高密度培养

摘要： 酒酒球菌(Oenococcus oeni)主导的苹果酸-乳酸(MLF)发酵是优质葡萄酒生产的重要工艺环节,制备高活菌数的酒酒球菌发酵剂是保障该环节顺利进行的重要前提之一。研究发现,一定量的L-苹果酸可以有效促进酒酒球菌的生长,并通过高密度培养条件优化提高酒酒球菌菌体密度。结果表明,通过正交试验得出的最佳高密度培养条件为初始pH值5.1、接种量3%、L-苹果酸添加量1 g/L。在此优化条件下,酒酒球菌ES-1的菌体密度较高,为(7.33±0.40)×10^(9) CFU/mL;进一步结合化学中和法和半连续培养法,可使最终菌体密度达(1.67±0.11)×10^(10) CFU/mL,是对照组的11倍。该研究获得的高密度培养优化方案可为制备优质本土酒酒球菌发酵剂奠定基础。

摘要： 绿藻门的栅藻属浮游植物可作为轮虫、枝角类等浮游动物的食物,而轮虫、枝角类等浮游动物又是鱼虾幼体优质的生物饵料,对水产养殖业的苗种培育起重要作用,因此绿藻门栅藻属浮游植物的高密度培养可为浮游动物提供高质量的食物。

摘要： 核糖核酸(RNA)是一类重要的生物大分子,近年来随着技术的进步和生活水平的提高,RNA及其降解产物核苷酸在医药、保健品和食品加工方面的应用越来越广泛。文章综述了酵母RNA的风味、营养功能及应用,介绍了酵母RNA的提取技术以及高RNA酵母菌株选育工作的研究进展,并展望了其他酵母选育技术在高RNA酵母菌株选育工作领域的应用。

摘要： 为研究一株本土葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum,H.uvarum)菌株BF-345高密度生长的培养基组分,采用单因素试验结合响应面法对培养基中的碳源、氮源、无机盐等成分进行优化,以生长量进行表征。结果表明,以葡萄糖34.683 g/L、酵母浸粉4.178 g/L、牛肉膏18.533 g/L、磷酸二氢钾5.683 g/L为培养基组分,在28°C,180 r/min条件下,摇床震荡培养18 h,菌株BF-345活菌数可达到5.673×10^(9)CFU/mL,比优化前高出一个数量级。研究结果表明葡萄糖更适用于H.uvarum菌株BF-345的吸收与利用,酵母浸粉与牛肉膏复合使用对其增殖作用显著优于单一氮源,且维生素B1、维生素B2、肌醇、烟酰胺作为生长因子不适用于其增殖培养。

摘要： 以活菌数为指标,通过单因素实验、Plackett-Burman、最陡爬坡和中心组合试验,确定植物乳杆菌NCU137的最佳培养基成分和最优静态培养条件。结果表明,最佳培养基成分为麦芽糖26.73 g/L,酵母浸粉21.8 g/L,大豆蛋白胨16.59 g/L,MgSO_(4)·7H_(2)O 0.15 g/L,MnSO_(4)·H_(2)O 0.06 g/L,腺嘌呤0.13 g/L,苯丙氨酸0.051 g/L,吐温801 mL/L;最优培养条件为初始pH 7.0,接种量3%,培养温度30°C,最终活菌数达到9.2×10^(9) CFU/mL。本文为植物乳杆菌NCU137果蔬高活性菌剂的制备奠定了基础。

摘要： 乳酸菌对人类生活大有裨益,是工商业生产中极为重要的研究对象。乳酸菌高密度培养是其工业化应用的重要步骤。乳酸菌高密度培养可以较低的培养体积和较短的培养周期获得较高的菌体密度,提高发酵速度和发酵效果,应用于生产实践中能够减少后续发酵剂的使用量,并控制设备投资,降低生产成本。乳酸菌高密度培养受到生产菌株、培养基成分、发酵条件以及发酵模式等因素的影响。本文主要从乳酸菌高密度培养的营养消耗模式、培养基、培养条件、培养技术等方面进行综述,并展望了今后的研究方向,以期为乳酸菌发酵剂的高效制备及工业应用提供理论依据。

