青枯菌

摘要： 为了挖掘番茄青枯病抗性基因,对青枯菌侵染前后的不同番茄自交系进行转录组测序(RNA-seq)。结果发现,在12个样本中共获得75.02 Gb的高质量数据,以差异倍数(FC)≥2且错误发现率(FDR)<0.01为标准,在抗、感番茄中分别获得970,695个差异表达基因(DEGs),共计1312个,占基因总数的3.71%。其中,上调基因数目分别为457,450个,共计693个;下调基因数目分别为513,245个,共计621个。这些DEGs中,有836个材料特异DEGs。通过GO和KEGG注释,这些DEGs主要分为代谢、调控、响应、结合和催化等47个功能组和DNA复制、次生物质合成、植物-病原物互作、信号转导等88个代谢通路,涉及4个NBS类抗病基因、6个植病互作基因、11个植物激素信号转导基因、22个防御反应基因、32个蛋白激酶、65个转录因子和多个其他重要功能基因,表明这些基因在响应Rs方面扮演着重要角色。启动子分析发现,这些基因含有多个防御与胁迫响应相关元件。选取50个代表基因进行RT-qPCR验证,发现超过1/2的基因表达变化趋势与RNA-seq结果一致。Solyc02g086980.3和Solyc04g011670.3可能参与抗病反应,Solyc01g073985.1、Solyc09g092580.4、Solyc09g098100.4和Solyc10g081300.1可能参与感病反应。这些基因表达谱有助于认识番茄青枯病抗性分子基础,进而加快基因改良和分子育种应用。

摘要： [目的]准确测定青枯雷尔氏菌的菌液浓度。[方法]选用胰蛋白胨大豆肉汤培养基和生理盐水为稀释液稀释青枯雷尔氏菌RsA(烟草分离源)和RsB(番茄分离源)菌悬液,利用血球计数板计数法测定菌悬液浓度,并利用分光光度计法测定菌悬液在600 nm处的吸光度值,建立青枯雷尔氏菌菌悬液浓度与吸光度值间的线性关系。[结果]线性回归方程表明:胰蛋白胨大豆肉汤培养基和生理盐水作为稀释液测定菌悬液浓度结果差异无统计学意义(P>0.05),但RsA和RsB菌悬液的吸光度值具有差异,回归方程分别为y=6.5784x+0.15828(r^(2)=0.99899)和y=5.1627x-0.12582(r^(2)=0.99899),回归方程间斜率和截距均差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]建立的青枯雷尔氏菌的菌液浓度标准曲线可用于测定吸光度值后快速计算不同分离源青枯雷尔氏菌菌悬液浓度,且无需将菌悬液培养基置换为生理盐水进行吸光度测定,具有一定的便捷性和实用性。

摘要： 为探究青枯菌Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)HrcN在致病过程中的功能,分别克隆青枯菌CBM613菌株的hrcN基因并连接至pET30a和pRI-eGFP载体,转化寄主细胞,开展原核表达及亚细胞定位研究。结果显示,HrcN蛋白是T3SS的结构组分之一,具有ATP酶活性,可在胞内水解ATP酶为效应蛋白的分泌过程提供能量。蛋白亚细胞定位预测表明,青枯菌HrcN蛋白定位于细胞内膜和细胞质,激光共聚焦定位结果显示,HrcN蛋白部分在叶绿体表达,部分在细胞内膜和细胞质表达,与蛋白亚细胞定位预测结果基本一致。据此推测HrcN是一种定位于细胞内膜上的外周蛋白,该结论为后续研究青枯菌T3SS的功能及其致病机制奠定基础。

摘要： 为建立简便、快速、准确、可靠的甘薯抗甘薯瘟病的鉴定方法,研究建立了水体通气水培法和多孔定植块水培法2种鉴定技术,均能有效鉴定甘薯对甘薯瘟病的抗性.通过探索不同通气时间、接菌浓度对甘薯瘟病发生的影响,确定1×10^(7) CFU/mL菌体悬浮液和全时段通气为通气水培法进行甘薯抗甘薯瘟病鉴定的最佳条件.另外,采用1×10^(8) CFU/mL菌液接种后,使用透气保湿性佳的基质块进行定植,完成鉴定仅需7~10 d,比用土壤基质定植鉴定时间(14~21 d)缩短一半.建立的水培法丰富了甘薯抗甘薯瘟病鉴定的方法,有利于批量快速筛选抗甘薯瘟病的甘薯品种(系).

