马铃薯晚疫病菌

摘要： Catharanthus roseus receptor-like kinase1-like kinases (CrRLK1Ls)是植物所特有的一类蛋白类受体激酶,在维持细胞壁完整性、细胞间通讯、生物和非生物应激反应中发挥重要作用。本研究鉴定了马铃薯CrRLK1Ls (StCrRLK1Ls)基因家族的成员数量,并对其理化特性、染色体位置、进化特征、亚细胞定位和对晚疫病菌侵染时的表达模式进行全面分析。结果显示,共获得17个StCrRLK1Ls基因,其氨基酸序列大小为753~997 aa,分子量和等电点分别为83.34~108.69kD和5.30~7.56,主要位于质膜。进化分析将马铃薯、拟南芥、水稻、苹果和番茄的CrRLK1Ls家族成员分为7个亚组,马铃薯CrRLK1Ls家族成员分布于亚组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ。StCrRLK1Ls不均匀的分布于8条染色体上,存在3个串联重复基因簇,包含6个基因。此外,StCrRLK1Ls启动子区域存在响应植物激素、防卫和逆境等多种顺式调控元件。‘大西洋’和‘陇薯7号’接种晚疫病菌(Phytophthora infestans,Pi)后,大量StCrRLK1Ls为差异表达。其中,StCrRLK1L8和StCrRLK1L10的相对表达量在晚疫病菌侵染期间明显上调;在‘大西洋’接种Pi 8 d时,StCrRLK1L11的表达量是对照的9.74倍,推断其可能在马铃薯响应病原真菌的过程中起重要的作用,可作为进一步开展抗病研究和功能分析的候选基因。

摘要： Catharanthus roseus receptor-like kinase1-like kinases (CrRLK1Ls)是植物所特有的一类蛋白类受体激酶,在维持细胞壁完整性、细胞间通讯、生物和非生物应激反应中发挥重要作用。本研究鉴定了马铃薯CrRLK1Ls (StCrRLK1Ls)基因家族的成员数量,并对其理化特性、染色体位置、进化特征、亚细胞定位和对晚疫病菌侵染时的表达模式进行全面分析。结果显示,共获得17个StCrRLK1Ls基因,其氨基酸序列大小为753~997 aa,分子量和等电点分别为83.34~108.69kD和5.30~7.56,主要位于质膜。进化分析将马铃薯、拟南芥、水稻、苹果和番茄的CrRLK1Ls家族成员分为7个亚组,马铃薯CrRLK1Ls家族成员分布于亚组Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ。StCrRLK1Ls不均匀的分布于8条染色体上,存在3个串联重复基因簇,包含6个基因。此外,StCrRLK1Ls启动子区域存在响应植物激素、防卫和逆境等多种顺式调控元件。‘大西洋’和‘陇薯7号’接种晚疫病菌(Phytophthora infestans,Pi)后,大量StCrRLK1Ls为差异表达。其中,StCrRLK1L8和StCrRLK1L10的相对表达量在晚疫病菌侵染期间明显上调;在‘大西洋’接种Pi 8 d时,StCrRLK1L11的表达量是对照的9.74倍,推断其可能在马铃薯响应病原真菌的过程中起重要的作用,可作为进一步开展抗病研究和功能分析的候选基因。

摘要： 为明确福建省部分马铃薯产区晚疫病菌群体结构,2017年-2019年在龙海市、福安市、霞浦县共分离获得96株马铃薯晚疫病菌。采用对峙培养法、鉴别寄主法和PCR-RFLP法对这些菌株的交配型、生理小种及线粒体DNA(mtDNA)单倍型进行分析。交配型测定结果显示,除了福建省福安市有5株(5.21%)为A1交配型外,其余91株(94.79%)均为自育型,未发现A2交配型及A1A2型菌株。从96个菌株中检测出16个生理小种类型,龙海市和福安市的优势生理小种均是可克服11个显性抗病单基因的1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11,霞浦县的优势生理小种为1.2.3.4.5.6.7.8.10。供试菌株均至少含有6个毒性基因。mtDNA单倍型共检测出3种类型,其中55个菌株(龙海市22株、福安市8株、霞浦县25株)为Ⅰa型,占57.29%,32个菌株(龙海市2株、福安市25株、霞浦县5株)为Ⅱa型,占33.33%,9个菌株(福安市7株、霞浦县2株)为Ⅱb型,占9.37%。研究结果表明,福建省马铃薯晚疫病菌群体遗传多样性日趋复杂。

