鲎试验

摘要： 为了研究金银花提取物对细菌内毒素的清除效果,分别采用水、乙醇和石油醚提取得到金银花提取物,再分别与大肠杆菌标准内毒素作用后,通过鲎试验法检测3种提取物中细菌内毒素残留量,对比分析3种金银花提取物清除细菌内毒素的作用。结果表明:金银花水提物、乙醇提取物、石油醚提取物中绿原酸含量分别为11.536±0.036、12.347±0.099、11.752±0.047μg/mL,说明乙醇提取物中绿原酸含量最高;与标准细菌内毒素作用后,金银花水提物、乙醇提取物、石油醚提取物中内毒素残留量分别为0.799±0.005、0.164±0.001、0.175±0.002 EU/mL,即水提取液、乙醇提取液、石油醚提液对细菌内毒素的清除率分别为84.02%±0.10%、96.71%±0.02%、96.50%±0.04%。说明金银花乙醇提取物对细菌内毒素的清除效果最佳。本试验结果可为后续金银花抗细菌内毒素的作用机制研究提供前期基础。

摘要： 目的 建立一种定量检测果汁细菌内毒素活性的方法,准确评估果汁潜在的内毒素污染风险.方法 采用动态显色法东方鲎(Tachypleus amebocyte lysate,TAL)试验对常见的4种果汁(橙汁、桃汁、苹果汁和葡萄汁)细菌内毒素活性进行检测,对果汁样品中的干扰因素进行识别与排除,最后使用抗增液排除β-葡聚糖等类似物质带来的假阳性结果.结果 市售果汁(n=36)的细菌内毒素活性范围为＜0.2～209.5 EU/mL,自榨果汁(n=12)的细菌内毒素活性范围为＜0.4～4.2 EU/mL,加标回收率范围均在50％～200％之间,符合药典要求.结论 动态显色法TAL试验适用于常见的4种果汁(橙汁、桃汁、苹果汁和葡萄汁)细菌内毒素活性的检测,为果汁的健康风险评价和卫生监管提供参考.

摘要： 目的 建立尿源性脓毒血症兔模型,并探讨鲎试验对尿源性脓毒血症的诊断价值.方法 将18只雄性兔随机分为正常组、假手术组、脓毒血症组,每组6只.结扎脓毒血症组兔的左侧输尿管远端并向输尿管内注入大肠杆菌悬液(ATCC 25922),建立尿源性脓毒血症模型;假手术组兔仅给予暴露左侧输尿管中段,正常组不做任何处理.于术前、术后24 h、术后48 h、术后72 h,观察各组兔的肛温、呼吸频率、心率,检测外周血白细胞计数及中性粒细胞(N)计数.术后72 h,光镜观察肾组织形态结构变化,并行血培养及鲎试验.结果 脓毒血症组术后的肛温、呼吸频率、心率、外周血白细胞计数及N计数均随时间延长而升高(均P0.05).结论 将大肠杆菌悬液注入兔输尿管并结扎,72 h后可成功复制尿源性脓毒血症模型;鲎试验对尿源性脓毒血症具有早期诊断价值.

摘要： 细菌内毒素可引起发热、微循环障碍、内毒素血症、脓毒性休克和弥散性血管内凝血等.鲎试验法是最常用的内毒素检测方法,其分为凝胶法和光度测定法,后者又可分为浊度法和显色基质法.内毒素检测对革兰阴性菌感染诊断具有重要的参考价值,也用于药品、医疗器械和环境的内毒素监测.内毒素检测对细菌感染诊断的敏感性与革兰阴性菌的种类有关,临床上可联用内毒素检测和其他检测手段如降钙素原检测来提高感染早期诊断的准确性.

摘要： 目的 建立统一的注射用伏立康唑(VRC)细菌内毒素检查方法.方法 按2015的版《中华人民共和国药典:四部》通则1143细菌内毒素检查凝胶法,使用2个厂家的鲎试剂对5个生产厂家的13批VRC样品进行细菌内毒素检查的方法学研究.结果 不同厂家注射用VRC稀释至0.67 mg/mL均可排除干扰作用.结论 建议将注射用VRC细菌内毒素检查项限值统一为0.75 EU/mg.

