顶体酶

摘要： 目的 探讨解脲脲原体(Uu)感染对男性不育患者精子血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR2)表达和精子顶体酶活性的影响.方法 参照世界卫生组织(WHO)标准方法对175例精液标本进行精液常规分析,其中正常生育组30例,不育男性145例.Western blot检测VEGF蛋白在人精子中的表达,免疫荧光观察VEGFR2在人精子上的定位,采用改良明胶底物膜法检测精子顶体内顶体酶(arcosin)活性(arcosin阳性反应率、arcosin活性强度).结果 145例男性不育症患者中精液Uu阳性47例,阳性率32.41％(47/145).Uu阳性不育组的精子VEGF/GAPDH平均光密度均明显低于Uu阴性不育组和正常生育组(P＜0.05).Uu阳性不育组的精子VEGFR2阳性率明显低于Uu阴性不育组和正常生育组,经统计学分析差异具有统计学意义(P＜0.05).Uu阳性不育组的arcosin活性(arcosin阳性反应率、arcosin活性强度)明显低于Uu阴性不育组和正常生育组(P＜0.05).相关性分析提示精子VEGF蛋白表达量与arcosin活性存在正相关性;精子VEGFR2阳性率与arcosin活性存在正相关性.结论 Uu感染阳性不育患者精子VEGF蛋白及其受体VEGFR2表达降低伴随arcosin活性(arcosin阳性反应率、arcosin活性强度)减弱.

摘要： Objective To study the effects of Ureaplasma urealyticum (Uu) on the level of DCXR expression and apoptosis in human spermatozoa. Methods According to semen analysis referred to WHO standard, 145 cases were assigned in infertile group. Western blot was used to measure the level of DCXR expression on spermatozoa. The localization of this protein on human spermatozoa was determined by indirect immunofluorescent staining using anti-DCXR antibody. The sperm apoptosis was assayed with TUNEL. After the treatment of sensitive antibiotics, the changes of indicators before and after treatment for Uu infection were compared. Results The level of DCXR protein expression and the DCXR-positive rate in Uu positive group were lower than those in Uu negative group. After treatment, the level of DCXR protein expression and the DCXR-positive rate were significantly higher than before therapy in Uu positive group (P＜0.05). The sperm apoptosis rate in Uu positive group was significantly higher than Uu negative group; after treatment, the sperm apoptosis rate was significantly reduced in Uu positive group (P＜0.05). Conclusion Uu infection may affect the level of DCXR protein expression and sperm apoptosis that influence fertility. After effective treatment of Uu infection, the sperm protein DCXR expression and sperm apoptosis would be obviously improved.%目的 探讨解脲脲原体(Uu)感染对男性不育患者精子膜蛋白双羟基/L-木酮糖还原酶(DCXR)表达和精子凋亡的影响.方法 参照世界卫生组织(WHO)标准方法对145例精液标本进行精液常规分析.Western blot和免疫荧光分别检测人精子DCXR蛋白的表达和定位,采用TUNEL法检测精子凋亡.对Uu感染阳性者进行敏感抗生素治疗,分析治疗前、后的不育症患者精液各项指标的变化.结果 Uu阳性不育组精子DCXR/β-actin平均光密度和精子DCXR阳性率均低于Uu阴性不育组(P＜0.05),治疗后Uu阳性不育组的DCXR/β-actin平均光密度和精子DCXR阳性率均明显高于Uu阳性不育组治疗前,差异有统计学意义(P＜0.05).Uu阳性不育组的精子凋亡率高于Uu阴性不育组,治疗后Uu阳性不育组的精子凋亡率明显低于Uu阳性不育组治疗前,差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析提示精子DCXR蛋白表达量和精子DCXR阳性率分别与精子凋亡率呈负相关性(r=-0.427、-0.562,P＜0.01).结论 Uu感染阳性导致精子DCXR蛋白表达减少、精子DCXR阳性率降低和精子凋亡率升高,Uu感染合理治疗后精子DCXR蛋白表达和精子凋亡有明显改善;精子DCXR蛋白的表达具有保护精子并减少精子凋亡率的作用.