摘要： 【目的】监测河北、内蒙古和吉林北方一季作区马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)对霜脲氰的抗性时空动态,明确霜脲氰及其混剂对马铃薯晚疫病的田间防治效果,为马铃薯晚疫病菌抗药性治理和杀菌剂合理使用提供依据。【方法】2011-2019年共采集分离到824个马铃薯晚疫病菌单孢菌株,采用菌丝生长速率法测定其对霜脲氰的敏感性,并通过田间药效试验验证霜脲氰及其混剂对马铃薯晚疫病的防治效果。【结果】河北、内蒙古和吉林3个地区的马铃薯晚疫病菌群体对霜脲氰抗性水平较低且抗性发展缓慢,平均EC50、平均抗性倍数、抗性频率和抗性指数随着监测年限及地域的不同而波动,但整体上趋于低位平稳。不同年份检测的马铃薯晚疫病菌菌株对霜脲氰的平均EC50为0.06-0.44μg·mL^(-1),平均抗性倍数为0.29-2.18,抗性指数为0.25-0.47。2011和2017年仅检测到敏感菌株,2012-2016年抗性菌株频率为1.90%-58.57%,2018年和2019年抗性菌株频率分别为20.83%和88.14%。不同省(自治区)的马铃薯晚疫病菌菌株对霜脲氰的平均EC50为0.17-0.18μg·mL^(-1),平均抗性倍数为0.85-0.91,抗性频率为16.61%-22.22%,抗性指数为0.29-0.31。田间药效试验结果显示20%霜脲氰SC、72%霜脲氰·代森锰锌WP、52.5%噁唑菌酮·霜脲氰WG对马铃薯晚疫病防治效果为81.5%-87.1%,显著高于68%精甲霜灵·代森锰锌WG的防治效果(61.8%-69.3%)。【结论】河北、内蒙古和吉林3个地区的马铃薯晚疫病菌群体对霜脲氰总体上保持敏感,霜脲氰单剂及其与代森锰锌或噁唑菌酮的混剂对晚疫病仍有良好防治效果。在马铃薯晚疫病菌对甲霜灵和精甲霜灵产生抗性的地区,20%霜脲氰SC、72%霜脲氰·代森锰锌WP和52.5%噁唑菌酮·霜脲氰WG可作为苯基酰胺类杀菌剂的替代药剂使用,但仍需密切监测马铃薯晚疫病菌对霜脲氰的田间抗性发生动态,限制霜脲氰及混剂一个生长季节的使用不超过两次且与不同作用机理的杀菌剂交替或者混合使用。

摘要： 旨在明确云南省马铃薯春作区晚疫病菌对甲霜灵的敏感性,为马铃薯晚疫病化学防治提供参考.采用菌落直径法对2018-2020年采自云南省春作区的301株马铃薯晚疫病菌进行甲霜灵敏感性测定,结果显示:甲霜灵高抗、中抗、敏感菌株分别占测定菌株的76.41％、21.26％和2.33％.研究结果表明,2018-2020年云南省马铃薯春作区晚疫病菌甲霜灵抗性菌株已高达97.67％,甲霜灵已不能在云南省春作区用于防治晚疫病.

摘要： 为开发利用山苍子油,实现马铃薯晚疫病的绿色防控,利用纯植物提取物山苍子油配制成25％山苍子油水乳剂,分别在室内平板纯培养和田间接种条件下,对马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)进行了室内抑菌试验及田间防效测定.结果表明,25％山苍子油水乳剂的1500、1800倍稀释液对马铃薯晚疫病菌菌丝生长的抑制率分别达到98.2％、94.6％,该药剂的田间防效达75.00％.可见,25％山苍子油水乳剂能够通过抑制菌丝生长的方式,阻止晚疫病菌对马铃薯植株的为害,实现对马铃薯晚疫病的绿色防控,为马铃薯晚疫病的防治提供了新的思路.