摘要： 目的：探讨降钙素原（PC T ）在肺感染患者的诊断价值和疗效监测。方法选择338例肺感染或合并肺感染的患者，所有患者检测血常规、PCT、痰细菌培养、鲎试验和胸部CR或CT。结果细菌感染组患者PCT水平明显高于真菌感染组和痰培养阴性组（P＜0．05），革兰阴性菌感染患者 PCT 水平明显高于革兰阳性菌感染患者（P＜0．05），细菌感染组在治疗5 d后PCT下降明显（P＜0．05），真菌感染组PCT治疗前后变化不明显（P＞0．05）。结论 PCT 可作为细菌感染的血清标志物和抗菌药物疗效的有效监测指标。

摘要： [目的]比较气相色谱-串联质谱法（GC-MSMS）与鲎试验（LAL）在检测畜禽舍空气内毒素中的应用效果及相关性，以及气载内毒素是否对环境和饲养人员健康构成危害。[方法]通过国际标准AGI-30液体冲击式空气采样器，在4个养殖场16个畜禽舍采集空气样品，采用GC-MSMS与LAL测定空气细菌内毒素浓度。[结果]LAL测定的牛舍、猪舍、羊舍和禽舍空气细菌内毒素浓度中间值分别为1.85×105 EU/m3、2.76×106 EU/m3、4.82×105 EU/m3、6.55×106 EU/m3；而GC-MSMS测定的分别为3.3×104 EU/m3、1.26×105 EU/m3、2.4×104 EU/m3和8.21×105 EU/m3。GC-MSMS在禽舍检测出的空气内毒素浓度显著大于其他畜舍（p<0.05）。用LAL和GC-MSMS分析测定的空气中内毒素浓度超过了对大多数动物和人体有威胁的阈限值1.0×103EU/m3。用GC-MSMS与LAL测定的禽舍和羊舍空气样品中细菌内毒素浓度之间存在显著相关（p<0.05），而牛舍和猪舍之间浓度没有显著相关性。GC-MSMS主要检测存在于动物舍空气内毒素中含有C14-C18链的3-羟基脂肪酸。LAL测定的内毒素浓度与含有C14-C16链3-羟基脂肪酸量之间有显著相关（p<0.05）。[结论] GC-MSMS与LAL联合应用可以提高检测气载内毒素的准确性，且本研究表明畜禽舍中检测到的空气细菌内毒素浓度可以危害人类和家畜动物健康。%[Objective] To compare the application effect and correlation of the gas chromatography–tandem mass spectrometry method(GC-MSMS)and the Limulus test(LAL)in testing the airborne endotoxin,and to analyze whether airborne endotoxin is harmful to the environment and breeders health. [Methods] Air samples were collected by using the international standard AGI-30 air samplers of liquid impingement in 16 livestock and poultry houses from 4 farms,and examined for the concentration of bacterial endotoxin with the LAL test and GC-MSMS technique. [Results] The median concentrations of airborne endotoxin determined by LAL test in cow barns,piggeries,sheep sheds and poultry houses were 1.85×105 EU/m3,2.76×106 EU/m3,4.82×105 EU/m3,6.55×106 EU/m3 respectively,while those measured by the GC-MSMS technique were respectively 3.3×104 EU/m3,1.26×105 EU/m3,2.4×104 EU/m3 and 8.21×105 EU/m3. The concentrations of airborne endotoxin detected by GC-MSMS method in poultry houses were significantly higher than any other examined barns(p<0.05). The concentrations of airborne endotoxin determined with LAL test and GC-MSMS analysis surpassed the threshold(1.0×103EU/m3)above which would be harmful to most animals and humans. A significant correlation(p<0.05)between the concentrations of endotoxin determined by the LAL and GC-MSMS techniques was found in the air samples from poultry houses and sheep sheds,but not found in other examined barns. GC-MSMS method was designed to detected 3-hydroxy fatty acids containing C14–C18 chains of airborne bacterial endotoxin in livestock and poultry houses. A significant correlation(p<0.05)was found between the concentrations of endotoxin determined with LAL test and the amounts of 3-hydroxy fatty acids with C14–C16 chains. [Conclusion] The combination of GC-MSMS technique and LAL test will improve the accuracy of measurement. The endotoxin concentration detected in this study could be a respiratory hazard to both humans and livestock animals.