摘要： 为实现一株自分离风味酵母的高密度培养及生长动力学预测模型构建,本文对从酱油发酵醪中筛选的产4-乙基愈创木酚的风味酵母A10-2进行了高密度培养工艺的研究,对培养基种类(氮、碳源)、浓度进行了研究及优化,并对酵母的生长、基质消耗过程进行了数学模型的构建和验证。结果表明:磷酸二氢铵作为无机氮源,浓度0.2 g/100 mL为最适氮源流加补料方案;使用糖蜜作为唯一碳源时,培养液中持续流加保持总糖浓度为0.4~0.6 g/100 mL可获得最佳菌体生长速度;A10-2酵母的生长符合Logistic方程S形曲线,基质(总糖)消耗符合Leudeking-Priet方程,比生长速率最大值μ_(m)为0.4764 h^(−1),最大菌体生长得率系数Y_(G)值为0.5879 g/g,维持系数ms=0.0127 g·L^(−1)·h^(−1)。所建立模型能够较好的描述酵母在高密度培养过程中的生长和耗糖情况,具有预测指导意义。

摘要： 极端嗜酸硫杆菌属微生物在生物冶金、生物脱硫以及固体废弃物的处置中扮演重要作用,但该类微生物在培养过程中细胞浓度很低,限制了该类微生物的广泛应用.高密度培养是提高微生物生产效率的有效手段.高密度培养技术在嗜酸微生物中的应用能够显著减少微生物培养的生成成本,缩短生产周期,极端嗜酸硫杆菌微生物菌剂的输出速率.本文从菌种选育、培养条件、培养方式综述了极端嗜酸硫杆菌高密度培养的研究现状.

摘要： 试验利用从自然发酵泡菜中筛选出的一株性能优良的优势菌株乳杆菌LF-8001进行高密度培养,通过单因素试验和正交实验分析初始pH、接种量、培养温度、外加营养因子种类以及中和剂种类对乳杆菌LF-8001高密度细胞培养的影响.确定乳杆菌LF-8001的最佳高密度细胞培养工艺为:以2％的西葫芦汁液作为外加营养因子、0.5％K2HPO4溶液为中和剂,调节MRS培养基初始pH为7,接种6％的乳杆菌LF-8001后于30°C恒温培养至稳定期,在此条件下乳杆菌LF-8001的菌浓度达到了 1.08×1010CFU/mL.

摘要： 随着生物制药行业的不断发展与进步,增加了基于细胞培养的生物制品的需求量,使多种动物细胞规模化培养技术应运而生,并得到了广泛的应用,特别是悬浮培养技术,有效弥补了传统动物细胞规模化培养技术使用过程中的不足.本文通过对动物细胞规模化培养技术的发展现状进行分析,了解不同动物细胞规模化培养技术的优缺点,加大改进力度,选择合适的规模化培养技术,能够显著缩短细胞生长的周期,提高细胞密度,提升细胞的产量和质量.

摘要： 二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)是一种高附加值的ω-3脂肪酸,具有重要的生理功能.本文通过单因素实验确定葡萄糖/甘油和蛋白胨/酵母浸粉为Schizochytrium sp.FJU-512生产DHA的最适碳氮源.在单因素实验的基础上设计Plackett-Burman实验和Box-Behnken实验优化培养基, DHA产量可达15.23 g/L,较优化前的6.18g/L提高了2.46倍.借助Logistic和Luedeking-Piret方程,分别建立了裂殖壶菌菌体生长和DHA生成的动力学模型;为了实现裂殖壶菌工业化高密度培养,根据单位体积液体中搅拌功率相同的准则,进行15L～100L发酵罐主要控制参数——搅拌转速的理论放大计算.裂殖壶菌的生物量、油脂产量和DHA产量分别由原来的103.26g/L、51.50 g/L和19.44 g/L增加到放大后的110.75 g/L、50.77 g/L和22.32g/L.rn 为了进一步提高DHA发酵产量，考察了添加柠檬酸和苹果酸对发酵裂殖壶菌的影响。在摇瓶培养60h时添加1 g/L(w/v)的柠檬酸和添加1~3g/L(w/v)的苹果酸可提高DHA的产量，在15L发酵罐中验证结果与摇瓶实验相符，在60h添加1g/L(w/v)的柠檬酸钠和3g/L(w/v)的苹果酸，DHA产量分别从原来的16.04g/L提高到21.00g/L和19.54g/L.