摘要： 采用MTT染色法分别测定马铃薯晚疫病菌对峙培养时间、杂交菌株组合、保存温度及保存时间对卵孢子活力的影响,计算卵孢子活力率;通过不同温度处理、不同浓度H2O2溶液及混合培养时间处理、混合培养基质处理,探索卵孢子萌发条件.试验结果表明,不同菌株组合和自育型菌株产生卵孢子数量和活力均不同,随对峙培养时间延续,卵孢子数量逐渐增多,但卵孢子活力逐渐下降,杂交菌株组合对峙培养15 d或自育型菌株培养15 d后,卵孢子活力最高.不同温度对卵孢子活力影响不同,-20°C可以保持卵孢子活力,21°C培养促进卵孢子进入萌发期.H2O2溶液促进卵孢子进入萌发期,卵孢子进入萌发期比率随H2O2溶液浓度增加而提高,卵孢子经0.7％H2O2溶液处理后,卵孢子进入萌发期比率最高可达95.7％.土壤和组织浸出液配制而成的混合培养基均促进卵孢子萌发,其中土壤浸出液与黑麦培养基以1:1混合而成的培养基促进卵孢子萌发效果最佳,卵孢子最高萌发率为19％,与杂交组合产生的卵孢子相比,自育型菌株产生的卵孢子萌发率相对较低.以上结果为马铃薯晚疫菌群体遗传和马铃薯晚疫病流行研究提供理论依据.

摘要： 为探明我国北方一季作区马铃薯晚疫病菌对氟吡菌胺抗性发生动态,河北省农林科学院植物保护研究所2012~2016年自河北、内蒙古、辽宁、吉林、黑龙江等地区采集分离到马铃薯晚疫病菌520个菌株,采用菌丝生长速率法检测供试菌株对氟吡菌胺的敏感性,并以茎叶喷雾法评价了9种生产上常用药剂对马铃薯晚疫病的田间防治效果。

摘要： 生防菌108、158、162、T6分离自内蒙古马铃薯植株及其土壤,本研究测定了4株生防菌对马铃薯晚疫病菌菌丝生长、游动孢子释放、游动孢子萌发、孢子囊萌发产生芽管的抑制作用.试验结果表明:4株生防菌对马铃薯晚疫病菌的菌丝生长、游动孢子释放和游动孢子萌发有明显的抑制作用.其对菌丝生长的抑制作用较高,抑菌带宽度均在11.3～18.0mm,生防菌发酵液浓度在10-1时生防菌对游动孢子释放的抑制率为90.7％～78.4％,对游动孢子萌发的抑制率为82.1％～59.2％.其中生防菌158抑制作用为最好,最高抑菌带宽度可达到18.2mm,对游动孢子释放的抑制率为90.7％,对游动孢子萌发的抑制率为82.1％,其次是菌株T6.4株生防菌对马铃薯晚疫病菌的孢子囊萌发产生芽管抑制作用都相对较弱.

摘要： 测定了117株采自甘肃省7市12县区的马铃薯晚疫病菌对甲霜灵的敏感性,结果表明,71株晚疫病菌表现高抗,占60.68％;14株晚疫病菌表现中抗,占11.97％;32株晚疫病菌表现敏感,占27.35％;甘肃省除采自临夏州的马铃薯晚疫病菌对甲霜灵表现敏感外,其余各地的菌株对甲霜灵已产生不同程度的抗药性.

摘要： 从我国北方五省采集的马铃薯晚疫病菌,采用菌丝生长速率法和叶盘漂浮法测定其对甲霜灵的敏感性,采用叶盘漂浮法测定其对精甲霜灵的敏感性,结果表明:我国北方五省马铃薯晚疫病菌田间已普遍对甲霜灵及精甲霜灵产生抗性.以菌丝生长速率法检测的380株和叶盘漂浮法检测的227株晚疫病菌对甲霜灵的抗性频率分别为80％和74％,叶盘漂浮法检测的96个菌株中对精甲霜灵抗性菌株占54.2％。

