酶法测定

摘要： 酶法测定血清肌酐特异性好、抗干扰强、线性范围广,现已成为全自动生化分析仪测定血清肌酐的常用方法.本例报道为1例疑似肾功能不全患者,应用酶法检测血肌酐波动较大,且末次入院无急性肾功能衰竭的诱因,考虑IgM大分子蛋白影响了血清肌酐检测结果,遂用干化学法或抗干扰强的试剂进行复查,结果未见肌酐检测值呈假阳性增高.

摘要： 以壳聚糖为载体对醇脱氢酶(ADH)和脲酶(UASE)进行固定化。固定化的最适条件:ADH和UASE的偶联时间分别为2.5h和1.5h,交联剂戊二醛浓度为0.6%和0.5%,偶联pH值为6.8和5.0。对游离酶及固定化酶的性质研究表明,ADH酶促反应的最适宜pH为8.0和8.4,最适宜温度为33°C和35°C,米氏常数为48mmol/L和13mmol/L;UASE酶促反应的最适宜pH均为7.0,最适宜温度为60°C和72°C,米氏常数为0.4mmol/L和2mmol/L。固定化酶与游离酶相比在复用性上具有优势,用固定化酶测定了试样中尿素含量以及模拟样中银离子含量。

摘要： 研究十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)-辛烷-己醇反胶束体系固定化醇脱氢酶(ADH)的制备及应用。考察了含水量、CTAB和己醇用量对于ADH固定化的影响。对游离酶和固定化酶的催化动力学性质研究表明:酶促反应的最适pH值分别为8.2和8.8,最适温度分别为31°C和20°C,米氏常数分别为12mmol/L和7mmol/L。30°C时,游离酶存放150min后失活90%,固定化酶失活50%,表明反胶束固定化ADH有较好的热稳定性。应用此体系测定了试样中乙醇的含量。

摘要： Chitosan was used as a support,alcohol dehydrogenase( ADH) was immobilized by crosslinking combination. The optimum conditions of immobilization for ADH were that chitosan was crosslinked with 0. 6%glutaraldehyde and reacted with ADH for 2. 5h in the enzyme solution of pH6. 8. The study on the enzymatic characterizations of free and immobilized ADH indicates that optimum pH value of the enzymatic reaction were 8. 2 and 8. 4,the temperatures were 34°C and 35°C,the Km value were 13mmol·L-1 and 48mmol·L-1 respectively. It indicated that the immobilized enzyme has advantage of reuse stability over free enzyme. The immobi-lized enzyme has been used to determine trace chrome in sample.%以壳聚糖为载体,通过交联结合使醇脱氢酶( ADH)得以固定化。固定化的最适条件为：交联剂戊二醛浓度0．6%,pH值6．8,酶的偶联时间2．5h。对游离酶和固定化酶的动力学性质研究表明,酶促反应的最适pH分别为8．2和8．4,最适温度为34°C和35°C。酶的米氏常数为13mmol·L-1和48mmol·L-1。与游离酶相比,固定化酶在复用性上具有优势。应用固定化酶测定了试样中铬含量。

摘要： 目的 比较两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能.方法 分别应用国产与进口两种血清游离脂肪酸检测试剂盒,通过雅培c8000全自动生化分析仪测定50份体检样本血清游离脂肪酸浓度,进行精密度、准确度、抗干扰和线性试验等分析性能的评价与比较.结果 ①精密度分析结果:国产试剂的批内CV％为7.6％、5.8％,批间CV％为9.6％;进口试剂的批内CV％为0.7％、2.8％,批间CV％为2.2％.②平均回收率结果:国产试剂平均回收率为100.3％,进口试剂为97.76％,两者差异无统计学意义(P＞0.05).③线性范围分析结果:在3.11 mmol/L内,国产试剂测定血清游离脂肪酸线性相关性良好;在3.23mmol/L内,进口试剂线性相关性良好,且两者差异无统计学意义(P＞0.05).④干扰试验分析结果:在血红蛋白＜0.12mmol/L,胆红素＜0.34mmol/L,甘油三酯＜11.3mmol/L,维生素C＜1.2mmol/L条件下,两种试剂盒测定血清血清游离脂肪酸的结果之间无显著差异(P＞0.05).⑤对临床血清游离脂肪酸测定结果分析表明,两种试剂相关性好(Y九强 =0.9667X德赛+0.0175,R2=0.9801,P＜0.05,n=50),偏差无统计学差异(P＞0.05).结论 国产与进口试剂盒检测血清游离脂肪酸结果一致性较好,且CV％均小于10％.国产试剂精密度相对较低,线性可达3.11 mmol/L,抗干扰能力较强.该结果表明两种试剂盒的分析性能无明显差异,具有较好可比性.