摘要： 目的：使用鲎试验评估内毒素血症在肝硬化失代偿期中的应用价值。方法选择120例肝硬化患者作为研究对象，对其血和（或）腹水中的内毒素进行检测。结果肝硬化患者腹水和血中内毒素显著升高（P＜0.05），且腹水中的内毒素升高幅度更明显（P＜0.05）；内毒素血症的发生率和肝病的病情显著相关，病情越严重的患者越容易发生内毒素血症，其中处于肝硬化失代偿期的患者内毒素血症的发生率最高。结论鲎试验在检测处于肝硬化失代偿期患者合并内毒素血症方面灵敏、可靠，值得推广使用。

摘要： 目的:合成鲎试验荧光底物.方法:在温和条件下,以保护氨基酸为原料,用碳二亚胺缩合法合成荧光三肽Boe-Leu-Gly-Arg-MCA.结果:该荧光底物质量基本符合要求,可用于兔血清内毒素的测定.结论:对较灵敏的荧光基质法定量测定内毒素应深入研究.

摘要： 鲎试验是利用鲎的变形细胞与微量内毒素产生凝集反应的现象，作为判断试供品中细菌内毒素限量是否符合规定的一种方法。它具有比家兔法更简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。中国药典1995年版已收载细菌内毒素检查法(简称鲎试验)，但只用于几种输液的检查。根据现有的实验证明，心不干扰细菌内毒素检查或有干扰，但可以克服的药品注射剂，将能够全部以鲎法代替家兔热原检查法。

摘要： 目的:对厦门产叶下珠进行成分分离,从中筛选出有抗内毒素作用的物质.方法:叶下珠水、醇提取液经有机溶剂萃取得10组成分,这些成分与内毒素作用,通过鲎试验法监测内毒素含量的变化,由此判断提取物抗内毒素作用的大小.结果:有三组成分有抗内毒素作用,其中一组成分浓度为0.48、0.24、0.12mg/ml时,得到的吸光度值为0.147、0.404、0.568,阳性对照为0.733,该成份随浓度递增抗内毒素作用不断增强.结论:叶下珠的一些成份在体外对内毒素有较好的抑制作用.

摘要： 目的 比较血液透析液细菌内毒素定量检查时采用"水系统"法与"同体系模型"法的特点及其应用范围.方法 对已经找出最佳稀释倍数与检测方法的血液透析液,按照细菌内毒素定量测定法采用"水系统"法(用细菌内毒素检查用水,简称BET水,稀释标准内毒素制备标准曲线)与采用"同体系模型"法(用待测样品稀释标准内毒素制备标准曲线)的标准曲线的线性、样品回收率、实测值进行比较分析.结果 两种方法所得样品回收率均在50％～200％之间,实验有效.结论 对于干扰较少的碳酸氢盐透析液中的碱性浓缩透析液采用"水系统"法较为适宜;而对于干扰较大的碳酸氢盐透析液中的酸性浓缩透析液需用"同体系模型"法才能测定.

摘要： 目的 比较血液透析液细菌内毒素定量检查时采用"水系统"法与"同体系模型"法的特点及其应用范围.方法 对已经找出最佳稀释倍数与检测方法的血液透析液,按照细菌内毒素定量测定法采用"水系统"法(用细菌内毒素检查用水,简称BET水,稀释标准内毒素制备标准曲线)与采用"同体系模型"法(用待测样品稀释标准内毒素制备标准曲线)的标准曲线的线性、样品回收率、实测值进行比较分析.结果 两种方法所得样品回收率均在50％～200％之间,实验有效.结论 对于干扰较少的碳酸氢盐透析液中的碱性浓缩透析液采用"水系统"法较为适宜;而对于干扰较大的碳酸氢盐透析液中的酸性浓缩透析液需用"同体系模型"法才能测定.