摘要： 反季马铃薯种植面积在云南省增长较快，但晚疫病为害十分严重。对2005^2008年云南省反季马铃薯产区的晚疫病菌群体的遗传结构如交配型、甲霜灵敏感性、生理小种、mtDNA单倍型进行了研究。云南反季马铃薯晚疫病菌群体的交配型主要由自育型(SF)组成，A2交配型和A1菌株发生频率较低。晚疫病菌甲霜灵高抗、中抗和敏感菌株共存，抗性菌株比例较高。反季马铃薯晚疫病菌可以克服已知的12个抗性基因，生理小种组成类型较少，但均是高度复合的小种，含有9～12个毒性因子。mtDNA单倍型非常单一，只有Ia被检测到。反季马铃薯晚疫病菌群体交配型组成复杂、致病性强，自育型菌株可能在云南晚疫病菌群体的演替中起主要的作用。研究结果还揭示出当前云南省反季和大春马铃薯晚疫病菌群体间没有明显的时空和地理差异。

摘要： 采用叶盘法测定了22种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌的室内毒力.结果表明,氰霜唑、嘧菌酯·苯醚甲环唑、嘧菌酯、烯酰吗啉、吡唑醚菌酯、双炔酰菌胺、唑胺菌酯、嘧菌酯·百菌清和吡唑醚菌酯·代森联对马铃薯晚疫病菌的毒力较高,有效抑制中浓度( EC50)小于1μg a.i/ml;霜脲氰·代森锰锌、百菌清、霜霉威和丙森锌的毒力较低,有效抑制中浓度(EC))大于10μg a.i/ml.

摘要： 采用生长速率法比较著菌清等6种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌的抑菌效果.结果表明,薯菌清对马铃薯晚疫病菌的抑菌效果最好,在400～1 200 mg/L浓度下,相对抑菌率达99.47％～100％,LC50为19.95 mg/L,其毒力分别是70％乙磷铝锰锌24.55倍、72％杜邦克露16.98倍、64％杀毒矾16.60倍、70％代森锰锌的16.65倍,具有较好的研究和开发前景.

摘要： 本文论述了对2004年7月采自河北省围场县甘沟门、棋盘山、哈里哈村和围场县马铃薯研究所试验地及温室的26个马铃薯晚疫病菌株进行甲霜灵敏感性评价.敏感性测定结果表明,在26个被测菌株中高抗菌株23个,占被测菌株的88.5％;高度敏感菌株、敏感菌株和中抗菌株各1个,分别占被测菌株的3.85％.对甲霜灵高抗菌株在病菌群体中占绝对优势,而且抗性程度很高,浓度为100μg/ml的甲霜灵对46.2％的被测菌株没有任何抑制效果.高抗菌株W041901的EC50值为352.8,高敏感菌株的EC50值为0.09945.

摘要： 通过对由具有6个无毒基因不同表现型的马铃薯晚疫病菌构建的4个混合池进行cDNA-AFLP分析、共获得85个与无毒基因相关的差异表达片段,其中与无毒基因Avr1、Avr2、Avr3-Avr10-Avr11、Avr4相关的差异表达片段分别为20,28,16和21个.将这些差异表达片段对20个晚疫病病菌个体进行无毒基因差异表达验证,得到无毒基因连锁群Avr3-Avr10-Avr11的修选片段1个,即A11T13Avr3-10-11S157;无毒基因Avr4的候选片段2个,即A24T19Avr4S125和A24T24Avr4S144.Blast分析表明:A11T13Avr3-10-11S157与马铃薯晚疫病菌正萌发孢子囊(germinating sporangium)EST(expressed sequence tag)库中的序列PG001F10.XT7同源;A24T19Avr4125与晚疫病菌正萌发泡囊(germinating cyst)EST库中的PH051G10.X17部分序列完全一致;未发现与A24T24Avr4S144同源的序列,说明此序列可能为一新的马铃薯晚疫病菌EST.A24T194Avr4S125与EST PH051 G10.XT7的序列一致性表明选择正工萌发的孢囊时期鉴定无毒基因的可行性,也为进一步快速获得全长无毒基因Avr4及进行功能验证奠定了基础.

