鸟氨酸脱羧酶

摘要： 鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)是多胺生物合成途径中的关键酶,其主要功能是催化鸟氨酸脱羧生成腐胺.在多种疾病和肿瘤细胞中,ODC的表达水平和催化活性都高于正常细胞,因此抑制ODC的活性是相关疾病预防和治疗的一个潜在途径.ODC抑制剂的发现和检验依赖于对其催化反应进程的监测,常采用的途径包括利用高效液相色谱法检测腐胺产量和利用同位素标记法检测二氧化碳的产量等.这些检测方法的繁琐操作和成本极大地限制了其应用,尤为突出的问题是这些方法很难实现高通量检测和实时检测.文中研究了基于大环分子葫芦[6]脲(Cucurbit[6]uril,CB6)与荧光染料DSMI (Trans-4-[4-(dimethylamino)styryl]-1-methylpyridinium iodide)的ODC酶活实时无标记检测法,系统分析了其应用范围和局限性,并对其进行了优化.最后,利用优化后的方法实现了对不同机制ODC抑制剂的活性评价.

摘要： 烟草鸟氨酸脱羧酶对烟草根系中尼古丁的形成以及烟草在逆境胁迫条件下生存发挥一定作用,为进一步研究烟草鸟氨酸脱羧酶特性,对其进行生物信息学分析.利用Protparam、Smar、Cdd和NetPhos工具对烟草鸟氨酸脱羧酶的理化特性、家族性和磷酸化进行分析.结果显示:烟草鸟氨酸脱羧酶各成员均为酸性,NtODC_1和NtODC_2属于稳定性蛋白,NtODC_3、NtODC_4和NtODC_5属于不稳定性蛋白,且NtODC_5的热稳定性较强;烟草鸟氨酸脱羧酶各成员均属于IV族脱羧酶家族;在催化过程中,烟草鸟氨酸脱羧酶各成员以NtODC_1较为活跃.

摘要： 目的 研究二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚的影响.方法 按照体重将大鼠随机分为3组:对照组、模型组和实验组,每组15只.实验组给予2％二氟甲基鸟氨酸,对照组与模型组皮下注射0.9％NaCl,均4周.以异丙肾上腺素5 mg·kg-1连续皮下注射1周复制心肌肥大模型.计算心脏指数;用Msaaon染色评价纤维化程度;以实时荧光定量PCR测定心房钠尿肽(ANP)、鸟氨酸脱羧酶(ODC)和精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)mRNA水平.结果 对照组、模型组、实验组的心脏指数(mg·g-1)分别为3.49±0.21,3.76±0.32和3.55±0.27;这3组的间质纤维化率分别为(6±2)％,(24±5)％和(14±2)％;这3组的ANP mRNA表达水平分别为0.60±0.08,1.20±0.44和0.65±0.13;这3组的ODC mRNA表达水平分别为0.95±0.19,1.67±0.21和1.17±0.09;这3组的SSAT mRNA表达水平分别为0.95±0.28,1.57±0.18和1.85±0.17.上述指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 DFMO对大鼠心肌肥厚有保护作用,其机制与降低多胺合成代谢和增强分解代谢有关.

摘要： 目的 探讨上调鸟氨酸脱羧酶( ODC)抗酶-1( AZ-1)对非小细胞肺癌细胞系A549多胺代谢酶表达和细胞凋亡的影响.方法 制备靶向提高人源性AZ-1表达的pcDNA3. 1-HOAZ-1质粒,用其与空载质粒pcDNA3. 1(-)分别转染A549细胞,并设立未经任何处理的空白对照组,48 h后分别收集总RNA和蛋白质,通过反转录聚合酶链反应和蛋白质印记分析分别检测AZ-1、ODC和鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制剂-1( AZIN-1)的表达;同样的处理条件下应用流式细胞计量术检测细胞凋亡.结果 在转染pcDNA3. 1-HOAZ-1质粒后,ODC表达被明显抑制,AZIN-1的表达调节不明显;过表达 AZ-1引起细胞凋亡增加( P<0. 05) .结论 过表达 AZ-1能抑制 ODC表达和促进A549细胞凋亡.

