转基因马铃薯

摘要： 将多种病毒的有效核酸片断拼接成融合基因转入马铃薯可获得多抗马铃薯材料.针对马铃薯生产中分布广泛、危害严重并经常混合感染的马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)和马铃薯S病毒(PVS),开展了利用基因工程方法获得兼抗4种马铃薯病毒转基因马铃薯材料的研究.试验在前期获得含4种马铃薯病毒外壳蛋白基因片段的质粒pART27-XSYV-rh的基础上,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化马铃薯(Solanum tuberosum)品种'陇薯3号',PCR扩增和PCR-Southern杂交证明,4价融合基因已整合到马铃薯基因组中.qRT-PCR分析表明,该融合基因在转基因植株中能正常表达.3株转基因植株的抗病性鉴定结果表明,2株对4种病毒同时具有抗性;1株对PLRV侵染表现阳性,对另外3种病毒同时具有抗性.

摘要： 为获得兼抗马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)和马铃薯潜隐花叶病毒(Potato virus S,PVS)4种病毒的转基因马铃薯新材料,分别以这4种病毒全长CP基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得4种病毒CP基因相对保守区段的基因片段,并将其拼接成融合基因,以载体pHANNIBAL和pBI121为基础,构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导的转基因体系进行马铃薯遗传转化,并对获得的转基因马铃薯进行病毒抗性检测.结果 表明,所获得的融合基因片段RH1和RH2,酶切鉴定分别得到长度为1 200 bp的条带,与预期片段相符;构建了含pdk内含子和RH1、RH2融合基因的RNAi植物表达载体,经BamH I/SacI双酶切,获得长度约3 200 bp的片段,表明RNAi植物表达载体pBI121-pRH构建成功;转化易感病毒马铃薯品种陇薯11号,PCR检测和PCR-Southern杂交分析表明融合基因已整合到陇薯11号马铃薯基因组中;抗病性检测显示4株转基因马铃薯植株对4种病毒均免疫.表明利用RNAi可筛选出抗多种病毒的转基因马铃薯新种质.

摘要： 为建立一种鉴别转基因马铃薯的PCR方法,设计转基因马铃薯常用调控元件的特异性引物,以4种转基因马铃薯标准品系EH92-527-1、AV43-6-G7、AM04-1020、PH05-026-0048为模板进行单基因PCR和多重PCR扩增工艺方法研究.经琼脂糖凝胶电泳结果分析后,从中筛选出一组引物特异性较强,且无交叉污染或非特异性扩增现象的引物组合对.对9种已知转基因马铃薯样品进行多重PCR验证,均得到条带清晰且区分明显的目的条带.成功建立了能够快速、准确鉴别转基因马铃薯中多种调控元件的多重PCR与单基因PCR相结合的检测方法.

摘要： 对于转基因技术,人们除了担心食用安全外,还担心种植转基因作物会破坏生态环境。究竟转基因技术会对环境产生哪些影响？转基因领域专家为你答疑解惑。欧文·帕特森,英国议员,任环境、食品和农村事务大臣转基因技术已被普遍用于使作物抵御特定的病虫害。以转基因马铃薯为例,马铃薯晚疫病是一种严重的真菌病害。

摘要： 在我国,虽然水稻、小麦、玉米、马铃薯等4种主粮并未允许商业种植转基因品系,但允许进口获批的商业转基因品系及相关产品。在欧美,转基因马铃薯主要有Monsanto公司的抗病毒抗甲虫品系和BASF公司的EH92-527-1高支淀粉品系。

摘要： 以转基因马铃薯块茎为材料,采用双波长分光光度法、蒽酮比色法测定了其直链淀粉、支链淀粉和总淀粉的质量分数.对其GBSS、SSS的活性进行了测定,采用SPSS软件进行了独立样本t检验.结果表明:与对照组相比,转基因马铃薯(K5)总淀粉、支链淀粉的质量分数升高差异显著,GBSS、SSS的活性及直链淀粉质量分数降低差异显著.表明利用RNAi对马铃薯块茎淀粉合成酶基因的干扰取得了一定的效果.

