鸡传染性法氏囊病病毒

摘要： 传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是鸡的一种重要免疫抑制病。超强毒株感染病程急促,感染后3~5天就造成鸡的高死亡率;耐过鸡的中枢免疫器官法氏囊不可逆损伤,免疫力严重受损,不仅易继发和并发其他疫病,而且对各种疫苗的免疫应答能力减弱。该病于1957年首次暴发于美国,随后在全球广泛流行。

摘要： VP2蛋白是鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的主要结构蛋白及保护性抗原,为了研究原核表达的IBDV VP2可溶性蛋白的免疫原性,从IBDV超强毒SD株克隆出VP2基因,将其克隆于pET-30a原核表达质粒,并转化至大肠杆菌菌株BL21中,诱导表达后,经SDS-PAGE及Western blot分析,发现在37 kDa处出现特异性蛋白条带,与预期结果一致,且大部分VP2蛋白存在于菌液上清液中。经诱导条件的优化,菌液上清液表达的VP2蛋白琼脂扩散(AGP)效价可达1∶16。用不同AGP效价的VP2蛋白乳化配苗,免疫SPF鸡,免疫后21 d,进行AGP抗体效价测定及攻毒保护试验,发现VP2蛋白以AGP效价不低于1∶8配苗,免疫鸡用超强毒SD株及经典株BC6/85株攻毒,保护率均为10/10。结果表明,成功获得了表达VP2可溶性蛋白的基因工程表达菌BL21-VP2,且表达的VP2蛋白具有良好的免疫原性,为IBDV基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。

摘要： 根据杆状病毒表达系统的密码子偏好性,对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV) VP2基因序列进行密码子优化,然后合成序列.优化后的序列被定向克隆至转移载体pFast BacTM1,转化DH10BacTM感受态细胞获取重组杆状病毒穿梭质粒,转染昆虫细胞SF9,获得P0代重组杆状病毒.间接免疫荧光鉴定和Western blot分析结果显示,病毒reBac-VP2感染昆虫细胞后,能够在昆虫细胞的上清中稳定表达VP2蛋白,而且能够与IBDV的抗体发生特异性结合,具有良好的免疫原性.本试验成功构建了能够分泌表达VP2蛋白的重组杆状病毒,为IBDV诊断试剂及亚单位疫苗研发提供了工具.

摘要： 为探究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)DK分离株的致病性和遗传变异情况,本研究测定了该分离株的鸡胚半数致死量(ELD50)、 对SFP雏鸡的致病力以及扩增病毒的VP2基因并分析其序列.结果显示,DK分离株对鸡胚的ELD50为104.5/0.2 mL,以2×103 ELD50剂量感染SFP雏鸡出现典型IBD的临床症状、剖检和组织学病变;实验鸡发病率为100％,致死率为44.4％;DK株VP2基因序列与参考株的同源性为93.1％～97.0％、氨基酸序列同源性为93.6％～97.5％,其基因序列和氨基酸序列均与Cu-1wt参考株(经典株)同源性最高;DK株VP2氨基酸序列的七肽区SASWSGS及249Q、253Q、279D、284A、290M、313V、330S氨基酸位点均与强毒株的氨基酸位点一致;但其222P、256V、299N 3个氨基酸不符合IBDV超强毒株的特征;而其第222、249位氨基酸为P和Q,与抗原变异株(vIBDV)的T和K也不相同.结果表明:IBDV DK株为中等偏强毒力病毒.本研究为IBD的防控提供参考依据.

摘要： 为建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)对雏鸡的最佳感染模型,采用点眼滴鼻、肌肉注射、擦肛和泄殖腔内灌注等不同方法,对SPF鸡和普通鸡进行了攻毒致病试验.结果表明,以泄殖腔内灌注方法攻毒,可使雏鸡发生传染性法氏囊病(IBD)速度快,病死率高,临床症状和病理变化典型.该试验结果为制备鸡传染性法氏囊病感染模型,提供了精确、简单的技术支持.