摘要： 微藻因其诸多优良特性而成为生物柴油最具潜力的原料之一.但大规模培养微藻制备生物柴油尚需解决优良藻种选育、高密度培养、细胞采收、脱水及高效生物反应器设计等技术问题.本文从藻种、营养因素、培养条件、营养方式及培养模式等方面,阐述了当前影响富油微藻高密度培养和油脂积累因素的研究概况,大量实践证明很多微藻在营养缺乏或环境压力下，细胞内可以积累大量的油脂，但是通常营养缺乏会导致微藻生长变差，生物量降低等，为克服生长和油脂积累的矛盾，科学工作者充分利用营养物质丰富时微藻大量繁殖并积累牛物量，营养匾乏时大量积累油脂的特点，采用基于营养调控的两步培养技术获得较好的效果。

摘要： 本文以实验室筛选获得的适于发酵生产用的直投式酸奶发酵剂菌株组合保加利亚乳杆菌L.b-23和嗜热链球菌S.t-14为材料，对其高密度培养工艺进行了研究。结果发现按球菌：杆菌=1:1的混合培养比例，pH 6.6～6.8，转速85～100r/min，42°C培养18h后活菌数达到1.27×109cfy/mL；菌悬液经1.8％海藻糖，0.25％甘油，5.5％谷氨酸钠和0.5％吐温80保护剂处理，冷冻干燥后获得的发酵剂活菌数达到3.35×1011CFU/g。

摘要： 中性内切纤维素酶在纺织及造纸工业具有重要的应用.通过单因素方法结合析因设计对基因工程菌GS 115-pPIC9K-eg Ⅰ的产酶条件进行优化,发酵酶活力为278.28±8.67U/mL,较优化前提高了74％.对工程菌GS 115-pPIC9K-eg Ⅱ的培养体系进行优化，发酵酶活力可达4205.88±9.87U/mL。15L发酵罐进行放大培养，蛋白含量为1378ug/ml，最终酶活力高达32529U/mL，提高了7.8倍，比活提高了2.15倍。本文通过(NH4)2SO4盐析、透析、浓缩和Q Sepharose Fast Flow离子交换进行纯化，纯化倍数为1.8倍，回收率为18.3%。该内切纤维素酶相对分子质量约为46KD、最适反应温度为70°C，热稳定性较好，60°C保温30min仍能保留80%以上的活力;在pH 6.0-7.0有较高的稳定性，最适反应pH为6.5;Fe3+,Li+对其有激活作用，而K+,Ca2+,Cu2+,Zn2+,Mn2+,Co2+,Al3+对酶具有不同程度的抑制作用，Mg2+,Na+,Ba2+对其影响不大。

摘要： 利用大型海藻细胞的全能性获得了蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、多管藻(Polysiphonia urceolata)和孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的无性系材料,在此基础上分别构建了绒球状微球体、网状微球体和簇生状微球体三种微球体形式,这种微球体形式适合于大型海藻的生物反应器高密度培养.簇生状的孔石莼微球体在10L藻类生物反应器中的培养密度达5.81g FW/L,最高生长速度达到0.36g FW/(L·d),最大比生长速率为0.130/d.藻类生物反应器高密度培养海藻无性系可用于海藻育苗、水产养殖水处理以及天然活性物质生产等.

