金龟子绿僵菌

摘要： 褐飞虱Nilaparvata lugens (Stal)以单食性水稻为主,是亚洲地区重要的水稻害虫之一,繁殖力强的特点是其大面积为害水稻的重要原因。金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae是一种环境友好型的昆虫病原真菌,近年来被广泛用于害虫防治。本研究结果显示8×10^(10)孢子/mL金龟子绿僵菌悬浮剂在实验室条件和田间条件下对褐飞虱都具有明显的致死效果,最高校正死亡率与相对防效分别为55.67%和63.81%。与对照组相比,感染金龟子绿僵菌雌性褐飞虱16 d内产卵量下降了38.37%,卵孵化率下降37.5%,且羽化第1d的雌性褐飞虱Vg基因表达量最低,仅为对照组的32.26%,海藻糖含量为对照组44.64%。结果表明金龟子绿僵菌不仅对褐飞虱有较高的致死效果,也能通过影响Vg的表达和海藻糖的消耗从而减少褐飞虱的产卵量。

摘要： 【目的】黄氏枝膜叶蜂Cladiucha huangbki是新发现的叶蜂科(Tenthredinidae)枝膜叶蜂属Cladiucha种类,以幼虫取食危害乳源木莲Manglietia yuyuanensis叶片,虫口密度大,严重影响乳源木莲的生长。本研究旨在明确该虫的生物学特性,并筛选出对该虫具有高致病力的金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae菌株,为高效治理该虫提供理论基础和生物防治资源。【方法】以林间调查和室内饲养观察相结合的方式,观察黄氏枝膜叶蜂的各发育阶段形态特征和生物学特性(寄主植物、分布和生活史);采用孢子悬浮液喷雾法筛选高致病力金龟子绿僵菌菌株。【结果】林间和室内观察结果表明,黄氏枝膜叶蜂幼虫取食木兰科木莲属植物,在福建永安市一年发生1代,以老熟幼虫(预蛹)在土室中越夏、越冬;翌年3月上旬化蛹,3月下旬成虫羽化,4月上旬为雌虫产卵高峰期,4月中旬幼虫出现,4月下旬至5月上旬为幼虫危害高峰期,5月中旬老熟幼虫开始入土做土室,入土深度30~150 mm。室内金龟子绿僵菌不同菌株对黄氏枝膜叶蜂幼虫致病力测定结果表明,以1×10^(7)孢子/mL悬浮液喷雾11 d后,不同菌株对其幼虫的校正死亡率均超过85%,其中MaQZ-01,MaYTTR-04-05,Ma3和MaFZ-134个菌株感染的叶蜂幼虫校正死亡率为100%。菌株MaFZ-08感染引起的黄氏枝膜叶蜂僵虫率最高,为60%;其次是MaYTTR-04-05,引起的僵虫率为50%。金龟子绿僵菌各菌株对黄氏枝膜叶蜂幼虫的致死中时间(LT50)相差不大,在6 d左右,其中MaYTTR-04-05菌株的LT50最短,为5.090 d。【结论】黄氏枝膜叶蜂在福建永安一年发生1代,5月中、下旬老熟幼虫入土做土室化为预蛹越夏越冬。本研究筛选出对黄氏枝膜叶蜂幼虫致病力强的金龟子绿僵菌MaYTTR-04-05菌株,在其防治上有良好的应用前景。

