重组改构人肿瘤坏死因子

摘要： 目的:探讨重组改构人肿瘤坏死因子与顺铂胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效.方法:选择2017年3月～2019年3月收治的恶性胸腔积液合并肺癌、乳腺癌患者78例,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组39例.对照组给予顺铂药液灌注,观察组给予重组改构人肿瘤坏死因子药液灌注,治疗2周后,对比两组疗效、生存质量和不良反应.结果:观察组治疗总有效率为89.74％(35/39),高于对照组的61.54％(24/39),差异有统计学意义(P<0.05);观察组生存质量改善率为82.05％(32/39),高于对照组的58.97％(23/39),差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应总发生率为41.03％(16/39),低于对照组的82.05％(32/39),差异有统计学意义(P<0.05).结论:对恶性胸腔积液患者胸腔灌注时给予重组改构人肿瘤坏死因子的疗效高于顺铂,能够有效提升患者的生存质量,且并发症较少.

摘要： 目的 探讨重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)治疗肺癌恶性胸腔积液的效果及安全性.方法 选取2017年1月至2020年1月山西省煤炭中心医院血液肿瘤科收治的62例肺癌恶性胸腔积液患者,男33例,女29例,年龄(71.5±4.3)岁,年龄范围为65～90岁.采用随机数表法将患者随机分为顺铂组及rmhTNF组,每组31例,顺铂组采用顺铂治疗,rmhTNF组在顺铂组的基础上加用rmhTNF治疗,比较治疗4周后两组患者的治疗效果、治疗后生活质量、不良反应发生情况及生存期.结果 rmhTNF组患者的缓解率[74.2％(23/31)]高于顺铂组[42.0％(13/31)],总生活质量[(70.56±6.71)分]优于顺铂组[(60.38±5.98)分],差异有统计学意义(P＜0.05).rmhTNF组患者出现4例不良反应,顺铂组出现6例不良反应.rmhTNF组患者无进展生存期、总生存期均长于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 rmhTNF治疗肺癌恶性胸腔积液的缓解率高,生活质量好,值得在临床上推广应用.

摘要： 目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)应用重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)雾化吸入联合化疗的临床效果.方法 将118例NSCLC患者按随机数字表法分为观察组(n=59)和对照组(n=59).对照组予以吉西他滨+卡铂(GP)化疗方案治疗,观察组在此基础上联合rmhTNF雾化吸入治疗,所有患者均治疗4个化疗周期.对比两组患者临床疗效,治疗前后血清相关肿瘤标志物[糖类抗原15-3(CA15-3)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)]水平、外周血中调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞(Th)17水平、癌症治疗性功能评价量表-肺癌(FACT-L)评分变化以及不良反应发生情况.结果 观察组患者的ORR、CBR分别为52.5％(31/59)、81.4％(48/59),均高于对照组的33.9％(20/59)、64.4％(38/59),差异均有统计学意义(P﹤0.05).治疗前,两组患者CA15-3、CEA、CA125、Treg、Th17、Treg/Th17水平及FACT-L中各领域(生理状况、情感状况、社会/家庭状况、功能状况、肺癌附加的关注)评分及总分比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);治疗后,两组患者CA15-3、CEA、CA125、Treg、Th17、Treg/Th17水平均较治疗前下降,生理状况、情感状况、社会/家庭状况、功能状况、肺癌附加的关注评分及总分均较治疗前上升,且观察组患者CA15-3、CEA、CA125、Treg、Th17、Treg/Th17水平均低于对照组,生理状况、情感状况、社会/家庭状况、功能状况、肺癌附加的关注评分及总分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).两组患者消化道反应、骨髓抑制、肝肾功能损害、过敏反应、口腔溃疡不良反应发生情况比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).结论 NSCLC应用rmhTNF雾化吸入联合化疗可有效稳定患者病情,维持体内Treg/Th17稳态,改善生活质量,疗效确切,且患者耐受性良好.