摘要： To obtain transgenic potato plants that express human interleukin 12(hIL-12)protein,the early-constructed plant expression vector driven by Ppatatin of potato tuber-specific promotor was transformed into potato byAgrobacterium-mediated transfection, followed by co-cultivation,screening and differentiation,and the transgenic plants were acquired. Techniques of PCR,RT-PCR,GUS staining,and ELISA analysis were performed for the identification of transgenic plants. The results showed that 12 transgenic lines were obtained,and in the 10 transgenic lines the target gene was in the potato genome,i.e.,positive rate was 83%. RT-PCR analysis illustrated that exogenous genes expressed successfully in 7 transgenic lines at mRNA level,moreover,ELISA data showed that 5 transgenic lines presented the high level of hIL-12 protein expression. In addition,the expression of hIL-12 was genetically stable in these 7 transgenic potato lines.%为获得高效表达人白细胞介素-12（hIL-12）蛋白的转基因马铃薯植株，利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的hIL-12植物表达载体导入马铃薯，通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株，并结合PCR、RT-PCR、GUS染色及ELISA分析对转基因植株进行鉴定。结果显示，获得12个马铃薯转基因株系，PCR检测表明其中的10个株系目的基因已导入马铃薯基因组，转基因阳性率为83%；RT-PCR分析表明其中的7个株系外源基因在转录水平成功获得表达，ELISA分析表明其中的5个株系有明显的蛋白水平表达。对这7个株系后代的检测表明外源基因成功表达且具有良好的遗传稳定性。

摘要： 说起转基因食品，作为消费者的你首先想到的是什么？或许是这些：比如转基因玉米和大豆会致癌，转基因玉米导致广西大学生精子活力下降，转基因食品导致不育；欧美人不吃转基因食品、转基因马铃薯致实验大鼠中毒；转基因玉米导致老鼠减少、母猪流产，转基因正成为超过原子弹的杀伤武器等等……这些年，一提起“转基因”，

摘要： In order to compare drought resistance of DREB1A/Bar transgenic potato plants,with a control cul-tivar (non-transgenic Longshu 10),5 -7 cm seedlings of DREB1A transgenic lines were grown in pots using vermiculite and regularly watered.Watering continued to the 15-16 leaf stage after which plants were not wa-tered for 18 days to impose for drought stress.During the drought stress,plant phenotypic features were re-corded using visual observation and digital camera images.After 10 days of drought stress,stress-related phys-iological and biochemical parameters were determined.During the normal watering phase both the non-trans-genic control and the transgenic potato lines grew well,the MDA content,relative electrical conductivity and superoxide dismutase (SOD)activity were not significantly different (P >0.05 ).After 10 days of drought stress the control plants began to wilt,but the transgenic lines remained in good condition.MDA content and relative electrical conductivity in the transgenic line was significantly lower than those of the non-transgenic plants (P <0.05),while the SOD activity was significantly higher than that of non-transgenic plants (P <0. 05).After for 18 days of drought stress 74.33% of the control plants were dead whereas fewer transgenic plants had died;the mortality of DR2 and DR5 was 20.43% and 5.65% respectively.The resistance of DREB 1A/Bar transgenic potatoes to glufosinate,a systemic non-selective herbicide,compared with non-trans-genic lines was determined by treating plants with a 0.3% glufosinate spray.Ten days after treatment all non-transgenic plants had died,while the transgenic plants were affected slightly.The study indicated that intro-duction of DREB1A and Bar genes significantly enhanced drought tolerance and herbicide resistance in trans-genic potato plants.%在前期获得 DREB1A／Bar 双价转基因马铃薯的基础上，对转基因植株进行了耐旱性和除草剂抗性分析。耐旱性分析显示，在正常浇水条件下，对照和各转基因马铃薯株系生长状态良好且大致相同，各株系的丙二醛含量、相对电导率和 SOD 酶活性无显著差异（P ＞0．05）。经过控水10 d 后，非转基因对照植株叶片明显萎蔫卷曲，而转基因植株仍然保持良好的生长状态；转基因株系的丙二醛含量和相对电导率显著低于非转基因株系（P ＜0．05），而SOD 酶活性显著高于非转基因对照（P ＜0．05）。控水18 d 时，大部分对照植株死亡，死亡率为74．33％；转基因植株只有极少数植株死亡，DR2和 DR5的死亡率分别为20．43％和5．65％。用0．3％的市售草铵膦喷施各株系，10 d后，对照植株全部枯死，转基因株系的个别叶片干枯，绝大多数叶片及所有茎秆生长状态良好。以上分析表明， DREB1A 和 Bar 基因的导入，明显增强了转基因马铃薯对干旱和除草剂的抗性。

