降解酶

摘要： 赭曲霉毒素A(OTA)是一种广泛分布在食品中的真菌毒素,减少或脱除食品及其原料中的赭曲霉毒素A,对提高食品质量、保障国民食品安全具有重要意义。本实验室前期从粪产碱菌中获得可降解OTA的酰胺水解酶Af-OTd,本研究通过基因重组实现Af-OTd蛋白的高效表达,并对纯化的Af-OTd蛋白进行酶学性质分析。结果表明:纯化的Af-OTd酶对OTA的降解率达90%以上,降解活性受温度、pH值、酒精含量及金属离子的影响。该酶最适温度50°C,最适pH 7.5。酒精含量增加会导致酶活性下降,当酒精含量增至8%,剩余酶活几乎为0。1 mmol/L的金属离子Ca^(2+)、Co^(2+)、Cu^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)、K^(+)及EDTA对该酶具有不同程度的抑制作用;微量的Co^(2+)、Zn^(2+)对Af-OTd酶活性有明显的促进作用。

摘要： 目前,聚氨酯(PUR)塑料占据全球塑料市场的6%左右,然而,由于处置不合理,大量聚氨酯塑料被丢弃到环境当中,造成了严重的资源浪费和环境污染等问题。废弃塑料的资源再利用已成为各个国家关注的重要问题。废弃塑料处理主要包括掩埋、焚烧以及机械回收、物理化学和生物利用等。与传统物理和化学法的降级利用相比,生物法因其绿色安全和潜在的高值化利用而成为研究者关注的热点。然而,塑料高分子特殊的分子结构使得目前塑料生物处理依然存在诸多问题,难以实现规模化应用。本文综述了PUR的化学结构和PUR降解性微生物的筛选方法,并总结了PUR降解微生物和降解酶的研究现状以及评价其降解效果的方法,为推进PUR生物降解研究提供了一定参考。

摘要： 玉米赤霉烯酮(ZEN)是具有雌激素作用的次生代谢产物,可以被来源于Gliocladium roseum的内酯水解酶降解为无毒物质。为了实现玉米赤霉烯酮降解酶基因zlhy-6在枯草芽孢杆菌中的表达,获得不含抗生素抗性基因的食品级重组枯草芽孢杆菌,本研究采用一步克隆及重叠延伸PCR的方法构建了单启动子和包含HpaⅡ和P43双启动子的表达质粒,将质粒转化到枯草芽孢杆菌中,获得重组菌株168/pMA5-zlhy-6和168/pMA5-P43-zlhy。然后构建了重组整合载体amy-p43-zlhy,将zlhy-6基因整合到枯草芽孢杆菌168的基因组中。通过Cre/lox系统敲除抗生素抗性基因,获得整合了P43-zlhy表达盒的食品级重组枯草芽孢杆菌BZ-zlhy。将构建的3个重组菌株在37°C、pH值7.5条件下培养36 h,结果显示,双启动子表达载体重组菌株的最高酶活性为2.2 U·mL^(-1),是单启动子菌株的1.2倍。双启动子重组菌株表达的降解酶对ZEN(4μg·mL^(-1),30 min)的降解率为65.1%。重组菌株枯草芽孢杆菌BZ-zlhy表达水平最低(0.4 U·mL^(-1))。本研究实现了玉米赤霉烯酮降解酶在枯草芽孢杆菌中表达,同时构建了不含抗生素抗性基因的食品级重组枯草芽孢杆菌,为玉米赤霉烯酮降解酶的工业化生产奠定了基础,也为解决粮食储藏和饲料生产中的ZEN污染提供了思路。

摘要： 氟喹诺酮类抗生素属于喹诺酮类抗生素,是一类人畜通用的抗生素。近年来,被广泛应用于人类和畜牧、水产等养殖业领域,然而其大量使用,造成在环境中的不断残留和累积,给自然环境和人类健康造成了较大威胁。现有研究表明,微生物降解是有效去除氟喹诺酮类抗生素残留污染的有效方法之一。本文总结和介绍了近年来氟喹诺酮类抗生素微生物降解单株菌和混合菌群、微生物降解酶、降解途径以及微生物降解氟喹诺酮类抗生素的实际应用,并对目前氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究中存在的问题进行了分析,以及对未来氟喹诺酮类抗生素微生物降解研究的重点进行了探讨,以期为后续的研究提供参考。