摘要： 目的 比较血液透析液细菌内毒素定量检查时采用"水系统"法与"同体系模型"法的特点及其应用范围.方法 对已经找出最佳稀释倍数与检测方法的血液透析液,按照细菌内毒素定量测定法采用"水系统"法(用细菌内毒素检查用水,简称BET水,稀释标准内毒素制备标准曲线)与采用"同体系模型"法(用待测样品稀释标准内毒素制备标准曲线)的标准曲线的线性、样品回收率、实测值进行比较分析.结果 两种方法所得样品回收率均在50％～200％之间,实验有效.结论 对于干扰较少的碳酸氢盐透析液中的碱性浓缩透析液采用"水系统"法较为适宜;而对于干扰较大的碳酸氢盐透析液中的酸性浓缩透析液需用"同体系模型"法才能测定.

摘要： 目的 比较血液透析液细菌内毒素定量检查时采用"水系统"法与"同体系模型"法的特点及其应用范围.方法 对已经找出最佳稀释倍数与检测方法的血液透析液,按照细菌内毒素定量测定法采用"水系统"法(用细菌内毒素检查用水,简称BET水,稀释标准内毒素制备标准曲线)与采用"同体系模型"法(用待测样品稀释标准内毒素制备标准曲线)的标准曲线的线性、样品回收率、实测值进行比较分析.结果 两种方法所得样品回收率均在50％～200％之间,实验有效.结论 对于干扰较少的碳酸氢盐透析液中的碱性浓缩透析液采用"水系统"法较为适宜;而对于干扰较大的碳酸氢盐透析液中的酸性浓缩透析液需用"同体系模型"法才能测定.

摘要： 目的 比较血液透析液细菌内毒素定量检查时采用"水系统"法与"同体系模型"法的特点及其应用范围.方法 对已经找出最佳稀释倍数与检测方法的血液透析液,按照细菌内毒素定量测定法采用"水系统"法(用细菌内毒素检查用水,简称BET水,稀释标准内毒素制备标准曲线)与采用"同体系模型"法(用待测样品稀释标准内毒素制备标准曲线)的标准曲线的线性、样品回收率、实测值进行比较分析.结果 两种方法所得样品回收率均在50％～200％之间,实验有效.结论 对于干扰较少的碳酸氢盐透析液中的碱性浓缩透析液采用"水系统"法较为适宜;而对于干扰较大的碳酸氢盐透析液中的酸性浓缩透析液需用"同体系模型"法才能测定.

摘要： 容易且适当地反映预碰撞制动的影响。汽车碰撞模拟试验的试验条件设定方法具有：实车试验结果获取步骤，获取在实车碰撞试验中的、实车向障碍物碰撞时或碰撞前的规定时机下的、搭载于实车的人偶的头部相对于所述实车的相对位置的信息、以及实车与障碍物碰撞时的实车的加速度变化的信息；试验条件设定步骤，其基于实车试验结果获取步骤的获取结果，设定试验条件以使汽车碰撞模拟试验中台车的加速度波形具有从第一时刻至第二时刻的预碰撞波形、以及第二时刻之后的碰撞波形。在试验条件设定步骤中，设定试验条件以使预碰撞波形为基于相对位置的信息的波形，使碰撞波形为基于加速度变化的信息的波形。

摘要： 为了以简单的方式在试验台上在考虑到行驶动力学状态的情况下实现带有控制单元的车辆或车辆子系统的接近现实的测试，该控制单元处理测量参数(MGi)的传感器值(SWi)，本发明规定，为了执行台架试验，将所述控制单元(11)切换到试验模式中；相同测量参数(MGi)的计算值(RWi)在模拟单元(23)中计算并且将测量参数(MGi)的计算值(RWi)附加于测量参数(MGi)的检测到的传感器值(SWi)输送给控制单元(11)；并且所述控制单元(11)在试验模式中忽略测量参数(MGi)的检测到的传感器值(SWi)并且所述控制单元放弃测量参数(MGi)的计算值(RWi)的可信度测试。

