酯酶

摘要： 以蓝圆鲹肝脏为对象,通过硫酸铵盐析、Q-Sepharose阴离子交换柱层析、Q-HP阴离子交换柱层析、Phenyl Fast Flow疏水柱层析和Superdex G75凝胶过滤柱层析技术分离纯化得到一种酯酶。该酶的回收率为0.69%,纯化倍数为1150倍。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Superdex G75凝胶过滤柱层析结果显示纯化得到的酯酶分子质量为61.18 kDa。肽指纹图谱显示其肽段与红鳍东方鲀假定脂酰辅酶A水解酶一致。该酶的最适条件为pH 8.0、50°C;在pH 6.0~10.0、温度4~40°C条件下稳定性较高;金属离子K^(+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)、Al^(3+)和Fe^(2+)会使酯酶活性显著下降,而Ba^(2+)、Ca^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)和Mg^(2+)则会促进酶活性;该酶对甲醇、乙醇、丙酮和异丙醇等有机溶剂与盐具有较强的耐受性。底物特异性表明该酶在水溶液中偏向于水解中短链酯,对长链酯无水解活性,而在乳化体系中对长链酯也有较高的水解活性,显示出其具有酯酶与脂肪酶的双重活性。

摘要： 酯酶是一类丝氨酸蛋白酶,在生物体内被用于催化许多含有酯、酰胺、硫酯或乙酰基的化合物的水解。在生物体内,酯酶不仅起着重要的生理事件调节功能,参与各类药物的水解或激活,而且还参与许多病理事件(如肝癌),这可能与它独特的解毒功能有着密切的关系。因此,开发新的、有效的酯酶检测平台对生物和医学研究具有重要意义。与传统手段相比,荧光探针具有灵敏度高、选择性好、响应迅速、成本低、操作方便等诸多优势。因此用荧光探针检测酯酶是个很好的选择。本文主要综述了检测酯酶荧光探针的研究现状及最新进展。

摘要： 为了解大鳞鲃(Barbus capito)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定提供理论依据,本研究采用传统形态观察和测定可数可量性状的方法对30尾样品鱼进行形态特征分析,并通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对大鳞鲃5种组织(心脏、眼睛晶状体、肝脏、肾脏和脾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和酯酶(EST)进行分析。结果表明:大鳞鲃的主要形态特征为体呈梭形,头部较小,体修长,口亚下位,具有吻须和颌须各一对。身体被覆发光的鳞片,鱼体背部呈银灰色,腹部银白色。鳍式为背鳍D.Ⅲ-7~8、胸鳍P.Ⅰ-16~18、腹鳍V.Ⅱ-8、臀鳍A.Ⅲ-5和尾鳍C.22-28;侧线鳞数64-74、侧线上鳞数12~14、侧线下鳞数10~11;下咽齿齿式为2·3·5/5·3·2;脊椎骨数为46~49。大鳞鲃的LDH、MDH和EST同工酶具有组织特异性,这种特异性与组织行使其生理功能有关,肝脏组织3种同工酶表达活性最强,肾脏组织3种同工酶的表达活性较强,可能与肾脏具有调节渗透压功能有关。

摘要： 该研究的目的是选育1株高产酯酶的酿酒酵母,通过增加菠萝蜜酒中酯类的含量提高菠萝蜜酒的香气质量。以菠萝蜜果浆自然发酵液中分离获得的1株产酯酶酿酒酵母CS31为出发菌株,利用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)进行诱变育种,通过酒精耐受性实验、杜氏小管产气实验及菠萝蜜果酒发酵性能实验进行初筛,检测菌株对不同碳链长度底物(C2、C4和C6)的酯酶活性进行复筛,选育出1株能顺利完成果酒发酵的高产酯酶突变菌株YB93。随后,通过比较突变菌株YB93和出发菌株发酵菠萝蜜果酒的香气成分,进一步验证该突变菌株的产香能力。结果表明,突变菌株YB93的酯酶(C2~C6)比活力均明显高于出发菌株CS31,其中YB93的最大的酯酶(C2)比活力(952.67 U/g)比CS31(764.32 U/g)高出24.64%。相对于出发菌株,经突变菌株YB93发酵的酒样总挥发性物质提高了34.28%,酯类物质提高了60.67%,有效地提升了果酒中果香和花香类化合物的含量,明显增强了菠萝蜜果酒的香气品质。此外,突变菌株YB93经鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),且5次连续传代性能稳定,具有应用于果酒发酵的潜力。