摘要： The chromosome of transgene potato Shepody line pHeYCPC326-XC-Sh was analyzed by karyotype analysis and FISH to study the location of exogenous gene YRX (the conserved fragment of potato virus X,potato virus Y and potato leaf roll virus)on chromosome of transgenic potato and its genetic stability. Shepody is an autotetraploid with 48 chromosomes with an arm ratio of (1.37±0.23)~(2.28±0.14).The karyotype of Shepody is 2B and the karyotype formula is 2n=4x=7m+ 5sm.There are satellite chromosomes in chromosome C and J chromosome.The exogenous gene YRX on chromosome A,B,E,G and I is located in the telos of the chromosomes’short arm.%为了解外源三价外壳蛋白基因保守片段重组序列 YRX（马铃薯 X 病毒、Y 病毒和卷叶病毒）在转基因马铃薯染色体中的位置，分析其遗传稳定性，采用核型分析与荧光原位杂交技术对转基因马铃薯夏波蒂株系 pHeYCPC326-XC-Sh 进行染色体分析。结果表明：夏波蒂的染色体数目为48条，臂比范围为（1．37±0．23）～（2．28±0．14），核不对称属2B 型，核型公式为2n＝4x＝7m ＋5sm，其中 C 组与 J 组含随体。发现外源基因 YRX 在染色体 A、B、E、G、I 组均存在，大多位于染色体短臂端部。

摘要： 该文以对马铃薯纺锤形块茎类病毒（ＰＳＴＶｄ）有高度抗性的表达核酶的转基因马铃薯为材料，研究人核酶转录产物在植株根细胞中的亚细胞分布。

摘要： 以转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯为材料,研究了在低温胁迫下其活性氧代谢及保护酶活性的变化.结果表明:在低温胁迫下转基因马铃薯植株体内的超氧阴离子(O)产生速率明显低于对照非转基因马铃薯,随着胁迫强度的增加转基因马铃薯植株体内的O产生速率上升趋势明显小于对照;HO含量前者略高于后者但差异不大,都呈上升趋势;超氧化物歧化酶(SOD)活性转基因马铃薯显著高于对照,过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性转基因马铃薯略高于对照;转基因马铃薯体内的脂质过氧化产物---丙二醛(MDA)含量显著低于对照.

摘要： 以转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯为材料,研究了在低温胁迫下其活性氧代谢及保护酶活性的变化.结果表明:在低温胁迫下转基因马铃薯植株体内的超氧阴离子(O2-)产生速率明显低于对照非转基因马铃薯,随着胁迫强度的增加转基因马铃薯植株体内的O2-产生速率上升趋势明显小于对照;H2O2含量前者略高于后者但差异不大,都呈上升趋势;超氧化物歧化酶(SOD)活性转基因马铃薯显著高于对照,过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性转基因马铃薯略高于对照;转基因马铃薯体内的脂质过氧化产物--丙二醛(MDA)含量显著低于对照。

摘要： 以转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯为材料,研究了在低温胁迫下其活性氧代谢及保护酶活性的变化.结果表明:在低温胁迫下转基因马铃薯植株体内的超氧阴离子(O2.-)产生速率明显低于对照非转基因马铃薯,随着胁迫强度的增加转基因马铃薯植株体内的O2.-产生速率上升趋势明显小于对照;H2O2含量前者略高于后者但差异不大,都呈上升趋势;超氧化物歧化酶(SOD)活性转基因马铃薯显著高于对照,过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性转基因马铃薯略高于对照;转基因马铃薯体内的脂质过氧化产物---丙二醛(MDA)含量显著低于对照.