摘要： 目的探讨吉西他滨、顺铂(GP化疗)联合重组改构人肿瘤坏死因子对非小细胞肺癌患者巨噬细胞移动抑制因子、胸苷激酶-1水平的影响。方法选取盘锦辽油宝石花医院自2016年3月至2017年3月收治的100例非小细胞肺癌患者为研究对象。按照随机数字表法将患者分入A组和B组,每组各50例。给予A组患者GP化疗;给予B组患者GP化疗联合重组改构人肿瘤坏死因子治疗。比较两组患者治疗前和治疗后1、6个月的巨噬细胞移动抑制因子、胸苷激酶-1水平,以及两组治疗有效率、不良反应发生率。结果治疗后1、6个月,两组患者的巨噬细胞移动抑制因子、胸苷激酶-1水平均低于治疗前,且B组低于A组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 GP化疗联合重组改构人肿瘤坏死因子治疗非小细胞肺癌安全、有效,可降低患者巨噬细胞移动抑制因子和胸苷激酶-1水平。

摘要： 目的 评价重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF-NC,天恩福)联合顺铂治疗恶性浆膜腔积液的疗效、安全性和对患者生活质量的影响.方法 入组的83例患者中,实验组38例,对照组45例.实验组抽取浆膜腔积液后腔内灌注顺铂50 mg/m2及rmhTNF-NC200万单位,对照组抽取浆膜腔积液后采用顺铂50 mg/m2单药灌注.结果 实验组38例恶性浆膜腔积液患者治疗有效率为84.21％(32/38),对照组45例恶性浆膜腔积液患者治疗有效率为64.4％(29/45),实验组优于对照组(P＜0.01);实验组治疗前后患者KPS评分明显改善(P＜0.05);不良反应发生率与对照组相当(P＞0.05).结论 rmhTNF-NC联合顺铂腔内注射治疗恶性浆膜腔积液可取得更加满意的疗效,改善患者生活质量的同时未发生严重的不良反应,值得临床推广.

摘要： 恶性胸、腹腔积液是晚期恶性肿瘤最常见的并发症之一,预后较差,临床上缺乏公认的标准治疗药物和方案.重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF,天恩福)为肿瘤生物免疫治疗药物,经过临床试验,2004年获得国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准,作为国家一类生物制品在国内上市;主要用于单药或联合化疗治疗复发难治的非小细胞肺癌(NSCLC)和非霍奇金淋巴瘤(NHL).注册临床研究和上市后IV期临床研究均表明,采用rmhTNF腔内灌注治疗恶性胸、腹腔积液具有良效,且患者的安全性和耐受性较好.为了更好地指导临床上合理应用rmhTNF治疗恶性胸、腹腔积液,中国临床肿瘤学会抗肿瘤药物安全管理专家委员会组织了相关领域的多学科专家学者,根据rmhTNF上市前、后治疗恶性胸、腹腔积液的临床研究和真实世界的实践经验,参考国内、外有关文献,共同讨论,多次修改,形成本共识,以供临床医师用药参考.