摘要： Objective To evaluate whether down-regulating antizyme inhibitor(AZIN) can regulate the expression of ornithine decarboxylase(ODC) and the proliferation of prostate cancer cell PC3 or not.Methods siRNA-AZIN transfected prostate cancer cell PC3,the level of antizyme(AZ),AZIN and ODC were measured by RT-PCR and westernblot. MTT was used to measure the proliferation of cells. Results The mRNA level of AZIN declined(P<0.01);the protein level of AZIN and ODC declined(P<0.05). Knockdown of AZIN significantly inhibited the proliferation of PC3(P<0.05). Conclusions Transfecting siRNA-AZIN can decrease the level of AZIN, then the decline level of ODC inhibits the proliferation of PC3.%目的 探讨抗酶抑制剂(AZIN)对前列腺癌细胞PC3鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达水平及增殖的影响.方法 将siRNA-AZIN转染前列腺癌PC3细胞,分别用RT-PCR及Western blot检测抗酶(AZ)、AZIN及ODC在mRNA和蛋白水平的表达,MTT检测细胞增殖.结果 siRNA-AZIN转染前列腺癌PC3细胞后,AZIN RNA表达水平降低(P<0.01);PC3细胞AZIN蛋白表达水平降低(P<0.05),且使ODC的表达水平降低(P<0.05);PC3细胞增殖能力明显减弱(P<0.05).结论 siRNA-AZIN可下调前列腺癌细胞PC3中ODC的表达.

摘要： 目的：探讨加味丹参饮通过调节鸟氨酸脱羧酶（ODC）活性在抗SD大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）中的保护机制。方法建立SD大鼠心肌IRI模型，设对照组、假手术组、缺血再灌注损伤（IRI）组、加味丹参饮(JWDSY)+IRI组共4组。酶联免疫(ELISA)法测定ODC含量，实时荧光定量PCR（RT-PCR）方法检测ODC mRNA表达水平，免疫印迹（Western blot）法检测ODC蛋白表达水平，高效液相色谱检测心肌组织中多胺的含量。结果与对照组比较，假手术组的ODC含量、ODC mRNA及蛋白表达水平均无统计学意义（P＞0.05）；与假手术组比较，IRI组的ODC含量显著增加、ODC mRNA及蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义（P＜0.01）；与IRI组比较, JWDSY+IRI组ODC含量显著减少，ODC mRNA和蛋白表达水平显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论加味丹参饮可能通过调节ODC活性，从而发挥对IRI后心肌的保护作用。%Objective To explore the protective mechanism of modified Danshen decoction on SD rats myocardial is-chemia-reperfusion injury (IRI) by ornithine decarboxylase (ODC) activity. Methods The SD rat models of myocardial IRI were established, the four groups of control group, sham-operation group, ischemia/reperfusion (IRI) group, Jiawei Danshen Decoction (JWDSY) + IRI group were assigned. The content of ODC was determined by ELISA method. The ODC mRNA expression level was detected by fluorescence quantitative RT-PCR method. The ODC protein expression level was detected by Western blot method, and the polyamine content was determined by HPLC. Results Compared with the control group, the content of ODC, ODC mRNA and protein expression level in sham-operationa group were increased, the difference had no statistically significant (P>0.05), while compared with the sham-operation group, the content of ODC, ODC mRNA and protein expression level in IRI group were increased significantlay (P<0.01). Compared with IRI group, the ODC content in JWDSY + IRI group was significantly reduced, and the ODC mRNA and protein expression level were decreased significantly, the difference was statistically significant (P<0.01). Conclusion Modified Danshen decoction could adjust the ODC activity, and then play a pro-tective effect on myocardium after IRI.

摘要： 目的 钻研高原肺水肿患者血浆中一氧化氮浓度改变;研究高原肺水肿患者血浆一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶酶活力和蛋白表达变化,及其血清蛋白浓度与肺动脉高压的相关性研究.经此研究,探究一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶对高原肺水肿发生和发展的作用.方法 通过对30例高原肺水肿患者血浆中一氧化氮浓度、一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶活力和蛋白表达进行检测,并与30例正常人进行差异性比较.结果 高原肺水肿患者血浆中一氧化氮水平显著下降(P0.01),但是有上升的趋势;鸟氨酸脱羧酶显著升高(P 0. 01 ) in HAPE patients. Ornithine decar-boxylase increased significantly (P<0. 01). High altitude pulmonary edema and pulmonary artery pressure in orni-thine decarboxylase plasma levels were negatively correlated (P<0. 05). Conclusion Nitric oxide and nitric oxide synthase in the development of high-altitude pulmonary edema play important regulatory role, and ornithine decarbox-ylase in high altitude pulmonary edema plasma expression can repair damaged tissue.

