骨基质明胶

摘要： 背景:磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性和骨传导性及可降解性,可用于修复骨缺损,但单一的磷酸钙骨水泥脆性大,不具有骨诱导活性,生物活性差.目的:构建多孔磷酸钙/骨基质明胶复合骨水泥,分析其理化特性.方法:提取兔骨基质明胶,制作聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic)acid,PLGA]空白微球,将PLGA微球(质量分数分别为0,5％,10％,对应制作的骨水泥分别设为空白组、5％组、10％组)、骨基质明胶与磷酸钙骨水泥复合,构建多孔磷酸钙/骨基质明胶复合骨水泥,考察3种复合骨水泥的微观结构、凝固时间、可注射性、抗溃散性、孔隙率及降解特性.将骨髓间充质干细胞分别与3种复合骨水泥浸提液共培养,14 d内检测细胞增殖率.将3种复合骨水泥材料分别植入新西兰兔腰椎椎体骨缺损内,12周后采用Micro-CT分析材料对骨缺损的修复作用.结果与结论:①与空白组比较,5％组、10％组复合骨水泥凝固时间减少(P<0.05),孔隙率增大(P<0.05),抗压强度、弹性模量降低(P<0.05),可注射性变差,抗扩散性弱,体外降解加速;与5％组比较,10％组复合骨水泥凝固时间减少(P<0.05),孔隙率增大(P<0.05),抗压强度、弹性模量降低(P<0.05),抗扩散性弱,体外降解加速;②与空白组复合骨水泥比较,5％组、10％组复合骨水泥可促进骨髓间充质干细胞的增殖(P<0.05);③3种骨水泥材料植入12周后的Micro-CT显示,骨缺损处均有新骨生成,5％组、10％组兔骨缺损部位骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量均明显高于空白组(P<0.05),骨小梁分离度均低于空白组(P<0.05);④结果表明质量分数为5％PLGA微球与骨基质明胶、磷酸钙骨水泥复合构建的骨水泥,具有良好的力学强度、降解性能、可操作性、细胞相容性及骨诱导活性.

摘要： Objective Chondrocytes were seeded on allogeneic demineralized cancellous bone (DCB ) constructing tissue-engineered cartilage to evaluate the feasibility of DCB as scaffolds for tissue engineering cartilage.Methods Allogeneic DCB was prepared by successive defatting and decalcification and then observed under scanning electronic microscope.One-month old rabbit articular chondrocytes were isolated and proliferated by monolayer culture.Passage 1 chondrocytes were seeded on DCB to construct tissue-engineered cartilage in vitro for 6 weeks.Specimens were taken after 7,14,21,28,35 and 42 days'culture and evaluated by hematoxylin and eosin (HE),toluidine blue (TB),and immunohistochemistry for collagen type Ⅰ and Ⅱ.Results Prepared DCB showed three-dimensional porous structure of 100 - 500 μm with good plasticity and certain mechanical strength. Chondrocytes grew well on and inside the DCB,and were located in lacunae and expressed matrix proteoglycan and type collagen Ⅱ,which formed cartiageous tissues on DCB up to 42 days'culture.Conclusion DCB combined with allogeneic chondrocytes successfully constructed tissue-engineered cartilage in vitro ,which is an ideal scaffold for tissue engineering cartilage.%目的 软骨细胞复合同种异体脱钙松质骨(demineralized cancellous bone,DCB)体外构建组织工程软骨,评价DCB作为组织工程软骨支架的可行性.方法 取新西兰兔长骨干骺端松质骨制备DCB,扫描电镜观察;分离幼兔关节软骨细胞,原代培养后种植在同种异体DCB体外培养,分别于7、14、21、28、35、42 d取材进行苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝(TB)、Ⅰ型和Ⅱ型胶原染色.结果 制备的DCB成三维立体多孔结构,孔隙大小100~500μm,有良好的可塑性和一定的力学强度;软骨细胞在DCB表面和空隙内生长、分化良好,形成软骨陷窝,分泌基质蛋白聚糖和Ⅱ型胶原.培养42 d软骨细胞在DCB表面及孔隙内形成软骨样组织.结论 DCB复合同种异体软骨细胞在体外成功构建了组织工程软骨,是一种较理想的软骨组织工程支架材料.

