酶联免疫吸附测定法

摘要： 目的:了解武汉市常青花园小区在售淡水鱼产品的孔雀石绿污染情况。方法:利用酶联免疫吸附测定法对常青花园周边地区的3个菜市场和3个超市所售卖的常见淡水鱼进行检测。结果:共检测组织样本39份,其中检测出孔雀石绿的样本有21份,孔雀石绿检出率为53.8%;超出国家标准的样本有13份,不合格率为33.3%。结论:该区域在售淡水鱼中孔雀石绿的残留情况比较突出。由于试验样本的来源难以进一步追溯,确定孔雀石绿违规添加的环节难度较大,亟需市场监管部门对市售淡水鱼产品从养殖、运输到售卖全链条建立起清晰可查的溯源体系,以便更好地保障市民的食品安全。

摘要： 目的探究分析第3、4代丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测试剂在血站血液检测中的作用。方法选取150份无偿献血者中经过第3、4代ELISA试剂检测后至少1种试剂检测结果为阳性的样本,并采用重组免疫印迹试验(RIBA)进行验证检测。分析HCV ELISA试剂检测结果,对比假阳性与真阳性标本的S/CO值,分析假阳性标本的RIBA条带。结果150份标本中,2种ELISA试剂检测结果均为阳性的标本125份,1种试剂检测结果阳性的标本25份,其中第3代ELISA试剂检测结果阳性150份,第4代ELISA试剂检测结果阳性125份。125份2种ELISA试剂检测结果均为阳性的样本经过RIBA验证,确定阳性样本120份,阳性率为96%;20份第3代ELISA试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA验证,确定阳性1份,阳性率为5%(1/20);5份第4代ELISA试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA验证,确定阳性2份,阳性率为40%(2/5)。说明2种ELISA试剂对HCV检测均为阳性的检测准确率较高。150份标本经RIBA验证,假阳性标本25份,真阳性标本125份。真阳性标本S/CO值高于假阳性标本。说明对于HCV ELISA试剂应当确定S/CO界限值,小于界限值的标本应当选择RIBA验证。影响假阳性结果出现的RIBA条带中,Core条带16条,占比为64%;NS3-1条带5条,占比为20%;NS3-2条带2条,占比为8%;NS4条带2条,占比为8%,无NS5条带。说明Core条带使ELISA试验结果呈现假阳性的几率很高,NS5条带不会影响ELISA试验结果。结论HCV ELISA检测试剂均存在一定假阳性,尤其是S/CO值较低的,或者2种试剂中有1种试剂呈现阴性结果,需要考虑是否为HCV假阳性,同时针对于RIBA条带分析发现,Core条带会使得ELISA结果呈现假阳性,为减少不确定结果,是否将带条带Core报告作为阴性,还需要深入研究。

摘要： 目的回顾分析浙江省无偿献血人群抗HTLV血清阳性率,对不同年龄、性别、地区、献血频次献血者抗HTLV血清阳性率进行比较。方法对2016年3月至2018年2月全省献血者血液标本采用酶联免疫吸附测定法进行抗HTLV筛检,抗HTLV反应性标本用免疫印迹试验进行确认。不同年龄、性别、地区、献血频次献血者抗HTLV血清阳性率比较采用χ^(2)检验。结果共检测无偿献血者标本1346673例,其中抗HTLV反应性为362例,反应性率为0.027%。确认阳性为48例,阳性率为0.004%。统计分析显示,不同年龄组无偿献血人群抗HTLV血清阳性率的差异、初次献血者与重复献血者抗-HTLV血清阳性率的差异、不同地区无偿献血人群抗HTLV血清阳性率差异均有统计学意义(P<0.01),但不同性别无偿献血人群抗HTLV血清阳性率无显著性差异。结论浙江省无偿献血人群HTLV感染率较低,不同年龄、献血频次和地区抗HTLV阳性率存在差异,应加强重复献血者队伍的建设,保障血液的安全。