摘要： 目的:非抗凝标本用于HbA1c％酶法测定的可行性.方法:采取60例糖尿病患者EDTAK2抗凝血标本及非抗凝血标本各1份,测定HbA1c％,比较抗凝组及非抗凝组HbA1c％结果.结果:抗凝组及非抗凝组HbA1c％测定结果差异无显著性.结论:非抗凝标本可以用于HbA1c％的酶法测定.

摘要： 目的 建立一种酶法测定血清钾离子液体试剂的方法,并评估该液体试剂的重复性(批内精密度)、抗干扰能力、线性、热稳定性,与离子选择电极法(ISE)的相关性.方法 对原有酶法测定血清钾离子方法进行了改进,并参考临床和实验室标准协会(CLSI)相关文件对试剂进行评估.结果 批内精密度0.846％～1.338％;线性范围0～10 mmol/L(γ=0.999);干扰物浓度总胆红素(TBil)600 mg/L,直接胆红素(DBil)600 mg/L,维生素C(Vc)600 mg/L,乳糜15 mg/L,血红蛋白10g/L时对试剂干扰不明显(≤±10％),抗钠离子干扰为249;该液体试剂与ISE法的回归方程Y=1.0345 X+0.0753,相关系数γ为0.984(P＜0.001),显著相关;试剂热稳定性在37°C下放置7d后初始吸光度值降低15.43％.结论 试剂改良后线性、批内精密度、抗干扰能力、热稳定性、与ISE显著相关.

摘要： 目的：非抗凝标本用于HbA1c%酶法测定的可行性。方法：采取60例糖尿病患者EDTAK2抗凝血标本及非抗凝血标本各1份,测定HbA1c%,比较抗凝组及非抗凝组HbA1c%结果。结果：抗凝组及非抗凝组HbA1c%测定结果差异无显著性。结论：非抗凝标本可以用于HbA1c%的酶法测定。

摘要： 以壳聚糖作为载体,戊二醛作为交联剂对脲酶进行固定化。固定化的最适条件为:酶的偶联时间60min,戊二醛浓度0.5%,pH值7.0。对游离及固定化脲酶的酶学性质研究表明,酶促反应的最适pH均为7.0,最适温度分别为33°C和70°C。米氏常数分别为29.8mmol/L和13.9mmol/L。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性和贮存稳定性更佳。应用固定化酶测定了试样中的微量组分。

摘要： 近年来随着经济的发展,人民生活水平的不断提高,人群的健康状况亦发生很大改变,特别是高血糖和高血脂人群出现年轻化的趋势.为了解健康人群的变化趋势,对2008年体检人群的血糖、血脂指标检测结果进行分析,报道如下.

摘要： 目的:了解血糖、血脂及血尿酸浓度在不同年龄组的改变以及与性别的关系。方法：采用葡萄糖氧化酶法测定血糖(GLU)；采用酶法测定血胆固醇(TC)、血甘油三酯(TG)；采用尿酸酶法测定血尿酸(UA)的水平。脂肪肝以B超为诊断依据。结果：(1)血糖、血脂和血尿酸的水平存在年龄差异,随年龄的增长而升高。且30岁以上各年龄组均高于30岁以下组,差异有统计学意义。而TC、TG平均值及异常检出率至50～59岁组达最高峰,以后TC开始下降,在80岁以后下降。TG有所下降,但在80岁以后仍有增高趋势；(2)男性组血糖、血脂和血尿酸的水平高于女性组,尤其70岁以下各组男性组血尿酸水平高于女性组,差异有统计学意义。而50岁以上组TC女性组高于男性组、60岁以上组TG女性组高于男性组；(3)脂肪肝检出率峰值见于60～70岁组。结论：上述结果显示低年龄组和男性组及50岁以上女性组人群血糖、血脂及血尿酸浓度的高水平和高检出率,迫切需要对这些人群开展正确的健康营养宣教和干预策略,是预防和控制慢性疾病的有效手段。

摘要： 本文利用商品血清胆固醇试剂盒(酶法)建立了一种快速、简单、准确测定鸡蛋总胆固醇含量的方法。取全蛋液约500mg(蛋黄液约200mg)用5000μL无水乙醇旋涡振荡提取1min,离心(10000转/min,10min),取200μL上清夜与2000μL测定试剂混匀,37°C保温10min,测定500nm的吸光值。本方法线性范围为0～120μg胆固醇,测定极限约0.40μg、0.15μg,在1h内可以测出胆固醇含量。利用本文建立的方法对3种鸡蛋胆固醇含量进行了测定,每克可食部分含量为3.879mg～3.950mg,每枚含量范围为198.9～210.1 g,平均为206.32mg。