摘要： 目的:通过将骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨植入大鼠皮下和将其与骨髓间充质干细胞体外复合培养,观察骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨在体内成骨情况和体外细胞相容性.方法:制备骨基质明胶和煅烧骨基质,按照1∶2比例制成重组人工骨,并与体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞复合培养48 h,利用流式细胞仪检测干细胞的凋亡情况和表型是否发生改变;取重组人工骨植入大鼠背部脊柱两侧,第2、4、8周分别取材,H-E染色组织观察、免疫荧光检测植入块周围的成骨情况.结果;细胞在复合材料上能够很好地黏附、生长以及增殖,与重组人工骨复合培养后,细胞表型和凋亡率均无明显变化,异位成骨显示人工骨具有较好的骨传导和骨诱导功能.结论:重组人工骨有较好的细胞相容性和较强的异位成骨性能.

摘要： 目的 探讨神经生长因子(NGF)与骨基质明胶(BMG)所制成的复合体(NGF-BMG)对兔桡骨缺损的修复作用.方法 48只新西兰兔完全随机分成NGF-BMG组、BMG组、NGF组和空白对照组,每组12只.制成双侧桡骨缺损模型后,前3组分别在缺损区放置NGF-BMG、BMG、NGF,空白对照组骨缺损不做处理.术后第4、8、12周每组各处死4只兔,作形态学观察、X线片及图像分析、组织切片,测量新骨面积并进行生物力学检测.结果 术后4、8、12周,NGF-BMG组X线片新生骨的灰度值[分别为(116±15)％、(183±14)％和(198±15)％]和组织切片新生骨所占比例[(34.5±4.5)％、(59.3±4.4)％和(76.2±8.1)％]均优于BMG组[(94±13)％,(140±13)％,(167±15)％;(26.8±4.8)％,(53.8±5.3)％,(66.2±8.5)％]、NGF组[(75±9)％,(112±13)％,(135±10)％；(19.7±2.9)％,(32.6±4.4)％,(35.3±7.6)％]和空白对照组[(70±6)％,(105±11),(130±11)％;(18.2±2.4)％,(29.3±3.4)％,(34.7±6.5)％](P＜0.05或P＜0.01).三点抗弯曲负荷结果在正常桡骨、NGF-BMG组、BMG组分别为(145±6)、(141±8)、(84±9)N,正常桡骨和NGF-BMG组之间差异无统计学意义(P＞0.05),BMG组生物力学强度较其他2组差(P＜0.01).结论 NGF-BMG复合体适用于骨缺损的修复.

摘要： 背景:前期实验发现单纯骨基质明胶材料与骨髓间充质干细胞复合后具有较好的成骨能力,修复骨缺损效果较好,但单纯骨基质明胶降解速度快,硬度差,不能用来修复承重区域的骨缺损.目的:观察骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨与骨髓间充质干细胞复合培养后细胞成骨潜能的变化.方法:利用骨基质明胶和煅烧骨基质制备重组人工骨,并与大鼠骨髓间充质干细胞复合培养48 h,用茜素红染色检测复合培养后细胞的成骨潜能.结果与结论:细胞在复合材料上能够很好的黏附、生长以及增殖,与重组人工骨复合培养后,细胞的成骨潜能和细胞表型无明显变化.表明重组人工骨易于与骨髓间充质干细胞结合,对细胞成骨潜能无影响,生物相容性良好.%BACKGROUND: Previous studies have found that simply bone matrix gelatin (BMG) material compound with bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) has a good osteogenic potential for bone defects with better effects, but simply BMG cannot be used to repair bone defects in load-bearing area because of rapid degradation speed and bad hardness.OBJECTIVE: To observe the changes in the osteogenic potential of BMSCs co-cultured with BMG/true bone ceramic (BMG/TBC).METHODS: BMG and TBC were used to prepare recombinant bone that was co-cultured with BMSCs for48 hours in vitro. Osteogenic potential of the recombinant bone was detected by Alizarin bordeaux staining.RESULTS AND CONCLUSION: BMSCs in composited material could adhere, grow and proliferate well after co-cultured with BMG/TBC. There were no changes of the osteogenic potential and cell phenotype. It is indicated that BMG/TBC is easy to combined with BMSCs without affecting osteogenic potential, which shows a good biocompatibility.