摘要： 结直肠癌被认为是消化道系统中发生率最高、死亡率最高的恶性肿瘤,在癌症初期阶段多无明显异常表现,容易误诊为消化不良等消化道良性病变而贻误治疗,导致就诊患者多进入癌症晚期阶段。晚期结直肠癌不仅出现腹胀、排便异常等消化道疾病症状,而且多伴有全身性中毒表现,健康遭受严重损害。

摘要： 丁二胺是一种重要的化工原料,可与二元酸进行聚合反应生成性能优异的新型高分子聚合塑料,应用前景十分广泛.鸟氨酸脱羧酶是生物合成法丁二胺的关键酶,它催化鸟氨酸脱羧生成丁二胺.本论文克隆了大肠杆菌的3种鸟氨酸脱羧酶基因speF、speC1和speC2基因并在E.coli BL21进行了分泌表达,结果表明:重组酶SpeC1和SpeC2的酶活性分别为16.33U/mL和16.38U/mL,明显高于重组酶SpeF的酶活性6.38U/mL;重组菌株转化获得的丁二胺产量分别约为1.5g/L,1.6g/L和2.0g/L.本文在大肠杆菌中表达重组鸟氨酸脱羧酶,为利用大肠杆菌进行生物转化合成丁二胺奠定基础.

摘要： 丁二胺是一种重要的化工原料,可与二元酸进行聚合反应生成性能优异的新型高分子聚合塑料,应用前景十分广泛.鸟氨酸脱羧酶是生物合成法丁二胺的关键酶,它催化鸟氨酸脱羧生成丁二胺.本论文克隆了大肠杆菌的3种鸟氨酸脱羧酶基因speF、speC1和speC2基因并在E.coli BL21进行了分泌表达,结果表明:重组酶SpeC1和SpeC2的酶活性分别为16.33U/mL和16.38U/mL,明显高于重组酶SpeF的酶活性6.38U/mL;重组菌株转化获得的丁二胺产量分别约为1.5g/L,1.6g/L和2.0g/L.本文在大肠杆菌中表达重组鸟氨酸脱羧酶,为利用大肠杆菌进行生物转化合成丁二胺奠定基础.

摘要： 目的：探讨鸟氨酸脱羧酶mRNA(ODCmRNA)在发育中和成熟内耳的表达和分布,并探讨它们的作用.方法：选用大鼠,胚胎13、21 d和生后8d及成年鼠.胚胎内耳分离出后用4％多聚甲醛4C固定过夜.生后和成年鼠则外淋巴灌流4％多聚甲醛.脱水和脱蜡的整个胚胎标本和成熟内耳标本的中轴切片,35-S标记的cRNA探针杂交、放射自显影,观察并照像.结果：13 d时ODCmRNA主要在耳包囊前腹侧表达,螺旋节未见表达.21 d时,ODCmRNA主要在内淋巴腔表皮层和耳蜗的间充质内表达.生后8天ODCmRNA在内淋巴腔面(耳蜗管)强表达,而螺旋节仍未表达.在成熟耳蜗不仅耳蜗管而且螺旋节都有强表达.结论：ODC是多胺合成中的关键酶,实验发现ODC在发育不同时期表达不同,说明多胺在对维持耳蜗正常机能和特化的细胞组织起重要作用.实验结果ODC分布于耳蜗管和内淋巴腔上皮,可以推测,ODC在内淋巴分泌、吸收方面起重要作用.

摘要： 目的：以高效液相色谱法利用柱前衍生方法,测定及研究鸟氨酸脱羧酶的活性,建立有效准确的高效液相色谱测定方法,进而探讨家兔肠梗阻模型的肠组织中鸟氨酸脱羧酶活性水平及其意义。方法：本文采用高效液相色谱法,采用酶提取液从小肠组织中提取鸟氨酸脱羧酶,后者与鸟氨酸在37°C水浴反应40min生成腐胺,再以苯甲酰氯的甲醇液衍生剂,在37°C水浴中衍生反应40min后,用氯仿萃取三次,取有机相再经氢氧化钠(0.2mol·L-1)萃取,取有机相吹干,甲醇复溶,进样,色谱柱为十八烷基键合硅胶柱KromasilC18(150mm×Φ4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水60∶40,流速：0.8mL·min-1,泵压：1700psi,检测波长：232nm,柱温：室温,进样量：20μL。结果：该方法的最低检测限0.11 μmol·L-1.腐胺在5.7-1134.4 μmol·L-1浓度范围内呈良好的线性关系,y=1296.2x+23160 (r=0.9998,n=7)。平均回收率为100.8％,RSD为2.23％。日内及日间精密度的相对标准偏差分别为2.65％和2.85％,均小于5％.重复性试验RSD为1.54％。衍生反应产生的杂质峰对腐胺峰无干扰,各组分峰均能得到较好的分离。与上述方法测得,不同给药方法,对家兔肠组织中鸟氨酸脱羧酶活性的影响,随着时间的改变,单剂量给药和合并用药,家兔肠组织中腐胺含量的变化,可得知鸟氨酸脱羧酶活性的变化,能反应出这种给药方法对家兔肠组织内炎症的抑制程度。结论：本法简单,成本低,并能准确的检测出腐胺的浓度,得出鸟氨酸脱羧酶的活性,从而得知三种不同的汤药合并,对家兔小肠组织炎症的抑制程度好。