摘要： 为了解广东省花生青枯病病原菌的遗传多样性,对广东省主栽花生品种近年来发生青枯病的病株进行病原菌分离,共获得64株分离菌株,其中31株为青枯菌(Ralstonia solanacearum).遗传多样性分析,发现31株青枯菌菌株均为演化型I型.随机挑取不同分离地点的花生青枯菌菌株进行致病力测定,发现来自不同地区的青枯菌致病力有所不同,其中来自湛江市的ZKRS126菌株致病力明显具有材料特异性,对花生A300致病力强而对花生A281致病力弱.此外,进化树分析的亲缘关系较近菌株致病力也有明显差异,近缘菌株ZKRS126与ZKRS206对花生A300的致病力具有显著性差异.本研究不仅有助于广东省花生青枯病的防治与研究,而且为抗青枯病花生品种的选育和研究提供基础数据和依托材料.

摘要： 由雷尔氏菌Ralstonia solanacearum导致的青枯病是世界性重要植物病害。该病原菌主要从根部侵染植物,并在根系中繁殖扩展,堵塞维管束,阻止水分向地上部运输而导致“青枯”症状的出现。综述青枯菌的分布与危害、病原种类与生物学特性、致病性及致病机理、基因组特征及分子标记等四个方面的研究进展。

摘要： 由雷尔氏菌Ralstonia solanacearum导致的辣椒青枯病在早期难以发现,为加强对辣椒青枯病的检测,用青枯菌供试菌株GMI1000接种辣椒,从发病植株中分离出辣椒青枯菌菌株,提取病菌DNA,以其为模板,对18对引物进行特异性筛选及灵敏度检测,建立病菌PCR检测体系。结果表明,GMI1000对辣椒具有较高的致病性,18对引物中有15对引物具有特异性检测效果,最佳退火温度为60°C,模板浓度最低至10^(-1) ng/μL时仍具有检测能力。

摘要： 近期,中国科学院分子植物科学卓越创新中心上海植物逆境生物学研究中心Alberto Macho研究组在《PLoS Pathogens》上,发表了论文。该研究发现了青枯菌致病新机制,探索通过遗传改良作物抗病反应的潜力。植物在正常生长情况下,免疫系统(PTI及ETI免疫)受到抑制而不发挥作用;然而一旦感知到病原菌侵染,免疫系统会立即开展快速而高效的工作。

摘要： [背景]由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的烟草青枯病是一种重要土传病害,在我国南方烟区普遍发生.生物防控是针对烟草青枯病的一种有效防治措施,但是相关的研究报道还较少.[目的]分离云南省烟植地的青枯病原菌,筛选其拮抗菌并对其抑菌效果进行鉴定.[方法]采用平板稀释法从云南感病烟草中分离获得青枯菌,采用平板对峙法筛选青枯菌拮抗菌,筛选得到的拮抗菌通过16S rRNA基因测序比对确定菌种类型,并在实验室和大田鉴定其对青枯病的防治效果.[结果]从感病烟草茎中分离出一株强致病性青枯菌小种RS-22,该菌能侵染烟草和番茄并最终使植物死亡;筛选出12株RS-22拮抗菌,其中拮抗作用最强的是Y4;Y4被鉴定为一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其菌体和分泌物都能抑制RS-22生长;Y4根部灌根处理能显 著提高烟草和番茄对青枯菌RS-22的抗性,Y4处理能使感病烟草部分恢复正常,在云南文山州烟草种植大田施加Y4菌剂和菌剂有机肥混合物也能显著降低烟草青枯病的感病率.[结论]青枯菌RS-22具有广谱的致病性,筛选的拮抗菌Y4能显著抑制青枯菌生长,而且对青枯菌侵染植物有很好的防治效果.研究结果为进一步研究烟草青枯病的生物防控提供了新的理论依据.

摘要： 由青枯雷尔氏菌引起的青枯病是影响农作物产量的主要病害之一,而我国对青枯病的防治目前尚未发现十分行之有效的措施。因此,了解青枯菌与植物的互作模式,对开辟防治青枯病的新思路具有重要意义。笔者在国内外学者研究文献的基础上,简单归纳了植物青枯菌的分类系统及发病特征,从分子水平上阐述了青枯菌在寄主植物根细胞间隙定植的侵染过程以及致病机理,从形态学、生理生化和基因表达调控三个方面分析了植物对青枯菌的抗性机制,指出了农业防治、药剂防治、生物防治等防治青枯病措施的局限性,并简要介绍了抗青枯病分子育种的研究进展。认为种植抗青枯病的多系品种和混合品种是控制青枯病危害的有效途径,据此提出挖掘多抗原抗性基因,进而培育抗青枯病新品种是防治青枯病的重要发展方向。