摘要： 本文利用商品血清胆固醇试剂盒(酶法)建立了一种快速、简单、准确测定鸡蛋总胆固醇含量的方法。取全蛋液约500mg(蛋黄液约200mg)用5000μL无水乙醇旋涡振荡提取1min,离心(10000转/min,10min),取200μL上清夜与2000μL测定试剂混匀,37°C保温10min,测定500nm的吸光值。本方法线性范围为0～120μg胆固醇,测定极限约0.40μg、0.15μg,在1h内可以测出胆固醇含量。利用本文建立的方法对3种鸡蛋胆固醇含量进行了测定,每克可食部分含量为3.879mg～3.950mg,每枚含量范围为198.9～210.1 g,平均为206.32mg。

摘要： 本文利用商品血清胆固醇试剂盒(酶法)建立了一种快速、简单、准确测定鸡蛋总胆固醇含量的方法。取全蛋液约500mg(蛋黄液约200mg)用5000μL无水乙醇旋涡振荡提取1min,离心(10000转/min,10min),取200μL上清夜与2000μL测定试剂混匀,37°C保温10min,测定500nm的吸光值。本方法线性范围为0～120μg胆固醇,测定极限约0.40μg、0.15μg,在1h内可以测出胆固醇含量。利用本文建立的方法对3种鸡蛋胆固醇含量进行了测定,每克可食部分含量为3.879mg～3.950mg,每枚含量范围为198.9～210.1 g,平均为206.32mg。

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 为探讨汉族人肝脂酶(HL)基因启动子-514C/T多态性与冠心病的关系.采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了127例冠心病患者和100例健康对照组汉族人HL基因启动子-514C/T多态性基因型,探讨了其对血脂、脂蛋白和载脂蛋白水平的影响.

摘要： 一种联用终点平衡法和酶反应动力学过程分析法处理酶反应过程数据测定酶底物量的方法；连续记录的酶反应曲线中相邻数据间信号变化超过仪器噪声两倍者为有效数据；测定加入少量酶液前的检测信号，校正酶液稀释效应得校正后起点信号；酶反应曲线中有效数据不多于7个或校正后起点信号与所记录最后数据之差绝对值小于仪器噪声50倍时用终点平衡法确定反应终点信号，有效数据多于七个、校正后起点信号与所记录最后数据之差绝对值大于仪器噪声50倍且底物消耗比例达到要求时用酶反应过程分析法预测反应终点信号；用校正后起点信号与反应终点信号之差的绝对值为测量指标，据标准品响应曲线确定待测底物浓度；该方法适用于可连续监测的不可逆酶反应体系。

摘要： 本发明公开了一种酶联比色法测定磷脂酶D酶活性的优化方法，一是通过反应体系充分反应，得到待测样品溶液；二是使用全波长酶标仪对待测样品溶液进行吸光度进行检测，得到样品溶液的吸光度值；三是以氯化胆碱物质的量为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并以样品溶液的吸光度值对照标准曲线得到对应胆碱物质的量；四是通过定义酶活并通过公式计算得到酶活数据。本发明中优化了磷脂酶D酶活性测定方法，解决了现有的酶联比色法中关于底物溶解、反应条件、终止反应、以及数据取得的问题，利用该方法测定磷脂酶D的酶活性用时短、操作简便、灵敏度高、重复性好、实用性强，并且确定了反应中所用试剂组成，有望进一步开发形成商品化试剂盒。

摘要： 本发明公开了一种电化学聚合信号放大的酶联免疫方法，用于乳制品中三聚氰胺的定量检测。方法采用竞争免疫反应，所用酶标二抗为硝基还原酶标记二抗，底物为硼氢化钠与邻硝基苯酚。在酶催化作用下，硼氢化钠将无法电聚合的邻硝基苯酚还原成可电化学聚合的邻氨基苯酚。反应后加入石墨烯作为电解质，用丝网印刷电极进行循环伏安电化学聚合。在电极表面滴加电解质溶液，检测电极表面形成的纳米复合物放大的电化学信号，从而测定样品中三聚氰胺的含量。本发明提出的方法结合了免疫反应的高特异性和纳米电聚合催化的高灵敏性，具有方法简便，准确度高，灵敏度好，检出限低的优点，可用于乳制品中三聚氰胺含量的测定。

