鸡新城疫病毒

摘要： 为了建立一种检测鸡新城疫病毒核酸的方法,以F蛋白基因序列为模板设计了一对引物,并利用建立的方法对采集的10份样品进行了检测。结果显示,本次设计的引物序列对新城疫具有较好的特异性和灵敏性,10份样品中全部为阳性。结合临床症状,实验结果能为鸡新城疫病毒分子病原学检测提供一定依据。

摘要： 鸡新城疫俗称鸡瘟,又叫亚洲鸡瘟、伪鸡瘟,是由鸡新城疫病毒引发的一种高度接触性、急性、烈性传染病。世界卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫情,我国将其列为一类动物疫病。1.1流行病学鸡最易感,各种鸡和各种龄期的鸡都能感染,幼鸡和中鸡更易感染。主要传染源是病鸡和带毒鸡。传播途径主要是消化道和呼吸道,也可经损伤的皮肤、黏膜侵入体内。一年四季均可发生,春秋多发。

摘要： 鸡新城疫又称鸡瘟或者亚洲鸡瘟,它是由鸡新城疫病毒引起的一种急性传染病,主要容易感染家鸡,尤其是雏鸡更加容易受到感染.本文主要从鸡新城疫的病原学、流行特点、传播途径、临床症状、病理变化、免疫和预防等进展情况进行了分析和综述.

摘要： 为建立新城疫病毒在BHK-21细胞的无血清全悬浮培养工艺以获得高滴度和高纯度的新城疫悬浮培养抗原,通过悬浮培养驯化和筛选获得了形态良好、稳定传代的BHK-21-sc悬浮细胞株;该细胞以初始密度0.5×106 cells/mL接种,培养72 h可增殖到6×106 cells/mL,细胞活率达95％.以5 L生物反应器悬浮培养BHK-21-sc细胞,对鸡新城疫病毒La Sota株的接毒剂量、TPCK胰酶添加浓度、病毒培养温度、收获时间等工艺参数进行了摸索和优化;并在5 L-16 L-50 L生物反应器中进行逐级放大,以优化后的鸡新城疫悬浮培养工艺进行3个批次病毒悬浮培养.最终确定鸡新城疫病毒La Sota株接种BHK-21-sc悬浮细胞株的悬浮培养工艺:BHK-21-sc细胞悬浮培养的第3天按照感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.005接种病毒,并添加终浓度为5μg/mL的TPCK胰酶,于33°C培养72 h后收获病毒液.应用该悬浮培养工艺在5、16、50 L反应器上悬浮培养BHK-21-sc悬浮细胞株生产鸡新城疫病毒HA滴度不低于9 log2,病毒含量不低于106.0 TCID50/0.1mL.表明BHK-21-sc细胞无血清全悬浮生产鸡新城疫病毒工艺稳定,可以实现逐级放大和规模化生产.

摘要： 为建立快速同步检测鸡源新城疫病毒、传染性法氏囊病毒与传染性支气管炎病毒的多重RT-PCR检测方法,并应用于临床检测.参考GenBank中NDV NP、IBV N和IBDV VP基因序列,设计了3对特异性引物.通过优化引物浓度及退火温度建立多重RT-PCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验.结果显示,成功建立了检测NDV、IBDV和IBV的三重RT-PCR方法,具有良好的特异性和稳定性,只扩增出NDV、IBDV和IBV的特异性片段,对鸡大肠杆菌、鸡沙门氏菌、鸡巴氏杆菌和鸡马立克等其他无关病原核酸无扩增;对NDV、IBDV和IBV核酸最低检测量分别为NDV6.18×101 copies/μl、IBDV 8.64×106 copies/μl和IBV2.57×102 copies/μl;用该方法进行多次重复性试验结果一致.结果表明,所建立方法对NDV、IBDV和IBV的三重RT-PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好;为鸡源新城疫、染性法氏囊与传染性支气管炎临床混合感染病例的诊断和流行病学调查提供了可靠的方法.