摘要： 【目的】探究金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae,ZKJGL)生长发育所需要的营养条件以及对草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)幼虫的侵染力,为草地贪夜蛾生物防治研究以及生防菌剂的开发提供参考。【方法】室内测定温度、光周期、pH以及氮源、碳源对金龟子绿僵菌菌株ZKJGL菌丝生长和产孢的影响,并测定其对草地贪夜蛾2龄幼虫的活性。【结果】金龟子绿僵菌ZKJGL菌丝生长和产孢的适宜温度为20~25°C、pH=7、全黑暗条件,对碳源和氮源要求不高,麦芽糖、酵母膏或蛋白胨的利用率较好。孢子浓度为5×10;cfu/mL的金龟子绿僵菌ZKJGL菌株侵染草地贪夜蛾后累计死亡率达77.78%,LC;为4.406×10;cfu/mL,LT;少于4 d。【结论】金龟子绿僵菌ZKJGL易于培养,对营养条件、光照要求不高,对草地贪夜蛾的幼虫具有较强的致病力,可作为优良菌株进一步研发生物农药应用于防治草地贪夜蛾。

摘要： 用浓度为1.0×10^(8)个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421分别与不同浓度阿维菌素、苏云金杆菌、鱼藤酮和印楝素混配处理黄曲条跳甲,室内进行了联合毒力测定和3种保护酶(SOD、POD和CAT)活性的测定。结果显示,金龟子绿僵菌与低浓度阿维菌素、苏云金杆菌和鱼藤酮混合处理黄曲条跳甲都有增效作用,其中1.0×10^(8)个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421与浓度为1.92×10^(8) IU/L苏云金杆菌混配效果最好,协同毒力指数达165.0,其次为与浓度0.01 mg/L阿维菌素混配,协同毒力指数为96.0;保护酶活性测定结果显示,120 h内各处理酶活性均出现一定规律变化,1.0×10^(8)个孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421与1.92×10^(8) IU/L苏云金杆菌混配处理后3种酶活性最大值均高于其他所有混合处理中最大值,SOD、POD和CAT活性分别在混配后24、120和24 h达到高峰,且显著高于对照,即SOD活性值为190.270 U/g鲜重、POD活性值为1573.333 U/g鲜重、CAT活性值为396.237 nmol/min/g鲜重。结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421与苏云金杆菌混合对黄曲条跳甲具有很好的协同增效作用,这与联合毒力测定结果相一致。

摘要： 为茶叶生产中毛股沟臀叶甲的防治提供参考,采用不同剂量的400亿个孢子/g球孢白僵菌水分散粒剂和80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂进行田间试验,评价球孢白僵菌和金龟子绿僵菌CQMa421对毛股沟臀叶甲的田间防治效果。结果表明:球孢白僵菌和金龟子绿僵菌CQMa421均对毛股沟臀叶甲有一定防治效果,其防效为83.94%~90.63%。其中,140 g/667m^(2)的金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂的防效最高,为90.63%,推荐在4月下旬和5月上旬,成虫为羽化前施用。

摘要： 探明金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂大田应用效果,为其进一步推广应用提供科学依据,2020年在贵州省都匀市开展80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421防治稻飞虱、稻纵卷叶螟的田间试验。结果表明:80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂对水稻稻飞虱、稻纵卷叶螟有较好的防控效果,连续喷施2次后对稻飞虱的防效最高达70.02%,对稻纵卷叶螟的杀虫防效最高为65.03%,保叶效果为66.81%;有促进水稻增产的效果,比空白对照增产6.65%,可在生产上大面积推广应用。

摘要： 蛴螬是青海省西宁市文化公园区域内为害园林植物的主要地下害虫。调查分析了蛴螬的种类和为害特点,根据试验确定了金龟子绿僵菌防治蛴螬的剂量和处理方法,介绍了有效的绿色防治经验,以期为园林植物地下害虫的综合治理提供参考。