摘要： 复合树脂是口腔临床工作中重要的材料之一,主要应用于牙体缺损的修复、粘接等方面。但是其内含的单体之一双酚A⁃双甲基丙烯酸缩水甘油酯(bisGMA)很容易被来自细菌以及唾液中的酯酶降解,产生副产物双羟丙氧基苯基丙烷(bisHPPP),进而影响修复体的使用寿命,此为复合树脂的生物降解。本文就复合树脂生物降解的原因、机制,在不同口腔材料中的应用以及如何避免降解进行综述。

摘要： 对来自α/β水解酶超家族的酯酶基因Est2进行了克隆、异源表达及纯化,然后对其酶学性质进行了研究.研究结果显示:酯酶Est2的最适底物为对硝基苯乙酸酯(p-NPC2),最适反应温度为50°C,最适pH为8.0;Est2具有较好的pH稳定性,在pH 5.0～10.0范围内,其相对酶活性保持在50％以上;在40°C条件下具有最好的温度稳定性,在40°C耐受1h之后仍有大于60％的酶活性;金属离子Fe2+和有机试剂甲醇对酯酶Est2的酶活性具有激活作用.酯酶Est2在不同pH缓冲液中的稳定性以及对于Fe2+和有机试剂较好的耐受性,暗示其具有较好的潜在工业应用价值.

摘要： 嗜盐古菌是一类生活于极端高盐环境的化能异养型原核微生物,其所分泌的胞外酶(外泌酶)具有在高盐条件下仍能保持活性的特点,在制革工业、高盐有机废水处理和泡菜加工等腌制食品方面发挥重要用途.本文对嗜盐古菌的胞外蛋白酶、淀粉酶、酯酶等几种常见胞外酶的来源和基本酶学性质的最新研究进展进行综述,为更好地开发利用嗜盐古菌胞外酶资源提供参考.

摘要： 酯酶(esterase)可以催化酯水解和合成、多肽合成、内酯合成、酯交换等多种反应,在工业领域被广泛应用,故开发具有高活力、耐盐、耐碱、耐酸、耐高温等特殊性质的酯酶具有重要意义,而来自于极端环境微生物的酯酶往往具有这些特殊的性质.从环境中获得酯酶基因的传统方式主要依赖于微生物的纯培养和基于单菌的测序技术,但是自然界中可培养的微生物不足1％,很大程度上限制了酯酶资源的开发.宏基因组技术克服了传统分离培养技术的局限性,为酯酶及其他基因资源的开发和利用提供了更多可能,同时也面临着诸多挑战和亟待解决的问题.

摘要： 对氧磷酶(Paraoxonase,PON)是一类广谱的非专一性酯酶.对氧磷酶家族至少有3个成员,PON1、PON2和PON3.PON在有机磷酸代谢中具有重要作用,被认为是可开发治疗有机磷中毒的有前途的方法.本文综述了PON的性质、基因多态性、催化活性及PON在有机磷农药中毒中的重要作用.

摘要： 从酒醅中分离得到1株降解邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的细菌,命名为Aci-17。通过细菌16S rDNA系统发育分析,菌株Aci-17被鉴定为印度不动杆菌(Acinetobacter indicus)。为深入探讨Aci-17降解邻苯二甲酸酯类(PAEs)机理,利用基因重组技术克隆该菌株的酯键水解酶基因Est96,在大肠杆菌中异源表达获得酯键水解酶Est96。试验结果表明,该蛋白具有突出的降解PAEs能力,对邻苯二甲酸二甲酯(DMP)的降解率达到99.996%。生物信息学分析表明:Est96具有水解酶第Ⅳ家族典型保守基序G-X-S-X-G和HGGG氧阴离子孔结构,活性位点为Ser201,理论分子质量40.66 ku。根据Est96与DMP分子对接结果推测氢键、范德华力、Pi-Pi相互作用力及Est96蛋白分子的HGGG氧阴离子孔、GDSAG和HGF 3个结构域与Est96催化功能密切相关。本研究结果对明晰不动杆菌酯键水解酶催化PAEs生物降解机理提供参考。