摘要： 背景：前期实验发现单纯骨基质明胶材料与骨髓间充质干细胞复合后具有较好的成骨能力,修复骨缺损效果较好,但单纯骨基质明胶降解速度快,硬度差,不能用来修复承重区域的骨缺损.目的：观察骨基质明胶/煅烧骨基质重组人工骨与骨髓间充质干细胞复合培养后细胞成骨潜能的变化.方法：利用骨基质明胶和煅烧骨基质制备重组人工骨,并与大鼠骨髓间充质干细胞复合培养48 h,用茜素红染色检测复合培养后细胞的成骨潜能.结果与结论：细胞在复合材料上能够很好的黏附、生长以及增殖,与重组人工骨复合培养后,细胞的成骨潜能和细胞表型无明显变化.表明重组人工骨易于与骨髓间充质干细胞结合,对细胞成骨潜能无影响,生物相容性良好.

摘要： Objective To investigate the osteogenic effect of bone matrix gelatin after different dealing in ectopic bone area femoral. Methods 36 Japanese big ears white rabbits were divided into group A, B and C (12 in each). Group A: bFGF+ Vascular bundle+BMG. Group B: Vascular bundle+BMG. Group C: BMG. The animals were sacrificed after 4, 8 and 12 weeks respectively by perfusing ink. HE and Masson stained for histological observations and quantitative analysis. Results Quantitative analysis showed that the osteogenic and neovascularization areas of group A were the largest on the every time point. The correlation analysis of osteogenic area and vascular area were r4weeks=0.53, P < 0.05; r8weeks=0.46, P < 0.05; r12weeks= 0.61, P< 0.05. Conclusion The better vascularization, the better osteogenesis. There is a positive correlation between os-teogenicarea and vascularareawere%目的 探讨不同处理后的骨基质明胶(BMG)在异位成骨区的成骨效果.方法 将36 只日本大耳白兔随机分为3 组,每组12 只.A 组血管束植入用bFGF 预处理过的BMG 中;B 组血管束植入未作任何预处理的BMG 中;C 组单独植入BMG.分别于术后4、8、12 周给各组动物灌注墨汁后做HE 及Masson 染色进行组织学观察和定量分析.结果 新生骨面积定量分析,各个时间点上A 组新生骨面积均最大,与C 组比较差异均有统计学意义(均P ﹤0.05).新生骨面积比与血管面积比相关分析结果显示,r4 周=0.53,P﹤0.05;r8 周=0.46,P﹤0.05;r12 周=0.61,P﹤0.05.结论 血管化程度越高,新生骨面积越大;新生骨面积比与血管化程度呈正相关.

摘要： ①目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对骨基质明胶（BMG）包埋血管束的促血管化作用。②方法将36只日本大耳白兔随机分为A、B、C 3组,每组12只。A组：bFGF＋血管束＋BMG;B组：血管束＋BMG;C组：BMG。分别于术后4、8、12周给各组动物灌注墨汁后做透明标本进行大体观察,并做HE及Masson染色进行组织学观察和定量分析。③结果 3组均有不同程度的血管化,效果以A组最好,B组次之,C组最差。④结论 bFGF对BMG包埋血管束有促血管化的正协同作用。

摘要： ①目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨基质明胶(BMG)包埋血管束的促血管化作用.②方法 将36只日本大耳白兔随机分为A、B、C 3组,每组12只.A组:bFGF +血管束 +BMG;B组:血管束+ BMG;C 组:BMG.分别于术后4、8、12周给各组动物灌注墨汁后做透明标本进行大体观察,并做HE及Masson染色进行组织学观察和定量分析.③结果 3组均有不同程度的血管化,效果以A组最好,B组次之,C组最差.④结论 bFGF对BMG包埋血管束有促血管化的正协同作用.