摘要： 本文以武夷菌素为主要对象,以牛津杯抑菌测试法和菌丝生长抑制法观察武夷菌素对几种常见的真菌类活体微生物农药之间的影响。武夷菌素对于真菌孢子的抑制试验结果显示,武夷菌素在高浓度处理下对球孢白僵菌的抑制作用显著大于金龟子绿僵菌,其中对球孢白僵菌的最小抑菌浓度为400 mg/L,对金龟子绿僵菌的最小抑菌浓度为200 mg/L。武夷菌素对绿色木霉、哈茨木霉、淡紫拟青霉菌丝生长率的抑制试验结果显示:武夷菌素100mg/L浓度对于三种真菌菌丝生长的抑制率分别为64.6%、48.6%、39.2%,进行毒力回归方程计算,数据表明武夷菌素对绿色木霉的EC_(50)为57.13mg/L,对哈茨木霉的EC_(50)为109.81mg/L,对淡紫拟青霉的EC_(50)为170.03 mg/L。武夷菌素在防治病害过程中实际用药量约100 mg/L,会对金龟子绿僵菌、球孢白僵菌、绿色木霉、哈茨木霉和淡紫拟青霉产生不同程度的抑制,建议应错开使用。本研究所获得的结果对指导武夷菌素及活体微生物农药的生物防治应用具有重要的意义,为生物防治技术集成提供理论基础。

摘要： 二化螟。药剂防治指标为分蘖期枯鞘丛率达到8%~10%或枯鞘株率3%;穗期重点防治上代残虫量大、当代卵孵盛期与水稻破口抽穗期相吻合的稻田,于卵孵化高峰期施药。选用苏云金杆菌(Bt.)、金龟子绿僵菌CQMa421、印楝素、甲氧虫酰肼、氯虫苯甲酰胺、乙基多杀菌素等生物农药和低风险化学农药。

摘要： 为探索绿僵菌对黄曲条跳甲保护酶活性的影响,分别用浓度为1×10^(8)、2×10^(8)、4×10^(8)、8×10^(8)、1.6×10^(9)个/mL的金龟子绿僵菌CQMa421孢子悬浮液处理黄曲条跳甲成虫,对侵染后黄曲条跳甲体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行了研究。结果表明:处理后120 h内,SOD活性先升高后降低,48 h时SOD活性达最高,分别为69.5、72.5、74.5、75.9、76.7 U/g,SOD活性与孢子悬浮液浓度呈正相关;各处理POD活性在处理后72 h时开始上升,96 h时活性最高,分别为1 020、1 066.67、1 240、1 086.67、1 166.67 U/g,分别为对照组的3.33、3.48、4.04、3.54倍和3.80倍,随后开始下降;CAT活性变化总体趋势为上升—下降—上升—下降;3种酶活性最后都恢复至对照组水平,各处理组最大值间差异显著,且显著高于对照组,表明3种保护酶在黄曲条跳甲抵御金龟子绿僵菌入侵过程中均做出了应激反应。

摘要： 室内测定了6株金龟子绿僵菌菌落生长速率、产孢量，及对星天牛幼虫的致病力，结果表明：不同菌株生长速率和产孢量间存在显著差异，在PPDA培养基上MaYTTR04、MaZPTR01两个菌株的菌落生长速率较快，培养15d后，菌落直径分别为6.3cm和5.9cm；产孢量以MaYTTR04菌株最大，MaZPTR01其次，分别为2.0×108孢子／cm2和1.1×108孢子／cm2。毒力测定结果表明，不同绿僵菌菌株对星天牛幼虫的致病力差异显著，接种20d后，星天牛幼虫累积死亡率在40％～96.7％之间，接种MaZPTR01和MaYTTR04的较高，分别达到96.7％和93.3％，同时接种这2个菌株的星天牛幼虫僵虫率也高，分别达到86.7％和80％，致死中时(LT50)小，分别为5.71d和5.80d，说明该2个菌株对星天牛幼虫的毒力较强，同时又具备良好的生产性能，故可作为优良菌株进一步加以利用。

摘要： 研究了一株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae Ma22菌株对褐飞虱若虫的毒力.结果表明,随着真菌孢子浓度的增加,接种后褐飞虱的逐日死亡率上升.用时间-剂量-死亡率模型对生物测定结果进行模拟分析,估计出了绿僵菌对褐飞虱的致死剂量与致死时间.褐飞虱接种真菌后第6d的LC50值为4.04×105个孢子/ml;在接种剂量为1×106和1×107个孢子/ml时,LT50值分别为5.38d和4.52d.该菌株在褐飞虱的生物防治中具有很大的应用潜力.