摘要： 酯酶是一种催化酯键水解和合成的酶的总称,具有α/β折叠结构,是一类丝氨酸水解酶.微生物酯酶具有来源广、种类多、反应条件温和、稳定性好、底物专一、催化活性高等特点,是工业用酯酶的主要来源.本文从不同环境中筛选产酯酶微生物并进行基因克隆、表达和酶学性质研究,具体研究结果如下:rn 采用三丁酸甘油酯琼脂平板法对来自盐碱湖、红树林、湿地公园等不同环境样品中的产酯酶微生物进行筛选.通过菌株形态观察及分子生物学鉴定,共鉴定了60株产酶菌株,主要为芽孢杆菌属、假单胞菌属与不动杆菌属.rn 对筛选得到的酶学性质较好的产酯酶菌株进行酯酶基因的克隆，共获得18个酯酶基因片段，与己知的酯酶的蛋白序列一致性在67%至100%之间。基于获得的片段序列，采用同源克隆技术与TAIL-PCR方法克隆得到2个酯酶基因全长。来源于盐湖嗜盐嗜碱菌SL3与来源于舟山群岛巨大芽胞杆菌ZB7-11的酯酶基因全长分别为636bp与774bp，各编码211与257个氨基酸。Blastp分析表明这两个酯酶与Alkalibacterium sp. AK22和Bacillus megaterium来源的酯酶蛋白一致性最高分别为69%与98%。rn 将estSL3、estZB7-11两个基因分别在大肠杆菌中进行异源表达，并对重组酯酶rEstSL3与rEstZB7-11进行纯化和酶学性质研究。rEstSL3与rEstZB7-11最适作用底物分别为对硝基苯乙酸酯(pNPC2)和对硝基苯丁酸醋(pNPC4)，比活分别为256.86U/m和104.57U/mg;最适作用pH分别为9.0与8.0，在pH 6.0-10.0均具有良好的稳定性;最适作用温度均为30°C，且rEstSL3与rEstZB7-11分别在0°C与20°C可保持68%与80%左右的酶活，在低于60°C时均具有良好的热稳定性。在最适条件下，rEstSL3与rEstZB7-11对底物pNPC2与pNPC4的Vmax分别为769.23μmol/(mg`min)与96.15μmol/(mg`min),Km分别为0.15 mmol/mL与0.10mmol/mL;同时两者对Mn2+、CO2+、Ni2+等金属离子，Tween 80、EDTA及甲醇、乙醇等溶剂均具有一定抗性。而且rEstSL3对高浓度NaCl具有良好的耐受性，为耐盐耐碱性的低温碱性酯酶。

摘要： 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法对16个离褶伞属菌株进行酯酶同工酶分析，分析其酶谱多态性，并采用聚类分析方法对菌株间的亲缘关系进行鉴定。结果表明，在16个离褶伞菌株酯酶同工酶酶谱中，共检测到了10条相对迁移率不同的酶带，多态性较高，并且在相似系数为0.56时，可将供试菌株分为3类，第一类包括5个菌株，第二类包括1个菌株，第三类包括10个菌株。

摘要： 分类和亲缘关系的研究对番荔枝种质资源的保存和利用具有重要意义.本研究利用垂直板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对番荔枝属7种果树共14份资源进行了酯酶和多酚氧化酶同工酶分析.结果表明:2种同工酶共表现23条酶带,其中酯酶同工酶9条,多酚氧化酶同工酶14条,不同种的番荔枝间酶谱差异较大.2种酶的同工酶酶谱不能区分两份红毛榴莲和两份毛叶番荔枝;除此之外,其它各份资源均可一一区分.各资源间的遗传距离在0.000-0.895之间.聚类结果显示,14份番荔枝资源可分为2大类,第Ⅰ类包括牛心番荔枝、红毛榴莲、光叶番荔枝、白毛榴莲和大果番荔枝;其余的为第Ⅱ大类,包括杂交番荔枝和普通番荔枝两个种的8份资源.

摘要： 研究了产酯酶微生物的筛选,包括筛选模型、酶活力检测方法及菌株的分布.对30多份土样以及实验室保存的菌种进行了大量的筛选,以添加三醋酸甘油酯、乳酸乙酯酯类物质对土样等样品富集,采用添加显色剂澳甲酚紫的快速简便平板显色法,观察水解变色圈直径和菌落直径的大小进行初筛.获得两者直径之比相对较大的菌株174株,采用平板打孔检测法和摇瓶发酵比色法测酶活力相结合进行复筛,最终得到酯酶活力较高的24株菌株.就初筛和复筛方法及结果加以比较分析,对复筛菌株做不同底物的酶活力检测,建立了一个有效、简便及快速的微生物酯酶的筛选模型.并对酯酶产生菌的立体选择专一性进行了初步比较.