摘要： 目的:系统评价重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)对比顺铂胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的疗效和安全性.方法:计算机检索PubMed、Cochrane图书馆、Web of Science、中国期刊全文数据库、万方数据库、中国科技期刊数据库、中国医学生物文献数据库,纳入rmhTNF(试验组)对比顺铂(对照组)胸腔灌注治疗恶性胸腔积液的随机对照试验(RCT),提取资料并按照Cochrane系统评价员手册5.3.0评价质量后,采用Rev Man 5.3统计软件对数据进行Meta分析.结果:共纳入7项RCT,合计478例患者.Meta分析结果显示,试验组患者临床总有效率[RR=1.43,95%CI(1.27,1.62),P<0.001]显著高于对照组,差异有统计学意义;试验组患者胃肠道反应[RR=1.15,95%CI(0.73,1.80),P=0.55]、胸痛[RR=1.12,95%CI(0.73,1.73),P=0.60]、发热[RR=0.62, 95%CI(0.35,1.08),P=0.09]、骨髓抑制[OR=0.94,95%CI(0.57,1.54),P=0.79]发生率与对照组比较,差异均无统计学意义.结论:rmhTNF胸腔灌注治疗恶性胸腔积液疗效显著优于顺铂,胃肠道反应、胸痛、发热、骨髓抑制等毒副反应的发生率与顺铂相当.%OBJECTIVE:To systematically evaluate therapeutic efficacy and safety of recombinant mutant human tumor necrosis factor(rmhTNF)versus pleural perfusion of cisplatin in the treatment of malignant pleural effusions,and to provide evidence-based reference in clinic. METHODS:Retrieved from PubMed,Cochrane Library,Web of Science,CJFD,Wanfang database,VIP and CBM,RCTs about rmhTNF(trial group)vs. cisplatin(control group)in the treatment of malignant pleural effusions were included. Meta-analysis was conducted by using Rev Man 5.3 statistical software after quality evaluation and data extraction with Cochrane system evaluator manual 5.3.0. RESULTS:A total of 7 RCTs were included,involving 478 patients. Meta-analysis showed that clinical total response rate of trial group [RR=1.43,95%CI(1.27,1.62),P<0.001] was significantly higher than that of control group,with statistical significance. There was no statistical significance in the incidence of gastrointestinal reaction[RR=1.15,95%CI(0.73,1.80),P=0.55],chest pain[RR=1.12,95%CI(0.73,1.73),P=0.60],fever[RR=0.62,95%CI(0.35,1.08),P=0.09] and myelosuppression[OR=0.94,95%CI(0.57,1.54),P=0.79] between trial group and control group. CONCLUSIONS:Pleural perfusion of rmhTNF is significantly better than cisplatin in the treatment of malignant pleural effusions. The incidences of gastrointestinal reaction,chest pain,fever and myelosuppression induced by rmhTNF were similar to those induced by cisplatin.

摘要： Objective To investigate the clinical effect of Recombinant Mutant Human Tumor Necrosis Factor injection combined with docetaxel and cisplatin in the treatment of non-small cell lung cancer.Methods Totally 178 patients with NSCLC in our hospital from May 2013 to March 2016 were randomly divided into the control group and the study group,89 patients each.The control group was treated with docetaxel combined with cisplatin treatment,and the study group received more with recombinant mutant human tumor necrosis factor injection,21d for a course,and 2 groups were treated for 4 courses.Levels of serum tumor markers changes,application of Chinese cancer chemotherapy patient quality of life scale (QLQ-CCC) and the Karnofsky performance status scale (KPS) assessment of quality of life were compared,and toxicity and survival rate were recorded,and the clinical effects were compared.Results Compared with before treatment,2 groups of serum tumor markers carcinoembryonic antigen (CEA),carbohydrate antigen 125 (CA125) and cytokeratin 19 fragment (Cyfra21-1) decreased (P ＜0.01),QLQ-CCC scale physical,psychological and social score and total scores decreased (P ＜ 0.01),KPS scores increased (P ＜ 0.05).Compared with the control group,the study group of CEA,CA125 and Cyfra21-1 were lower (P ＜ 0.01),levels of QLQ-CCC scale physical,psychological and social scores and total scores were higher (P ＜ 0.01),KPS scores were higher (P ＜ 0.05),objective response rate (ORR) was higher (P ＜ 0.05).At the cut-off follow-up,the survival rate of the control group35.96％ (32/89) was lower than the study group,and the survival rate64.04％ (57/89) was lower than the study group(P ＜ 0.05).Conclusion Recombinant Mutant Human Tumor Necrosis Factor injection combined with docetaxel and cisplatin in the treatment of non-small cell lung cancer was effective,and it can improve the survival rate and quality of life,which was worthy of promotion.%目的 探讨注射用重组改构人肿瘤坏死因子联合多西他赛加顺铂化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的临床效果.方法 选取2013年5月～2016年3月笔者医院收治的178例NSCLC患者,根据就诊顺序随机分为对照组和研究组,每组89例.对照组予多西他赛联合顺铂方案治疗,研究组在上述基础上加用重组改构人肿瘤坏死因子治疗,均以21天为1个疗程,连续治疗4个疗程,并酌情予对症处理.检测血清肿瘤标志物变化,应用中国癌症化疗患者生活质量量表(QLQ-CCC)和卡氏功能状态量表(KPS)评估生活质量,记录毒性不良反应情况和生存情况,并比较临床效果.结果 与治疗前比较,两组血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖蛋白抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)水平降低(P＜0.01),QLQ-CCC量表躯体、心理、社会评分及总评分均降低(P＜0.01),KPS评分升高(P＜0.05);与对照组比较,研究组CEA、CA125、Cyfra21-1水平较低(P＜0.01),QLQ-CCC量表躯体、心理、社会评分及总评分均较高(P＜0.01),KPS评分较高(P＜0.05),客观缓解率(ORR)较高(P＜0.05);截止随访,对照组生存率为35.96％ (32/89)低于研究组生存率64.04％(57/89),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 注射用重组改构人肿瘤坏死因子联合多西他赛加顺铂治疗非小细胞肺癌疗效显著,有效提高生存率和生活质量,值得临床推广.

