酶学

摘要： 目的运用分析批长度Westgard西格玛(σ)规则为酶学室内质量控制设置合理的质控策略。方法收集盘锦辽油宝石花医院2020年参加国家临检中心室间质量评价数据及本实验室室内质量控制数据作为偏倚及变异系数。采用国家卫健委颁布的《临床生物化学检验常规项目分析质量指标》(卫生行业标准WS/T403-2012)提供的允许总误差作为规范,计算σ度量,根据分析批长度Westgardσ规则选择质控策略,计算质量目标指数,评价酶学的分析性能。结果酶学各项目中,2个项目的σ≥6,选择1_(3s)规则,分析批长度为1000;2个项目的σ水平为6>σ≥5,质控规则为1_(3s)/2_(2s)/R_(4s),每450个测试做一次质控;2个项目的σ水平为5>σ≥4,质控规则为1_(3s)/2_(2s)/R_(4s)/4_(1s),每200个测试做一次质控;1个项目的σ水平为4>σ≥3,质控规则为1_(3s)/2_(2s)/R_(4s)/4_(1s)/6_(x),每45个测试做一次质控。结论分析批长度Westguardσ规则是一种基于患者风险的质控策略,能够优化质控策略,改进质量方案,提高实验室的检测能力。

摘要： 乳房炎是造成奶牛养殖业经济损失最为严重的疾病之一。导致奶牛乳房炎的病因很多,即使进行了适当的干奶期护理和提供了良好的饲养环境,仍然会有5%左右的奶牛患乳房炎,患病后不仅影响乳汁品质,严重的还可导致奶牛乳腺的器质性损伤。临床型奶牛乳房炎一旦发生,奶牛大概率会被淘汰,所以,奶牛隐性乳房炎的早期诊断尤为重要。本文对奶牛隐性乳房炎的诊断方法进行综述,为临床防治提供参考。

摘要： 为解决酶学难以作为一门独立课程的形式纳入本科教学体系的困境,将酶学核心知识整合为理论课堂教学模块、实验教学模块、模拟仿真教学模块、技能竞赛教学模块和实习实践教学模块,贯穿于本科生培养过程中.以理论和实验课程、技能竞赛、专业实践及毕业设计为实施载体,集约资源,优化配置,充分协调5大教学模块的关系,使学生从"原理—设计—分析—操作—应用"5个方面系统掌握酶学知识,进而形成完善的知识结构和广阔的知识范畴,培养学生的学习兴趣和创新能力.通过对酶学教学模块在本科教学中的应用探索进行总结和思考,旨在为酶学相关学科提供可借鉴的教改经验.

摘要： 目的 探究苏格木勒-7对卵巢功能低下模型大鼠的卵巢功能保护机制.方法 采用48只正常性周期大鼠随机分为4组:模型组即环磷酰胺组(CTX)、模型加苏格木勒-7〔0.5 g/(kg·d)〕组即苏-7-0.5组、模型加苏格木勒-7〔1.0 g/(kg·d)〕组即苏-7-1.0组、正常组,除了正常组其他3组均连续7 d腹腔注射CTX 30 mg/(kg·d).正常组和模型组等量生理盐水灌胃,其余给药组在造模第1天开始(建模同时)分别灌胃给予苏-7-1.0 g/(kg·d)和苏-7-0.5 g/(kg·d),每天给药1次,连续给药24 d,采用免疫组织化学法检测卵巢组织氧化应激相关蛋白8-羟基脱氧乌苷(OHdG)、4-羟基壬烯醛(HNE)、硝基酪氨酸(NTY)及卵泡发育相关细胞因子骨形成态蛋白质(BMP)-15、生长分化因子(GDF)-9的定位及表达量;用Western印迹法检测卵巢组织凋亡相关蛋白及抗氧化相关蛋白Bax、Bcl-2、超氧化物歧化酶(SOD)、血小板反应蛋白(TSP)-1、组织蛋白酶(Cathepin)D、骨髓基质细胞抗原(BST)1、补体因子-H(CFH)等的表达量.结果 苏格木勒-7对大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、转化生长因子(TGF)-β1明显改善;Western印迹检测结果,对Bax、Bcl-2、SOD及TSP-1、CFH等显著改善.结论 苏-7通过多方面、多途径来对化疗性卵巢功能低下大鼠内分泌和生殖功能起到保护作用.