摘要： 该实验采用富集培养的方法从土壤中筛选出有效降解玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的菌株。初筛采用ZEN涂布至无机盐培养基作为唯一碳源,复筛是以菌株的发酵液对ZEN的降解率作为评价指标,得到一株菌株A.lwoffi.Haut.1,其发酵液在37°C下与5μg/m L ZEN共培养48 h,降解率高达93.54%。经16S rDNA基因测序分析、生理生化实验和菌落形态观察初步对菌株进行鉴定,并对该菌株的降解活性物质进行初步定位,最终探究丹宁-聚乙二醇法和盐沉法对无细胞上清液进行粗降解酶的提取效果。结果表明,该菌株鉴定判断为鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii);该菌株的无细胞上清液的降解率最高为82.31%,无细胞上清液经加热处理、蛋白酶K处理和蛋白酶K+SDS处理后,降解率分别为20.10%、41.67%和18.68%,说明降解活性物质主要为胞外酶;当单宁浓度为15 mg/mL,聚乙二醇溶液浓度为10 mg/mL,提出的酶液降解率为64.33%,而盐沉法加入60%硫酸铵提出的粗酶液降解率为20.30%,因此,单宁聚乙二醇法提取降解酶效果更好。该研究为菌株降解ZEN的作用机理提供了研究基础,也为生物降解ZEN提供了新的研究材料。

摘要： 拟除虫菊酯被认为是有机磷农药的安全替代品,因此当有机磷农药被禁限使用时,其应用显著增加.目前,拟除虫菊酯销量约占世界杀虫剂总额的20％.这类农药的长期、广泛使用既带来了经济效益,也造成了环境污染,危害人类及其他非靶标生物.针对这一问题,已开发出多项修复技术,其中微生物法高效环保、成本低廉,已成为修复拟除虫菊酯污染的最优方法.笔者综述了最新分离的拟除虫菊酯降解菌株及其特性;拟除虫菊酯降解酶及其基因;拟除虫菊酯及其代谢产物(间苯氧基苯甲酸等)的降解途径.此外,还提出了拟除虫菊酯类农药微生物降解研究的发展趋势和需要进一步解决的问题.

摘要： [目的]本文旨在从不同种类的烟叶表面分离鉴定能有效降低烟叶中淀粉、纤维素、木质素、蛋白质及果胶含量的细菌菌株,并研究菌株在最佳产酶条件下产生的降解酶对烟叶品质的改善效果。[方法]通过测定分离株降解淀粉、纤维素、木质素、蛋白质及果胶的能力以及菌株产生的各种降解酶活性筛选具有高效降解能力的菌株。通过优化发酵时间、发酵温度、pH值、接种量、培养基装液量及摇床转速等条件使菌株产酶效率达到最高,将最佳产酶条件下生产的发酵液和烟叶共同发酵,测定发酵前、后烟叶中大分子化合物及香气成分的含量变化以评价菌株对烟叶品质的改善效果。[结果]在分离得到的87株菌株中,菌株yc10被鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.),可以同时降解烟叶中淀粉、纤维素、木质素、蛋白质和果胶,且产生的各种降解酶活性均处于中高水平。菌株yc10的最佳产酶条件为:发酵时间36 h,发酵pH值7,发酵温度37°C,接种量6%(体积分数),装液量80 mL,摇床转速200 r·min-1。在最佳产酶条件下培养菌株yc10,并将其粗酶液作用于4种烟叶A、B、C、D,结果发现4种烟叶中淀粉、纤维素、木质素、蛋白质和果胶均被降解,且烟叶中总糖含量增加。烟叶A经过菌株yc10发酵后,酮类、酸类、酯类、杂环类、醇类和醛类物质的含量均增加。[结论]从烟叶表面分离得到1株假单胞菌yc10,可产生多种降解酶;优化发酵条件后,对烟叶中淀粉、纤维素、木质素、蛋白质和果胶的降解效果均有提升,发酵液作用于烟叶48 h后可使大分子化合物含量降低、总糖含量增加、烟叶中香气成分含量增加,起到提质增香的效果。

摘要： [目的]研究椰子织蛾幼虫肠道微生物的种类和功能,以揭示其消化利用寄主老叶的机制.[方法]采用传统微生物分离培养技术分离培养肠道细菌,用16S rRNA基因序列分析的方法鉴定菌株,采用透明圈染色法对所得菌株进行功能性验证.[结果]基因序列检测对比鉴定得到9种可培养细菌菌株,主要属于变形菌门和厚壁菌门以及放线菌门;功能性验证结果表明,伯克霍尔德氏菌、解淀粉芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌菌株具有纤维素降解酶,寒气玫瑰单胞菌、解淀粉芽孢杆菌含木聚糖降解酶.[结论]椰子织蛾肠道中存在可培养的具有降解纤维素及木聚糖能力的细菌,这些细菌可能有助于椰子织蛾取食消化椰子等老叶,研究所获得的肠道微生物菌株也为后续研究该虫与环境的关系及相关菌株应用于农业、能源、环保价值的探索提供帮助.