摘要： 由青枯菌引起的青枯病是世界范围内严重危害马铃薯产业的细菌性病害,青枯菌能够通过Ⅲ型分泌系统分泌效应蛋白来促进侵染.因此,鉴定效应蛋白的分泌是研究其功能的重要基础.研究建立了基于腺苷酸环化酶(CyaA)报告基因的鉴定体系,克隆了Ⅲ型分泌系统效应蛋白的启动子区域及其分泌信号区域,融合表达带有CyaA报告基因及FLAG标签的重组质粒.克隆了3个不同效应蛋白的启动子区域,比较了3个启动子在转录水平上的表达差异,并鉴定了其在蛋白水平的表达丰度,并利用高效表达的启动子进行了分泌性鉴定.结果显示,rip6效应蛋白的启动子启动效率较高且蛋白表达丰度高.进一步利用rip6效应蛋白启动子进行分泌鉴定,结果显示野生型转化质粒的马铃薯接种块茎中的cAMP显著高于Ⅲ型分泌系统突变体菌株接种的马铃薯块茎的cAMP含量,证明该系统可以有效检测效应蛋白的分泌.研究为马铃薯青枯菌效应蛋白分泌建立了高效稳定的体系,为深入研究效应蛋白毒力功能奠定基础.

摘要： 为了分析青枯菌致病力表型转换调控转绿因子phcA在青枯菌FQY_4中对致病因子的调控作用，在烟草青枯菌FQY_4基因组测序的基础上，通过同源重组的方法构建没有标记的青枯菌FQY_4 phcA-突变体，并采用定量PCR方法分析了其调控的相关致病基因的表达。结果显示青枯菌FQY_4 phcA -突变体中，phcA调控的致病相关基因pme、tek、epsE、egl、xpsR和hrpB的表达受到明显的抑制，它们的Log2(RQ)值分别下调6.97, 10.14, 8.79，9.61和 9.56倍，说明phcA在烟草青枯菌FQY_4致病力的调控中起重要作用。

摘要： 以虫漆酶作为催化剂,壳聚糖和阿魏酸为底物合成壳聚糖-阿魏酸共聚物,利用FT-IR和SEM分析共聚产物的结构.抑菌性能检测出在浓度为1mg/mL时壳聚糖-阿魏酸共聚物较壳聚糖原样对青枯菌的抑菌圈提高了4.0mm. 本文通过漆酶催化氧化合成壳聚糖-阿魏酸共聚物，利用红外色谱、扫描电镜对其结构进行表征，分析了它的反应机理;通过对青枯菌的平板对峙实验发现壳聚糖-阿魏酸共聚物的抑菌性较壳聚糖有明显的提高。

摘要： 用改良的SM——1选择性培养基检测烟田杂草植物带青枯菌的情况,结果显示禾本科、茄科、旋花科、豆科等43种植物的根系,经处理后浸注接种到烟苗上,其浸注点上显示出黄斑——褐斑——叶片萎蔫——烟株枯死的病变过程,根据病变过程的时间可以分为3类致病力差异.又根据在SM—1平板上培养分离的难易程度,可以将田间杂草分为3类,极易培养分离类:胜百菊、通泉草、牛繁缕和马齿苋等,菌落圆形——椭圆形,稍突起,中央深紫红色——粉红色,边缘乳白色;难培养分离类:牛筋草、马唐草、圆果稗等13种植物;尚无法培养分离类:稀签、李氏禾等20种植物.

摘要： 本研究分别于福建省南平、三明以及龙岩地区田间烟草病株上分离获得了45个烟草青枯病菌株.经青枯菌演化型复合PCR检测,45个菌株均能够扩增得到片段大小分别为144 bp和280 bp的两条特异性扩增条带,从而表明全部分离菌株均系青枯菌演化型Ⅰ型即亚洲分支菌株.进而基于45个分离菌株对3种双糖和3种己醇氧化利用能力的检测结果:鉴定出其中43个菌株属于青枯菌生化变种Ⅲ,1个菌株属于生化变种Ⅳ,1个菌株属于非标准型生化变种(能利用山梨醇和甜醇,不能利用3种双糖和甘露醇).

