限制性片段长度多态性

摘要： 芥菜型油菜细胞质雄性不育(CMS)系WJS01A是一种稳定不育系,其败育彻底,不受环境条件的影响。该研究从形态、细胞特征、遗传和分子生物学等方面对WJS01A进行鉴定,以揭示其败育机制,为该不育系在油菜育种中的应用提供理论基础。结果表明:(1)不育系WJS01A的花序结构与正常芥菜型油菜差异不大,但在花蕾饱满度、花朵张开度及花瓣长度和宽度方面略低于正常的芥菜型油菜;它的雌蕊发育正常,但花药、花丝缩短,致使雄蕊高度显著低于柱头,花药白化无花粉产生。(2)将WJS01A衍生的甘蓝型油菜背景不育系WNJ01A以及Polima(Pol)、Ogura(Ogu)和Kosena(Kos)不育系分别与其恢复系或保持系测交,结果显示来源于WJS01A的不育类型与Pol、Ogu和Kos等材料的恢保关系明显不同,仅Hui01可以恢复WNJ01A的育性。(3)不育系WJS01A属于无花粉囊型不育,败育时期为花药原基到孢原细胞时期。(4)线粒体不育基因多重PCR可以明显区分WJS01A、WNJ01A与Pol、Ogu、Kos,但是目前的引物组合不能区分WJS01A与正常的芥菜型油菜。(5)线粒体基因组的限制性片段长度多态性(RFLP)分析表明,在所检测的8个探针/酶组合中均可以将不育系WJS01A与其他4种细胞质雄性不育系区分开,说明WJS01A是一种显著不同于Pol、Ogu和Kos等的细胞质雄性不育类型。WJS01A的利用可以丰富和拓宽当前油菜杂种优势利用的遗传基础,为缓解当前油菜杂种优势利用中不育胞质单一性问题提供新的种质。

摘要： 目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因rs2736098、rs2075786和rs2736100位点单核苷酸多态性(SNP)与结肠癌遗传易感性的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对186例结肠癌患者和194例结肠腺瘤患者(病例组)以及随机匹配的406例健康体检行结肠镜检查未见明显异常者(对照组)进行基因多态性分析.结果:rs2736098、rs2075786位点各基因型在病例组和对照组中的频率分布差异无统计学意义(P>0.05),结肠癌组rs2736100位点GG基因型频率显著高于健康对照组及结肠腺瘤组(29.03％vs 16.50％、18.04％,P<0.05),携带GG基因型者罹患结肠癌风险增加2.216倍(95％CI:1.393-3.527).结论:hTERT基因rs2736100位点基因多态性与结肠癌遗传易感性相关.

摘要： 为考察猪ALAS1基因内含子9多态性及其对繁殖性能指标的遗传效应,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法,分析ALAS1基因内含子9在杜洛克猪、长白猪、大白猪和梅山猪群体内的多态性,并分析该突变位点与长白猪、大白猪繁殖性状的相关性.结果显示:ALAS1基因内含子9在长白猪群体内的基因型频率为CC(0.01)、CT(0.32)和TT(0.67);在大白猪群体内的基因型频率为CC(0.23)、CT(0.40)和TT(0.38);在梅山猪群体内的基因型频率为CC(0.62)、CT(0.26)和TT(0.11);在杜洛克猪群体内只检测出TT基因型,TT基因型频率为1.00.ALAS1基因在长白猪群体内CT型的总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)比TT型的TNB和NBA分别高0.23头(P>0.05)和0.29头(P>0.05).ALAS1基因在大白猪群体内的TNB和NBA均表现出CC>CT>TT的趋势.在大白猪群体内CC型的TNB、NBA比CT型的TNB、NBA分别多0.28头(P>0.05)和0.24头(P>0.05);CC型和CT的TNB比TT型的TNB分别多1.63头和1.35头(P<0.01);CC型和CT的NBA比TT型的NBA分别多1.58头和1.34头(P<0.01).ALAS1基因在大白猪群体中CC型为影响产仔数的优势基因型,CC型和CT型的TNB、NBA均高于TT型的TNB、NBA,差异达到极显著水平.