摘要： 一种联用终点平衡法和酶反应动力学过程分析法处理酶反应过程数据测定酶底物量的方法；连续记录的酶反应曲线中相邻数据间信号变化超过仪器噪声两倍者为有效数据；测定加入少量酶液前的检测信号，校正酶液稀释效应得校正后起点信号；酶反应曲线中有效数据不多于7个或校正后起点信号与所记录最后数据之差绝对值小于仪器噪声50倍时用终点平衡法确定反应终点信号，有效数据多于七个、校正后起点信号与所记录最后数据之差绝对值大于仪器噪声50倍且底物消耗比例达到要求时用酶反应过程分析法预测反应终点信号；用校正后起点信号与反应终点信号之差的绝对值为测量指标，据标准品响应曲线确定待测底物浓度；该方法适用于可连续监测的不可逆酶反应体系。

摘要： 本发明涉及一种用酶标法测定海马幼苗组织消化酶活力的方法，包括：1)将冰冻海马幼苗加入到容器中，冰浴下再加入0.7％NaCl的生理盐水或匀浆介质后，用多功能样品均质器匀浆，离心机离心，取上清液备用；2)取部分上述上清液测定组织总蛋白浓度；3)取容器A、B，分别加入底物淀粉缓冲液，再向B中加入步骤1)所得上清液，然后分别在A、B中各加入碘反应液和蒸馏水；4)吸取A、B中溶液分别滴入酶标板的两个孔中；随后将上述的酶标板放入酶标仪中，同时检测两孔中溶液的吸光度；5)最后计算样品的淀粉酶活力。本发明的方法操作简单，成本低廉，效率高，且环保无污染。

摘要： 本发明公开了一种比色法测定银离子和汞离子的DNA酶，其特征在于：所述的DNA酶由G‑四链体DNA与氯化血红素结合而成，其中G‑四链体DNA序列为：5'‑CTG GGA GGG AGG GAG GGA‑3'。利用含腺嘌呤碱基T的G‑四链体作为银离子和汞离子的识别序列，没有金属离子存在时，其与氯化血红素(Hemin)结合形成G‑四链体‑Hemin DNA酶，能高效催化H

摘要： 本发明公开一种血清中肌酐的二步酶法测定方法及测定试剂，利用肌酐测定试剂的试剂1中的过氧化氢酶消除内源性肌酸产生的过氧化氢，进而由肌酐测定试剂的试剂2中的过氧化氢酶抑制剂抑制试剂1中的过氧化氢酶，从而测定样本中肌酐含量。本发明具有可规避以过氧化物酶氧化过氧化氢造成的本底升高、致使检测结果准确度、精密度不好的优点。

摘要： 本发明提供一种稳定的酶法测定脂肪酶活性的试剂，所述试剂由试剂一和试剂二按3份:1份组成；所述试剂一由下列成分组成：共脂肪酶5～200ku/L，缓冲液0.01～1.0mol/L，氯化钙0.1～100mmol/L，去污剂0.1～100mmol/L，稳定剂0.1～100mmol/L和抑菌剂0.1～10mmol/L，溶液的pH值为7.5～9.0；所述试剂二由下列成分组成：缓冲液1～100mmol/L，底物0.1～1mmol/L，助溶剂10～200mmol/L，去污剂0.1～100mmol/L，稳定剂0.1～100mmol/L和抑菌剂0.1～10mmol/L，溶液的pH值为2.0～6.0。本发明试剂可以通过紫外/可见光分析仪或全自动/半自动生化分析仪测定出血浆或血清样本中的脂肪酶的活性，测试结果灵敏度高、精密度好，有较大的应用价值。

摘要： 本发明涉及提供一种抗肝素干扰的α－L－岩藻糖苷酶酶法测定试剂及其使用方法。本发明的试剂为液体双试剂，具有良好的抗肝素干扰性能和优良的稳定性。采用速率比色法，可以在半/全自动生化仪上使用。本品采用新型底物，配方中同时加入了抗肝素干扰的抗干扰剂，试剂具有灵敏度高、抗干扰性能强的特点；本品加入选定的稳定剂，使得试剂具有良好的稳定性，温度在2－8度保存(避光密封)12个月不影响其性能。本试剂可以广泛的用于原发性肝癌的早期诊断、健康体检、肝部疾病普查等。

摘要： 本发明公开一种血清中肌酐的二步酶法测定方法及测定试剂，利用肌酐测定试剂的试剂1中的过氧化氢酶消除内源性肌酸产生的过氧化氢，进而由肌酐测定试剂的试剂2中的过氧化氢酶抑制剂抑制试剂1中的过氧化氢酶，从而测定样本中肌酐含量。本发明具有可规避以过氧化物酶氧化过氧化氢造成的本底升高、致使检测结果准确度、精密度不好的优点。