摘要： 在外循环气升式生物反应器（工作体积10 L，高径比2.9）中，采用直径为2-3 mm 的无细胞颗粒代替固定化细胞，模拟通常的发酵状态，考察颗粒浓度对氧传递、循环液速和气含率等参数的影响，确定多相反应器中适宜的固含率。进一步对固定化根霉（Rhizopus sp. F-16）细胞在外循环气升式生物反应器中的发酵性能进行了研究，确立其最适通气量为1.3 vvm，最适装液量为8.75 L，发酵48 h 时固定化细胞生成的酯酶活力达41.6 U/g 细胞。该研究结果对于微生物在低高径比气升式生物反应器中发酵生产酯酶的工艺优化具有重要意义。

摘要： 本研究利用"神舟"三号(SZ-3)飞船搭载草地早熟禾(Poa pratensis)品种纳苏(Nassu)干种子,地面种植后利用表观变化初步筛选并通过营养扩繁出突变株系PM、PM和PM.观察空间环境对草地早熟禾植株叶片解剖结构及过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的影响.结果表明,与CK相比,三个变异株系由于细胞数目的增加使叶片宽度明显增加;叶肉细胞平均直径降低使叶片厚度减少;PM、P3株系叶片泡状细胞的增多,改变了叶片的形态.过氧化物酶同工酶分析结果表明,CK有11条谱带,迁移率为4.63~47.22;PM有21条谱带,迁移率为2.78~68.52;PM有17条谱带,迁移率为2.78~67.59;PM有20条谱带,迁移率为2.78~63.89.酯酶同工酶分析结果表明,CK有3条谱带,迁移率为59.74~94.81;PM有8条谱带,迁移率为38.96~94.81;PM有7条谱带,迁移率为48.05~94.81;PM有8条谱带,迁移率为49.35~94.81.PM、PM和PM三个株系与CK含有一部分完全相同的谱带,另一部分谱带发生了较大变化:分别出现了CK中没有的谱带和在CK中存在两三个变异株系没有的谱带.同时各谱带的强弱也发生了不同程度的变化.上述三个变异株系在生产应用和遗传育种上均具有较高的价值.

摘要： 采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳法,分析了桃源鸡、雪峰乌骨鸡蛋黄酯酶多态现象.研究结果表明蛋黄酯酶多态与血清酯酶多态由同一遗传系统所控制.两个品种中,Es-2均表现为有带(+)型,Es-1区多态现象较为丰富,存在Es-1、ES-1、Es-1三个等位基因,且均以Es-1为优势基因,频率分别为78.53％(桃源鸡)、80.17﹪(雪峰乌骨鸡)、Es-1在两个群体中频率最低,这为明确两个品种的选育方向提供了理论依据.此外,在桃源鸡中发现了CC纯合型,而雪峰乌骨鸡中无Es-1的纯合现象.

摘要： 经对本研究室筛选所得的一株可立体选择性水解(S)-酮基布洛芬乙酯的酯酯产生菌-芸苔丝孢酵母ET4进行紫外诱变,获得了产酯酶能力显著提高的菌株,其中活力最高的菌株4-3-1-3的水解活力为野生菌活力的1.8倍,而选择性保持不变.对活力高的菌株进行传代稳定性的考察,发现菌株传十代后,活力基本不变.对菌株4-3-1-3进行了培养基碳源的优化结果表明,以异丙醇为唯一碳源,比酶活提高5倍.在摇瓶中对该菌株生长及产酶进程的考察表明,培养18小时后,酶活可达最高,8.5U/L.

摘要： 随着涂布损纸的大量回用，源于合成胶粘剂的白树脂问题开始越来越多地出现在涂布纸的生产过程中。这些粘性的白树脂对纸机的运行和产品的质量都有着极大的负面影响。白树脂在纸机系统内的絮聚和沉积问题可以通过物理、化学、生物和工艺的方法加以改善。本文简要的探讨了白树脂问题的产生、危害和化学、生物控制方法。

摘要： 随着涂布损纸的大量回用，源于合成胶粘剂的白树脂问题开始越来越多地出现在涂布纸的生产过程中。这些粘性的白树脂对纸机的运行和产品的质量都有着极大的负面影响。白树脂在纸机系统内的絮聚和沉积问题可以通过物理、化学、生物和工艺的方法加以改善。本文简要的探讨了白树脂问题的产生、危害和化学、生物控制方法。

摘要： 本发明提供了一种三萜类化合物，从华褐孔菌的子实体中分离得到式I和式II所示的两个三萜类化合物，这两个化合物具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性，可作为潜在的治疗阿尔茨海默病药物或先导化合物的开发应用。本发明还提供了一种三萜类化合物的制备方法和应用。

摘要： 本申请公开了一种内酯酶，其氨基酸序列系为将序列编号5第167个氨基酸由缬氨酸(Valine)突变成组氨酸(Histidine)的序列，该内酯酶用于提高对α‑玉米赤霉烯醇的降解效率。本申请还公开了一种降解α‑玉米赤霉烯醇的方法，其系利用前述内酯酶对α‑玉米赤霉烯醇进行降解，以提高对α‑玉米赤霉烯醇的降解效率。