摘要： 目的 本研究旨在探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因rs2853676和rs2853677位点单核苷酸多态性(SNPs)与结肠癌遗传易感性的关系.方法 2017年1月-2018年12月在烟台业达医院采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对186例结肠癌患者、194例结肠腺瘤患者、随机匹配的406例健康体检行结肠镜检查未见明显异常者进行基因多态性分析.结果 rs2853676位点各基因型在病例组和对照组中的频率分布差异无统计学意义(P>0.05),结肠癌组rs2853677位点CC基因型频率显著高于健康对照组(17.74％vs 8.62％,P<0.05),携带CC基因型者罹患结肠癌风险增加2.193倍(95％CI:1.287-3.373).rs2853677位点结肠腺瘤组+结肠癌组与对照组相比CC基因型分布差异具有统计学意义(P<0.05),OR=1.682(95％CI:1.053-2.685).结论 hTERT 基因rs2853677 位点基因多态性与结肠癌遗传易感性相关.

摘要： 目的 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析复方川贝散中川贝母成分.方法 研究起止时间为2019年2月至2019年5月.新型快速植物基因组DNA提取试剂盒分别提取复方川贝母和蛇胆川贝液中DNA,PCR扩增后采用SmaⅠ限制性内切酶酶切,并进行琼脂糖凝胶电泳分析.同时,对川贝母含量为0％～40％的样本进行PCR-RFLP检测.结果 复方川贝散和蛇胆川贝液PCR扩增后均出现特异性条带,但经SmaⅠ酶切后复方川贝散在100～250 bp出现两条特异性酶切条带,而蛇胆川贝液无特异性条带.川贝母含量为4％时,经PCR-RFLP分析在100～250 bp得到两条特异性DNA条带.结论 PCR-RFLP可有效分析复方川贝散中川贝母成分,且对含量超过4％的样本可有效检出.

摘要： 目的 探讨聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)rs805304多态性的最适实验条件.方法 运用PCR-RFLP技术分别对2016年1月～2017年3月昆明医科大学第一附属医院收治的182例2型糖尿病患者和147名健康体检者DDAH2基因rs805304的多态性进行检测,对影响PCR-RFLP方法的主要因素进行研究.结果 最适实验条件:退火温度为58°C,变性温度为95°C,2× Power Taq PCR Master Mix浓度为12.5 μL,引物浓度为0.8 μmo/L,酶切体系为15 μL体系中加8.0 μL产物,用5U的限制性内切酶BstUI消化.结论 最适实验条件的摸索为后续研究奠定了基础.

摘要： 目的:研究雌激素受体β基因(ESR2)的多态性与不明原因复发性流产(URSA)之间的关系.方法:选择2010年8月至2015年5月我院收治的URSA女性85例作为研究组,另根据研究组受试者的年龄、体质量指数(BMI)、学历等基线资料匹配选择85例我院体检健康的有2次及以上的成功怀孕且活产的非妊娠妇女作为对照组.在月经周期的2～3天取各受试者的肘静脉血5 ml,比较两组妇女卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)和雌二醇(E2)的血清水平,同时检测ESR2基因的rs 1256049、rs4986938和rs1256030位点多态性,分析ESR2各基因位点多态性及其与激素水平间的关系.结果:两组妇女FSH和E2水平差异无统计学意义(P＞0.05).研究组妇女LH水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组妇女的rs1256049、rs4986938、rs1256030位点的各基因型频率及不同位点与各基因型(野生型、杂合型、纯合型)血清FSH、E2和LH的水平间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).对照组妇女中仅rs4986938位点与rs1256030位点多态性呈正相关(r =0.38,P=0.00),研究组妇女中仅rs1256049位点与rs4986938位点的多态性之间呈负相关(r=-0.17,P=0.02).结论:ESR2的多态性与URSA之间无明显关系.三个位点间有一定的相关性,且在两组中是不同的,这种差异是否与URSA间存在一定的联系,还需要进一步研究.%Objective:To study the relationship between polymorphism of estrogen receptor β gene(ESR2)and unexplained recurrent spontaneous abortion(URSA).Methods:A total of 85 women with recurrent spontaneous abortion were recruited in our hospital from August 2010 to May 2015.A total of 85 healthy ethnically matched women with two or more successful pregnancies and live births and no history of complicated pregnancies were recruited as the control group.5 ml elbow vein blood was extracted in the menstrual cycle of 2-3 days,and serum levels of follicle stimulating hormone(FSH),luteinizing hormone(LH),and estradiol(E2) were measured and compared between two groups,the rs1256049,rs4986938 and rs1256030 polymorphisms of ESR2 gene were detected and the correlation between ESR2 gene locus polymorphism and URSA was analyzed.Results:There was no significant difference in FSH and E2 level between the two groups (P ＞ 0.05).The level of LH in the study group was significantly higher than that in the control group (P ＜ 0.05).There were no significant differences in the rs1256049 locus,rs4986938 locus and rs1256030 locus between the two groups.The level of FSH,LH and E 2 in rs1256049 locus,rs4986938 locus,rs1256030 locus of all genotypes of females were not statistically significant (P ＞ 0.05).There was a negative correlation between the polymorphism of rs1256049 locus and the rs4986938 locus among all subjects,and rs4986938 locus were positively correlated with rs1256030 polymorphism.There was a positive correlation between the rs4986938 locus and rs1256030 locus polymorphism (r =0.38,P =0.00) in the control group,and there was a negative correlation between the rs1256049 locus and the polymorphism of the rs4986938 locus in the study group (r =-0.17,P =0.02).Conclusions:There is no significant relationship between ESR2 polymorphism and URSA.There is a certain correlation between the three mutation sites of ESR2 gene,and this correlation is different between the two groups,but whether there is a link between URSA and this difference still needs further study.