摘要： 试验在(18L:6D)光照节律下,分别利用50、100、150 Lx光照强度,探究其对种公猪处理时,精子顶体酶活性、精液中SOD浓度的变化情况。试验时间为2017年11—12月的短光照季节。试验结果表明:顶体方面,不同光照强度下,处理第90天时,精子顶体酶表达量分别为111.13、127.11和181.18 mU/mL与第0天时其含量数值相比差异显著(P<0.05);SOD方面,在(18L:6D)光照节律下,第90天时,SOD含量分别为83.61、256.03和237.85 mU/mL,与50 Lx组相比,100 Lx组和150 Lx组SOD含量数值均显著增加(P<0.05),其中100 Lx组,SOD含量数值最高。

摘要： 目的:探讨人精子血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(VEGFR2)表达和精子顶体酶活性的关系.方法:收集92例精液标本,按照世界卫生组织(WHO)颁布的标准对精液进行常规分析检测.免疫印迹法检测VEGF蛋白在人精子中的表达,免疫荧光法观察VEGFR2在人精子上的定位,采用改良明胶底物膜法检测精子顶体内顶体酶活性(顶体酶阳性反应率、顶体酶活性强度).结果:免疫印迹检测结果显示,不育各组精子VEGF/GAPDH平均光密度均明显低于正常生育组;免疫荧光染色检测结果显示,不育各组精子VEGFR2阳性率均明显低于正常生育组;不育各组的顶体酶活性(顶体酶阳性反应率、顶体酶活性强度)与正常生育组比较均有显著下降.相关性分析提示精子VEGF蛋白表达量与顶体酶活性存在正相关性;精子VEGFR2阳性率与顶体酶活性存在正相关性.结论:男性不育患者精子VEGF蛋白及其受体2表达降低并伴随顶体酶活性减弱.

摘要： 目的:探讨精子顶体酶活性对辅助生殖技术治疗方案选择中的影响及其意义.方法:选择2014年～2015年在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心(成都西囡妇科医院)门诊就诊的2120例不育夫妇的男性,对其进行精液常规分析和精子顶体酶活性检测.根据检测结果分为顶体酶正常组和异常组,比较两组在辅助生殖技术治疗方案选择中的差异.结果:①硕体酶活性正常组的精子浓度、前向运动精子百分比、精子活动率与顶体酶活性异常组相比,其差异具有统计学意义(P＜0.05);②顶体酶活性正常组和异常组在辅助生殖技术治疗方案选择中的差异无统计学意义(P＞0.05);③2014年～ 2015年间,采用辅助生殖技术治疗方案者的精子顶体酶活性下降,其差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:精子顶体酶活性正常组与异常组之间的精液常规参数存在显著性差异,但是精子顶体酶活性检测对辅助生殖技术治疗方案选择的临床指导意义不明确,精子顶体酶活性异常者也能选择与正常者一致的辅助生殖技术治疗方案;精子顶体酶活性在2年间呈逐年下降趋势,其对辅助生殖技术治疗后受精结局的影响有待进一步研究.

摘要： 目的:观察强精方对肾精亏虚证少弱精症患者精子密度、精液活力、顶体酶和INHB的影响。方法:将66例本病患者随机分为治疗组和对照组,每组33例,治疗组予强精方治疗,对照组予六味地黄丸治疗,观察两组患者精液常规、顶体酶、血清抑制素B(INHB)。结果:治疗后,两组患者的精子浓度、精子活力均高于治疗前,且治疗组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者顶体酶、INHB水平均高于治疗前,且治疗组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组1对夫妻怀孕,治疗组4对夫妻怀孕;治疗组治愈率为12.5%,总有效率为93.8%。对照组治愈率为3.3%,总有效率为40.0%,治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:强精方治疗肾精亏虚证少弱精症有较好疗效,能改善精子密度和活力,并提高顶体酶以及INHB的水平。

摘要： 采用酶联免疫吸附法测定血清睾酮、精子顶体酶、睾丸组织中超氧化物歧化酶和丙二醛含量;CASA系统检测精子的活力指标;TUNEL法检测睾丸组织中生精细胞的凋亡情况.结果表明,大鼠生殖系统所受到的即时损伤与修复与辐照脉冲的场强和脉冲数有关,场强越高,脉冲数越大,损伤越明显,修复越困难.结果提示,在实验条件下,场强的影响比脉冲次数的影响更显著.%The testosterone, superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), and acrosin activity were measured by ELISA. The cell apoptosis of testicular was observed by TUNEL. The sperm motility was analyzed by CASA. The results showed that the harms caused by W-EMP exposure, and the subsequent recovery were dependent on the intensity and pulse number of W-EMP. With the increase of electric intensity and pulse number the impact of W-EMP exposure increased, which leaded to a slower recovery rate. The results indicates that compared with the pulse number, the electric intensity in present work has much stronger impact on the reproductive system.