摘要： 目的:对罗氏Cobas C501全自动生化分析仪酶学指标测定进行多要素方法学性能验证.方法:针对正确度、精密度、线性三个主要性能指标进行验证.正确度及精密度参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件,评估偏倚;精密度认证是通过测定BIO-RAD高低两个不同浓度水平的质控品,评估批内精密度、天间精密度;线性参照行业标准WS/T 408-2012验证线性范围.结果:NCCL2018年酶学正确度验证的5份室间质评物检测的ALT偏倚均小于8％;高低两个不同浓度水平质控品ALT项目批内不精密度均小于4％,天间不精密度均小于5.33％.ALT线性为临床可接受二阶非线性.结论:罗氏Cobas C501全自动生化分析仪酶学项目的主要性能指标均符合质量目标要求,可应用于临床检测.

摘要： 目的 探讨脑脊液酶学参数对开颅手术后颅内感染的临床意义.方法 选取神经外科开颅手术后确诊颅内感染患者53例和无颅内感染患者23例,分别检测其脑脊液酶学参数,同时分析脑脊液白细胞计数(WBC)及中性粒细胞百分比(NEUT)、总蛋白(TP)、葡萄糖(Glu)、氯(Cl)和C反应蛋白(CRP)水平,比较两组间差异,并用ROC曲线和二元Logistic回归分析比较常规单一参数和多指标联合检测的诊断性能.结果 与非感染组相比,感染组脑脊液酶学参数天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、腺苷脱氨酶(ADA)、酸性磷酸酶(ACP)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)水平以及炎症指标CRP、WBC、NEUT、TP、Cl均升高,差异有统计学意义(P<0.05).ROC曲线显示,酶学参数AST、LDH、CK、CK-MB、α-HBDH、ADA、ACP、GLDH和炎症指标WBC、NEUT和TP可区分感染组和非感染组患者(P<0.05);联合ROC曲线下面积(AUC)大于0.700的4种酶学参数LDH、CK-MB、α-HBDH、GLDH诊断开颅手术后颅内感染的AUC可提升至0.772;进一步联合敏感性最高的ADA和特异性最高的ACP,其诊断AUC可提升至0.795;再进一步联合炎症指标WBC、NEUT和TP,其诊断AUC可达到0.851.结论 开颅手术后颅内感染患者脑脊液多种酶学参数水平均显著高于非感染患者;脑脊液酶学参数联合炎症指标检测有助于开颅手术后颅内感染的筛查.

摘要： 目的：探讨以慢性进行性神经系统受累为主要表现的GM1、GM2神经节苷脂沉积症的临床特征、酶学及基因学诊断方法. 方法：对4例GM2神经节苷脂沉积症及1例GM1神经节苷脂沉积症患儿进行详细病史询问、体格及辅助检查,5例患儿均行眼底检查、头颅MRI、氨基己糖苷酶(Hex)/β-半乳糖苷活性、血生化、血、尿代谢筛查、脑电图、腹部超声、听觉诱发电位等检查. 结果：5例患儿均于生后6月内起病，均表现为智力运动倒退，对声音刺激有异常惊跳反应，抽搐发作4例;锥体束征均阳性，共济失调4例;眼底检查有4例发现樱桃红斑，头颅MRI示均提示有以丘脑为主的异常信号;3例Tay-Sachs病患儿仅HexA降低，1例Sandhoff患儿HexA及Hex B均降低，1例患儿 β-半乳糖昔酶活性降低。3例患儿HEXA1基因检测到1个突变位点，1例患儿HEXB基因检测到1个突变位点:1例 β-半乳糖昔活性显著降低的患儿已做基因检测，结果待归。 结论：儿童进行性智力运动倒退伴异常凉跳反应、视力减退、眼底樱桃红斑、顽固性抽搐及共济失调是神经节昔脂沉积症的临床特点。血氨基己糖昔酶(Hex)/β-半乳糖昔活性检测是诊断的重要依据。基因检测有助于确诊并指导下一胎的生育。

摘要： 从多个农药厂污泥中分离出一株降解效果良好的联苯菊酯降解菌Pseudomonassp.LFJS3-9,3d内对20mg/L联苯菊酯降解率为95.02％.Pseudomonassp.LFS3-9降解酶主要为胞内酶,属组成酶,耐储藏,4°C中保存25d仍保持最高酶活的90％,在40°C以下和pH7.0～8.0时酶活较稳定,并以37°C和pH7.0时酶活最高,对联苯菊酯降解率达87.28％.酶具有较好的热稳定性,70°C时保温1h,1.2h内对联苯菊酯仍具有40％的降解率.对联苯菊酯的Km为602.92nmol/mL,最大反应速率为28.09nmol/min,降解速率为72.96nmol/(min·mg蛋白).最适酶学反应体系为含联苯菊酯20mg/L的pH7.5缓冲液2.7mL,粗酶液0.3mL,温度37°C,反应时间1.2h.

