一个重要的病原体,复方白头翁散能有效地抑制鼠伤寒沙门菌。

摘要： BaeSR是鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)中重要的双组分系统(two component system,TCS),通过调控下游靶基因的转录表达影响细菌的耐药性。本研究旨在探索BaeR过表达后,鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物(FQs)的耐药调控机制,寻找BaeR潜在靶基因。首先表达BaeR蛋白并纯化与验证,选取从转录组学筛选到的与耐药相关的差异表达基因(包括ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR)作为BaeR潜在靶基因,结合LacZ报告基因融合试验及凝胶阻滞试验(EMSA)探究BaeSR对鼠伤寒沙门菌的耐药调控机制。结果显示:经纯化验证后,在28 ku处出现目的条带,表明BaeR蛋白成功表达。LacZ报告基因融合试验结果表明,BaeR过表达后可以正向调控ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的表达。EMSA结果表明,BaeR蛋白可以直接结合到marR的启动子区,调控marR基因的表达。在鼠伤寒沙门菌中,BaeSR可以通过正向调控靶基因ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的转录表达并直接调控marR的表达,从而影响菌株对FQs的耐药性。

摘要： 为探究鼠伤寒沙门菌sRNA STnc1220的分子特征、生物学功能及对细菌毒力的影响,通过PCR扩增了鼠伤寒沙门菌sRNA STnc1220基因,分析了其分子特征,利用TargetRNA2网站预测STnc1220基因可能调控的靶基因;利用λ-Red同源重组技术构建沙门菌(STM)-基因缺失突变株,并与亲本SL1344比较,对其生长特性、生化特性、遗传稳定性、生物被膜(BF)形成能力、在不同应激环境中(pH值、H_(2)O_(2)、高盐和乙醇胁迫环境)的适应性、通过黏附侵染巨噬细胞和小鼠感染试验对致病力进行研究。结果显示,STnc1220基因全长73 bp、其上游5′-UTR存在-10和-35启动子结合位点,预测其潜在的靶基因为barA基因;试验成功构建缺失株STM-ΔSTnc1220,且具有良好的遗传稳定性;与SL1344亲本株相比,缺失株的生长速度、生化特性及生物被膜形成能力没有发生改变;在pH=4.8,pH=9和H_(2)O_(2)条件下生长速率差异不显著,但在4%NaCl环境下,缺失株在7 h后生长速率明显高于亲本株,在3.8%乙醇环境中缺失株在对数期的生长速率显著升高(P<0.05);其对巨噬细胞中黏附和侵袭能力极显著降低(P<0.01),小鼠LD_(50)显著升高,对小鼠的肝脏和脾脏的病理损伤致病力减弱。表明STnc1220基因在环境适应性和毒力调控中发挥了重要的作用。为阐明鼠伤寒沙门菌的致病机制提供理论依据。

摘要： 为探究沙门菌外膜蛋白基因fadL、ompN、ybfM以及sRNA RybB和伴侣蛋白Hfq缺失对该菌致病性的影响,构建了鼠伤寒沙门菌基因缺失菌株,并测定了基因缺失菌株的生长曲线,同时通过小鼠腹腔注射测定了基因缺失菌株的毒力及其在小鼠脾脏和肝脏上的定殖能力.结果显示,与鼠伤寒沙门菌亲本野生型菌株LT2相比,基因缺失菌株的生长能力变化不大.LT2对小鼠的LD_(50)为3.97×10^(7)CFU;外膜蛋白基因缺失菌株ΔompN、ΔfadL和ΔybfM的LD_(50)分别为1.58×10^(5)、6.29×10^(5)、9.97×10^(5)CFU,毒性明显增强;sRNA敲除菌株(ΔrybB)的LD_(50)为9.97×10^(7)CFU,毒性有所下降;伴侣蛋白Hfq敲除组(Δhfq)及rybB&hfq双敲除组的小鼠死亡数未超过50%,毒性明显下降.感染48 h后,与对照组(LT2)相比,所有基因缺失菌株处理组的脾脏指数均极显著性升高;ΔrybB&Δhfq、Δhfq处理组的脾脏载菌量显著降低,其余菌株处理组的载菌量与LT2差异不显著;ΔrybB、ΔrybB&Δhfq、ΔfadL、ΔybfM处理组的肝脏指数均显著下降,而Δhfq、ΔompN处理组的肝脏指数变化不显著;ΔrybB、ΔfadL处理组肝脏载菌量变化不显著,Δhfq、ΔrybB&Δhfq处理组的肝脏载菌量显著下降,而ΔompN、ΔybfM处理组的载菌量显著上升.总的来说,hfq、rybB缺失降低了鼠伤寒沙门菌的致病力,而fadL、ompN、ybfM的缺失提高了鼠伤寒沙门菌的致病力.