摘要： Objective To investigate the clinical efficacy of rmhTNF in the treatment of malignant pleural effusion and investigate the relationship between CD133 with efficacy and prognosis of MPE patients treated by rmhTNF.Methods 38 cases of malignant tumor with malignant pleural effusion were selected as the study subjects.RmhTNF was infused intralpeurally at a dose of 300 KU each time and 3-4 times was regarded as one course.10 ml pleural effusion was collected before treatment to detect the expression of CD133 of tumor cells and to analyze the effect and prognosis of MPE treated with rmhTNF and the relationship with CD133.Results Among the 38 patients,there were 0 cases of CR,16 cases of PR,18 cases of SD,4 cases of PD and 42.11％ of total ORR.The total DCR was 89.47％.The median of PFS was 2 month,and the median of OS was 4 month.Patients with PS score (0-1) had higher DCR than patients with PS score (2-3),and the difference was statistically significant.Patients treated with RmhTNF combined with systemic chemotherapy were higher than those of RmhTNF monotherapy in ORR and DCR,PFS and OS were longer.CD133+ tumor cells were detected in 22 patients with malignant pleural effusion before treatment,and CD133+ tumor cells were not detected in 16 patients with malignant pleural effusion before treatment;ORR and DCR in patients with pleural effusion did not detect CD133+ tumor cells were higher than those detected in CD133+ patients;PFS and OS in patients without CD133+ tumor cells in pleural effusion were longer than those detected in CD133+ patients.Condusion CD133+ is an unfavorable factor in the application of rmhTNF in the treatment of MPE patients.In addition,the combination of rmhTNF pleural perfusion combined with systemic chemotherapy can achieve a better curative effect and prognosis than the rmhTNF single drug to treat MPE.%目的 探讨重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)对恶性胸腔积液(MPE)的疗效,分析胸腔积液中肿瘤细胞CD133表达情况对重组改构人肿瘤坏死因子疗效和预后的影响.方法 选择伴有恶性胸腔积液的肿瘤患者38例作为研究对象,应用rmhTNF300万IU胸腔灌注,3d一次,3到4次为一个疗程;治疗前收集10 ml胸腔积液,检测肿瘤细胞CD133的表达情况,分析rmhTNF治疗MPE疗效、预后的影响因素及与CD133的关系.结果 38例患者中,CR病例0例,PR病例16例,SD病例18例,PD病例4例;总的ORR为42.11％,总的DCR为89.47％,PFS中位数为2月,OS中位数为4月;PS评分(0～1)的患者较PS评分(2～3)的患者的DCR高,差别具有统计学意义;RmhTNF联合全身化疗的患者较RmhTNF单药治疗的患者ORR和DCR高,PFS和OS长;治疗前22例患者恶性胸水中检测出CD133+肿瘤细胞,16例患者治疗前胸水中未检测出CD133+肿瘤细胞.胸水中未检测出CD133+肿瘤细胞的患者ORR及DCR较检测出CD133+的患者要高;胸水中未检测出CD133+肿瘤细胞的患者PFS及OS较检测出CD133+的患者长.结论 胸水中检测出CD133+肿瘤细胞是应用rmhTNF治疗MPE患者不利的因素,另外在条件允许的情况下采用rmhTNF胸腔灌注联合全身化疗治疗MPE能取得较rmhTNF单药胸腔灌注更好的疗效和预后.