摘要： 本文探求从金龟子绿僵菌菌丝体中提取分离苦马豆素的有效方法并改进发酵液中苦马豆素的提取分离方法，以期为优化培养方案、增加苦马豆素获得来源、改进苦马豆素提取分离技术、降低苦马豆素生产成本及工业化生产苦马豆素提供依据。

摘要： 将不同梯度含水量(23.67％、8.57％、6.54％、3.67％)绿僵菌孢子粉以离心管石蜡封装和安培管火焰熔封后在不同温度(室温、4°C、-15°C、-85°C)下贮存，安培管火焰熔封处理优于离心管石蜡封装处理，孢子活率总体随含水量的增加、储存温度升高及贮存时间的延长而呈下降趋势，且各处理间P<0.01，差异极显著。根据对数残留定律y=a·e-bt 拟合估计孢子失活50％所需时间(T50)和失活90％所需的时间(T90)，结果表明：贮存金龟子绿僵菌孢子粉时宜采用安培管火焰熔封，并将其含水量降低到<5％水平。

摘要： 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一.本实验用RT-PCR方法,从本实验室分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blast分析此基因序列与M.anisopliae E6的chi1基因(AF02749)同源率为96％.以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia.coli)BL 21中进行表达.经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63.3％.菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性.

摘要： 在产孢量、发芽率测定的基础上,筛选出分离自松墨天牛、漆蓝卷象、松毛虫、土蝽等不同寄主上的4个球孢白僵菌菌株和3个金龟子绿僵菌菌株,测定对松墨天牛的致病力.结果白僵菌Bma13、F-263菌株和绿僵菌2049对幼虫的致病力最强,在室内接种量1×107孢子/ml时死亡率达100％.白僵菌F-263(7.4×106孢子/成虫)、B08(9.2×105孢子/成虫)和绿僵菌2049菌株(3.4×106孢子/成虫)对成虫致病力最强,室内接种20天后僵虫率分别达到90.％、83.3％和100％.这些菌株今后在防治松墨天牛方面具有较大开发应用价值.

摘要： 小云斑鳃金龟(Polyphylla laticolla laticollis Lewis)是近年来云南省危害马铃薯块茎的地下害虫之一,发生危害严重.本试验在室内测定了从棕色金龟子(Holotrichia titanis Reitter)幼虫体上分离的金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae Metschnikoff(Sorokin)]MA0107对小云斑鳃金龟(P.laticolla laticollis Lewis)幼虫的毒力,并用时间—剂量—死亡率模型进行了模拟分析,同时对该菌种在土壤中的宿存能力进行了测定.结果表明,该绿僵菌菌株对小云斑鳃金龟幼虫具有较强的毒力,剂量效应参数为0.74;该绿僵菌分生孢子在土壤中的宿存量随接种后时间的延续而下降,每克土壤中的成菌落数的对数与处理后的天数成线性相关关系,其有效杀虫成分的分生孢子在土中的半衰期为17天.由此在马铃薯整个生育期内,在土壤中施放该菌种防治小云斑鳃金龟幼虫时,放菌次数应为2~3次.

摘要： 为了明确杀虫真菌绿僵菌与常用的植物源农药之间的相容性,本研究测定了四种植物源农药(苦参碱、鱼藤酮、印楝素和除虫菊素)对绿僵菌Ma41孢子萌发、菌丝生长及产孢量的影响.试验结果表明:除虫菊素与绿僵菌的相容性最好,虽然在常用浓度下,对孢子萌发率和产孢量抑制率分别为51.95％和44.50％,但在亚致死浓度和次亚致死浓度下,对孢子萌发、菌丝生长和产孢的抑制作用都较弱.苦参碱与绿僵菌也有较好的相容性,虽然在常用浓度和亚致死浓度下,对绿僵菌产孢的抑制率达66.08％和55.84％,但在3种试验浓度下,其时孢子萌发和菌丝生长的抑制作用都较小.此外,鱼藤酮和印楝素与绿僵菌的相容性差.