摘要： 本文研究了甲霜灵、霜脲氰、氟吗啉、烯酰吗啉、阿米西达等5种杀菌剂在离体条件下对马铃薯晚疫病菌菌丝生长、孢子囊产生、释放游动孢子、游动孢子萌发等不同发育阶段的影响.结果表明,甲霜灵对其抗性菌株的菌丝生长无抑制作用,而对野生敏感菌株的活性较高,优于其他4种药剂,但这4种药剂对抗甲霜灵菌株和野生敏感菌株有相同的活性;在不完全抑制病菌菌丝生长的浓度下,这些药剂均不影响病菌单位菌落面积上的孢子囊产生量;5种药剂均能抑制病菌孢子囊释放游动孢子的过程,其中对阿米西达最敏感;甲霜灵不影响病菌游动孢子萌发,而另外4种药剂均能在较低浓度下抑制游动孢子萌发.因此,另外4种药剂可作为甲霜灵的替代药剂用于马铃薯晚疫病的防治。

摘要： 本文采用RAPD技术分析重庆不同马铃薯产区的晚疫病菌群体结构差异，探讨病菌的遗传谱系与地理分布之间的关系。研究结果表明，菌株间显示了DNA指纹的多态性，供试菌株扩增的条带分子量大小在500～2000bp之间。经UPGMA聚类分析，在0.80遗传相似水平下，供试菌株分为6个遗传谱系，其中谱系L1、L2、L3为优势谱系。重庆晚疫病菌的群体遗传结构较简单，菌株的遗传谱系与地理分布之间表现一定的相关性。

摘要： 本发明公开一种防治马铃薯晚疫病的药剂组，包括用于马铃薯种薯的a液、用于幼苗的b液和用于块茎形成期至收获期的c液；所述a液的原料包括有天麻根系提取液、MgCl

摘要： 本发明涉及马铃薯晚疫病菌细胞色素b基因Cytb核苷酸点突变的鉴定及其在杀菌剂吡唑醚菌酯抗性检测中的应用，具体公开了两种快速鉴定马铃薯晚疫病菌Cytb基因406位核苷酸突变对吡唑醚菌酯产生抗性的分子检测方法及其专用引物。所述突变位点指马铃薯晚疫病菌中Cytb基因自5’末端起第406位核苷酸为A纯合，由此导致Cytb蛋白自N端起第136位氨基酸为纯合的精氨酸。本发明提供的分子检测方法灵敏度高、特异性强、检测周期短，可以实现马铃薯晚疫病菌对吡唑醚菌酯抗性菌株的快速鉴定，高通量监测田间马铃薯晚疫病菌对吡唑醚菌酯的抗性发生及发展情况，为我国马铃薯晚疫病的发生流行和抗性治理提供理论指导。

摘要： 本发明属于植物抗病育种技术领域，尤其是涉及一种马铃薯晚疫病菌生理小种的鉴定方法及其应用。本发明中马铃薯晚疫病菌生理小种的鉴定方法包括以下步骤：(a)设置病圃田；(b)将马铃薯寄主材料在培养基上培养，再进行水培，形成水培苗；(c)将水培苗移栽至步骤(a)中的病圃田；(d)对步骤(c)中的马铃薯进行病害调查，记录马铃薯晚疫病生理小种的类型。本发明选用自然病圃开展实验研究，兼顾了科学有效和环境友好的优点，整个实验过程对专业技术要求不高，操作简单可行，将实验后半部分移至大田进行鉴定，实验效果更为显著，缩短了实验时长，同时提高了实验准确度。

摘要： 本发明公开了一种马铃薯晚疫病菌LAMP检测引物及其可视化检测方法，专用于马铃薯晚疫病菌特异检测。主要采用设计了一种马铃薯晚疫病菌的LAMP引物F3、B3、FIP、BIP。经过LAMP恒温扩增后显色反应或琼脂糖凝胶电泳检测，可观察到绿色荧光或出现LAMP特征性的梯形带。所发明的LAMP引物及其用法可被用于生产实践中马铃薯晚疫病菌感染的植株的快速、灵敏、准确的检测，同时可用于田间病害的早期诊断和病菌的监测和鉴定，为马铃薯晚疫病的防治提供可靠的技术和理论依据。