摘要： 目的:研究用体腔热灌注化疗法联合腔内注射重组改构人肿瘤坏死因子(rmh TNF)法治疗恶性胸腹腔积液的临床效果.方法:将重庆市彭水县人民医院近年来收治的60例恶性胸腹腔积液患者随机分为观察组和对照组.在两组患者入院后,对对照组患者采用常规的化疗药物进行腔内灌注治疗,对观察组患者采用体腔热灌注化疗法联合腔内注射rmh TNF法进行治疗,然后对比两组患者病情的缓解情况.结果:与对照组患者相比,观察组患者病情的总缓解率较高,P<0.05.结论:用体腔热灌注化疗法联合腔内注射 rmh TNF 法对恶性胸腹腔积液患者进行治疗可显著提高其治疗的效果,缓解其病情.

摘要： 目的：探讨重组改构人肿瘤坏死因子注射液胸腔注射治疗恶性胸腔积液的临床疗效与不良反应. 方法：临床选择41例已经CT引导下肿块穿刺或经支气管镜病理学活检及胸水脱落细胞学检查证实恶性肿瘤胸腔积液的患者,随机分为2组,分别进行重组改构人肿瘤坏死因子注射液胸腔注射治疗+全身化疗或全身化疗,观察其疗效与毒副反应. 结果：41例患者治疗结束后4周进行疗效评估,治疗组及对照组总有效率分别为52.38％、30.00％,但治疗组患者胸腔注射治疗后有效率高于对照组,2组患者治疗过程中均无严重不良反应,无Ⅱ度及以上血液学毒性反应.未发生治疗相关性死亡. 结论：重组改构人肿瘤坏死因子注射液胸腔注射治疗恶性胸腔积液疗效确切、并发症少、安全性高、患者耐受性好.

摘要： 本发明改构了可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-“脂联素”球部重组融合蛋白的基因序列，去除了肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部基因间的冗余序列，共去除18个氨基酸，形成了只含有可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部的新的基因；并合成了改造后的基因在哺乳动物细胞中表达的偏爱密码子。经过比较，改构后的基因表达的蛋白更加稳定，优化的密码子在哺乳动物细胞中表达效率提高约4-6倍。本发明还建立了一种快速大量获得蛋白的腺病毒/BHK21表达系统，该表达系统的生产规模易于放大，适应无血清培养，可以反复多次收获目标蛋白，成功制备了有生物学活性的改造后的融合蛋白。

摘要： 本发明公开了一种重组可溶性肿瘤坏死因子α受体(HusTNFR)基因的新药用途。本发明采用I型或II型长效人重组可溶性肿瘤坏死因子α受体，通过5种动物模型，对慢性肝病重症肝损伤的大鼠进行干预，结果显示，半衰期12‑140小时的长效人重组可溶性肿瘤坏死因子α受体具有预防慢性肝病重症肝损伤的发生，以及治疗早期慢性肝病重症肝损伤的良好疗效，其疗效较非长效HusTNFR有明显提高。

摘要： 本文描述了与人肿瘤坏死因子α(hTNFα)结合的抗体。并列出抗体重链与轻链可变区的核苷酸序列及其衍生的氨基酸序列。将此重链及轻链可变区基因分别与人免疫球蛋白gamma 1(hIgG1)重链的恒定区及人kappa(k)轻链恒定区基因连接成嵌合基因。再以含有此嵌合基因的载体引入宿主细胞株表达抗体蛋白。此重组嵌合抗体蛋白在体外测试可中和hTNFα的活性，适用于治疗分泌过多有害的hTNFα的病患，包括某些炎症，如类风湿性关节炎与节段性回肠炎。