摘要： 甲烷氧化菌不仅能氧化甲烷生成甲醇，还能将正构烷烃、酯、环烃、芳香化合物和杂环化合物羟基化，烯烃环氧化并能氧化降解卤代烃(图2)。甲烷氧化菌因其独特的催化特性，在减少生态系向大气的甲烷排放量、降低垃圾填埋场等产生的甲烷、大宗的化学品生产、有机污染物方面降解以及煤矿和气田瓦斯气体的安全控制方面具有巨大的应用潜力。然而甲烷氧化菌工业应用的瓶颈问题是甲烷氧化菌生长速率慢及细胞密度低，培养操作困难及难以实现高密度培养。因此，建立甲烷氧化菌的大规模高效培养技术是利用MMO进行一碳转化的前提。解决这一问题的思路有两个:1)建立适合于甲烷氧化菌的快速高密度培养体系；2)在工业微生物中进行异源表达甲烷氧化菌的关键酶，从而实现重组菌高密度培养及其一碳生物转化的两步培养体系，本文以这两个思路为主，介绍甲烷氧化菌的生物化工研究进展。

摘要： 本文研究了盐生杜氏藻(Dunaliella salina Teodoresce)在高效光合生物反应器中的生长动力学，揭示了低光径的高光效机制。通过降低光径和提高培养体系中湍流的方式，改善细胞的受光状况，将盐藻细胞的培养密度提高到1．26×107cells／ml。从而进一步验证了光照对盐藻生长的影响的本质不是单纯的光照强度，而是细胞的受光状况。同时证明．如果考虑到细胞受光状况、混合程度、CO2供应、营养状况和细胞自我抑制物等综合因素及其它限制因予，已发表的大多数微藻的最高培养密度和最佳光照强度的实验结果将得到很大程度的提高。

摘要： L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine)是人体8种必需氨基酸之一,分子式:C9H11NO2,分子量165.19.L-苯丙氨酸用于制备多种氨基酸输液,综合氨基酸制剂以及营养强化剂,也是抗癌药物的合成原料,同时在抗病毒新药的开发应用上也引起重视。但其主要用途是用于功能性食品添加剂阿斯巴甜(APM)的生产和消费。阿斯巴甜国内俗称蛋白糖,其甜度为蔗糖的200倍.是一种优良的低热量甜味剂,适用于肥胖症和糖尿病患者食用,同时具有提神醒脑以及减肥的功效。自从上世纪80年代以来,它已经发展成为了国际市场上的主导强力甜味剂,得到了广泛的应用。目前世界市场上L-苯丙氨酸的年需求量约1.5万吨,我国国内市场对L-苯丙氨酸的需求在3000吨左右.国内虽已有少量几家L-苯丙氨酸生产厂家,但生产规模偏小,年产量大都在100吨/年以下,供需缺口很大,远远不能满足国内市场日益增长的需求,每年仍需依靠国外进口来弥补供需缺口,耗用大量的外汇.目前,L-苯丙氨酸的生产主要有蛋白质水解提取法、化学合成法、微生物发酵法和酶法。其中,发酵法和酶法是主要的生产方法。本项目利用基因工程与发酵技术相结合的的方法进行L-苯丙氨酸的生产.采用肉桂酸为底物,利用酶法转化生产L-苯丙氨酸.由于其底物肉桂酸价格便宜,而且工艺简便,转化率高等特点。所以该方法在工业生产中极富竞争力。本文介绍了该课题主要技术指标、项目工艺路线和关键技术、项目经济效益、合作和联系方式等等。

摘要： Efficient porcine interferon-a(pIFN-a) expression in high density recombinant Pichia pastoris cultivation was achieved in a 5 1 bench-scaled bioreactor. The resultsindicated that a high and stable oxygen uptake rate (OUR)during induction phase was closely related with pIFN-aproduction efficiency.The multi-variables clustering andanalysis results showed that the achievement of a high andstable OUR relied on a higher glycerol consumption rateduring fed-batch culture phase and a moderate methanollevel (around 10 g/l) during induction phase. In the highand stable OUR environments (200-300 mmol/l/h), thehighest pIFN-a antiviral activity could reach a level of 6.7 x 10 IU/ml, which was morethan 10-300-folds higherthan those obtained at lower OUR (80-200 mmol/l/h) usingthe same bioreactorand those obtained in shaking flasks.Clustering and analysis of the specific growth and glycerolconsumption rates data during culture phase could detect the ill fermentation state at early stage, potentially provided a simple and effective fault alarming/diagnosis method for the achievement of stable pIFN-a production.