摘要： 将鸡新城疫检验和基础种子批冻干毒存放于-70°C保存,并于保存当日和保存后12、24、36、48、60、72、75和78个月,随机抽样,分别进行病毒含量测定、无菌检验和对鸡毒力测定;将检验和生产种子批湿毒存放于-20°C保存,并于保存当日和保存后3、6、9、12、15和18个月,随机抽样分别进行病毒含量测定和无菌检验.结果表明,检验种子和基础种子冻干毒保存75个月病毒含量与保存当日无明显化,无细菌、霉菌污染;检验用冻干强毒对60和90日龄鸡的毒力及病毒含量与保存当日无明显变化,无细菌、霉菌污染.检验用强毒与生产种子批湿毒保存15个月,对鸡的毒力和病毒含量无明显变化,无细菌、霉菌污染.因此,将鸡新城疫冻干毒于-70°C保存的有效期定为72个月;将湿毒于-20°C保存的有效期定为12个月.

摘要： 为了构建鸡传染性喉气管炎病毒(Avian Infectious Laryngotracheitis,AILT)和鸡新城疫病毒(Newcastle disease,ND)双重检测方法,本文以鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒的基因保守序列为基础,进行2对特异性引物及2条非一致荧光基团标记的TaqMan探针设计与试验.优化、调整反应条件后,建立鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法.这种双重PCR检测方法对传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒监测灵敏度为10拷贝/L,相对于常规OCR检测方法灵敏度提高100倍,并且该PCR检测方法对禽流感病毒、鸡白血病病毒等检测结果均为阴性,具备良好的特异性,此外该检测方法批内和批间的重复变异系数都<2％.使用鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法对比常规的检验方法测试150份组织样品,达到100％的正确率,该方法可以作为鸡传染性喉气管炎病毒和鸡新城疫病毒的快速检测手段.

摘要： 为探讨人参皂苷体内抗鸡新城疫病毒的作用机理，试验用鸡新城疫病毒人工感染雏鸡模型，采取人参皂苷口服，观察试验鸡只的临床症状及体重变化，测定血清抗体效价的变化情况。结果表明，人参皂苷组可以明显推迟人工感染NDv雏鸡的发病日龄，缩短ND病鸡的发病过程。试验鸡饲喂人参皂苷后可明显降低发病率和死亡率并促进抗体水平的产生。说明人参皂苷可以降低病毒对组织的损害程度，增强雏鸡对病毒的抵抗力。

摘要： 鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是引起鸡新城疫的病原体.为研究鸡基因Ⅶ新城疫病毒融合蛋白F,本研究通过PCR方法扩增出鸡新城疫Ⅶ的F基因,并采用生物信息学软件对其进行分析,将分析后的F基因的两种基因片段分别连接到pET32-a(+)表达载体上,经转化到大肠杆菌DL21中诱导表达,并对蛋白的表达、可溶性进行鉴定、同时采对纯化后的F蛋白兔疫BALB/C小鼠制备抗血清,采用兔疫印迹方法鉴定抗血清与F蛋白及病毒的反应原性.研究结果为去除了信号肽的F基因片段分别为762bp及1347bp,将其进行表达后蛋白大小分别约为48kDa及68kDa,均为包涵体表达,该蛋白免疫小鼠制备的抗血清可以与F蛋白及NDV病毒反应.结果表明,本研究成功表达了NDVⅦ的F基因并制备了抗血清,研究结果将为新城疫病毒F蛋白的应用及基础研究提供理论参考.