摘要： Infectious bursal disease ( IBD ) is a highly contagious infectious disease of chickens caused by infectious bursal disease virus ( IBDV) . The disease, first described by Cosgrove in 1962, has been popular and caused serious economic losses in poultry regions and countries. Vaccination is currently considered as a viable option to control IBD, which can stimulate active or passive immune protection for the susceptible chickens. Thus, the quality of the vaccines is critical in clinic prevention. Because of the mutation of the IBDV strains, the poor antigenic match between the commercialized vaccine and the epidemic strains often leads to immune failure. Therefore, it is urgent to develop effective vaccines against IBD. In order to provide a reference for the development of new vaccines, this review summarizes the recent advances of IBD vaccines such as IBD gene deletion vaccine, live virus vector vaccine and so on.%鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的雏鸡的一种高度接触性传染病,自1962年报道以来,世界上主要养禽国家和地区均有流行,给养禽业带来严重经济损失.目前,IBD防控的主要方法是采用疫苗接种,使易感雏鸡获得主动或被动免疫保护,因此疫苗的质量对临床上IBD的防控起着至关重要的作用.虽然各国均有较好的商品化疫苗,但随着IBDV毒株的不断变异,商品化疫苗的抗原性与流行毒株不能完全匹配,临床上免疫失败时有发生,因此迫切需要研发与临床流行毒株相匹配的新型疫苗用于IBD的防控.对近期IBD的基因缺失苗、亚单位疫苗、DNA疫苗以及活载体疫苗等新型疫苗的研究进展进行概述,以此为IBD新型疫苗的研究提供参考.

摘要： 传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染鸡的临床诊断主要检测法氏囊组织的病理变化,包括分析感染组和对照组的法氏囊重量与体重比值(囊重指数).本研究采用IBDV强毒株BC6-85感染22日龄SPF鸡3d后,对其免疫器官法氏囊、脾脏及胸腺的重量和组织病理变化等进行检测.研究显示,与健康对照组相比,感染组的法氏囊虽然呈现明显病理变化,但平均囊重指数无显著减少.此外,鸡感染IBDV后脾脏也发生了明显的外观和组织学病理变化,特别是其重量与体重的比值增加极其显著(p＜0.01),并且感染组内各样本的脾脏重量与对应体重显著相关(r=0.695,p=0.026).IBDV感染鸡的胸腺未发现明显病理改变.以上虽然仅为IBDV特定病毒株的结果,且样本数量有限,但提示作为重要的B淋巴细胞和单核/巨噬细胞器官,脾脏在IBDV感染鸡的重量与体重比,(脾重指数,本研究为1.66)可以考虑成为临床和现地快速诊断法氏囊病的参考指标之一.

摘要： In order to produce high titers of infectious bursal disease virus (IBDV)antigen,the proliferation technology of chicken IBDV BJQ902 strain in DF-1 cell line was studied by the selec-tion and optimization of the following five culture conditions,including the amount of inoculated virus,harvest time,inoculation time,culture temperature and serum concentration in maintenance media.The results showed that the optimal proliferation conditions of IBDV BJQ902 strain in DF-1 cell line were obtained as follow:The culture temperature was 37 °C,the inoculum concentration was between 0.01% and 0.1% (V/V),the inoculation time was between 48 and 72 h after cell passage,the serum concentration in maintenance media was between 1% and 2%,the harvest time was between 60 and 72 h after inoculation.Under the optimal conditions,the virus titers were be-tween 10 8.3 and 10 8.7 TCID50/0.1 mL.%试验旨在通过 DF-1细胞增殖获得高效价的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)抗原。通过病毒接种量、收毒时间、接毒时间、温度和维持液血清浓度5个培养条件的筛选和优化,对 IBDV BJQ902株在 DF-1细胞上的增殖工艺进行了研究。结果表明,IBDV BJQ902株在 DF-1细胞上最佳增殖条件为：在37°C条件下培养,接毒量在0.01%~0.1%之间,接种时间为细胞传代后生长48~72 h,维持液血清浓度为1%~2%,收毒时间为病毒接种后60~72 h。在此培养条件下增殖病毒毒价在108.3~108.7 TCID50/0.1 mL 之间。