摘要： 本发明属基因工程技术、基因功能应用领域，涉及重组可溶性肿瘤坏死因子α受体(HusTNFR)基因的新药用用途，本发明采用I型或II型长效人重组可溶性肿瘤坏死因子α受体，通过急性、亚急性肝衰竭的经典动物模型，对小鼠暴发性肝功能衰竭进行干预，结果显示，其半衰期延长10倍以上，具有良好预防和治疗模型动物急性及亚急性肝衰竭的疗效，明显降低模型动物死亡率。其预防和治疗急性及亚急性肝衰竭的疗效较非长效HusTNFR有明显提高。

摘要： 本发明涉及一种改构人肿瘤坏死因子的分离纯化方法，特别涉及一种经PEG化后的改构人肿瘤坏死因子的分离纯化方法。将常规方法裂菌所得到的rhTNF－αPEG化，经DEAE－离子交换树脂柱分离纯化可得到比活性为2.15－4.11×10

摘要： 本发明改构了可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-“脂联素”球部重组融合蛋白的基因序列，去除了肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部基因间的冗余序列，共去除18个氨基酸，形成了只含有可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部的新的基因；并合成了改造后的基因在哺乳动物细胞中表达的偏爱密码子。经过比较，改构后的基因表达的蛋白更加稳定，优化的密码子在哺乳动物细胞中表达效率提高约4-6倍。本发明还建立了一种快速大量获得蛋白的腺病毒/BHK21表达系统，该表达系统的生产规模易于放大，适应无血清培养，可以反复多次收获目标蛋白，成功制备了有生物学活性的改造后的融合蛋白。

摘要： 本发明涉及4‑苯并吡喃酮衍生物、其药学上可接受的盐、溶剂化物、消旋体或立体异构体、包含其作为有效成分的用于预防、改善、治疗肿瘤坏死因子相关疾病的组合物、利用其的肿瘤坏死因子相关疾病治疗方法、用于抑制肿瘤坏死因子(TNF)的试剂组合物及肿瘤坏死因子抑制方法，所述组合物可以口服给药，因此没有注射副作用，而且没有免疫原性抗性，易于与现有的口服制剂联合给药以及易于调节用量，可通过直接与肿瘤坏死因子结合来有效抑制肿瘤坏死因子活性。

摘要： 本发明公开了一种重组可溶性肿瘤坏死因子α受体(HusTNFR)基因的新药用途。本发明采用I型或II型长效人重组可溶性肿瘤坏死因子α受体，通过5种动物模型，对慢性肝病重症肝损伤的大鼠进行干预，结果显示，半衰期12-140小时的长效人重组可溶性肿瘤坏死因子α受体具有预防慢性肝病重症肝损伤的发生，以及治疗早期慢性肝病重症肝损伤的良好疗效，其疗效较非长效HusTNFR有明显提高。

摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及一种重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体纯化方法。该方法将待纯化重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品上样于平衡后的阳离子交换层析柱，经洗涤、淋洗、再平衡后，洗脱，得到纯化后的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体溶液；待纯化的重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体样品的制备方法为：取整合了人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体基因的中国仓鼠卵巢细胞，经培养后，取细胞培养上清液，采用Protein A亲和层析，即得；淋洗为线性梯度洗脱；再平衡的缓冲液为柠檬酸缓冲液、醋酸缓冲液或磷酸缓冲液。本发明通过淋洗步骤，成功提高了重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体的纯度。

摘要： 本发明公开了一种重组改构人肿瘤坏死因子的生产方法，特别涉及一种采用通过菌种发酵和离子交换法制备重组改构人肿瘤坏死因子的方法。包括如下步骤：采用常规的方法进行裂菌，用Q－sepharose阴离子交换层析，用SP－sepharose阳离子交换层析。采用此生产工艺，单批生产300～400g菌体，可以获得800～1200mg的nrhTNF蛋白，纯度达到95％以上，比活达2～4×10