摘要： 目的 将硫酸钙与骨基质明胶复合，构建新型可降解复合人工骨，通过动物实验观察复合人工骨对骨缺损的修复能力，探讨其临床应用的可行性。 方法 分别制备硫酸钙、骨基质明胶，按一定比例，体外物理复合并预制成形。取新西兰大白兔 21 只，制作双侧尺骨 15mm 骨缺损动物模型，随机分为 3 组，CS/BMG 组植入 CS/BMG 复合人工骨、CS 组单纯植入硫酸钙人工骨、空白对照组缺损区旷置。标本于术后 4 周、8 周、12 周分批取材，经大体观察、影像学及组织学检查，观察复合人工骨修复骨缺损的效果。

摘要： 本文阐述了海南省人民医院应用去蛋白天机骨和猪骨基质明胶组合修复四肢骨干长段缺损的治疗技术,并对治疗结果和BBC骨治疗的优势进行了讨论.

摘要： 本发明公开了一种可注射性软骨脱细胞外基质混合脱钙骨基质水凝胶及其制备方法。本发明将同种或异种软骨经过脱细胞处理制备软骨细胞外基质，同时将同种或异种骨组织经过脱脂、脱钙、脱细胞处理制备脱钙骨基质，二者按照一定比例混合后再经过胃蛋白酶消化，在中性pH、37°C和适宜盐浓度条件下固化成可注射性水凝胶。使用本发明所述方法制备的软骨脱细胞外基质混合脱钙骨基质水凝胶具有良好的生物可降解性，最重要的是具有可注射性；同时，由于进行脱细胞处理，免疫原性大大降低，具有较好的生物相容性，生物排斥反应降低；本发明取材简单，操作方便，可用于各种软骨缺损填充及微创骨科软骨修复治疗，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本发明公开了一种可注射性软骨脱细胞外基质混合脱钙骨基质水凝胶及其制备方法。本发明将同种或异种软骨经过脱细胞处理制备软骨细胞外基质，同时将同种或异种骨组织经过脱脂、脱钙、脱细胞处理制备脱钙骨基质，二者按照一定比例混合后再经过胃蛋白酶消化，在中性pH、37°C和适宜盐浓度条件下固化成可注射性水凝胶。使用本发明所述方法制备的软骨脱细胞外基质混合脱钙骨基质水凝胶具有良好的生物可降解性，最重要的是具有可注射性；同时，由于进行脱细胞处理，免疫原性大大降低，具有较好的生物相容性，生物排斥反应降低；本发明取材简单，操作方便，可用于各种软骨缺损填充及微创骨科软骨修复治疗，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本发明公开了一种鱼类脱钙骨基质及其制备方法，其中，制备方法包括以下步骤：将新鲜鱼骨置于反应釜中，在反应釜中依次进行如下处理：氯化钠溶液4°C搅拌8h‑SDS溶液4°C搅拌8h‑纯水清洗‑丙三醇4°C搅拌8h‑纯水清洗‑过氧化氢溶液37°C搅拌8h‑纯水清洗‑无水乙醚4°C搅拌8h‑蛋白酶溶液4°C搅拌0.5h‑纯水清洗‑无水乙醇脱水，将脱水后的鱼骨从反应釜中取出，冷冻干燥后获得鱼类脱钙骨基质。本发明制备得到的鱼类脱钙骨基质完好的保留了鱼骨骨骼的空间结构，具有良好的生物相容性、生物降解性和骨修复能力，无人畜共患病风险，经粉碎、重塑后获得的产品机械强度好，可用于各种非承重骨缺损修复和承重骨缺损辅助修复。