摘要： 咖啡酸在自然界分布广泛,但其脂溶性较差,试验通过酯化的方法增强它们的脂溶性.研究发现咖啡酸酯不仅具有良好的抗氧化、抗肿瘤活性,而且还具有良好的抑菌性,能够有效抑制桑青枯菌的生长.因此，以咖啡酸为先导化合物，对其改性，开发出安全高效的新型脂溶性食品抗氧化剂是完全可行的。试验还进一步探究了咖啡酸酯在防治青枯病中的运用，结果显示咖啡酸甲酯、咖啡酸乙酯、咖啡酸丙酯和咖啡酸异丙酯对青枯病病原菌抑制圈为0.1-0.5cm，说明对桑青枯病有抑制作用，结果还找到了利用咖啡酸酯抑制桑青枯病菌的半致死浓度。这种方法显示咖啡酸酯在低浓度时能够有效抑制的青枯菌，是一种防治青枯病的有效方法。

摘要： 青枯菌(Ralstonia solanacearum)是引起包括辣椒在内的多种重要作物青枯病的病原细菌。青枯菌通过T3S(III型分泌系统)、T2S(II型分泌系统)等将多种毒性因子输送到胞外使植物致病。转基因抗病、培育抗性品种和生物防治是防治青枯病的主要途径。转基因抗病中，常存在转基因作物抗性范围过窄、抗性不稳定、发育异常、产量下降等不足。使用诱导型启动子来调控广谱抗性基因表达，通过诱发超敏反应提高植物抗病性是理想的基因工程策略。

摘要： 采用酸性乙醇浸提翅果油树叶片中生物碱,硅胶柱层析纯化,所得生物碱对7种细菌和3种真菌进行抑茵作用实验。结果表明：翅果油树叶片中生物碱对细菌和真菌均有一定的抑制作用,对青枯菌的抑制作用明显强于对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆茵;对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和四种青枯菌(OD1、DB1、DC1和M5)的最低抑菌浓度分别为160、320、160、160、320、160和160 μg/mL;对根霉和青霉表现出较强的抑制作用,而对曲霉的抑制作用较弱。

摘要： 本发明提出一种基于微生物组学技术筛选青枯病生防菌剂的方法及所得青枯病生防菌剂，属于微生物技术领域。该青枯病生防菌剂由Pseudomonas lurida FGD5‑2、Pseudomonas koreensis HCH2‑3和Pseudomonas rhodesiae MTD4‑1按体积比1:1:1构成，其中，P.lurida FGD5‑2具有如SEQ ID NO.1所示序列，P.koreensis HCH2‑3具有如SEQ ID NO.2所示序列，P.rhodesiae MTD4‑1具有如SEQ ID NO.3所示序列。本发明利用微生物组学技术筛选青枯病生防菌尚属首次，本次利用该方法筛选得到3株具有抗青枯病能力的菌株，通过对3株假单胞菌的溶磷活性、产生长素以及铁载体能力测试发现，3株假单胞菌均具有良好的效果；进一步还对3株假单胞菌的防病效果进行了分析，发现3株菌株无论单独或复配使用均具有良好的抗青枯病能力，可有效用于烟草青枯病防治中。

摘要： 本发明提出了一种防治植保青枯雷尔氏菌、青枯假单胞菌病害的噬菌体及其应用，所述噬菌体于2020年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2020944。该噬菌体噬菌谱广，能同时裂解青枯雷尔氏菌、青枯假单胞菌，能更有效的解决农作物种植中出现的细菌病害感染问题，可作为用于防治植保青枯雷尔氏菌、青枯假单胞菌病害的微生态制剂。

摘要： 本发明提出一种基于微生物组学技术筛选青枯病生防菌剂的方法及所得青枯病生防菌剂，属于微生物技术领域。该青枯病生防菌剂由Pseudomonas lurida FGD5‑2、Pseudomonas koreensis HCH2‑3和Pseudomonas rhodesiae MTD4‑1按体积比1:1:1构成，其中，P.lurida FGD5‑2具有如SEQ ID NO.1所示序列，P.koreensis HCH2‑3具有如SEQ ID NO.2所示序列，P.rhodesiae MTD4‑1具有如SEQ ID NO.3所示序列。本发明利用微生物组学技术筛选青枯病生防菌尚属首次，本次利用该方法筛选得到3株具有抗青枯病能力的菌株，通过对3株假单胞菌的溶磷活性、产生长素以及铁载体能力测试发现，3株假单胞菌均具有良好的效果；进一步还对3株假单胞菌的防病效果进行了分析，发现3株菌株无论单独或复配使用均具有良好的抗青枯病能力，可有效用于烟草青枯病防治中。