摘要： 近年来，不孕不育发生率在逐年增加。据WHO统计预测，不孕不育将成为仅次于肿瘤和心脑血管疾病的第三大疾病。本文将从精子顶体酶的生理作用、影响因素、对临床的诊断价值及治疗四个方面对国内外近年来与顶体酶活性研究相关的文献进行综述。

摘要： 近年来，不孕不育发生率在逐年增加。据WHO统计预测，不孕不育将成为仅次于肿瘤和心脑血管疾病的第三大疾病。一直以来，精液常规分析都被作为评价男性生育能力的主要指标，但是精子的数量与活动能力并不能完全反映精子的受精能力。本文将从精子顶体酶的生理作用、影响因素、对临床的诊断价值及治疗四个方面对国内外近年来与顶体酶活性研究相关的文献进行综述。

摘要： 目的:观察黄精赞育胶囊治疗男性不育症患者项体酶活性异常的临床疗效。方法:观察32例男性不育症患者服用黄精赞育胶囊前后顶体酶活性、精子动态学相关参数的前后变化。结果:32例患者经过三个月治疗,比较前后项体酶活性定量、精子密度、a级精子、a+b级精子,差异有统计意义。结论:黄精赞育胶囊可以较明显提高精子顶体酶活性及精子动态学各项参数,改善精子质量。

摘要： 目的:研究生精冲剂临床治疗顶体酶异常男性不育症的方法及疗效。方法:观察48例男性不育症患者生精冲剂治疗前后顶体酶、精液参数的变化情况。结果:治疗1个疗程(3个月)后,总有效率83.3％。治疗后精子顶体酶、精液质量较治疗前明显改善。

摘要： 一种精子顶体反应试剂盒，包括组织片保存液、荧光结合物、荧光封固液。所述组织片保存液每100ml含有戊二醛0.5ml、甲醇5ml、乙醇2ml、聚乙烯吡咯酮PVP0.2g、福尔马林1ml，余量为纯净水。该试剂盒可进行精子诱发顶体反应检测，如不进行钙离子诱发，则可用于精子顶体反应状况评估、精子顶体完整性测定。组织片保存液可让整个精子诱发顶体反应检测试验过程分成两部分进行，保存第一部分实验得到的样品和试验结果，在随后72小时内的任意时间里进行第二部分的操作都不会影响最终的试验结果，缓解工作强度。荧光染色系统的荧光强、可稳定15天不衰减，检测结果更加稳定、易判读，也保证了结果的可重复性。该试剂盒及测定方法可以临床应用推广。

摘要： 一种精子顶体反应试剂盒，包括组织片保存液、荧光结合物、荧光封固液。所述组织片保存液每100ml含有戊二醛0.5ml、甲醇5ml、乙醇2ml、聚乙烯吡咯酮PVP0.2g、福尔马林1ml，余量为纯净水。该试剂盒可进行精子诱发顶体反应检测，如不进行钙离子诱发，则可用于精子顶体反应状况评估、精子顶体完整性测定。组织片保存液可让整个精子诱发顶体反应检测试验过程分成两部分进行，保存第一部分实验得到的样品和试验结果，在随后72小时内的任意时间里进行第二部分的操作都不会影响最终的试验结果，缓解工作强度。荧光染色系统的荧光强、可稳定15天不衰减，检测结果更加稳定、易判读，也保证了结果的可重复性。该试剂盒及测定方法可以临床应用推广。

摘要： 本发明属于精子顶体酶测量技术领域，公开了一种人体精子顶体酶药盒，将明胶混合液制成溶胶状基质液，涂制固定成均匀底膜，显示顶体酶(Acroin)的活性；将精子在超薄明胶底膜上孵育，离心及磷酸盐缓冲液清洗去除膜抑制因子精子顶体解聚，释放并溶解‑明胶基质膜，形成围绕在精子前部周围的孔区；通过光镜观察，光线穿透孔区，在精子头周围看到明亮的晕环，在染色后深紫蓝色背景的衬托下，观察到酶反应，测量每个亮环直径的大小来估计单个精子顶体酶活性的强弱。本发明方法简单且成本低，准确计算顶体酶的阳性反应率，为试管婴儿技术筛选出活性更强的精子，提高成功率。