摘要： 本申请涉及付之鲎试验的抗凝血酶III用的前处理剂及前处理方法。具体来说，其提供一种手段，其可减少将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用，因此可高精度地实施抗凝血酶III的鲎试验。在与二价金属盐共存的状态下，将付之鲎试验的抗凝血酶III供至使蛋白质失活的处理中，由此降低将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用。

摘要： 本发明涉及细菌内毒素检测技术，特别是一种微量终点显色鲎试验方法。该方法使用96孔微孔酶标板作为反应容器及光度测定容器，使用微量的鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate，TAL或Limulus Amebocyte Lysate，LAL)作终点显色法鲎试验。本发明的微量终点显色鲎试验方法消耗的TAL量仅是现行鲎试验方法的10～20％，即10～20μl/T，而且实验操作更简便快捷。本发明的部分内容同样可以应用到其它光度法鲎试验，使TAL的用量减少80～90％。

摘要： 一种用于细菌内毒素鲎试验检测法的缓冲液，其特征在于所述缓冲液为含有酚红的Tris-HCl缓冲液，酚红的重量浓度为0.005-0.1%。其制备方法是将酚红和Tris盐称重后，在150-200度干烤1-5小时；再加入无内毒素的水，用浓盐酸调节缓冲液的pH至所需要的值；高压消毒无菌保存或冷冻保存。本发明的缓冲液可以用来稀释被测样品，同时可以调节并指示样品pH。本发明的用于细菌内毒素鲎试验检测法的缓冲液，在两种内毒素测定法中对内毒素的测定无影响，均符合鲎试验法测定的规定。

摘要： 本申请涉及付之鲎试验的抗凝血酶III用的前处理剂及前处理方法。具体来说，其提供一种手段，其可减少将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用，因此可高精度地实施抗凝血酶III的鲎试验。在与二价金属盐共存的状态下，将付之鲎试验的抗凝血酶III供至使蛋白质失活的处理中，由此降低将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用。

摘要： 本发明公开了一种鲎试验法内毒素真菌检测仪，该检测仪包括机体箱，所述机体箱分上下两层，下层为方形桌体结构，上层左侧设置检测区域、右侧设置显示区域：在上层左侧的检测区域，设置有单片机模块及与单片机模块连接的多个通道的光发射装置、光接收装置、检测放大模块、孵育加热装置；本发明检测仪采用和传统酶标分析仪不同的结构，采用直接用安瓿瓶检测不用二次加试剂避免交叉污染，采用铝板加热保证温度的均匀和稳定。

摘要： 提供一种手段，其可减少将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用，因此可高精度地实施抗凝血酶III的鲎试验。在与二价金属盐共存的状态下，将付之鲎试验的抗凝血酶III供至使蛋白质失活的处理中，由此降低将抗凝血酶III付之鲎试验时的反应干扰作用。

摘要： 本发明涉及细菌内毒素检测技术，特别是一种微量终点显色鲎试验方法。该方法使用96孔微孔酶标板作为反应容器及光度测定容器，使用微量的鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate，TAL或Limulus Amebocyte Lysate，LAL)作终点显色法鲎试验。本发明的微量终点显色鲎试验方法消耗的TAL量仅是现行鲎试验方法的10～20％，即10～20μl/T，而且实验操作更简便快捷。本发明的部分内容同样可以应用到其它光度法鲎试验，使TAL的用量减少80～90％。

摘要： 一种用于细菌内毒素鲎试验检测法的缓冲液，其特征在于所述缓冲液为含有酚红的Tris－HCl缓冲液，酚红的重量浓度为0.005－0.1％。其制备方法是将酚红和Tris盐称重后，在150－200度干烤1－5小时；再加入无内毒素的水，用浓盐酸调节缓冲液的pH至所需要的值；高压消毒无菌保存或冷冻保存。本发明的缓冲液可以用来稀释被测样品，同时可以调节并指示样品pH。本发明的用于细菌内毒素鲎试验检测法的缓冲液，在两种内毒素测定法中对内毒素的测定无影响，均符合鲎试验法测定的规定。