摘要： 本发明公开了一种复合富血小板血浆和脱钙骨基质的骨修复材料及其制备方法，属于医疗材料领域。本发明的骨修复材料为含富血小板血浆和脱钙骨基质的凝胶，其制备方法包括以下步骤：(1)将脱钙骨基质粉末加入获取的富血小板血浆中，充分混合搅拌，制成混悬液；(2)将含Ca2+和凝血酶的溶液与步骤(1)中的混悬液按一定体积比混匀，静置，形成凝胶，得到骨组织修复材料。本发明利用自体富血小板血浆复合脱钙骨基质形成的人工骨材料，两者相辅相成，共同促进骨修复。富血小板血浆复合脱钙骨基质形成的凝胶可塑性强，可通过透视定位微创置入，也可通过开放手术植入，操作方便。

摘要： 本发明公开了一种复合脱钙骨基质的硅胶隆鼻材料。包括硅胶、脱钙骨粉、固化剂和增强粘合剂。本发明采用硅胶和脱钙骨基质共同构建隆鼻假体，拟用同种异体组织降低硅胶长期植入并发症发生的概率，与硅胶相比，脱钙骨基质具有更好的生物相容性，同时也更容易降解，利用脱钙骨基质降解产生的孔隙，让自体组织得以长入硅胶内部，进而“活化”假体，降低并发症的发生，而硅胶假体相较其他隆鼻假体而言，完全取出假体也相对容易。

摘要： 本发明公开了一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法，涉及免疫层析法定量检测技术领域。与现有技术相比，本发明提供的检测试纸条具有如下优势：制作方便，体积小、便于携带且成本较低，克服了酶联免疫吸附法(ELISA)制作复杂、体积大、不便于携带等缺点，可以实现单人份检测。上述试纸条具有检测灵敏度高，可以满足定量检测的需求。通过免疫分析仪对结果进行判读，可实现自动化，减少主观因素的影响，提供便利、快速、可靠、结果可重复的诊断结果。采用上述试纸条适用于各种医疗现场的检测所需。

摘要： 本发明属于生物医学的材料制备领域。特别适用于生物医学中骨形态发生蛋白(BMP)的骨基质明胶载体。本发明方法是利用还原剂破坏其分子内和分子间的二硫键和天然活性的空间构象，使双体结构还原成单体结构，失去诱导活性并与胶原蛋白去复合。该方法的特点是破坏维持蛋白质生理活性的分子结构和构象，提高了抽提去活效率。

摘要： 本发明属于医学生物材料技术领域，具体涉及一种复合型骨基质明胶聚乳酸多孔生物活性材料的制备方法。本发明主要公开一种复合型骨基质明胶聚乳酸多孔生物活性材料的制备方法，该方法制备的复合型骨基质明胶聚乳酸多孔生物活性材料可根据临床需要进行塑型，具有与人类天然骨相类似的三维多孔结构及骨诱导活性。具体方法包括以下步骤：1)将骨组织粉碎成骨粉；2)将骨粉依次在氯仿/甲醚溶液、盐酸溶液、氯化钙溶液乙二胺四乙酸溶液、氯化锂溶液中浸泡制成骨基质明胶；3)将骨基质明胶、聚乳酸、造孔剂混合均匀装入模具内，在二氧化碳反应釜中反应制得复合型骨基质明胶聚乳酸多孔生物活性材料；4)经浸泡、冷冻干燥封装、辐照灭菌制成。

摘要： 本发明提供了一种双层的人工皮肤移植物，它包括：(a)真皮层，所述的真皮层含有骨基质明胶、成纤维细胞和基质蛋白；(b)位于真皮层一个主表面之上的表皮层。在本发明的双层人工皮肤中，有连续的表皮细胞生长在成纤维细胞一骨基质明胶复合物表面，且表皮细胞分化良好，有较明显的分层。切片显示组织工程人工皮肤具有和正常人体皮肤相似的组织结构特征。本发明还提供了该人工皮肤的制备方法和用途。

摘要： 本发明属于生物医学的材料制备领域。特别适用于生物医学中骨形态发生蛋白(BMP)的骨基质明胶载体。本发明方法是利用还原剂破坏其分子内和分子间的二硫键和天然活性的空间构象,使双体结构还原成单体结构,失去诱导活性并与胶原蛋白去复合。该方法的特点是破坏维持蛋白质生理活性的分子结构和构象,提高了抽提去活效率。