摘要： 哮喘和变应性支气管肺曲霉菌病(allergic bronchopulmonary aspergillosis,ABPA)的临床表现相似,极易造成因漏诊、误诊而延误治疗.为提高这两种疾病诊断的准确性,运用蛋白芯片技术,分别检测哮喘患者、ABPA患者和正常对照受试者的血清蛋白质;经过生物信息软件分析,筛选出具有诊断价值的候选蛋白质生物标志物;利用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)质谱和酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),对候选靶标进行单一样本扩大数量和验证;并采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评估候选蛋白质生物标志物的诊断价值.研究发现:与正常对照组比较,哮喘组有7个差异表达蛋白质,ABPA组有15个差异表达蛋白质;与哮喘组比较,ABPA组有15个差异表达的蛋白质.MRM法的验证结果显示:与正常对照组比较,哮喘组的SERPINF2、C6和HABP2蛋白呈现显著性差异表达,ABPA组的SERPINF2和F10呈现显著性差异表达;ABPA组与哮喘组比较,CPN2和IGLL5呈现显著性差异表达.ELISA法验证结果表明:ABPA患者血清的CSF1蛋白质水平明显低于哮喘患者的,而TNFRSF10C蛋白质水平明显高于哮喘患者的.ROC曲线结果显示:与正常对照组比较,哮喘组差异蛋白质C6的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.914,敏感度为73.3%,特异性为99.9%,ABPA组F10的ROC曲线AUC为0.871,敏感度为80.0%,特异性为85.7%;与哮喘组比较,ABPA组中CPN2和IGLL5联合诊断的AUC为0.867,敏感度为86.7%,特异性为80.0%.由此可见,新筛选出的蛋白质生物标志物与哮喘或ABPA的发生发展密切相关,具有诊断与鉴别诊断的潜能.

摘要： 治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用.单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高.单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域.根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代.我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物.单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性.对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施.目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等.本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考.

摘要： 目的 研究电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附测定(ELISA)法在检测乙型肝炎病毒感染血清学标志物中的应用效果.方法 选取98例乙型肝炎病毒感染患者作为研究对象,全部患者均应用ECLIA和ELISA法检测血清学标志物.比较两种检测方法的诊断准确率及对血清标志物的阳性检出率.结果 ECLIA的诊断准确率为98.98％(97/98),高于ELISA法的74.49％(73/98),差异具有统计学意义(χ2=25.542,P0.05).结论 对比ELISA法,对乙型肝炎病毒感染患者实施ECLIA检测其诊断准确率更高,可准确并监测病情,临床应用价值更高,可推广.

摘要： 目的:观察与分析化学发光法与酶联免疫吸附测定法应用到乙型肝炎两对半检测中效果,为临床检测提供参考.方法:选取2019年05月-2021年04月期间在我院确诊为乙型肝炎的115例患者为对象,分别采用化学发光法与酶联免疫吸附测定法测定患者血液样本中HBsAb(乙型肝炎表面抗体)、HBsAg(乙型肝炎表面抗原)、HBeAb(乙型肝炎E抗体)、HBeAg(乙型肝炎E抗原)及HBcAb(乙型肝炎核心抗体)情况,并比较检测结果.结果:115例患者中采用化学发光法检测HBsAg、HBeAb、HBeAg阳性率明显高于酶联免疫吸附测定法(P0.05).结论:化学发光法检测患者乙型肝炎两对半各指标情况优于酶联免疫吸附测定法,在临床血液检测中值得优选.

摘要： 含鹅膏肽类毒素致命鹅膏中毒可导致患者肝功能障碍,严重者出现死亡,经酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测鹅膏肽类毒素有助于早期临床确诊.本文三例患者经ELISA鉴定为含α-鹅膏毒肽的致命鹅膏中毒,中毒患者以消化系统损害为首发症状,后期出现肝功能损害,1例患者放弃治疗后死亡,予以吸附毒素、导泻、补液促进毒物代谢、保肝等支持治疗后,2例患者好转出院.

摘要： 目的:分析利用PCR技术在检测乙型肝炎中的应用情况.方法:治疗时间段从2018年1月截止到2019年12月期间,在我院检查的乙肝患者中选出愿意参加的120例,按照随机分配法分为两组,每组60例,给予对照组患者常规酶联免疫吸附测定法进行检验,给予观察组患者PCR技术进行检验,对比两组患者的乙型肝炎检出率.结果:对照组患者乙型肝炎检出人数为85例,占比70.83％;观察组患者乙型肝炎检出人数为118例,占比98.33％,观察组明显高于对照组(P<0.05).结论:在乙型肝炎检验中,应用PCR技术准确性更高,值得临床应用推广.