摘要： 【目的】筛选鼠伤寒沙门菌sRNA SdsR的靶基因,为明确s RNA与靶基因的互作以及沙门菌的致病机制奠定基础。【方法】利用TargetRNA2软件预测sRNA SdsR的靶标,基于前期的s RNA SdsR敲除后转录组测序结果,将预测到的基因注释到GO、KEGG以及eggNOG数据库中进行分析,通过RT-qPCR对预测到的杂交能量较高的部分靶基因进行验证。【结果】TargetRNA2软件预测到29个靶标,其中hemA、STM0951、mreC、STM1252、dcoC的杂交能量较高,且能与sRNA SdsR有连续的碱基匹配,分别与鼠伤寒沙门菌血红素合成、氧化还原过程、草酰乙酸脱羧酶的合成、膜的组成部分、细胞质蛋白的合成有关。RT-qPCR结果显示,相对于野生菌株3409,敲除s RNA SdsR后hemA、mreC的表达分别下调0.70和0.39倍;STM0951、STM1252、dcoC的表达分别上调0.51、0.35和1.86倍。【结论】hemA、STM0951、mreC、STM1252、dcoC基因很可能受s RNA SdsR的直接调控且对某些靶基因的表达有促进作用。

摘要： 目的分析2017—2020年儿科鼠伤寒沙门菌的分离及耐药情况,为临床合理选择抗生素提供依据。方法对115例腹泻患儿的肛拭样本(分离后确诊为沙门菌)进行分离培养,在生化鉴定和血清学分型确定为鼠伤寒沙门菌后采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验,并采用Whone5.6及SPSS21.0软件包进行数据统计及分析。结果2017—2020年共有115例患儿经血清型鉴定检出鼠伤寒沙门菌。鼠伤寒沙门菌高发于夏秋季节,占84.35%。感染患儿以<3岁幼儿为主。鼠伤寒沙门菌对氨苄西林及头孢曲松的平均耐药率比较高,而对喹诺酮类药物以及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性高。结论鼠伤寒沙门菌对氨苄西林和头孢曲松的耐药率高,临床应合理选择抗生素,避免细菌耐药的发生。

摘要： 鼠伤寒沙门菌可引起人类、禽类等多种动物的食物源性人畜共患病,呈多种血清型流行态势.疫苗是控制疾病的有效手段,然而现有沙门菌疫苗针对异源沙门菌的保护力有限,因而开发能够预防多种血清型的新型疫苗是迫切需求.O-抗原是沙门菌的保护性抗原,其特异性抗体能够有效地清除沙门菌的感染.本研究构建三株表达纽坡特沙门菌O-抗原的减毒鼠伤寒沙门菌二价疫苗株,并在小鼠模型上检测其免疫原性和免疫保护效应.

摘要： 本研究于2014年在云南昆明某综合医院儿科开展腹泻监测时，从1例迁延性腹泻患儿粪便标本中先后3次检出鼠伤寒沙门菌。本研究对患儿进行了回顾性调查、随访和实验室检测，对其发病情况、诊治经过、病原特征和转归等进行了综合分析。该患儿腹泻症状持续约40 d且粪便标本中持续检出鼠伤寒沙门菌。出现这种情况的原因可能主要是就医不及时且治疗不规范，即腹泻早期忽略了较为关键的补液和微量元素补充，而肠道感染明显时期又因药物过敏而致抗生素治疗不规范，以至于使用的抗生素不仅没有彻底清除患儿肠道内的病原菌，可能还反而加剧了患儿肠道微生态失衡。

摘要： 研究sipB基因与鼠伤寒沙门菌菌体糖酵解的关系.本研究以sipB基因缺失株SL1344ΔsipB、互补菌株SL1344-c-sipB和野生型菌株SL1344为研究对象,利用丙酮酸测试盒、乳酸测试盒、ATP含量测试盒分别检测培养3、6、9、12、15h菌体中丙酮酸、乳酸和ATP的含量,然后进行数据分析比较.本试验结果显示，鼠伤寒沙门菌sipB基因缺失后，与互补菌株和野生型菌株相比，丙酮酸、乳酸含量降低，而ATP含量增高，差异极显著。说明sipB基因与菌体糖酵解过程密切相关。该研究结果为分析sipB基因与菌体糖酵解的关系，进而为研究sipB基因与菌体死亡的关系奠定基础。