摘要： 为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于pET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta (DE3)进行诱导表达.将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量混合于复性液中,制备Fab并对其进行活性鉴定.结果显示L和Fd蛋白相对分子质量大小分别为25 ku和28 ku.Western blot和ELISA检测结果表明,获得的抗体Fab大小约为50 ku,并且与VP2蛋白和不同病毒株均具有特异性结合能力.体外中和试验结果表明,获得的IBDV抗体Fab具有中和活性,可以有效阻断IBDV (B87株)对鸡胚成纤维细胞(DF1)的感染.本实验获得的IBDV抗体Fab有望成为治疗IBD的候选生物制剂,为研制治疗IBD抗体制剂奠定了基础.

摘要： In order to obtain recombinant VP2 antigen for chicken infectious bursal disease virus ( IBDV ) antibody detection, a pair of specific primers were designed according to the published sequence of IBDV VP2 gene. The VP2 gene was amplified by RT-PCR from IBDV BC6/85 strain and cloned into pET-32a vector, the recombinant plasmid pET-32a-VP2 was induced by IPTG to get the recombinant protein expressed in inclusion body forms. After the recombinant protein was purified, Western blot detection showed that the expressed protein had good antigenicity and could be used for IBDV antibody detection. The research provides a foundation for IBDV antibody detection research and development of new vaccines.%为获得可用于鸡传染性法氏囊病病毒（ IBDV）抗体检测的重组抗原 VP2蛋白，根据GenBank中发表的IBDV VP2序列设计一对特异性引物，应用RT－PCR技术克隆IBDV经典标准攻毒株（ BC6／85株）的VP2基因，插入质粒pET－32a中构建重组表达质粒pET－32a－VP2，经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。重组蛋白纯化后，Western－blot检测表明具有良好的反应原性。本研究为下步建立IBDV抗体的间接ELISA方法及新型疫苗的研制奠定了基础。

摘要： 为研究鸡传染性法氏囊病病毒在不同宿主上的培养特性,从河南省某疑似感染鸡传染性法氏囊病病毒的鸡场采集病料,通过琼脂免疫扩散试验初步筛选出IBDV毒株,并将毒株回归易感鸡、在SPF鸡胚及DF1细胞上培养.结果显示:用以上不同方法培养出的病毒作为抗原与标准阳性血清之间均出现阳性沉淀线;回归SPF鸡试验显示发病率达100％,死亡达60％,病死鸡只出现法氏囊肿大、出血甚至出现紫葡萄样;该毒株能引起鸡胚CAM增厚、胚体出血,引起DF1细胞变圆脱落;ELD50与TCID50分别为10-46/0.1mL、10-5.5/0.1mL.试验证实IBDV分离株,属于超强毒株,该毒株可以在鸡胚和DF1细胞上适应增殖,将其命名为HN12号分离株.

摘要： 本文从临床表现胸腿肌出血、法氏囊肿大出血为主要特征的病死鸡肝脾和法氏囊中分离到一株病毒(IBDV-FJ)。该分离毒无血凝性，在琼脂扩散试验中能与抗IBDV特异性血清出现一条清晰的白色沉淀线；人工感染28日龄雏鸡出现与临床一致的病变，并回收到病毒；应用针对IBDV VP3基因的特异性引物进行RT-PCR，能扩增到长度为1041bp的特异性目的片段；序列分析发现分离毒VP3基因与IBDV超强毒和经典毒株的核苷酸同源性分别为97.7％-98.2％和95.2％。初步表明该分离毒为鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株。