摘要： 以部分肝切除诱导的雄性SD大鼠(180～200 g)早期再生肝为材料,用RT-PCR法分析皮质酮处理后再生肝鸟氨酸脱羧酶及抗酶mRNA水平变化.结果表明,皮质酮对鸟氨酸脱羧酶mRNA水平具有剂量依赖性抑制作用;10、20 mg/kg体重皮质酮对抗酶mRNA水平影响不大,40 mg/kg处理可促进其转录.

摘要： 鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的关键酶和限速酶.许多肿瘤促进剂、诱导荆在诱发组织癌变的过程中,伴有ODC活性的异常升高,在一些癌基因转化细胞系及几乎所有的动物肿瘤中,也均有ODC基因表达的异常.多胺包括精胺、精眯和腐胺,普遍存在于机体的各种组织细胞中,在细胞的生长和分化中发挥着重要作用.研究表明,肿瘤细胞和组织中多胺的含量及生物合成异常增高,在肺癌中尤为明显.因此,多胺的生物合成为抗癌药物的发展提供了一个重要的靶标.鸟氨酸脱羧酶作为多胺生物合成途径中的第一个限速酶,也是活性最低的酶,可催化L-鸟氨酸生成腐胺.据报道,ODC的含量在许多肿瘤中增高,并与肿瘤的复发有一定的关系.因此,针对抑制ODC活性的癌症基因治疗正成为研究热点.

摘要： 根据鸟氨酸脱羧酶(ODC)的催化反应结果及其抑制剂作用特性,并利用先前分离筛选得到的2株ODC生产菌株作为酶源母本,设计了一种高效、经济性的ODC抑制剂生产菌株的筛选模板,并以此作为初筛手段从土壤和活性污泥中快速分离产生较高ODC抑制性物质的微生物菌种.研究发现适量浓度的鸟氨酸结构类似物对产抑制剂菌株的分离十分有效,而对于分离得到的136株细菌进行一系列初筛以及ODC酶活测定、实际比较抑制作用效果的复筛试验后,筛选得到了8株高强ODC酶活抑制菌株,其中菌株WZFF. OIDC1-14的ODC活性抑制率均超过40％,证明该筛选模型可靠有效.

摘要： 利用鸟氨酸脱羧酶(ODC)siRNA干涉、ODC过表达、添加特异性ODC抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)处理小鼠子宫内膜上皮细胞和基质细胞,采用实时定量PCR对多胺代谢相关酶类mRNA水平进行检测.结果显示:在子宫内膜上皮和基质细胞中,ODC siRNA转染后可导致SSAT mRNA水平下降为对照组的71.78%和54.36%(P<0.01),SAMDC mRNA水平上升为对照组的1.666 6倍和3.036 6倍(P<0.01);ODC过表达造成SSAT水平为对照组的1.921 4和2.852 7倍(P<0.01),AZ I mRNA水平为对照组的1.962 1和3.073 8倍(P<0.01);利用DFMO处理体外分离的上皮细胞和基质细胞,SSAT mRNA水平为对照组的1.626 7和1.773 3倍(P<0.01),SAMDC mRNA水平为对照组的1.630 0和1.730 0倍(P<0.01),AZ I mRNA水平为对照组的71.00%和76.67%(P<0.01);DFMO处理后上皮细胞和基质细胞数目(31.00士3.00和43.67士7.51)和活力(0.26士0.03和0.36士0.05)都显著下降(P<0.01),处于静止期的比例增加(56.33%和58.75%)高于对照组(43.46%和47.83%),处于分裂期的百分比(27.27%和27.37%)低于对照组(37.76%和40.30%).结论:对多胺限速酶mRNA水平和酶活性的调节可引起多胺相关酶类mRNA水平的变化,维持了细胞内多胺水平的稳定,从而调节细胞的增殖.