摘要： 构建鼠伤寒沙门菌环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统，并对其生物学特性进行检测。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344Δcya为亲本株，利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的同源重组技术，经两步法缺失并筛选asd基因缺失株(SL1344ΔcyaΔasd)。将含asd基因且无抗性的pYA3493质粒电转化至缺失株SL1344ΔcyaΔasd，构建重组菌株SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)。本研究以实验室前期构建的鼠伤寒沙门菌SL1344Δcya为亲本菌株，通过自杀性质粒介导的同源重组的方法构建得到SL1344ΔcyaΔasd缺失株，然后将含asd基因且无抗性的pYA3493质粒电转化至缺失株SL1344ΔcyaΔasd，获得SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)重组菌株。该菌株的生化特性与亲本株SL1344Δcya保持一致，说明asd基因并不影响SL1344Δcya的生化特性，SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)对雏鸡的致病性测定试验结果表明，其毒力较参考株SL1344降低了约104倍，初步说明该重组菌株作为疫苗载体具有良好的安全性，所构成的宿主载体平衡致死系统可用于外源基因的稳定表达，为开发安全高效的口服多价鼠伤寒沙门菌活载体疫苗奠定了基础。

摘要： 鼠伤寒沙门菌是一种常见的能引起哺乳动物胃肠炎的食源性病原菌，全球每年有2千万人感染沙门菌病，有大约20万人死于沙门菌病，在公共卫生方面具有重要的意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344△crp和SL1344△sipB基因缺失株为研究对象，研究crp和sipB基因缺失后对细菌侵袭能力的影响。研究结果发现crp基因缺失株失去了利用麦芽糖、半乳糖、山梨醇等的能力，并且生长速度较亲本菌株相比也发生了显著的下降。而sipB基因缺失株仍然保持着利用麦芽糖、半乳糖、山梨醇等的能力，并且其生长速度较亲本菌株相比没有发生明显的变化，说明sipB基因缺失后不影响菌株参与碳水化合物、氨基酸和小肽代谢等功能。体外和体内侵袭力的实验对crp基因缺失株和sipB基因缺失株进行了比较，在小鼠体内的动态分布试验结果显示缺失菌株较亲本菌株相比在肝脏和脾脏上面分离到的细菌数明显的低于亲本菌株，细胞的黏附和侵入试验结果也显示出缺失sipB基因后能够显著降低对上皮细胞的黏附和侵入能力，而crp基因缺失株实验组与亲本菌株对照组无明显差别，均与前面的小鼠试验模型结果相一致。

摘要： 鼠伤寒沙门菌是一群非适应性或泛嗜性的沙门菌，具有广泛的宿主，是目前世界各国分离率最高的菌型之一。该菌能引起各种哺乳动物以及人类发生全身性感染，具有重要的公共卫生意义。本研究以鼠伤寒沙门菌SL1344△crp基因缺失株为研究对象，研究crp基因缺失后引起的减毒机制,对crp缺失株耐酸碱性、耐盐性、运动性、生物生物被膜主要成分以及黏附和入侵等方面的测定。细菌运动性检测结果表明：该缺失株较亲本菌株相比失去了运动性能力，这与Javier等构建的爱德华菌的crp基因缺失株的结果相一致，笔者推测该基因可能与细菌鞭毛的形成有关。耐酸碱性试验结果表明：crp缺失菌株在酸性和碱性环境中均会影响其生长，PH值在8以上或者在4以下均对其生长有显著的影响，在培养24h后的结果表明crp基因缺失株表现出对碱性环境的耐受性更强，耐盐性试验结果显示crp基因缺失株对高盐的耐受性降低，说明该基因可能与细菌细胞膜的耐高渗能力有关。

摘要： 本研究利用PCR方法扩增鼠伤寒沙门菌的SodA基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-SodA.将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG进行诱导表达.通过双酶切和SDS-PAGE试验检测结果表明,SodA在大肠杆菌中得到了表达.SodA基因的成功表达,为后续鼠伤寒沙门菌SodA酶特性的研究奠定基础.