摘要： 鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病病毒引起雏鸡的急性、高度接触性、溶淋巴细胞性的传染病，给养鸡业带来很大的经济损失。本研究首次对12年来我国南方部分省区流行的IBDV毒株进行了全面的分子流行病学分析，获得了有关IBDV流行株发生分子变化的重要的分子流行病学数据，将为临床上IBD的有效防制，特别是新型疫苗的研制提供重要的依据。研究根据IBDV全基因组序列设计出一对针对B节段的VP1-b(767bp)片段的引物，通过RT-PCR技术对2000～2012年期间分离到的91株IBDV野毒株进行了VP1-b的扩增和测序，并与本课题组己有的关于分离株的基于A片段的VP2高变区(vVP2)的序列分析结果进行比较。结果表明，我国南方部分省区近12年来流行的IBDV以不同形式的基因重排病毒为主。根据基因分型结果，筛选出NN040124,NN1005,BH11,JS7,NN1005,YL052和NN1172等7株基因型代表株，通过分段扩增和测序获得了7个代表株和1个疫苗株的A节段(64bp-3171bp)和B节段(12bp-2805bp)的序列。分析发现，分离株BH11,JS7,NN1005和NN1172在A节段中具有与参考vvIBDV类似的特征性氨基酸位点;而NN040124,YL052和GD10111在该区域既具有与参考vvIBDV类似的特征性氨基酸位点，又具有与参考弱毒株类似的位点;此外，7个分离株均具有数量不一的、参考株没有的特异性氨基酸位点序列，但这些位点均不在A节段和B节段的功能区上，表明，目前流行的IBDV仍然处于不断的进化中。基于A节段和B节段的同源性分析和遗传进化分析比较表明，BH11等7个分离株均为节段重排病毒，结果与基于VP1-b和vVP2的分析结果基本一致，但在具体的重排方式上，一些毒株的A和B节段的分析结果与基于部分片段的结果不完全一致，很可能是由于片段内发生了同源重组。

摘要： 从江苏南京疑似传染性法氏囊病病毒感染的鸡场采集病料，通过临床症状、病理剖检变化、人工感染、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和PCR扩增鉴定等，证实了该鸡场发生了鸡传染性法氏囊病，且从病料中分离到了纯净的传染性法氏囊病病毒。同时，证实该毒株的毒力较强，具有标准毒株的理化特性，免疫原性也比较好。

摘要： 传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)是由传染性法氏囊病毒(infectious bursal diseasevirus, IBDV)引起鸡的一种高度接触性、免疫抑制性传染病。IBDV基因组为双股RNA (dsRNA)由A和B两个片段组成，其中A片段包含两个部分重叠的开放阅读框(ORFs)，小ORF编码17kDa的非结构蛋白VP5，大ORF编码110kDa的多聚蛋白;而B片段编码VPI蛋白。2008年河南新乡某养鸡场发生鸡传染性法氏囊病。采取发病鸡的法氏囊，经琼脂扩散实验、病毒分离鉴定获得IBDV。本研究拟通过病毒VP2基因的克隆与分析，鉴定该病毒的生物学特性。

摘要： 为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

摘要： 为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

摘要： 为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

摘要： 为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

摘要： 为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2融合蛋白同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果.结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,重组融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低对照组.但试验组鸡的IBDV抗体水平于7dpc～42dpc则极显著低于对照组(p＜0.01).然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3dpc～21dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7dpc～21dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7dpc～14dpc)均显著高于对照组(p＜0.01).结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用.

摘要： 本发明公开了抗鸡传染性法氏囊病毒的scFv抗体在治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用。本发明提供的scFv‑XC抗体，包括由重链可变区、轻链可变区以及它们之间的连接区组成；重链可变区为如下（a）或（b）：（a）由序列1第1‑123位氨基酸残基组成的蛋白质；（b）将（a）经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的蛋白质；轻链可变区为如下（c）或（d）：（c）由序列1第139‑244位氨基酸残基组成的蛋白质；（d）将（c）经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的蛋白质。本发明本发明提供的scFv‑XC抗体，是利用抗原‑抗体共表达的细菌展示技术筛选获得的，该scFv‑XC抗体的中和活性比已授专利权的scFv‑D抗体高60倍以上，具有特异性强、治疗效果更好等优点。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明公开了抗鸡传染性法氏囊病毒的scFv抗体在治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用。本发明提供的scFv-XC抗体，包括由重链可变区、轻链可变区以及它们之间的连接区组成；重链可变区为如下（a）或（b）：（a）由序列1第1-123位氨基酸残基组成的蛋白质；（b）将（a）经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的蛋白质；轻链可变区为如下（c）或（d）：（c）由序列1第139-244位氨基酸残基组成的蛋白质；（d）将（c）经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的蛋白质。本发明本发明提供的scFv-XC抗体，是利用抗原-抗体共表达的细菌展示技术筛选获得的，该scFv-XC抗体的中和活性比已授专利权的scFv-D抗体高60倍以上，具有特异性强、治疗效果更好等优点。