摘要： 我国1982年至1994年对中药资源调查结果，中草药有12807种;其中植物药11146种，动物药1581种。几千年来中草药对中华民族的健康起到了重要的作用，也对中华民族的饮食文化起到了重要的作用。中草药不仅用于治疗治病，也多数可用于食品、或者可用于保健(功能)食品、功能化妆品。如食品的香辛料、食品配料、天然色素来源于中草药的植物;豆类食品中含有皂苷和异黄酮苷;茶饮料中茶多酚和皂苷:油料种子中的苷类;低热量甜味剂的甘草皂苷、甜叶菊苷、罗汉果苷;我国批准的近万种保健食品，都离不开中草药。

摘要： 生物转化是本世纪微生物研究领域中的一门重要分支,它是通过生物学方法改变生物物质的结构或组成,使生物活性发生变化的一门科学.生物转化是以生命体中生理代谢及其调控机制的研究成果为基础,通过微生物或酶学技术以提高生物物质的生物活性或改变其生物学功能为目的,以达到更好地为生命活动服务.

摘要： 从新疆阜康石油土壤分离出的产低温脂肪酶的菌株由于保藏不当而退化,本文对其进行了活化,并对该低温脂肪酶的部分性质进行了研究,最适反应温度为35°C,最适反应pH值为8.5,该酶在50°C时酶活迅速丧失,热稳定性不是十分理想.为了降低酶在保藏中活力的丧失迅速,有必要寻求保护剂,发现随着时间的延长,甘露醇、乙酸钠、葡萄糖、甘油、山梨醇对该酶的激活作用明显增强,此中的机理有待于进一步探讨.由于EDTA对酶活基本上没有影响,初步认为该酶不是金属酶.

摘要： 谷胱甘肽硫转移酶基因工程菌E.ColiBL21(DE3)PGEX表达产生的谷胱甘肽硫转移酶(酶活为387.1μmol/ml·hr)通过硫酸铵盐析、SephadexG-25、SephadexG-100分离纯化,其纯化倍数为12倍,分离产率为41.32％.酶活最适pH为6.5～7.0,最适温度为50°C,最佳酶促反应时间为30min.本文对此进行了介绍.

摘要： 高香优质的福建乌龙茶具有自然的花香和醇厚的滋味，受到越来越多消费者的青睐。其主要的一个物质基础，就是福建拥有丰富多彩的乌龙茶品种资源。本文拟简介福建乌龙茶品种资源在全省各产茶县(市)的分布与收集保存概况；福建乌龙茶优良新品种的选育研究进展。到目前为止，福建省已通过审(认)定的国家级乌龙茶优良品种有12个；已通过审定的省级乌龙茶良种有11个；还有一批优良新品系正在品比与区试之中。并简介福建乌龙茶品种资源的主要农艺性状，主要生化成分，以及细胞学和酶学研究的概况。为省内外茶区选择引种提供参考。

摘要： 本文运用对大麦黄矮病毒的繁殖和RNA的提取以及第一链cDNA的合成、PCR的扩增、克隆、基因组序列的测定分析等方法来测定与分析大麦黄矮病毒PAV-CN的序列.

摘要： 本文运用对大麦黄矮病毒的繁殖和RNA的提取以及第一链cDNA的合成、PCR的扩增、克隆、基因组序列的测定分析等方法来测定与分析大麦黄矮病毒PAV-CN的序列.