摘要： 与传统的疫苗生产方法相比,用转基因植物表达的抗原作为疫苗日益增多.本文研究了传染性支气管炎病毒(IVB)S1蛋白在转基因马铃薯(品种东农303)中的表达及其免疫原性.将IBV S1蛋白cDNA序列构建到CaMV 35S启动子的下游,经农杆菌介导的转化方法转化马铃薯植物.对转基因马铃薯植株基因组DNA和mRNA的分析表明:目的基因稳定整合到马铃薯基因组中,且正常转录.用IBV抗体通过ELISA方法发现大部分转基因植物都可检测到重组蛋白.用转基因马铃薯植株表达的IBV S1蛋白免疫小鼠和小鸡可产生中和抗体.以上结果表明,用转基因马铃薯表达的IBV S1重组蛋白可作为IBV疫苗的候选抗原.

摘要： 转cry3A和vhb基因马铃薯对蔬菜花斑虫的抗性表达研究表明:转基因品系中11个品系时二代蔬菜花斑虫幼虫具有较高的抗性。该基因载体马铃薯品系的田间抗虫性表达研究与室内虫试结果一致。其中,转cry3A+vhb双价基因C、C马铃薯品系对蔬菜花斑虫的抗性表达高于C、C等转cry3A单价基因载体的马铃薯品系。C品系的被害程度明显高于其他品系,与对照差异不明显。

摘要： 转cry3A和vhb基因马铃薯对蔬菜花斑虫的抗性表达研究表明:转基因品系中11个品系时二代蔬菜花斑虫幼虫具有较高的抗性。该基因载体马铃薯品系的田间抗虫性表达研究与室内虫试结果一致。其中,转cry3A+vhb双价基因C、C马铃薯品系对蔬菜花斑虫的抗性表达高于C、C等转cry3A单价基因载体的马铃薯品系。C品系的被害程度明显高于其他品系,与对照差异不明显。

摘要： 转cry3A和vhb基因马铃薯对蔬菜花斑虫的抗性表达研究表明:转基因品系中11个品系时二代蔬菜花斑虫幼虫具有较高的抗性。该基因载体马铃薯品系的田间抗虫性表达研究与室内虫试结果一致。其中,转cry3A+vhb双价基因C、C马铃薯品系对蔬菜花斑虫的抗性表达高于C、C等转cry3A单价基因载体的马铃薯品系。C品系的被害程度明显高于其他品系,与对照差异不明显。

摘要： 提供了用于转化植物、优选单子叶植物以及甚至更优选甘蔗的组合物和方法。转化方法涉及用土壤杆菌感染植物组织，以及使用包含高浓度胶凝剂的培养基对其进行共培养，这导致抑制细菌的加剧生长并且导致增加转化频率。本发明包括转化的植物的再生和实际的转化的植物。

摘要： 本发明涉及利用蚯蚓的性腺再生能力的转基因蚯蚓的养殖方法、通过该养殖方法养殖的转基因蚯蚓以及从转基因蚯蚓的体液生产重组蛋白质的方法。本发明的转基因蚯蚓的养殖方法，通过用于弥补以往转基因技术的缺点的形态的新型生命工程技法，并利用具有高注入有效性和如胚胎干细胞等全能性的再生母细胞，能够在转基因体的所有部位嵌入重组基因，由此能够通过转基因体的体液来生产重组蛋白质，由于向性腺直接投入靶基因，因而无需代生母(动物)，由于利用能够进行生殖的转基因体，因而能够持续生产多个转基因体，远比以往的转基因技术更加简便，而且不需要昂贵的设备及娴熟的技术。