摘要： 本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

摘要： 本发明获得了一种传染性法氏囊病病毒VP2蛋白，为使用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒，经皮下注射家蚕幼虫或蛹，首次成功在家蚕幼虫或蛹体内大量生产表达的IBDV VP2蛋白。而在现有技术中，一直以来人们未能成功地将含有IBDV VP2蛋白编码基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒，在家蚕幼虫或蛹体内中表达。本发明还提供了一种利用家蚕生物反应器生产传染性法氏囊病病毒VP2蛋白及传染性法氏囊病亚单位疫苗的方法，本发明的IBDV VP2蛋白可以在制备治疗或预防传染性法氏囊病疫苗中的应用，也可以提供在制备传染性法氏囊病诊断试剂中的应用。

摘要： 本发明公开了一种禽腺病毒Hexon与鸡传染性法氏囊病病毒VP2融合抗原、亚单位疫苗及其制备方法和应用。本发明的一种禽腺病毒Hexon与鸡传染性法氏囊病病毒VP2融合抗原，所述融合抗原包括禽腺病毒Hexon蛋白和鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白。所述融合抗原具有如下氨基酸序列：（1）由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；或（2）与序列SEQ ID No.1限定的氨基酸序列同源性在95%至100%编码相同功能蛋白质的氨基酸序列。本发明制得的亚单位疫苗的保护性抗原是融合抗原，融合抗原的生产采用基因工程发酵的方式制备，具有成本低、抗原纯度高、免疫原性好以及安全性高优点。

摘要： 本发明涉及一种鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、病毒性关节炎四联灭活疫苗的生产方法。本发明采用新城疫病毒La Sota株、传染性支气管炎病毒M41株、表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的大肠杆菌基因工程菌E.coli BL21/pET28a-VP2株和病毒性关节炎AV2311株作为生产菌毒种，超强浓缩工艺和优质佐剂制备成灭活疫苗，免疫动物后抗体产生快，效价高，保护期长，降低了疫病的发生及蔓延。

摘要： 本发明属于动物基因工程疫苗领域，具体涉及表达鸡传染性法氏囊病病毒变异株VP2基因的重组嵌合型新城疫病毒的构建方法与应用，具体是：将鸡传染性法氏囊病病毒变异毒株VP2基因共有序列插入到含有基因VII型F和HN基因的嵌合型LaSota弱毒株中，得到即为表达鸡传染性法氏囊病病毒变异毒株VP2基因的重组嵌合型新城疫病毒；所述嵌合型LaSota弱毒株是用基因VII型NDV的HN基因和碱性蛋白酶裂解位点附近氨基酸序列突变的F基因分别替换LaSota疫苗株的HN和F基因后得到的。本发明可作为多联疫苗制备用种毒为研发有效防控IBDV变异株和基因VII型NDV感染的廉价高效疫苗奠定基础。

摘要： 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒、血清4型禽腺病毒二联灭活疫苗及其制备方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上，在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因，获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)疫苗株，命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。将该疫苗株制备成二联灭活疫苗，免疫保护实验证明，接种rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒的攻毒感染，证明rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗具有非常好的免疫原性。本发明的提出为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病提供了有效的技术手段。

摘要： 本发明提供一种表达鸡传染性法氏囊病病毒变异株的VP2基因重组火鸡疱疹病毒株，是在火鸡疱疹病毒基因组中插入IBDV VP2基因外源制备的。本发明以火鸡疱疹病毒(HVT)FC‑126疫苗毒株为载体，以其UL45‑UL46的间隔区为插入位点，将含有VP2基因的表达盒插入到火鸡疱疹病毒基因组中，获得重组病毒rHVT‑vVP2株。免疫保护评价结果表明本发明的rHVT‑vVP2株免疫鸡群后，针对IBDV强毒株及变异毒株的攻击，可以提供100％攻毒保护。