摘要： 本发明提供了一种酯酶est4、酯酶EST4、重组质粒和基因工程菌株及其应用，该酯酶EST4由来源于深海污泥的酯酶基因est4编码，其催化水解温度范围为20‑55°C，水解pH值为5.0‑10.0，在45°C条件下保温12h仍能保持80％以上的残余酶活，在纯极性有机溶剂中保存12h仍然保持90％以上的残余酶活；该酯酶EST4能够应用于催化多种芳香仲醇的动力学拆分反应和短链萜烯酯的催化生成反应；本发明还构建了能够表达上述酯酶EST4的基因工程菌株，实现了该酶在大肠杆菌中的异源表达，为其工业化生产打下了良好的基础。

摘要： 本发明公开了一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌，菌株中包括一种可表达乙酰酯酶的重组载体pKK223‑3‑ybaC，及利用该菌株液态发酵制备乙酰酯酶的方法为：将大肠埃希氏菌

摘要： 本发明提供了一种三萜类化合物，从华褐孔菌的子实体中分离得到式I和式II所示的两个三萜类化合物，这两个化合物具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性，可作为潜在的治疗阿尔茨海默病药物或先导化合物的开发应用。本发明还提供了一种三萜类化合物的制备方法和应用。

摘要： 本发明涉及用于增强乙酰胆碱酯酶稳定性和活力的组合物及其制备方法，目的是解决现有技术中存在的乙酰胆碱酯酶溶液在运输和储存过程中稳定性低，易失活，保质期短的问题，而提供了一种乙酰胆碱酯酶的保护剂。基于乙酰胆碱酯酶的保护剂，本发明还提供了一种乙酰胆碱酯酶溶液，由上述的乙酰胆碱酯酶的保护剂和乙酰胆碱酯酶组成；基于上述乙酰胆碱酯酶溶液，本发明还提供了一种乙酰胆碱酯酶溶液的制备方法。本发明的乙酰胆碱酯酶的保护剂为乙酰胆碱酯酶提供一种疏水环境，同时在酶表面形成多羟基结构，增强了乙酰胆碱酯酶溶液的稳定性，提高了乙酰胆碱酯酶溶液的保质期，方便了乙酰胆碱酯酶溶液的运输和储存。

摘要： 本申请公开了一种内酯酶，其氨基酸序列系为将序列编号5第167个氨基酸由缬氨酸(Valine)突变成组氨酸(Histidine)的序列，该内酯酶用于提高对α-玉米赤霉烯醇的降解效率。本申请还公开了一种降解α-玉米赤霉烯醇的方法，其系利用前述内酯酶对α-玉米赤霉烯醇进行降解，以提高对α-玉米赤霉烯醇的降解效率。

摘要： 本发明公开了酯酶基因est816及其重组酯酶在降解拟除虫菊酯类农药方面的应用。具体涉及酯酶基因est816的异源表达及其重组酯酶在降解拟除虫菊酯类农药方面的应用。本发明分别通过大肠杆菌表达体系和毕赤酵母表达体系构建了重组酯酶Est816，该酶在两种表达体系中高效可溶性表达，具有较好的热稳定性和酸碱耐受性；且对常用的拟除虫菊酯类农药（如氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯等）有强降解作用，降解率高达90%以上，因此在去除拟除虫菊酯类农药残留方面有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶或他们的突变体在制备或筛选治疗肿瘤的药物中的用途。本发明提供乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶或他们的突变体在制备或筛选治疗肿瘤的药物中的用途，所述治疗肿瘤的药物为口服给药药物。本发明利用乙酰胆碱酯酶质粒、丁酰胆碱酯酶质粒口服的方式，将乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶基因游离在动物体染色体外进行表达，从而提高了安全性、方便性，并有更好的肿瘤预防和治疗的效果。从体外细胞和体内动物实验可以看到乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶表达对非小细胞肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、脑胶质瘤、头颈癌、血液瘤等肿瘤细胞株都有抑制的效果。

摘要： 本发明提供了具有内酯酶活性的突变的极端嗜热PTE，其衍生自对应于SEQ？ID？NO:1的共有序列的极端嗜热磷酸三酯酶，所述突变的PTE包含在55个假定的位置处选择的至少一个突变，并且所述突变的PTE具有增强的性质。此外，本发明提供了包含突变的极端嗜热PTE的组合物及其用途，尤其是作为有机磷化合物的生物清除剂或者作为使用内酯进行通讯的细菌的群体猝灭剂的用途。