摘要： Burkholderia xenovorans LB400是一株多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)降解菌,可以氧化含有1-6个氯取代基的多氯联苯.近年来,由于其广泛的底物谱和优异的降解性能,菌株LB400已成为研究原核生物降解多氯联苯的生物化学和分子生物学方面的模式生物.目前关于PCBs的微生物降解研究已不再局限于对微生物资源的挖掘,而是更多地聚焦在LB400等降解菌的PCBs降解基因、降解酶的酶学特性以及酶的人工分子进化等方面.同时,LB400作为早期发现的降解菌,其对多氯联苯的降解途径、底物范围及相关机制也被广泛探讨;但是对于PCBs降解相关基因的调控研究较少.因此,本文以Burkholderia xenovorans LB400对多氯联苯降解为核心,通过综述其代谢途径、代谢相关基因和酶系以及降解应用等方面的研究进展,以期为深入探讨Burkholderia xenovorans LB400的应用以及进一步在遗传、分子和生化水平研究其他多氯联苯降解菌株提供借鉴.

摘要： 本试验通过将玉米赤霉烯酮降解酶基因zhd101基因在大肠杆菌中的表达,以获得大量纯化的重组ZHD101降解酶蛋白.通过人工合成zhd101基因,以质粒pET32a(+)为表达载体,构建zhd101重组质粒,并通过酶切和测序鉴定重组质粒.然后化学转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导转化子,通过SDS-PAGE电泳鉴定zhd101表达水平,采用Novagen公司生产的His.Bind蛋白纯化试剂盒纯化ZHD101蛋白.结果表明,重组质粒pET32a(+)-zhde101经HindⅢ、SacⅠ酶切后,1％琼脂糖凝胶电泳证实zhd101正确插入pET32a(+)载体.重组菌经IPTG诱导后,有分子量大约为47.5KD蛋白表达,与预期的融合蛋白分子量相符,蛋白表达量约占细菌总蛋白量的35％,纯化后的ZHD101蛋白样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为95％左右.成功构建的pET32a(+)-zhd101表达载体能在大肠杆菌BL21(ED3)获得高效表达,大量纯化的ZHD101蛋白为进一步研究和应用奠定了基础.

摘要： 本文针对长残留除草剂异噁草酮对后茬作物的残留危害问题,对已分离得到的异噁草酮降解菌W2的应用做进一步的基础研究.在明确了降解酶的酶学性质和降解效果的情况下,探明了异噁草酮降解酶的降解效果对不同作物生长的影响.本实验采用生物测定法在温室盆栽条件下研究了降解酶的降解能力.结果表明随着降解酶施用时间的延长,可以有效减轻异噁草酮对玉米和白菜苗期生长的影响.施用降解茵酶和贮存酶液20d时,玉米和白菜生长情况均达到空白对照水平.应用气相色谱法测定异噁草酮残留量,土壤中异噁草酮残留量在21.465μg·kg-1以下为玉米和白菜正常生长的安全残留浓度.为解决异噁草酮的残留危害问题奠定应用基础,提供技术支持.

摘要： 本文系统研究了菌株W2产生的异噁草酮降解酶在不同温室条件下的降解效果.旨在为降解酶在生产上的应用提供理论依据,为解决异噁草酮的残留危害问题奠定应用基础,提供技术支持.应用气相色谱法研究了不同培养温度,土壤湿度,原酶液添加量和异噁草酮初始添加浓度对酶液降解异噁草酮的影响.结果表明培养温度为30°C,土壤湿度为田间最大持水量的50％,原酶液添加量为2mL.kg-1的条件下,30d降解酶对异噁草酮的降解率最大,为81.671％,与添加菌悬液处理和药剂对照相比分别提高了30.95％和58.459％,降解半衰期(12.334d)比菌悬液和药剂对照分别缩短了16.913d和68.265d.而异噁草酮初始添加浓度对降解酶的降解效果影响不显著.