摘要： 本发明公开了一株高产锰氧化酶鞘细菌，所述鞘细菌为浮游球衣菌(Sphaeotilus natans)FJS2015，已于2015年1月26日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No.10437。所述的鞘细菌及其生物学纯培养物在水处理中以及制备水处理剂中具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一株高产锰氧化酶鞘细菌，所述鞘细菌为浮游球衣菌(Sphaeotilus natans)FJS2015，已于2015年1月26日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCC No.10437。所述的鞘细菌及其生物学纯培养物在水处理中以及制备水处理剂中具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了酶学性能改善的甲基对硫磷水解酶突变体及其应用。本发明对野生型甲基对硫磷水解酶进行定点改造，结合蛋白结构计算、模拟技术和分子生物学技术对OPHC2进行体外突变和表达，并运用生物化学手段检测蛋白酶的动力学参数和稳定性，筛选获得热稳定性和底物亲和力有显著改善的突变体V117HQ119E以及催化效率显著提高并在表面活性剂中稳定性提高的突变体F263W，其氨基酸序列分别为SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。本发明显著改善了OPHC2的酶学性能，拓宽了OPHC2的应用领域和作用效率，在有机磷农药降解、机体解毒和神经毒剂洗消等方面应用前景广泛。

摘要： 本发明涉及到具有增强酶活性的局部用酶学伤口清创组合物。这些组合物包含含有至少一种蛋白水解酶和至少一种亲水多元醇的分散相，以及含有疏水基质的连续相。

摘要： 本发明涉及使用末端脱氧核苷酸转移酶无模板酶学合成多核苷酸的组合物和方法，所述末端脱氧核苷酸转移酶是源自不同物种的变体的嵌合体。

摘要： 本发明涉及缺少歧化作用活性的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)变体用于任何预定序列的多核苷酸的无模板酶学合成的用途。这种TdT变体实现正确序列多核苷酸的更高产率。

摘要： 本发明涉及具有改善的酶学特性的胰蛋白酶变体，尤其涉及突变的胰蛋白酶，其包含导致对亲核底物的亲和力增加的至少在两个氨基酸位置处的氨基酸取代和/或导致水解活性降低的至少在两个氨基酸位置处的氨基酸取代。

摘要： 本发明公开了酶学性能改善的甲基对硫磷水解酶突变体及其应用。本发明对野生型甲基对硫磷水解酶进行定点改造，结合蛋白结构计算、模拟技术和分子生物学技术对OPHC2进行体外突变和表达，并运用生物化学手段检测蛋白酶的动力学参数和稳定性，筛选获得热稳定性和底物亲和力有显著改善的突变体V117HQ119E以及催化效率显著提高并在表面活性剂中稳定性提高的突变体F263W，其氨基酸序列分别为SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。本发明显著改善了OPHC2的酶学性能，拓宽了OPHC2的应用领域和作用效率，在有机磷农药降解、机体解毒和神经毒剂洗消等方面应用前景广泛。

摘要： 本实用新型公开了一种褐藻胶裂解酶和甘露聚糖酶的酶学性质测定设备，包括实验箱，其特征是：所述实验箱上侧中部设有一排均匀排布的卡接口，若干所述卡接口两侧分别设有安装孔，所述实验箱两端内壁中部分别固定连接承载板的一端，每个所述卡接口内均设置有试管，每个所述试管下侧均贴于所述承载板上侧，两个所述安装孔内分别设置有温度计，两个所述温度计下侧均贴于承载板上侧，所述实验箱上侧固定连通有入水管，所述实验箱侧面下部固定连通水阀，所述实验箱内壁下侧设有U型加热丝，本实用新型涉及实验室设备领域，具体地讲，涉及一种褐藻胶裂解酶和甘露聚糖酶的酶学性质测定设备。本装置可以实现将实验用水通过搅拌使水温均匀。

摘要： 本实用新型提供一种漆酶的酶学性质研究用实验装置，包括遮光盖，箱体，凸起，扣块，恒温板，电热板，导热结构，消毒板和恒温器，所述遮光盖的底端设置有箱体，且箱体的内部底端表面设置有凸起，该凸起的上端外围固定有扣块；所述扣块的上端设置有恒温板，且恒温板的内部设置有电热板，该电热板的表面设置有导热结构；所述恒温板的上表面上方设置有恒温器，且恒温器的一侧设置有消毒板。本实用新型箱体，恒温板和消毒板的设置，通过遮光恒温结构为漆酶研究培养环境提供稳定做工，通过自主散热与主动导热产生辅助做工，为恒温板实现稳定的做工环境结构，减少发热时耗，通过活性结构连接消毒装置，提高便利程度，优化使用体验。