摘要： 目的：对2013年上海市流行的沙门菌进行鼠伤寒单相变异株的鉴定、基因型和耐药谱分析.rn 方法：结合PCR和血清分型方法鉴定鼠伤寒单相变异株.采用PCR方法检测鼠伤寒沙门菌fljB、fljA和hin基因.用纸片法对鼠伤寒沙门菌单相变异株进行耐药性检测.rn 结果：检出鼠伤寒沙门菌单相变异株有52株,在沙门菌和鼠伤寒沙门菌中的构成比分别是4.41％和23.3％;44株单相株fljB基因缺失,另有2株基因型为fljB+fljA-hin-和6株fljB+fljA+hin+;多重耐药单相株共有40株,其中耐4类以上抗生素的有36株(69.23％),对氨苄青霉素-链霉素-磺胺异恶唑-四环素耐药的有36株(61.54％).rn 结论：上海市鼠伤寒沙门单相变异株检出率高,fljB基因缺失是主要的分子机制,多重耐药性严重,且以氨苄青霉素-链霉素-磺胺异恶唑-四环素耐药为典型.

摘要： 鼠伤寒沙门菌是一群宿主非特异性肠道致病菌,是重要的人类食物源性病原体.本研究以编码鼠伤寒沙门菌SL1344的侵袭性蛋白B的sipB基因作为减毒基因,为研究sipB基因的功能和研发安全有效的沙门菌疫苗提供了理想靶点.SL134445单B缺失株毒力较亲本株SL1344明显下降约700倍，有大量实验证明鼠伤寒沙门菌的、sip8基因能够通过caspase-1介导IL-1β和IL-18的激活作用促进巨噬细胞的凋亡和坏死，由此推测这种缺失株的毒力减弱可能与降低巨噬细胞的凋亡和坏死有关。本研究中SL134445单B免疫组的IgG水平明显高于对照组并且于免疫后第14-21天达到最高水平(p＜0.01)说明SL134445△SipB能够有效地刺激机体的免疫功能。SL134445△SipB缺失株免疫后野毒攻毒有43.7%的免疫保护率，而SL13444△crp单缺失株免疫后有85.7%的免疫保护率，比较后发现、sipB基因缺失后有较低的免疫保护率，这可能与sipB基因缺失后能够降低其对巨噬细胞的黏附和侵入能力和影响其它一些免疫原性基因的表达有关，提示sipB基因很有可能是沙门菌的一种很重要的免疫原性基因，但是否是这种机制引起的变化还需要进一步验证。

摘要： 为研制更加安全有效的减毒鼠伤寒沙门菌基因缺失株和开发适于粘膜免疫更加理想的疫苗活载体,本文以χ7213(pREΔasd)为供体菌,SL1344ΔcrpΔcya 为受体菌进行结合转移,通过自杀性质粒介导的等位交换技术两步法筛选SL1344ΔcrpΔcyaΔasd 缺失株,并对其生物学特性进行了初步研究.实验表明:该缺失株在有外源DAP 的存在下才能够正常生长,且能稳定遗传缺失的asd 基因,其血清型与亲本株SL1344ΔcrpΔcya 及强毒株SL1344 保持一致;其生化特性与亲本株基本相同,但与强毒株相比变化较明显,且生长速度明显减慢;雏鸡毒力试验结果表明其毒力较SL1344 降低了至少105倍.证实减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔcyaΔasd 缺失株构建成功,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服多价疫苗奠定了基础.

摘要： 本发明公开了一种沙门氏菌肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌PCR焦磷酸法的检测引物试剂盒和检测方法。本发明根据沙门氏菌aceA基因、肠炎沙门氏菌特异序列、鼠伤寒沙门氏菌的STM4599序列中的保守区域，分别设计扩增引物和测序引物，对目标片段进行PCR扩增，再用扩增产物制备单链模板，进行焦磷酸测序，测序引物后前30个碱基序列为GCCTGTGGGTACTTCTCCTGCCAGTATAAT判断样品中含有沙门氏菌，测序引物后前30个碱基序列为CCTGTTGTCTGCTCACCATTCGCCAGCCAC和TACAACCGGAGTGCACATTAATCCCGCAGC则分别判断含有肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌。

摘要： 本发明涉及一种鉴别肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌的多重PCR方法，该方法是以提取的待测细菌DNA为模板，用SEQ ID NO.1－10所示的5对引物进行mPCR扩增；mPCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳结果进行判定。本发明利用所合成的引物进行PCR扩增，建立起的多重PCR可以直接研磨病料进行扩增，可以在一个体系中检测出不同的沙门氏菌血清型，在临床检测中较传统的分离纯培养后进行血清玻板凝集的3天时间比仅需要6个小时左右，大大缩短了诊断时间，为临床诊断提供依据。

摘要： 本发明属于微生物检测领域，公开了一种同时快速检测食品中活的鼠伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌菌的方法。针对鼠伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌菌设计特异性引物，采用叠氮溴化丙锭处理处理取出死菌的干扰，最终提取DNA做多重PCR检测。本方法和经典的细菌分离、鉴定和血清学分型方法相比更快速、准确。