摘要： 利用现代生物技术，大规模开发和利用可再生性的非粮木质纤维素类生物质资源，将其降解转化为液体燃料和大宗化学品，既可以减缓石油等不可再生资源的消耗，降低我国对原油的过度依赖，有效地缓解能源资源紧缺，保证国家能源安全，维持国家经济的有效运转，又能够在保护生态环境和减缓温室效应的同时，开拓新的经济增长点、加快经济发展方式转变，促进全球经济的可持续发展。文章利用某实验室早年分离得到的一株产纤维素酶的丝状真菌斜卧青霉进行研究，得出各种木质纤维素降解酶组分的合成受到微生物严格的调节控制。并为深入了解斜卧青霉木质纤维素降解酶系组成及不同酶组分间的协同作用进行了一系列实验研究。

摘要： 本文研究了Pandoraea sp.OXJ-11菌产草酸盐降解酶的酶学性质。草酸钠降解酶的最适底物浓度为0.7 mg/mL，最适酶反应温度为30°C。20°C下保温酶活力较稳定，30°C时保温2h酶活力开始下降，50°C时酶活完全丧失。酶反应的最适pH范围较宽为5.5-8，粗酶液在pH7-8时保温比较稳定。金属离子浓度为5mmol/L时，Na+和Mn2+对酶有激活作用，Fe2+、Cr3+、Cu2+对酶都有抑制作用，而金属离子浓度为10mmol/L时，Mg2+对酶有较明显激活作用，Fe2+和Cr3+对酶有抑制作用。

摘要： 介绍了植物细胞壁多聚糖及其降解酶在谷物及豆类加工品、果蔬热加工中的功能作用,这对理解膳食纤维的结构与功能作用具有促进意义.

摘要： 从6种果胶酶中，筛选出对柑橘皮渣降解作用良好的果胶酶W1，适宜用量为0.05％;从5种纤维素酶中，筛选出对柑橘皮渣降解作用良好的纤维素酶R-10，酶适宜用量为0.01％。由果胶酶W1和纤维素酶R-10组成的复合酶，适宜的酶解温度为30°C，酶解时间为24小时。

摘要： 为了有效治理克百威农药污染，以克百威为唯一碳源，利用富集培养的方法从农药厂活性污泥中分离到一株克百威降解菌CYW-44，经生理生化、16S rDNA序列分析及API 50CHB鉴定试剂条分析，将菌株鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌在营养培养基中培养5d时对100mg·L-1的克百威降解率为97.72%，6d能够完全降解克百威。通过液相色谱(HPLC)法检测，发现在降解过程中，克百威降解产物呋喃酚及其他代谢产物不产生累积。研究证实该菌株能分泌胞外降解酶和胞内降解酶高效降解克百威，对克百威的降解率分别达到99.1%和82.63%。同时通过SDS-PAGE验证了克百威对菌株降解酶活性的诱导作用。

摘要： 本文介绍了我国纺织印染行业传统退浆工艺的现状，分析了退浆废水中各种成分对COD值的贡献。指出PVA降解酶的退浆工艺虽然不能降低退浆液的COD值，但可改善退浆废水的可生化性。rn 采用PVA降解酶对退浆废水进行处理，可以有效降解废水中的PVA。无PVA的上浆工艺将是今后的发展方向。

摘要： 聚乙烯醇是水溶性高分子树脂,由于其相对于其他聚乙烯类高分子树脂而言具有一定的可生物降解性。对于其生物降解的过程和机理的研究已越来越受到人们的关注。本文从材料学的改性技术和环境学的相容性两个角度综述了国内外聚乙烯醇生物降解的研究概况。通过聚乙烯醇溶液及薄膜的降解过程的介绍,指出化学改性和微生物降解的结合将是今后含聚乙烯醇类废水及固体废弃物的主要方法。

摘要： 本发明公开了丁香醛作为漆酶降解已烯雌酚氧化还原介体的应用及其提高漆酶降解已烯雌酚降解率的方法，属于环境污染处理技术领域，具体为通过将丁香醛与漆酶溶液组成漆酶‑丁香醛介质溶液然后与己烯雌酚溶液混合于反应体系中，并放入振荡培养箱中反应一段时间后利用乙酸乙酯萃取己烯雌酚终止反应实现对己烯雌酚的降解，本发明通过制备漆酶‑丁香醛介质溶液并用于己烯雌酚的降解，使漆酶对己烯雌酚的降解率由原来的44.56％提高到92.45％，这有利于己烯雌酚废水的处理，在污水处理领域有实际应用价值。