摘要： 利用平衡致死系统构建表达鸡新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）血凝素-神经氨酸酶（HN）的减毒鸡白痢沙门菌（Salmonella enteria serovar Pullorum,S.Pullorum）活载体疫苗株，并进一步研究其生物学和免疫学特性，为筛选NDV重组减毒沙门菌疫苗候选株提供一定的理论依据。本试验成功构建的表达NDV HN的重组S.Pullorum C79-13ΔcrpΔasd(pYA-HN)与其亲本缺失菌株C79-13ΔcrpΔasd相比具有相似的生物学特性；与野生株C79-13株相比生化特性发生明显的变化。新城疫病毒是粘膜病原，因此本研究采用口服的免疫及攻毒方式以模拟感染的天然状态从而建立新城疫动物模型。重组菌免疫后在一定时期内能够刺激机体产生有效的体液、黏膜和细胞免疫应答反应，且具有良好的保护率，有潜力成为鸡白痢-新城疫二联活疫苗的优秀候选菌株，为进一步开发不携带抗性标记的NDV基因工程疫苗奠定了良好的基础。

摘要： 选用海藻糖、明胶、PVP等成分配制耐热保护剂,采用梯度真空干燥方法,将鸡新城疫病毒La Sota株进行泡沫干燥,通过37°C10d耐老化试验筛选到配方T5的病毒滴度损失为0.2 Lg;NDV-T5泡沫干燥疫苗经DSC测定配方玻璃化转变温度Tg为56.45°C,扫描电镜观察可见较为规则的片状结构;NDV-T5在各温度耐热性能均较好,2°C～8°C保存24个月,25°C保存15个月、37°C保存5个月,病毒含量下降≤1.0 Lg;将不同保存温度的NDV-T5泡沫干燥疫苗免疫1月龄雏鸡,鸡只均能在免后14d产生抗体,与现有商品疫苗效力相当.

摘要： 根据鸡新城疫病毒(La Sota株)禽流感病毒(H9亚型,HL株)二联灭活疫苗制造及检验试行规程(以下简称《规程》)的规定,禽流感病毒(H9亚型,HL株)制苗用病毒液的制备中规定,病毒液置-15°C保存应不超过30日.为此经过试验,对同一批的禽流感病毒(H9亚型,HL株)病毒液在不超过30日进行几次冻融,测定病毒含量及红细胞凝集价,结果是在3次冻融后病毒液的效价达到108.17EID50/0.1mL.《规程》规定禽流感病毒(H9亚型,HL株)病毒液计算EID50每O.1ML病毒含量应≥108.OEID50.

摘要： 为进一步探究鸽Ⅰ型副粘病毒与鸡源新城疫F0裂解位点附近序列存在的差异，利用生物信息学软件对分离的鸽Ⅰ型副粘病毒与GenBank已发表的标准鸡新城疫毒株相应F0裂解位点附近序列进行分析。结果表明：鸽Ⅰ型副粘病毒与鸡新城疫核苷酸序列的同源性相对较低，而对鸽Ⅰ型副粘病毒与鸡新城疫的疏水性比较可以看出，二者也存在较大的差别。

摘要： 为了比较银耳多糖硫酸化修饰前后抗鸡新城疫病毒(NDV)的作用，将安全浓度范围内的硫酸化银耳多糖(sTPSs)sTPStp、sTPS70c、未修饰的银耳多糖TPS70c、TPStp、TPStc和NDV以3种方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒混合感作后加)加入到鸡胚成纤维细胞(CEF)的培养体系中， MTT法测定各多糖对NDV感染CEF能力的影响。结果表明，5种多糖在合适的浓度可以显著抑制NDV感染细胞。在三种加样方式中，sTPStD在1.563μg-mL-1时的病毒抑制率最高，显著高于3个未修饰多糖组。表明硫酸化修饰后的银耳多糖能显著提高抗病毒活性。

摘要： 鸡新城疫是由副粘液病毒引起的一种高致病性、高传染性、高死亡率的鸡传染病,目前中国列入A类传染病,临床危害大、严重影响养鸡业的经济效益,通过采用综合防控措施,减少鸡新城疫发生,有积极的推广应用前景.

摘要： 鸡新城疫是由副粘液病毒引起的一种高致病性、高传染性、高死亡率的鸡传染病,目前中国列入A类传染病,临床危害大、严重影响养鸡业的经济效益,通过采用综合防控措施,减少鸡新城疫发生,有积极的推广应用前景.