摘要： 探讨孕酮及其受体、白细胞介素8(IL-8)在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达,以及孕酮、孕酮受体与IL-8的相关性。应用酶联免疫吸附测定法和免疫组织化学染色法分别检测30例原因不明自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠妇女(对照组)血清孕酮、IL-8以及绒毛和蜕膜组织PR、IL-8的表达情况。①流产组血清孕酮水平明显低于对照组,血清IL-8水平明显高于对照组;②孕酮受体在2组绒毛组织的蛋白表达均为阴性;孕酮受体在2组蜕膜组织中均表达于蜕膜基质细胞的细胞核,且流产组表达水平明显低于对照组;③IL-8在2组绒毛组织中均表达于绒毛上皮细胞的细胞质,且流产组的表达水平明显高于对照组;IL-8在2组蜕膜组织中均表达于蜕膜基质细胞的细胞质,且流产组的表达水平高于对照组;④流产组血清孕酮与IL-8呈显著负相关性,流产组蜕膜组织孕酮受体与IL-8呈显著负相关性。以结果提示孕酮、孕酮受体低表达、IL-8高表达可能与原因不明自然流产的发生有关,且孕酮、孕酮受体可能通过下调IL-8的表达来维持正常妊娠。

摘要： 本文对赭曲霉毒素A的常用检测方法进行了考察,主要考察了高效液相色谱法,酶联免疫吸附测定法和胶体金免疫快速定量检测法的检测限和定量限,适用的线性范围和精确度等因素,分析了三种检测方法的优劣,得出，HPLC法需要的试剂较多，需要接触OTA的标准品，使用的免疫亲和柱也需要冷藏保存，色谱仪更是需要避免移动，便携性不强，实验耗时较长。该方法的重复性好，准确度高，因此国家标准中推荐此方法。ELISA法需要的仪器和设备不多，试剂盒也需要冷藏保存，接触到的标准品一般浓度较低甚至没有。酶标仪可以携带，一次可以检测大批量的样品，适合于样品的初步筛选。GCIT法所需要的孵育器和读数仪体积不大，一般无需接触标准品，具有一定的优势，但是其精确度相比较略差，适用于样品的现场检测和筛选。

摘要： 目的：通过对城市社区60岁以上老年人群尿液中神经丝蛋白(AD7c-NTP)含量的测定,初步探索其在老年性痴呆(AD)早期筛查诊断中的价值.rn 方法：采用酶联免疫吸附测定法(ELISA),检测病例组(86例)与年龄、性别相匹配的对照组(172例)尿液中AD7c-NTP的含量,绘制ROC曲线,计算灵敏度与特异度.rn 结果：病例组尿AD7c-NTP值平均为((2.32±1.38)ng/ml，对照组尿AD7c-NTP值平均为(0.86±0.62)ng/ml，两组间差异具有显著性统计学意义(F=138.041，P＜0.01);ROC曲线下的面积为0.854，当临界值选定为1.313ng/ml时，灵敏度为84.9%，特异度为70.3%。rn 结论：尿液中AD7c-NTP的含量可作为AD早期筛查诊断的生化指标。

摘要： 近年来，基于抗原—抗体分子识别的免疫分析技术，特别是酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)逐步发展起来，它具有简单、快速、灵敏、廉价及在线检测农产品中农药残留等优点，已成为最有应用价值和发展潜力的痕量分析技术之一。rn 本文旨在利用单克隆抗体技术获得高特异性的抗体，建立ELISA方法检测有机磷农药对硫磷的残留，通过对硫磷标准品的检测，选定抗原抗体的工作浓度，并在选定的浓度下进行样品添加回收率实验，检验其在实际样品检测中的可运用性。再对分子结构与对硫磷相似的几种有机磷类农药进行交叉反应实验，检测实现农药多残留检测的可能性，为商品化有机磷农药试剂盒提供支持。

摘要： 目的：探讨并评价不同的检验方法对沙眼衣原体检测结果的影响.方法：采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法与免疫胶体金技术对5364例标本进行沙眼衣原体检测,并对两种方法的检测结果进行比较.结果：ELISA与免疫胶体金技术检测结果比较,总体标本及女性标本检测结果的差异无统计学意义(P＞0.05),ELISA检测男性标本的阳性检出率为11.02％,显著高于女性标本4.2％(P＜0.05).结论：ELISA法特异性、敏感性高于免疫胶体金技术,对男性尿道沙眼衣原体感染的早期诊断具有重要意义.

摘要： 目的：探讨并评价不同的检验方法对沙眼衣原体检测结果的影响.方法：采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法与免疫胶体金技术对5364例标本进行沙眼衣原体检测,并对两种方法的检测结果进行比较.结果：ELISA与免疫胶体金技术检测结果比较,总体标本及女性标本检测结果的差异无统计学意义(P＞0.05),ELISA检测男性标本的阳性检出率为11.02％,显著高于女性标本4.2％(P＜0.05).结论：ELISA法特异性、敏感性高于免疫胶体金技术,对男性尿道沙眼衣原体感染的早期诊断具有重要意义.