摘要： 研究金龟子绿僵菌次级代谢产物对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响。 将100只14日龄健康无免疫雏公鸡随机分为5组，第Ⅰ-Ⅲ组分别注射高、中、低(4、2、1mg／kg)3种剂量的金龟子绿僵菌次级代谢产物;IV组和V组分别为无佐剂组对照组(No Adjuvant,NA)和空白对照组。第Ⅰ-IV组动物予14日龄以新城疫病毒(NDV)LaSota株弱毒活疫苗滴鼻进行第1次免疫，2周后加强免疫1次。分别于首免前和酋免后连续6周在各免疫组随机抽取10只鸡检测血清中ND-HI抗体效价：于每次免疫后24小时检测外周血中白细胞数;于免疫后42日龄检测免疫器官指数;用MTT法检测脾脏淋巴细胞的增殖活性。金龟子绿僵菌次级代谢产物剂量为1.2mg／kg,大多数实验组鸡的抗体效价与雏鸡脏器(胸腺，脾脏，法氏囊)指数及外周血中自细胞数都显著高于对照组。金龟子次级代谢产物单独或其协同脂多糖(LPS)，植物血凝素P(PHA-P)刺激时，鸡脾脏淋巴细胞的增殖活性增强。金龟子绿僵菌次级代谢产物剂量为4mg/kg时实验组鸡的抗体效价，免疫器官指数和外周血中的白细胞数均减少;鸡脾脏淋巴细胞的增殖活性降低。

摘要： 尽管在巴西和澳大利亚广泛使用金龟子绿僵菌防治甘蔗和牧草害虫取得较大进展，在非洲用黄绿绿僵菌防治蝗虫的试验也很成功，但迄今为止国外还是多采用巴西发明的塑料袋固体培育法或类似的方法，很难形成商业规模。

摘要： 本发明公开了金龟子绿僵菌与绿僵菌素混合杀虫组合物，所述金龟子绿僵菌分生孢子的个数与绿僵菌素的毫克数比为(0.1～10.0)×106∶10～100。本发明克服了现有防治地下害虫单独使用绿僵菌其防治效果不稳定、见效慢的不足，利用绿僵菌素对绿僵菌的增效作用，通过大量试验研究，选择确定了二者最佳的混合比例，开发出绿僵菌与绿僵菌素混配杀虫组合物，同时提供了含所述组合物的杀虫剂。本发明杀虫剂制备和使用方法简单，技术方案切实可行，防治效果稳定而且显著，对防治地下害虫尤其是蛴螬类害虫，具有重要的意义。

摘要： 本发明涉及一种真菌杀虫剂新剂型的生产方法，确切地说是金龟子绿僵菌无纺布菌条生产工艺方法。该方法包括五道生产工序，即菌种的取得、一级斜面菌种培养、液体种子培养、液体发酵罐生产和菌条的接种培养。本发明生产的杀虫剂，对害虫的防治效果持久，对天牛类蛀干害虫杀虫效果明显且稳定，受天气影响相对较小，工艺稳定，投资少，占地小，生产无三废问题。

摘要： 本发明公开了金龟子绿僵菌与绿僵菌素混合杀虫组合物，所述金龟子绿僵菌分生孢子的个数与绿僵菌素的毫克数比为(0.1～10.0)×106∶10～100。本发明克服了现有防治地下害虫单独使用绿僵菌其防治效果不稳定、见效慢的不足，利用绿僵菌素对绿僵菌的增效作用，通过大量试验研究，选择确定了二者最佳的混合比例，开发出绿僵菌与绿僵菌素混配杀虫组合物，同时提供了含所述组合物的杀虫剂。本发明杀虫剂制备和使用方法简单，技术方案切实可行，防治效果稳定而且显著，对防治地下害虫尤其是蛴螬类害虫，具有重要的意义。