摘要： 本发明属于分子生物学和免疫学领域，涉及赖氨酸脱羧酶抗原表位、抗赖氨酸脱羧酶抗体及其用途。具体地，所述赖氨酸脱羧酶抗原表位具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5所示的序列。本发明还涉及一种抗赖氨酸脱羧酶多克隆抗体，所述多克隆抗体与上述抗原表位特异性结合。所述多克隆抗体具有高的特异性和效价。本发明还涉及所述多克隆抗体的制备方法和用途、含有该多克隆抗体的组合物、以及检测赖氨酸脱羧酶的方法。

摘要： 本发明属于分子生物学和免疫学领域，涉及赖氨酸脱羧酶抗原表位、抗赖氨酸脱羧酶抗体及其用途。具体地，所述赖氨酸脱羧酶抗原表位具有SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5所示的序列。本发明还涉及一种抗赖氨酸脱羧酶多克隆抗体，所述多克隆抗体与上述抗原表位特异性结合。所述多克隆抗体具有高的特异性和效价。本发明还涉及所述多克隆抗体的制备方法和用途、含有该多克隆抗体的组合物、以及检测赖氨酸脱羧酶的方法。

摘要： 本发明公开了一种L‑赖氨酸脱羧酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6，能够有效催化L‑鸟氨酸的脱羧反应，从而通过外消旋鸟氨酸拆分法制备D‑鸟氨酸，具有工业化开发应用价值。

摘要： 提供的是具有改进的腐胺生产力的新型修饰的鸟氨酸脱羧酶蛋白和其用途。

摘要： 本发明提供一种含二氢吖啶小分子抑制剂，该小分子抑制剂为2,2‑二甲基‑N‑(6‑甲基‑4‑氧代‑3,4‑二氢‑2‑吖啶基)丙酰胺，该结构式为本发明将该含二氢吖啶小分子抑制剂在抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)上的应用，以及在制备治疗肿瘤药物中的应用，及在制备治疗病原微生物感染药物中的应用，并取得显著效果。

摘要： 本发明提供一种含喹啉小分子抑制剂，该小分子抑制剂为4‑氯苯基8‑喹啉磺酸盐的结构式为：本发明将该含喹啉小分子抑制剂在抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)上的应用，以及在制备治疗肿瘤药物中的应用，及在制备治疗病原微生物感染药物中的应用，并取得显著效果。

摘要： 本发明提供一种含苯并间二氧杂环戊烯小分子抑制剂，该小分子抑制剂为N'‑({6‑硝基‑1,3‑苯并间二氧杂环戊烯‑5‑基}亚甲基)螺[2.3]己烷‑1‑碳酰肼，其结构式为：本发明将该含苯并间二氧杂环戊烯小分子抑制剂在抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)上的应用，以及在制备治疗肿瘤药物中的应用，及在制备治疗病原微生物感染药物中的应用，并取得显著效果。

摘要： 本发明提供一种含2,6‑二羟基嘌呤小分子抑制剂，该小分子抑制剂为1,3‑二甲基‑8‑(2‑噻吩基)‑3,7‑二氢‑1H‑嘌呤‑2,6‑二酮，其结构式为：本发明将该含2,6‑二羟基嘌呤小分子抑制剂在抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)上的应用，以及在制备治疗肿瘤药物中的应用，及在制备治疗病原微生物感染药物中的应用，并取得显著效果。

摘要： 本发明提供一种苯甲酰胺小分子抑制剂，该小分子抑制剂为2,3,4,5,6‑五氟‑N‑(3‑氟烯基)苯甲酰胺，结构式如下：本发明将该苯甲酰胺小分子抑制剂在抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)上的应用，以及在制备治疗肿瘤药物中的应用，及在制备治疗病原微生物感染药物中的应用，并取得显著效果。

摘要： 本发明提供小分子抑制剂在制备抑制鸟氨酸脱羧酶与鸟氨酸脱羧酶抗酶1的相互作用的制药用途，以及在制备稳定鸟氨酸脱羧酶非活性二聚体的药物上的应用。所述的小分子抑制剂包括6‑[N'‑(4‑二甲基氨基苯甲基）‑肼基‑[1,3,5]三氮唑‑2,4‑二胺、或1‑丁基‑N‑(4‑氯苯基)‑1H‑苯并[d]咪唑‑2‑胺、或1,3‑二甲基‑8‑(2‑噻吩基)‑3,7‑二氢‑1H‑嘌呤‑2,6‑二酮中的任意一种。