摘要： 本发明包含用于在人类中减少草酸盐的方法和组合物，以及用于纯化和分离重组的减少草酸盐的酶蛋白的方法。本发明提供了用于以粒子组合物递送减少草酸盐的酶的方法和组合物。本发明的组合物适合于治疗或预防草酸盐相关病症的方法。

摘要： 本发明公开了丁香醛作为漆酶降解已烯雌酚氧化还原介体的应用及其提高漆酶降解已烯雌酚降解率的方法，属于环境污染处理技术领域，具体为通过将丁香醛与漆酶溶液组成漆酶‑丁香醛介质溶液然后与己烯雌酚溶液混合于反应体系中，并放入振荡培养箱中反应一段时间后利用乙酸乙酯萃取己烯雌酚终止反应实现对己烯雌酚的降解，本发明通过制备漆酶‑丁香醛介质溶液并用于己烯雌酚的降解，使漆酶对己烯雌酚的降解率由原来的44.56％提高到92.45％，这有利于己烯雌酚废水的处理，在污水处理领域有实际应用价值。

摘要： 提供了鉴定、观察和纯化来自复杂生物样品的蛋白酶的方法。

摘要： 本发明涉及一株产聚乙烯醇降解酶的菌株及聚乙烯醇降解酶。所涉及的菌株命名为：嗜根性寡养单胞菌，Stenotrophomonas rhizophila，该菌株于2016年3月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC 1.15515。本发明所涉及的聚乙烯醇降解酶是上述菌株产生的酶。本发明的聚乙烯醇降解酶对于污水中高聚PVA的降解有显著的效果。

摘要： 本发明公开一种诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌、细胞壁降解酶及抗芦笋茎枯病品种的筛选方法，属于生物技术领域。本发明提供的诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌为天门冬拟茎点霉Phomopsis asparagi，保藏编号为：CGMCC No.13874。本发明提供的诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌可以诱导芦笋诱导分泌高含量防细胞壁降解酶，为抗病新品种选育和抗病品种合理布局服务。

摘要： 本发明公开了一种甲基硫菌灵降解菌，其菌株名称为芽孢杆菌(Bacillus sp)J2，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：61698。本发明属于环保生物技术领域，本发明通过运用亲和层析技术，从甲基硫菌灵降解菌的发酵上清液中分离纯化得到该菌株降解甲基硫菌灵的甲基硫菌灵降解酶，在分离纯化得到甲基硫菌灵降解酶的基础上，运用固定化技术获得了可多次使用的固定化甲基硫菌灵降解酶，该固定化甲基硫菌灵降解酶可更有效去除液态果蔬产品中的甲基硫菌灵，达到超标果蔬农残生物降解的目的，也可应用于废水中农残的清除，对于环境保护和保障公共卫生安全具有重要意义。

摘要： 本发明提供了一种有机磷降解酶基多功能催化剂的制备方法和有机磷降解酶基多功能催化剂及其应用，本发明的制备方法包括将复合型蛋黄壳结构纳米材料直接加入到具有亲和标签的有机磷降解酶的粗酶液中，经混合，分离后得到有机磷降解酶基多功能催化剂。本发明的有机磷降解酶基多功能催化剂制备方法操作简单，对酶纯度要求低，载体能够定向的与酶进行结合，制备的有机磷降解酶基多功能催化剂成本低，并且能够检测有机磷农药，还可级联降解有机磷农药，终产物对氨基苯酚具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开一种诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌、细胞壁降解酶及抗芦笋茎枯病品种的筛选方法，属于生物技术领域。本发明提供的诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌为天门冬拟茎点霉Phomopsis asparagi，保藏编号为：CGMCC No.13874。本发明提供的诱导分泌高含量细胞壁降解酶的芦笋茎枯病菌可以诱导芦笋诱导分泌高含量防细胞壁降解酶，为抗病新品种选育和抗病品种合理布局服务。

摘要： 本发明涉及一株产聚乙烯醇降解酶的菌株及聚乙烯醇降解酶。所涉及的菌株命名为：嗜根性寡养单胞菌，Stenotrophomonas rhizophila，该菌株于2016年3月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC 1.15515。本发明所涉及的聚乙烯醇降解酶是上述菌株产生的酶。本发明的聚乙烯醇降解酶对于污水中高聚PVA的降解有显著的效果。