摘要： 本发明属于微生物领域，具体涉及一种马铃薯晚疫病菌单孢子囊分离方法。在已有的悬浮液分离方法的基础上，利用单个孢子囊含有多个游动孢子，且每个游动孢子遗传物质相同的特点，分离获得单个孢子囊后，采用低温刺激其释放游动孢子，形成了一套分离单个孢子囊的新方法。改进后的方法成功率提高了近5倍，操作时间减少了一半，同时操作难度也大大降低，是病原群体研究试验中快速、大批量分离单孢子囊的一种行之有效的方法。

摘要： 本发明提供一种快速提取马铃薯晚疫病菌单个孢子囊DNA的方法。利用毛细玻璃管的毛细现象获取单孢子囊后，利用改进的CTAB法直接提取单个孢子囊的DNA。单个孢子囊所含有的蛋白及多糖等杂质较少，因此无需利用酚‑氯仿‑异戊醇去除，进而大大减少了DNA在繁琐操作过程中的丢失。可在较短时间内高效提取晚疫病菌的纯DNA。

摘要： 本发明提供两株麦宾草内生真菌Epichloe bromicola，保藏编号分别为：CGMCC No.22448和CGMCC No.22449。本申请人首次采用平板菌丝抑制法测试了不同麦宾草内生真菌粗浸膏对马铃薯晚疫病菌的抑制活性。通过活性抑制实验，麦宾草内生真菌菌株1、8对马铃薯晚疫病菌的抑制率强；将这两株菌进行了保藏。另外申请人通过离体叶片实验测试了麦宾草内生真菌菌株1和8的粗浸膏对马铃薯晚疫病具有不同程度的防治作用。且这两株内生真菌粗浸膏可能具有低的毒性。因此麦宾草内生真菌菌株1、8可作为极有前景的植物源杀菌剂。

摘要： 本发明提供马铃薯晚疫病菌及其所致植物病害的防治方法。所述方法包括将异硫氰酸烯丙酯和/或其控释系统，如控释胶囊、缓释颗粒剂、可湿性粉剂等施用于种植植物的土壤中，尤其是在种植前施用。本发明提供的异硫氰酸烯丙酯控释系统对马铃薯晚疫病菌的防治效果好，可长效控制该病害，减少用药次数，降低用药成本。单独使用异硫氰酸烯丙酯能够有效控制马铃薯晚疫病菌，且持效期长达2个月。

摘要： 本发明涉及一种马铃薯晚疫病菌培养基及其制作方法，属于卵菌培养领域，所述的马铃薯晚疫病菌培养基包括由黑麦汁、番茄汁、碳酸钙组成的混合液和琼脂条，制作的具体步骤为：称取黑麦，加入适量水后在高压灭菌锅内灭菌，灭菌后的黑麦加水打碎，煮沸后进行过滤得到黑麦汁；将番茄切成小块后打碎，制成番茄原汁，番茄原汁与清水按体积比1:1混合得到番茄汁；在番茄汁中按比例加入碳酸钙，然后将黑麦汁与番茄汁按比例混合制成混合液，在混合液中按比例加入琼脂条，用0.1%的氢氧化钠溶液调节pH值，灭菌后完成培养基的制作。本发明培养基能有效促进马铃薯晚疫病菌的生长，且能提高马铃薯晚疫病菌的产孢能力，明显增加产孢量，制备方法简单，制作时间短。

摘要： 本实用新型涉及一种快速剥离马铃薯晚疫病菌菌丝的简易工具，包括竹签、胶带；所述竹签经过胶带进行固定，竹签两端直径为0.47mm～0.64mm，竹签与竹签间距为0.83mm～1.64mm，竹签宽度为1.50mm～2.00mm，竹签长度为63.40mm～64.20mm；该工具可适应不同直径的培养皿，将培养皿边缘上的菌丝剥落，从而将菌丝从培养基表面完整剥离，避免菌丝剥离不干净，提高马铃薯晚疫病菌菌丝的利用率，降低孢子囊损失量，提高试验效率；且制作简便，便于操作，每皿马铃薯晚疫病菌与耙式竹签一一对应，避免交叉污染，解决采用一个刮菌器需高温消毒、冷却使用、剥离效果一般、试验效率低的问题；使用后可回收灭菌、循环使用，降低能源消耗。