摘要： Efficient porcine interferon-a(pIFN-a) expression in high density recombinant Pichia pastoris cultivation was achieved in a 5 1 bench-scaled bioreactor. The resultsindicated that a high and stable oxygen uptake rate (OUR)during induction phase was closely related with pIFN-aproduction efficiency.The multi-variables clustering andanalysis results showed that the achievement of a high andstable OUR relied on a higher glycerol consumption rateduring fed-batch culture phase and a moderate methanollevel (around 10 g/l) during induction phase. In the highand stable OUR environments (200-300 mmol/l/h), thehighest pIFN-a antiviral activity could reach a level of 6.7 x 10 IU/ml, which was morethan 10-300-folds higherthan those obtained at lower OUR (80-200 mmol/l/h) usingthe same bioreactorand those obtained in shaking flasks.Clustering and analysis of the specific growth and glycerolconsumption rates data during culture phase could detect the ill fermentation state at early stage, potentially provided a simple and effective fault alarming/diagnosis method for the achievement of stable pIFN-a production.

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为：胰蛋白胨19～21g/L，酵母浸膏9～11g/L，磷酸缓冲液终浓度100mmol/L，无氨基氮源12.8～14.8g/L，生物素4×10-4g/L，甘氨酸0.05～0.15wt%和体积浓度为0.5％的甲醇，pH为6～8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法，利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌，可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。

摘要： 本发明涉及混合粉末的高密度成形方法、高密度成形装置及高密度三层结构粉末压坯。将基础金属粉末和低熔点的润滑剂粉末的混合物填充到第一模具（21D）中，填充按基础金属粉末平均粒径小的第一层用混合粉末（100F）、基础金属粉末平均粒径大的第二层用混合粉末（100S）以及基础金属粉末平均粒径小的第三层用混合粉末（100T）的顺序,向各层用混合粉末施加第一加压力成形中间粉末压坯（110），加热并将已升温的中间粉末压坯（110）装入第二模具（41D）中，且施加第二加压力成形高密度三层结构粉末压坯。

摘要： 公开了一种高密度光盘、一种用于在高密度光盘上记录地址和/或伺服信息的方法以及一种用于再现记录在高密度光盘上的数据的方法。数据以具有等于ECC(纠错码)单元的大小的预定大小的RUB(记录单元块)的单元被记录在高密度光盘上。该RUB的地址信息和/或主轴伺服控制操作所需的预定通道比特的主轴索引信息被记录在RUB的第一链接区或第二链接区中。因此，在光盘播放器的重放期间，无需使用附加的复杂解码操作就可以快速地识别出地址信息和/或主轴索引信息，使得可以随机访问用户所需的特定位置和可以容易控制基于CLV的主轴伺服操作。

摘要： 本发明涉及一种在高密度只读记录介质上记录地址的方法和一种含有因此而记录的地址的高密度只读记录介质。在根据本发明的高密度只读记录介质中，数据被记录在多个记录块，其中，每个块均由引入区、其中写有被ECC格式化和调制之后的数据的一部分的物理簇和引出区构成，且每个块在其引入和/或引出区中具有其地址。

摘要： 公开了一种高密度只读光盘、一种用于在高密度只读光盘上记录DI(盘信息)的方法以及一种用于再现记录在高密度只读光盘上的数据的方法。该DI记录方法用于在导入区或导出区的特定记录区中以多于预定的次数重复记录适用于高密度只读光盘的凹坑式DI。因此，能够快速读取记录在特定记录区域中的DI，并根据所读取的DI来正常再现数据。