摘要： 目的 探讨慢性传输型便秘(STC)患者肠道微生态特点及结肠次全切除术的临床疗效.方法 选择2015年1月至2017年1月在新乡医学院第一附属医院接受结肠次全切除术治疗的STC患者28例为观察组,另选择体检健康者26例为对照组.留取2组受试者粪便标本,一部分标本通过选择性培养基对乳酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌、肠杆菌、肠球菌、梭杆菌进行分离培养和计数,计算各种菌的丰度;另一部分标本提取粪便微生物总DNA,通过末端限制性片段长度多态性分析粪便中细菌多样性和丰富度.采用Wexner便秘评分标准和胃肠动力学检查系统对观察组患者手术前后排便功能进行评估.结果 观察组患者肠道细菌香农多样性指数和丰富度均显著低于对照组(P<0.05).观察组患者肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌及类杆菌的丰度显著低于对照组,肠杆菌、肠球菌及梭杆菌的丰度显著高于对照组(P<0.05).观察组患者术后3个月Wexner便秘评分低于术前,肛管高压带、静息压、最大收缩压和收缩持续时间均高于术前(P<0.05).结论 STC患者存在结肠菌群紊乱,而结肠次全切除术可有效改善患者的便秘症状.

摘要： [目的]明确香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense 4个生理小种的系统发育关系.[方法] 利用PCR扩增该病菌4个生理小种的核糖体DNA内转录间隔区(Internal transcribed spacer, ITS),利用AIu I、Hpa II和Taq I 3种限制性内切酶对这些小种的ITS产物进行RFLP分析.[结果] PCR扩增结果表明:来自4个生理小种的8个菌株均可扩增得到568 bp的ITS单一片段,但这些生理小种间的片段没有明显的多态性;对这些生理小种ITS产物进行RFLP分析发现,不同生理小种之间的差异很小.[结论] PCR-RFLP技术不适用香蕉枯萎病菌生理小种的分析鉴定.%[Objective] To clarify the phylogenetic relationship of four physiological races of Fusarium oxysporum f.sp.cubense (Foc), the causal agent of fusarial wilt of banana.[Method] The ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) regions of the four physiological races of Foc were first amplified using PCR technique, and then RFLP analysis of the ITS products of these races were performed using three restriction endonucleases including AIu I, Hpa II and Taq I.[Result]A single 568 bp ITS fragment was amplified specifically from eight strains belonging to four races, respectively, but there was no obvious polymorphism among these races.RFLP analysis of the ITS products from these races showed that the differences among races were very small.[Conclusion] PCR-RFLP technique was unsuitable to be used as the identification basis for the physiological races of Foc.