摘要： 本发明涉及微生物领域，具体涉及金龟子绿僵菌菌株CIPPMa0941、及防治红火蚁的应用和菌剂。所述菌株的保藏编号为CGMCC No.40238。该菌株对红火蚁有较高毒力，对椰心叶甲、金龟子幼虫和蚜虫也有一定活性；与茚虫威、吡虫啉有较好兼容性,较低浓度的茚虫威、吡虫啉没有影响菌株孢子的萌发，还能有助于菌株侵入红火蚁，提供对红火蚁的致死率。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种绿僵菌IPPMHBHC‑7复合菌剂及其应用。金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBHC‑7，保藏编号为CGMCC No.15999，其对于亚洲小车蝗、毛足棒角蝗具有良好的半数致死时间和僵虫率。本发明将金龟子绿僵菌IPPMHBHC‑7与氯虫苯甲酰胺联合施用，能够显著提高杀虫的速效性和杀虫率。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种绿僵菌IPPMHBHC‑7复合菌剂及其应用。金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBHC‑7，保藏编号为CGMCC No.15999，其对于亚洲小车蝗、毛足棒角蝗具有良好的半数致死时间和僵虫率。本发明将金龟子绿僵菌IPPMHBHC‑7与氯虫苯甲酰胺联合施用，能够显著提高杀虫的速效性和杀虫率。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种金龟子绿僵菌IPPMHBC‑009复合菌剂及其应用。金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBC‑009，保藏编号为CGMCC No.16000，其对于亚洲小车蝗、毛足棒角蝗具有良好的半数致死时间和僵虫率。本发明将绿僵菌IPPMHBC‑009与毒死蜱联合施用，能够显著提高杀虫的速效性和杀虫率。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种金龟子绿僵菌IPPMHBC‑009复合菌剂及其应用。绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBC‑009，保藏编号为CGMCC No.16000，其对于亚洲小车蝗、毛足棒角蝗具有良好的半数致死时间和僵虫率。本发明将绿僵菌IPPMHBC‑009与氯虫苯甲酰胺联合施用，能够显著提高杀虫的速效性和杀虫率。

摘要： 本发明涉及一种真菌杀虫剂新剂型的生产方法，确切地说是金龟子绿僵菌无纺布菌条生产工艺方法。该方法包括五道生产工序，即菌种的取得、一级斜面菌种培养、液体种子培养、液体发酵罐生产和菌条的接种培养。本发明生产的杀虫剂，对害虫的防治效果持久，对天牛类蛀干害虫杀虫效果明显且稳定，受天气影响相对较小，工艺稳定，投资少，占地小，生产无三废问题。

摘要： 本发明公开了一种增强金龟子绿僵菌杀灭白蚁效果的miR‑71‑5模拟物。所述的miR‑71‑5模拟物序列来源于白蚁体内miR‑71‑5，DNA序列为SEQ 1。基于SEQ 1，设计4条单链DNA，序列分别为SEQ 2、SEQ 3、SEQ 4和SEQ 5，通过退火PCR获得2条miR‑71‑5的DNA模板，通过T7体外转录系统合成小分子双链RNA，即为miR‑71‑5模拟物，RNA序列为SEQ 6。利用显微注射技术将miR‑71‑5模拟物导入白蚁体内后，白蚁抗菌活性显著下降，感染死亡率显著上升。此外，将miR‑71‑5模拟物与白蚁食物混合，随后放入白蚁群体中供白蚁取食。白蚁取食miR‑71‑5模拟物后抗菌活性显著下降，感染死亡率显著上升。这表明miR‑7‑5模拟物能够抑制白蚁免疫力，提高生防菌对白蚁的杀灭效果。