摘要： 本发明公开了一种沙门氏菌肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌PCR焦磷酸法的检测引物试剂盒和检测方法。本发明根据沙门氏菌aceA基因、肠炎沙门氏菌特异序列、鼠伤寒沙门氏菌的STM4599序列中的保守区域，分别设计扩增引物和测序引物，对目标片段进行PCR扩增，再用扩增产物制备单链模板，进行焦磷酸测序，测序引物后前30个碱基序列为GCCTGTGGGTACTTCTCCTGCCAGTATAAT判断样品中含有沙门氏菌，测序引物后前30个碱基序列为CCTGTTGTCTGCTCACCATTCGCCAGCCAC和TACAACCGGAGTGCACATTAATCCCGCAGC则分别判断含有肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌。

摘要： 本发明公开了一种同时检测鼠伤寒沙门氏菌，肠炎沙门氏菌，以及魏氏梭菌A型的三重PCR引物组和试剂盒，其中包含三对引物，分别是鼠伤寒沙门氏菌上下游引物对分别是SEQIDNO:1，SEQIDNO:2；肠炎沙门氏菌上下游引物对分别是SEQIDNO:3，SEQIDNO:4；魏氏梭菌A型引物对分别是SEQIDNO:5，SEQIDNO:6。利用本发明提供的试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌，肠炎沙门氏菌，魏氏梭菌A型准确性高、特异性强、灵敏度高、易于操作、快速且结果可靠。

摘要： 本发明公开了一种鼠伤寒沙门氏菌噬菌体T102及其在富集分离沙门氏菌中的应用，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2021170。所述偶联物PhageT102‑MBs为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体T102与羧基磁珠偶联得到的复合物。本发明以噬菌体T102作为特异性识别沙门氏菌的元件，与羧基化磁珠偶联形成具有特异性捕获沙门氏菌与磁响应的双功能性分离探针，能够作为病原菌检测中前处理富集分离的有效手段，并且进一步扩展噬菌体在食品安全检测中的应用范围。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体涉及减毒鼠伤寒沙门氏菌的基因工程菌在制备治疗癌症的药物上的应用，采用区域动脉灌注的给药方式提高基因工程菌在胰腺、肺脏的分布浓度的方法。肿瘤细菌疗法备受关注。为提高基因工程菌在肿瘤组织中的浓度，尤其是胰腺癌等低血管肿瘤，静脉治疗药物难以达到病灶部位。本发明通过区域动脉灌注应用基因工程菌，提高了基因工程菌在胰腺、肺脏的分布浓度，具有很好的应用前景。

摘要： 本发明公开了减毒鼠伤寒沙门氏菌及其基因工程菌在制备治疗急性白血病的药物上的应用，涉及医药技术领域。该基因工程菌携带克隆有L‑methioninase(L‑甲硫氨酸酶或蛋氨酸酶)基因的重组表达质粒，可以在肿瘤组织持续表达L‑methioninase，大量消耗甲硫氨酸及其它营养物质，使得肿瘤细胞缺乏营养，生长缓慢，对急性白血病细胞具有显著的生长抑制作用，因此可以用于制备治疗急性白血病的药物。

摘要： 本发明提供一种同时检测单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的试剂盒及其制备方法，属于试剂盒领域。该试剂盒包括实时检测自吸阀分隔式芯片；所述的实时检测自吸阀分隔式芯片包括：自吸阀分隔式芯片、单核细胞增多性李斯特菌的FAM染料修饰特异性适配体、副溶血性弧菌的FAM染料修饰特异性适配体、鼠伤寒沙门菌的FAM染料修饰特异性适配体、空白对照FAM染料修饰适配体、HNB染料和氧化石墨烯。本发明对单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的最低检测浓度分别为46.8、22.9和32.3CFU/mL，加标回收率达到97.11～10.40％，灵敏度高，稳定性好。

摘要： 本发明提供一种同时检测单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的试剂盒及其制备方法，属于试剂盒领域。该试剂盒包括实时检测自吸阀分隔式芯片；所述的实时检测自吸阀分隔式芯片包括：自吸阀分隔式芯片、单核细胞增多性李斯特菌的FAM染料修饰特异性适配体、副溶血性弧菌的FAM染料修饰特异性适配体、鼠伤寒沙门菌的FAM染料修饰特异性适配体、空白对照FAM染料修饰适配体、HNB染料和氧化石墨烯。本发明对单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的最低检测浓度分别为46.8、22.9和32.3CFU/mL，加标回收率达到97.11～10.40％，灵敏度高，稳定性好。