摘要： 本发明公开了一种纳豆芽胞杆菌高密度发酵培养基及其高密度发酵方法，该发酵培养基，包括大豆蛋白胨，酵母提取物，氯化钠，海藻糖，磷酸二氢钾，植物油。本发明的发酵方法包括将纳豆芽胞杆菌复苏培养得到摇瓶种子液，摇瓶种子液接入一级发酵罐进行一级发酵，将一级发酵液转接二级发酵罐进行二级发酵；将二级发酵液转接三级发酵罐进行三级级发酵；放罐离心，收集菌泥制备纳豆芽胞杆菌微生态制剂。本发明通过对培养基成分的优化以及对工业发酵罐生产过程中非营养性的工艺参数进行调整，得到高浓度菌液，提高活菌数量，离心浓缩后菌泥产量提高，缩短了工业生产的发酵周期，提高发酵结果的稳定性，降低工业发酵成本，对提高发酵工业产品质量奠定基础。

摘要： 本发明公开了一种用于水体氨氮降解的硝化细菌菌剂的高密度分批培养生产工艺及用于上述工艺的硝化细菌高密度发酵的分批培养发酵罐系统，这一生产工艺分为纳米磁粉制备、硝化细菌种子液的培养、磁载硝化细菌的固定化、分批发酵培养、絮凝混合沉淀磁分离、冷冻干燥和复配制剂等步骤。这一生产工艺可以提高硝化细菌制剂的有效细胞密度，在硝化细菌菌剂制备的同时复配了絮凝剂和促生剂，在水体修复中使用，既能提高水体透明度，又能保证水体修复所需要的充足的硝化细菌的细胞密度和对新环境中的适应性。

摘要： 本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为：胰蛋白胨19～21g/L，酵母浸膏9～11g/L，磷酸缓冲液终浓度100mmol/L，无氨基氮源12.8～14.8g/L，生物素4×10-4g/L，甘氨酸0.05～0.15wt%和体积浓度为0.5％的甲醇，pH为6～8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法，利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌，可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。

摘要： 本发明公开一种酿酒酵母高密度发酵培养基和酿酒酵母高密度发酵方法，该酿酒酵母高密度发酵培养基的配方包含蔗糖75.80～77.12g/L，酵母浸膏33.31～34.25g/L，酸水解干酪素15.86～16.15g/L，硫酸铵0.55g/L，硫酸镁1.03g/L，磷酸二氢钾2.62g/L和甘氨酸2.03g/L。本发明的酿酒酵母高密度发酵培养基中碳氮比的搭配对酿酒酵母的生长繁殖和产物合成非常有利，采用该培养基并结合分批补料策略，发酵所得酿酒酵母的菌体浓度在50g/L以上，明显优于现有发酵工艺，实现了高密度、高产率和高浓度培养，同时也相应地缩小生物反应器的容积，减少了废水处理设备和费用，无需浓缩，降低了生物量的分离费用，将会给饲料酵母工业带来了巨大的经济效益和环境效益。

摘要： 本发明公开了一种用于植物细胞高密度培养的滚筒中空纤维反应器，包括滚筒、中空纤维管、培养液循环管以及用于带动所述滚筒转动的驱动装置，所述滚筒与外界不连通，所述中空纤维管固设于所述滚筒内，所述中空纤维管的数量为至少一根，所述培养液循环管与中空纤维管的管腔相连通，所述培养液循环管上设有培养液循环泵。本发明还相应提供一种利用上述滚筒中空纤维反应器培养番石榴叶细胞的方法。本发明装置在培养细胞时混合性能好、剪切力低且节能。另外，本发明装置由于滚筒转动带动壳腔流体内流动，可大大降低细胞的紧密团聚凝聚并改善其溶氧，改善膜的传质通透性，利于细胞生长代谢，有利于高密度细胞培养。