摘要： 本发明公开了一种培育具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆的方法。该方法是通过基因工程的手段沉默大豆中的eIF4E基因获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆；优选通过构建SEQ ID NO.1所示的大豆eIF4E基因干扰片段，将其导入大豆获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆。按照该方法能够获得具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆，为抗病大豆育种工作具有深远意义。

摘要： 本发明涉及具有针对疫霉属的卵菌的抗性的马铃薯转基因植物、该植物的转基因部分、其生产方法以及其在植物中的外部应用方法。在马铃薯植物中的宿主植物诱导的基因沉默方法中，提供来自致病疫霉的SEQ ID NO：1‑43的核苷酸序列，所述核苷酸序列还可作为用于处理植物的杀真菌剂而提供。

摘要： 提供了用于转化植物、优选单子叶植物以及甚至更优选甘蔗的组合物和方法。转化方法涉及用土壤杆菌感染植物组织，以及使用包含高浓度胶凝剂的培养基对其进行共培养，这导致抑制细菌的加剧生长并且导致增加转化频率。本发明包括转化的植物的再生和实际的转化的植物。

摘要： 本发明涉及利用蚯蚓的性腺再生能力的转基因蚯蚓的养殖方法、通过该养殖方法养殖的转基因蚯蚓以及从转基因蚯蚓的体液生产重组蛋白质的方法。本发明的转基因蚯蚓的养殖方法，通过用于弥补以往转基因技术的缺点的形态的新型生命工程技法，并利用具有高注入有效性和如胚胎干细胞等全能性的再生母细胞，能够在转基因体的所有部位嵌入重组基因，由此能够通过转基因体的体液来生产重组蛋白质，由于向性腺直接投入靶基因，因而无需代生母(动物)，由于利用能够进行生殖的转基因体，因而能够持续生产多个转基因体，远比以往的转基因技术更加简便，而且不需要昂贵的设备及娴熟的技术。

摘要： 本发明公开了一种培育具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆的方法。该方法是通过基因工程的手段沉默大豆中的eIF4E基因获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆；优选通过构建SEQ ID NO.1所示的大豆eIF4E基因干扰片段，将其导入大豆获得具有广谱病毒抗性的转基因大豆。按照该方法能够获得具有马铃薯Y病毒属广谱病毒抗性的转基因大豆，为抗病大豆育种工作具有深远意义。

摘要： 本发明公开了一种转基因马铃薯AV43‑6‑G7品系鉴定的引物、探针和方法，引物和探针序列是：上游引物Potato AV43‑6‑G7 primerF：5’‑ggtatcaggttctggaataagaccaa‑3’；下游引物Potato AV43‑6‑G7 primerR：5’‑tgtcgtgccagctgcatta‑‘3；探针Potato AV43‑6‑G7 Probe：5’‑FAM‑cccgcgcgttggccgat‑3’BHQ。鉴定方法包括产品DNA的提取、特异性基因的实时荧光PCR扩增和使用荧光定量PCR仪随机软件分析扩增结果并进行结果判定。本发明的优点是快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、成本低。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测马铃薯转基因成分和转基因品系的引物组合、试剂盒、检测方法及应用。所述的检测马铃薯常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增15种常用马铃薯转基因元件、2种转基因品系特异性序列以及1种马铃薯内参基因ST‑LS1(light‑inducible tissue‑specific gene)的引物组。本发明还涉及检测马铃薯转基因元件、转基因品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高；检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性；可用于转基因马铃薯及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明公开了AM04‑1020转基因马铃薯特异性实时荧光PCR检测引物、探针、方法和试剂盒。本发明针对AM04‑1020转基因马铃薯特异性序列设计引物和探针，建立AM04‑1020转基因马铃薯特异性实时荧光PCR检测方法，具有特异性好、灵敏度高、可重复性良好等优点，扩增效率为94.39％，最低定量检测下限为0.025％。有效的解决了现有技术中无AM04‑1020转基因马铃薯特异性精准定量检测技术的问题，该方法可应用于进出境口岸检验检疫、国内农业产品食品监管的AM04‑1020转基因马铃薯及其产品的检测。