摘要： 目的：建立人端粒保护蛋白1(protection of telomeres1,POT1)rs1034794位点多态性的检测方法. 方法：应用创造酶切位点法(Created Restriction Site PCR,CRS-PCR)设计PCR引物.其中一条引物根据突变位点邻近序列设计,引入错配碱基,使得引物3'端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成一个酶切位点,PCR产物用PCR-限制性片段长度多态性(PCR restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)法进行分析. 结果：设计一对特异引物,其中正向引物3'末端与多态相邻,倒数第三位碱基为错配碱基A可在PCR扩增后与多态T等位基因及相邻片段形成AGCT结构,使用限制性内切酶AluI酶切效果较好. 结论：应用CRS-PCR方法创造的酶切位点可以有效而简捷地检测POT1(rs1034794)基因多态性.

摘要： 线粒体DNA(mtDNA)是一种核外遗传物质.利用限制性内切酶处理mtDNA得到的限制性片段长度多态性(RFLP)既具有相对的科属稳定性,又能够反映科属间的进化关系,因而已成为动物科属鉴定和系统演化研究的一种有效遗传标记.本文以工蚁为材料,用6种限制性内切酶分析了常德市4种白蚁线粒体DNA限制性片段长度多态性,根据限制性片段差异计算了4种白蚁之间的遗传距离,利用MEGA4软件构建了四种白蚁的系统进化树,探讨了4种白蚁间的亲缘关系,初步构建了其RFLP指纹图谱.

摘要： 本文应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析和遗传学方法，针对AGT基因G-bA与T174M两种多态性进行研究，了解上述基因在河南地区汉族人群中的分布情况，在较大样本量人群中，初步探讨基因多态性与CHD(冠心病)、冠状动脉病变支数和CHD传统危险因素之间的关系，并分析两种基因位点的单倍型及其多态性对CHD的联合作用。

摘要： 目的：探讨我国北方地区汉族人载脂蛋白A V基因(apoA V)-1131T>C多态性对血脂的影响及其与冠心病的关系。rn 方法：应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了155例健康对照者和239例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者(CHD组)apoA V-1131T>C多态性基因型和等位基因频率分布，同时检测了研究对象的血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平。rn 结果：CHD组apoA V-1131T>C多态性与血清甘油三酯(TG)水平密切相关，TC和CC基因型患者血清TG水平明显高于TT基因型(分别为1.72、1.47和1.24mmol/L，P=0.001)。rn 冠心病组apoA V-1131C等位基因频率明显高于对照组(0.310比0.277，P=0.005)，TT、TC、CC基因型频率在CHD组和对照组分别为35.6%、54.0%、10.4%和53.5%、37.4%、9.1%，两组间差异具有统计学意义(P=0.002)。rn 结论：apoA V-1131T>C多态性对人群TG水平有极显著影响，T/C单核苷酸多态性与汉族人CHD的发生存在相关性。

摘要： 目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR)基因C677T多态与中国东北汉族脑梗死的关系.方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测了对照组和脑梗死组共141名的MTHFR基因C677T多态性分布.结果:经x2检验,MTHFR基因各基因型频率在对照组和脑梗死组之间无显著性差异(x2-1.24,P＞0.05);各等位基因频率在两组人群中均无显著性差异(x2-1.17,P＞0.05).结论:未发现MTHFR基因C677T多态与脑梗死之间存在相关关系.

摘要： 为探究广西南丹瑶鸡低腹脂的分子机理和培育低脂高质的肉鸡品系,利用创造酶切位点PCR-RFLP方法,对60只瑶鸡个体PGC-1α基因编码区646位点的多态性进行了分析.结果显示,GG,GA,AA基因型的频率分别为0.35,0.60和0.05;多态信息含量为0.35,属于中度多态.卡方适合性检验表明南丹瑶鸡PGC-1α646位点突变(G/A)处于哈代-温伯格不平衡状态(P＜0.05).

