摘要:
目的 探讨膀胱癌组织中二肽基肽酶-4(DPP4)的表达,以及其对膀胱癌增殖,迁移和侵袭的以及顺铂化疗敏感性调节.方法 收集江苏省人民医院32例膀胱癌患者的根治性膀胱切除术后的病理标本,包括膀胱癌组织及癌旁组织.使用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测DPP4在膀胱癌组织和细胞株中的表达.在BIU87细胞系中转染DPP4小干扰RNA(siRNA)及其阴性对照,分组为DPP4敲低组(si-DPP4)和对照组(si-NC),通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验,细胞克隆,划痕实验和Transwell实验分别观察DPP4对膀胱癌增殖,迁移和侵袭的影响.通过蛋白质印迹法(Western blot)法检测DPP4蛋白表达情况和顺铂耐药实验验证DPP4对膀胱癌化疗敏感性的影响.结果 RT-qPCR结果表明DPP4在膀胱癌组织中表达水平高于正常组织表达水平,差异有统计学意义(t=3.90,P<0.01);膀胱癌细胞系中表达水平(2.55±0.29、1.54±0.23)高于人正常膀胱上皮细胞系(1.00±0.03),差异有统计学意义(=9.30、3.92,P<0.01),生存分析显示DPP4高表达与预后不良明显相关(P<0.05).与对照组比较,DPP4敲低组的细胞增殖能力(0.84±0.02,0.87±0.02)低于敲低对照组(0.92±0.02),差异有统计学意义(t=5.08、3.65,P<0.05)、DPP4敲低组的克隆数[(203.98±6.73)、(252.77±5.83)个]低于敲低对照组[(351.64±8.53)个],差异有统计学意义(t=23.53、16.57,P<0.01)、DPP4敲低组的迁移能力(2.24±0.43,3.12±0.47)低于敲低对照组的迁移能力(7.59±0.44),差异有统计学意义(t=15.11、12.05,P<0.01);DPP4敲低组的侵袭数目[(147.23±8.71)、(179.19±9.83)个]低于敲低对照组[(372.21±18.52)个],差异有统计学意义(t=19.02、15.94,P<0.01)能力下降.顺铂药物敏感性实验表明,DPP4敲低组(18.63±1.40、19.56±1.47)膀胱癌细胞顺铂半数抑制浓度(IC5o)值低于敲低对照组(26.21±1.78),差异有统计学意义(t=5.78、4.98,P<0.01),并且在同时应用顺铂和DPP4抑制剂西他列汀时IC50值(16.96±1.10)低于顺铂单药对照组IC50值(23.62±1.88),差异有统计学意义(t=5.284,P<0.01).结论 敲低DPP4基因可以通过抑制膀胱癌细胞的增殖,迁移和侵袭能力,同时增加顺铂化疗敏感性,最终限制膀胱癌进展.