摘要： 目的：探讨并评价不同的检验方法对沙眼衣原体检测结果的影响.方法：采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法与免疫胶体金技术对5364例标本进行沙眼衣原体检测,并对两种方法的检测结果进行比较.结果：ELISA与免疫胶体金技术检测结果比较,总体标本及女性标本检测结果的差异无统计学意义(P＞0.05),ELISA检测男性标本的阳性检出率为11.02％,显著高于女性标本4.2％(P＜0.05).结论：ELISA法特异性、敏感性高于免疫胶体金技术,对男性尿道沙眼衣原体感染的早期诊断具有重要意义.

摘要： 目的：探讨并评价不同的检验方法对沙眼衣原体检测结果的影响.方法：采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法与免疫胶体金技术对5364例标本进行沙眼衣原体检测,并对两种方法的检测结果进行比较.结果：ELISA与免疫胶体金技术检测结果比较,总体标本及女性标本检测结果的差异无统计学意义(P＞0.05),ELISA检测男性标本的阳性检出率为11.02％,显著高于女性标本4.2％(P＜0.05).结论：ELISA法特异性、敏感性高于免疫胶体金技术,对男性尿道沙眼衣原体感染的早期诊断具有重要意义.

摘要： 本实验制备一种抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单克隆抗体,并使用该单抗建立了间接竞争ELISA方法,用于检测谷物、饲料等中的黄曲霉毒素B1.使用AFB1-BSA作为免疫原和包被原,通过细胞融合,细胞亚克隆,筛选出阳性细胞,收集腹水抗体;通过条件优化,最终确定包被原浓度为1μg/mL,抗体的最佳稀释倍数为1∶10000,并建立了相应的间接竞争ELISA方法,用于玉米样品检测,其添加回收率在80～95％之间.

摘要： 本实验制备一种抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单克隆抗体,并使用该单抗建立了间接竞争ELISA方法,用于检测谷物、饲料等中的黄曲霉毒素B1.使用AFB1-BSA作为免疫原和包被原,通过细胞融合,细胞亚克隆,筛选出阳性细胞,收集腹水抗体;通过条件优化,最终确定包被原浓度为1μg/mL,抗体的最佳稀释倍数为1∶10000,并建立了相应的间接竞争ELISA方法,用于玉米样品检测,其添加回收率在80～95％之间.

摘要： 本实验制备一种抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单克隆抗体,并使用该单抗建立了间接竞争ELISA方法,用于检测谷物、饲料等中的黄曲霉毒素B1.使用AFB1-BSA作为免疫原和包被原,通过细胞融合,细胞亚克隆,筛选出阳性细胞,收集腹水抗体;通过条件优化,最终确定包被原浓度为1μg/mL,抗体的最佳稀释倍数为1∶10000,并建立了相应的间接竞争ELISA方法,用于玉米样品检测,其添加回收率在80～95％之间.

摘要： 本文报道了用于在样品中测定配体结合性蛋白(治疗剂)的配体的量(总量，即结合能力)的方法，其按以下顺序包括以下步骤：对样品进行酸处理，通过向样品中加入抗配体抗体和标记的配体结合性蛋白，在溶液中形成非共价复合物，所述复合物包含i)抗配体抗体，ii)配体，和iii)标记的配体结合性蛋白，和测定复合物的量，从而确定配体结合性蛋白的配体的量。

摘要： 本发明涉及一种用于进行以微波为媒介的酶联免疫吸附测定(MELISA)的快速而有效的方法，用于检测微量的生物分子，例如抗原、抗体等。本发明尤其涉及一种以微波为媒介将抗原和抗体固定在活化后的表面上，随后采用可控的微波辐射进行随后的ELISA步骤。本发明的工艺能够将ELISA所需的总时间从数小时到几天显著地降低到不到10分钟。本发明的ELISA工艺具有快速、经济、再现、简单的优点，并具有自动化的潜力。其在临床诊断、分子生物、农业、食品工艺、环境科学、生物医学研究以及其他相关领域进行ELISA方面非常有用。

摘要： 本文报道了用于在样品中测定配体结合性蛋白(治疗剂)的配体的量(总量，即结合能力)的方法，其按以下顺序包括以下步骤：对样品进行酸处理，通过向样品中加入抗配体抗体和标记的配体结合性蛋白，在溶液中形成非共价复合物，所述复合物包含i)抗配体抗体，ii)配体，和iii)标记的配体结合性蛋白，和测定复合物的量，从而确定配体结合性蛋白的配体的量。