摘要： 为探究广西南丹瑶鸡低腹脂的分子机理和培育低脂高质的肉鸡品系,利用创造酶切位点PCR-RFLP方法,对60只瑶鸡个体PGC-1α基因编码区646位点的多态性进行了分析.结果显示,GG,GA,AA基因型的频率分别为0.35,0.60和0.05;多态信息含量为0.35,属于中度多态.卡方适合性检验表明南丹瑶鸡PGC-1α646位点突变(G/A)处于哈代-温伯格不平衡状态(P＜0.05).

摘要： 为探究广西南丹瑶鸡低腹脂的分子机理和培育低脂高质的肉鸡品系,利用创造酶切位点PCR-RFLP方法,对60只瑶鸡个体PGC-1α基因编码区646位点的多态性进行了分析.结果显示,GG,GA,AA基因型的频率分别为0.35,0.60和0.05;多态信息含量为0.35,属于中度多态.卡方适合性检验表明南丹瑶鸡PGC-1α646位点突变(G/A)处于哈代-温伯格不平衡状态(P＜0.05).

摘要： 为探究广西南丹瑶鸡低腹脂的分子机理和培育低脂高质的肉鸡品系,利用创造酶切位点PCR-RFLP方法,对60只瑶鸡个体PGC-1α基因编码区646位点的多态性进行了分析.结果显示,GG,GA,AA基因型的频率分别为0.35,0.60和0.05;多态信息含量为0.35,属于中度多态.卡方适合性检验表明南丹瑶鸡PGC-1α646位点突变(G/A)处于哈代-温伯格不平衡状态(P＜0.05).

摘要： APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用，检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96°C变性和Rsa Ⅰ酶切处理，以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15％;CE筛分介质PEO浓度3.0％，pH 8.2，电压15 KV温度15°C，λcx=488nm，λem=520nm荧光检测。检出率由高到低为:CE-SSCP(10/35)＞PAGE-SSCP(8/35)＞CE-RFLP(6/35)。rn CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断的简便可靠的方法。

摘要： 本发明公开了一种用于限制片段长度多态性研究的家蚕DNA抽提方法，以家蚕个体为研究对象，解剖后取后部丝腺；加入液氮后经充分研磨后，充分酶解后，用酚进行抽提后，用正丁醇浓缩后用乙醇进行沉淀；RNase处理后，经酚、氯仿抽提后，用正丁醇浓缩后用乙醇进行沉淀。严格控制实验环节，每头家蚕可抽提高纯度DNA(OD260/280＞1.9)200μg，可用于200次RFLP检测。该发明解决了目前以家蚕为材料的RFLP研究DNA纯度不高和抽提的DNA量过少的问题。

摘要： 本发明公开了一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法，属于分子生物技术领域，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析，测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，本方法可以实现对短链RNA尤其是miRNA的绝对定量，且具有高特异性、高灵敏度、结果客观、重复性好，可在100-106拷贝数范围内准确定量，也适用于RNA粗提物。

摘要： 一种检测核酸片段长度的方法，包括：将待检测核酸稀释至预定浓度；分别取等量体积的核酸与梯度倍数用量的磁珠结合；通过磁力装置吸附结合了核酸的磁珠，并去除上清；使用等量体积的洗脱缓冲液回溶磁珠上结合的核酸，并检测回溶核酸浓度；计算核酸与磁珠结合前后的浓度差异，并形成浓度差异与磁珠梯度倍数用量之间的曲线关系；将曲线关系与标准品曲线进行比对得到待检测核酸的片段长度，其中标准品曲线包括预定浓度的不同片段长度的核酸标准品与梯度倍数用量的磁珠结合前后的浓度差异与磁珠梯度倍数用量之间的对应关系。本发明的方法基于同种磁珠不同浓度倍数对核酸片段偏向性筛选的特性，结合数据分析对核酸片段的长度进行简易高效的检测。

摘要： 本发明涉及一种快速导出末端限制性片段长度多态数据的方法，包含有以下几个步骤：第一步、统计分析原始T‑RFLP数据;第二步、数据的导出和保存;第三步、数据的R统计语言进行数据合并和计算。与常规的利用Genemapper软件处理数据相比较，本方法更加快速，可以实现批量处理与导出数据，减少人工挑选图谱的误差。