摘要： 本发明公开了一种快速检测鉴定茄科青枯菌侵染引起的青枯病的方法。该方法由植物病样制备、肉眼观察和PCR验证三个阶段组成，可在4小时内完成检测与鉴定，而且检测鉴定成本低。该方法突破了传统的植物细菌病害鉴定周期长、专业性强和成本较高等局限性，也克服了从国外进口的微生物鉴定系统需要专用仪器设备和耗材、成本高和鉴定周期较长的不足，将病样品的特殊表症与分子生物技术有机地结合起来，结果准确可靠，从而达到实际生产中对植物病害鉴定快速、准确的要求。

摘要： 本发明提供一种青枯菌提取组合物、提取液和木麻黄中青枯菌的鉴别方法，所述组合物包含7.5份‑8.3份氯化钠和8份‑12份蛋白胨。与现有常规技术相比，本发明具有以下优点：本发明将合适比例的氯化钠和琼脂搭配组合，含有该组合的提取液能快速从少量木麻黄植物组织中提取青枯菌，并且提取的青枯菌足以用于鉴别，特别是足以用于青枯菌试纸鉴别，为野外就地快速检测青枯菌提供了可靠手段。

摘要： 本发明公开了一种利用青枯菌复杂种性扩繁烟草青枯菌噬菌体的方法，包括：(1)挑选青枯菌噬菌体，所述青枯菌噬菌体既能够裂解宿主为烟草的青枯菌，又能够裂解宿主为其它作物的青枯菌；(2)选择扩繁宿主，采用其它作物的青枯菌作为扩繁烟草青枯菌噬菌体的宿主；(3)利用青枯菌复杂种性扩繁烟草青枯菌噬菌体，将所述青枯菌加入到CPG液体培养基中震荡培养，当吸光值OD

摘要： 本发明提供了一种花生青枯菌效应蛋白RipAU，属于植物病理和作物病害防治研究领域。花生青枯菌RS‑P.362200效应蛋白RipAU，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。在本氏烟中瞬时表达RipAU基因，能够产生过敏性坏死反应。敲除RipAU后，能够显著降低青枯菌对花生的致病性，表明RipAU作为一个毒力因子。根据酵母双杂交方法，筛选到一个RipAU的靶蛋白AhSBT1.7。本发明在揭示花生青枯菌致病机理以及花生青枯病的防治方面具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供一种花生青枯菌效应蛋白RipG7及其在花生抗青枯病中的应用，属于植物病理和作物病害防治技术领域。花生青枯菌效应蛋白RipG7的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。敲除Rip刚后，能够显著降低RS‑P.362200对花生的致病性，表明RipG7作为一个毒力因子，在花生致病过程中发挥着重要的作用。筛选到RipG7的一个靶蛋白AhGEBG，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，蛋白序列如SEQ ID No.4所示。本发明在揭示花生青枯菌致病机理以及花生青枯病的防治方面具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供一种花生青枯菌效应蛋白RipW及其在花生抗青枯病中的应用，属于植物病理和作物病害防治技术领域。花生青枯菌效应蛋白RipW的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，其编码基因核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。敲除RipW后，能够显著降低Rs‑P.362200对花生的致病性，表明RipW作为一个毒力因子，在花生致病过程中发挥着重要的作用。根据酵母双杂交方法，在花生受青枯菌诱导的cDNA文库中筛选到了RipW的靶蛋白AhPOA，其基因核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，蛋白序列如SEQ ID No.4所示。本发明在揭示花生青枯菌致病机理以及花生青枯病的防治方面具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开了一株捕食番茄青枯菌的黄色黏球菌及其在番茄青枯病生物防控中的应用。黄色黏球菌(Myxococcus xanthus)R31，保藏号为：GDMCC No：61842。本发明创新性的采用植物病原菌青枯菌作为被捕食菌，成功利用被捕食菌诱导法从所采集的土样中分离筛选到了一株黏细菌菌株R31，经鉴定为黄色黏球菌(Myxococcus xanthus)，该菌株在生长过程中能够对多株不同致病力的青枯菌进行捕食，裂解病原细菌为自身的生长提供养分。该黏细菌对青枯病菌的捕食不区分菌株的生理生化特征和生理分化，显示其对青枯菌的广谱抗性。基于捕食实验及“中蔬四号”番茄的盆栽试验，表明本发明涉及的黏细菌Myxococcus xanthus R31在番茄青枯病生物防治方面具有巨大的应用潜力。