摘要： 本实用新型涉及一种包括一个或多个样品井的样品板、自动化装置、用于测定液体中一种或多种受关注的分析物的装置、用于执行酶联免疫吸附测定过程的套件和用于执行核酸探测过程的套件，其中一个或多个所述样品井包括：基部和设在所述基部中的一个或多个孔穴或凹陷，所述一个或多个孔穴或凹陷包括圆形的锥形孔径，并且其中在使用中，试剂珠或微球体通过压入保持或紧固在所述锥形孔径内。

摘要： 本实用新型提供了一种用于纸质酶联免疫吸附测定的酶标板，包括固相载体和包被层，固相载体为设置有多个疏水区的纸质微孔板，包被层附着在每一疏水区环绕的亲水区的表面，包被层包括由内向外依次布设于亲水区表面的高碘酸钠‑壳聚糖修饰层、包被抗体层、牛血清白蛋白封闭层。该用于纸质酶联免疫吸附测定的酶标板，高碘酸钠‑壳聚糖修饰层使包被抗体层通过化学交联方式固定于纸质微孔板的亲水区表面，增强了包被抗体层固定的稳定性和有效性，提高了p‑ELISA法的灵敏度并且重复性好。

摘要： 本发明公开了一种用于检测人下呼吸道博卡病毒的间接酶联免疫吸附测定法试剂盒及其应用，本发明的一种用于检测人下呼吸道博卡病毒的间接酶联免疫吸附测定法试剂盒，包括包被抗体、抗原、校准品、质控品、样品稀释液，所述包被抗体为抗人下呼吸道博卡病毒VP2融合蛋白单克隆抗体；所述抗原为人下呼吸道博卡病毒VP2融合蛋白；所述校准品为以ProSpec公司Procalcitonin Human Recombinant(HOR‑304，纯度≥97.0％)为HBoV阳性血清。本发明具有使用简便、检测快速、灵敏、稳定、操作简便等优点，具有较高的灵敏度和特异性，抗干扰能力强。

摘要： 本发明公开了一种STLV双抗原夹心酶联免疫吸附测定法及其试剂盒，该测定法包括以下步骤：1)STLV抗原包被；2)包被板封闭；3)加入酶标的STLV抗原；4)加入被检标本以及标本稀释液，使标本中的抗体与固相载体上的抗原复合物充分反应，形成固相抗原－抗体－酶标抗原复合物，洗涤除去未结合抗体和杂质；5)加底物显色，通过比色，测标本中抗体的量。经过改良的STLV双抗原夹心酶联免疫吸附测定法及其试剂盒具有检测速度快，节省人力、物力、降低检测成本等优点。符合快速、简单、明了的方法，易于推广，能满足基础需要，并适合流行病学调查。

摘要： 本发明公开了一种检测小分子物质的间接竞争酶联免疫吸附测定法。其目的是提供一种简化的检测小分子物质的间接竞争酶联免疫吸附测定法。该检测小分子物质的间接竞争酶联免疫吸附测定法，由以下步骤组成：1)包被；2)洗板；3)依次加入标准样品和待测样品，酶标二抗和小分子物质特异性抗体；4)洗板；5)加底物显色和终止反应。本发明的检测小分子物质的间接竞争酶联免疫吸附测定法中，采用了加入酶标二抗之后立即加入小分子物质特异性抗体的步骤，与现有的方法相比，不但省去了一步洗板的步骤，而且节省了酶标二抗与抗体结合所需的半小时，使测定时间缩短半小时以上，而且提高了检测灵敏度3－5倍。

摘要： 本实用新型公开了一种用于斑点‑酶联免疫吸附测定法压膜点孔的简易装置，包括安装座和印具，所述安装座一侧面上设有若干个探头，每个所述探头上活动套设有所述印具。本实用新型大量制备点样孔，大大提高工作效率，点样孔整齐、美观、高效、操作简单、使用性强、材料易得、成本低廉。

摘要： 本实用新型提供了一种基于酶联免疫吸附测定法系列检测试剂盒，包括盒体，所述盒体包括试剂腔、冷腔和工具腔，所述冷腔设置在试剂腔下方，所述工具腔设置在冷腔下方，盒体上铰接有盒盖，试剂腔内设置有第一试剂槽和第二试剂槽，冷腔内设置有制冷器，工具腔顶部设置有滑轨，工具腔内设置有工具板，所述工具板边缘上设置有滑轮，工具板上还设置有工具槽；本实用新型内设置的制冷器可以保证在运输及保存过程中，试剂盒中试剂始终包括稳定状态，工具板的滑动设计方便了工具的放和取。