摘要： 本发明公开了一种用于限制片段长度多态性研究的家蚕DNA抽提方法，以家蚕个体为研究对象，解剖后取后部丝腺；加入液氮后经充分研磨后，充分酶解后，用酚进行抽提后，用正丁醇浓缩后用乙醇进行沉淀；RNase处理后，经酚、氯仿抽提后，用正丁醇浓缩后用乙醇进行沉淀。严格控制实验环节，每头家蚕可抽提高纯度DNA(OD260/280＞1.9)200μg，可用于200次RFLP检测。该发明解决了目前以家蚕为材料的RFLP研究DNA纯度不高和抽提的DNA量过少的问题。

摘要： 本发明公开了一种基于片段长度多态性PCR的中药桃仁的鉴定方法，具体包括以下步骤：(1)准备好所需的原材料以及反应试剂；(2)提取步骤(1)中原材料的基因组DNA；(3)将基因组DNA、引物1、引物2、水和反应试剂构成PCR反应体系，在梯度PCR仪上，进行预变性、变性、退火、延伸、再延伸四个步骤循环若干次；(4)引物设计与筛选：从GeneBank数据库中搜集原材料基原植物或/和同属近缘种基原植物的叶绿体petA‑psbJ序列；进行序列比对后设计片段长度多态性PCR引物；将设计好的引物经过步骤(3)PCR扩增后，依据种间特异性、种内通用性原则筛选出鉴定引物；(5)PCR鉴定：经过筛选得出PCR鉴定引物为TR1和TR2；(6)PCR产物的纯化、克隆与测序。

摘要： 本发明公开了一种利用扩增DNA片段长度多态性测定短链RNA的方法，属于分子生物技术领域，包括以下步骤：首先利用至少两种与待测短链RNA相比无天然同源序列的合成小RNA作为测定的内标，将这些合成小RNA以不同分子数混合，形成动态小RNA标准分子梯度；再以等量的所述动态小RNA标准与所述待测短链RNA混合，经由RNA反转录、cDNA加尾、PCR同步扩增及PCR产物DNA长度多态性片段的荧光定量分析，测得所述待测短链RNA扩增产生的DNA片段荧光强度在所述动态小RNA标准荧光强度梯度上的相对比例，本方法可以实现对短链RNA尤其是miRNA的绝对定量，且具有高特异性、高灵敏度、结果客观、重复性好，可在100-106拷贝数范围内准确定量，也适用于RNA粗提物。

摘要： 本发明涉及的是一种生物技术领域的高通量扩增片段长度多态性检测方法，用两种荧光素分别标记高频内切酶和低频内切酶选择性引物，再结合测序仪进行检测，实现同时检测3类可能的酶切产物。所述的3类可能的酶切产物，是指：采用两个内切酶即识别4碱基序列的高频内切酶和识别6碱基序列的低频内切酶同时或先后切割基因组DNA或cDNA，根据片段两端的酶切位点序列，产生3类可能的片段，即高频－高频片段、高频－低频片段和低频－低频片段。本发明比只标记低频酶引物的荧光AFLP方法通量提高了约780％，所以，检测成本也将降低到原来的9.1％。

摘要： 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种鉴定裸鼹鼠线粒体细胞色素b基因的限制性片段多态性的方法及试剂盒。本发明首次建立裸鼹鼠的线粒体细胞色素b基因DNA序列的限制性片段多态性，作为裸鼹鼠特定的DNA指纹，可用于裸鼹鼠的物种鉴定。

摘要： 本发明的一种固相介质选择性提取短片段长度DNA的方法，将利用硅烷偶联试剂在表面同时修饰氨基和羧基的固相介质和不同片段长度的DNA分子混合。通过对固相介质进行表面修饰，使介质随着pH值的变化具备电荷反转特性，通过加入一定浓度的盐溶液使得不同片段DNA具有的电荷量不同，从而通过静电相互作用选择性吸附特定长度片段的DNA分子，达到高效提取，选择性提取的目的。本发明的优点在于：对DNA具有高的吸附效率和脱附效率,总提取效率高于95%，并且能够选择性分别提取不同片段长度的DNA分子，特别是小片段DNA分子，选择性分离效率高于90%，所用试剂简单经济,操作快速便捷。