摘要： 本发明公开了精子顶体酶的快速提取方法及其活性的流式检测方法，特点是提取方法包括将精液加入到离心管中，离心吸去精浆部份，保留下层精子沉淀，然后加入破膜液，使精子沉淀团均匀悬浮后，离心去掉上清，然后加入提取液，使精子悬浮，再离心3收集上清，即获得顶体酶提取物，其活性的流式检测方法为通过多肽或蛋白微球偶联技术和多肽或蛋白荧光标记技术，采用将顶体酶酶切底物进行荧光标记后连接到微球上，一定粒径的荧光微球能被流式细胞仪所识别，荧光强弱直接反应了样本中顶体酶活性的高低，优点是通过快速提取和流式检测结合，使得检测效率大大提高，增加了检测的灵敏性。

摘要： 本发明公开了一种基于电化学检测精子顶体酶活性的方法，其包含：将精子顶体酶底物修饰的电极分别于含有不同浓度精子顶体酶标准样品中充分浸渍，并分别测试所述电极的阻抗，由此建立活性精子顶体酶浓度与电极阻抗的标准曲线；以及，将所述电极分别于含有未知浓度精子顶体酶的待测样品中充分浸渍，并测试所述电极的阻抗，再依据所述标准曲线而获知所述待测试样中精子顶体酶的浓度；其中所述标准样品和待测样品均以适于使精子顶体酶专一结合并水解所述精子顶体酶底物的缓冲液作为溶剂。本发明还公开了一种试剂盒。藉由本发明的试剂盒及检测方法，能快速(3min左右)、可靠、灵敏(检测限可达0.001μM)且低成本的检测精子顶体酶的活性。

摘要： 本发明公开了一种基于LSPR检测精子顶体酶活性的方法、试剂盒及其应用。其中，该试剂盒包含：功能化纳米金标记精子顶体酶底物，包含纳米金以及通过化学键合和/或物理吸附方式固定在纳米金表面的精子顶体酶底物；以及，适于使所述精子顶体酶底物与精子顶体酶专一结合并进行反应的缓冲液。藉由本发明的试剂盒及检测方法，能快速(约3分钟左右)、可靠、灵敏且低成本的检测精子顶体酶的活性。

摘要： 本发明涉及一种精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，属于体外检测技术领域。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒包括：链霉亲和素带有Tosyl官能团磁颗粒、化学发光标记物标记的精子顶体酶抗体和偶联标记物标记的精子顶体酶抗体。本发明的精子顶体酶化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成对精子顶体酶的检测。这种化学发光免疫分析试剂盒与仪器配套，缩短了临床检测所需的时间。这种化学发光免疫分析试剂盒的检测精度较高。

摘要： 本发明提供了一种精子顶体酶的提取方法，所述方法包括以尿素溶液作为萃取剂，采用液‑固萃取技术将精子顶体酶萃取至液体中，并添加了顶体酶稳定剂保持酶的活性；本发明通过优选萃取剂和顶体酶稳定剂，并优化浓度配比，使其不损失酶活的前提下简化操作步骤，使顶体酶保存期达到14天以上；本发明工艺简单，可实现工业化大规模生产，可为企业带来良好的经济效益，具备广阔的前景。

摘要： 本发明属于精子顶体酶测量技术领域，公开了一种人体精子顶体酶药盒，将明胶混合液制成溶胶状基质液，涂制固定成均匀底膜，显示顶体酶(Acroin)的活性；将精子在超薄明胶底膜上孵育，离心及磷酸盐缓冲液清洗去除膜抑制因子精子顶体解聚，释放并溶解‑明胶基质膜，形成围绕在精子前部周围的孔区；通过光镜观察，光线穿透孔区，在精子头周围看到明亮的晕环，在染色后深紫蓝色背景的衬托下，观察到酶反应，测量每个亮环直径的大小来估计单个精子顶体酶活性的强弱。本发明方法简单且成本低，准确计算顶体酶的阳性反应率，为试管婴儿技术筛选出活性更强的精子，提高成功率。

摘要： 一种治疗顶体酶活性异常的中药汤剂，其组成原料重量份为：淫羊藿15‑25、黄芪15‑25、紫河车15‑25、山萸肉10‑20、谷芽10‑20、神曲10‑20、炒山楂15‑25、黑蚂蚁5‑15、阿胶10‑20、黑芝麻10‑20、鸡子黄6‑12、早莲草6‑12、补骨脂15‑25、金樱子5‑15、赤芍6‑12、合欢皮6‑12、生牡蛎5‑15、龙骨6‑12、葫芦巴6‑12、龙眼15‑25、青筋藤6‑12、鸡血藤5‑15、益智仁5‑15、猪屎豆6‑12、羊乳6‑12。本发明具有补益肝肾，固肾益气，补脾利尿的作用，可有效治愈精子顶体酶活性异常患者，经多例临床验证治愈率达94%。