摘要： 鸡新城疫是由副粘液病毒引起的一种高致病性、高传染性、高死亡率的鸡传染病,目前中国列入A类传染病,临床危害大、严重影响养鸡业的经济效益,通过采用综合防控措施,减少鸡新城疫发生,有积极的推广应用前景.

摘要： 本发明公开了一种鸡新城疫病毒毒株rClone30‑fliC及其在鸡新城疫病防治中的应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株及其制备方法，其制备方法包括如下步骤：将已构建的重组质粒pBrClone30‑fliC以及相应的辅助质粒pBL‑N、pBL‑P和pBL‑L共转染能稳定表达T7聚合酶的BHK‑21细胞，并拯救培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂fliC，除了增强了接种鸡的免疫反应外，出乎意料的快速产生HI抗体，实现了早期免疫效果，缩短了免疫空白期，同时不受母源抗体的干扰，提高免疫保护效率。本发明对于新城疫病的防治具有重大价值。

摘要： 本发明公开了一种鸡新城疫病毒毒株及其在制备鸡新城疫病疫苗中的应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30?GM?CSF、pBL?N质粒、pBL?P质粒和pBL?L质粒共转染哺乳动物细胞并培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株；所述重组质粒pBrClone30?GM?CSF为具有序列表的序列3自5’末端第2703?18408位核苷酸所示的DNA分子的质粒。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂GM?CSF，可以有效提高免疫效果，极大缩短免疫空白期，同时可抵抗母源抗体，提高免疫保护率。本发明对于新城疫病的防治具有重大价值。

摘要： 本发明公开了一株鸡新城疫病毒株H12株及其在制备鸡新城疫弱毒活疫苗中的应用。本发明的一株鸡新城疫病毒株H12株，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号为CGMCC？No.8506。实验表明，本发明分离得到的NDV？H12株是一株免疫原性好、生产性能优良、适宜大规模生产的种毒。由该NDV？H12株制备的活疫苗产品质量合格，能够满足产业化生产的要求。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒的试剂盒。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种鸡新城疫病毒毒株rClone30-fliC及其在鸡新城疫病防治中的应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株及其制备方法，其制备方法包括如下步骤：将已构建的重组质粒pBrClone30-fliC以及相应的辅助质粒pBL-N、pBL-P和pBL-L共转染能稳定表达T7聚合酶的BHK-21细胞，并拯救培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂fliC，除了增强了接种鸡的免疫反应外，出乎意料的快速产生HI抗体，实现了早期免疫效果，缩短了免疫空白期，同时不受母源抗体的干扰，提高免疫保护效率。本发明对于新城疫病的防治具有重大价值。

摘要： 本发明公开了一种鸡新城疫病毒毒株及其在制备鸡新城疫病疫苗中的应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30-GM-CSF、pBL-N质粒、pBL-P质粒和pBL-L质粒共转染哺乳动物细胞并培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株；所述重组质粒pBrClone30-GM-CSF为具有序列表的序列3自5’末端第2703-18408位核苷酸所示的DNA分子的质粒。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂GM-CSF，可以有效提高免疫效果，极大缩短免疫空白期，同时可抵抗母源抗体，提高免疫保护率。本发明对于新城疫病的防治具有重大价值。

摘要： 本发明公开了一株鸡新城疫病毒株H12株及其在制备鸡新城疫弱毒活疫苗中的应用。本发明的一株鸡新城疫病毒株H12株，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号为CGMCC No.8506。实验表明，本发明分离得到的NDV H12株是一株免疫原性好、生产性能优良、适宜大规模生产的种毒。由该NDV H12株制备的活疫苗产品质量合格，能够满足产业化生产的要求。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒的试剂盒。本发明检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。

摘要： 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒的基因芯片和试剂盒。本发明基因芯片和检测试剂盒可以准确、有效的检测鸡传染性喉气管炎病毒、鸡新城疫病毒和鸡传染性支气管炎病毒，且特异性强、灵敏度高、耗时短，检测快速，应用前景良好。