转基因猪

摘要： 人类首次接受转基因猪心脏移植据美国有线电视新闻网(CNN)报道,2022年1月10日,美国马里兰大学医学院在新闻发布会上表示,一名57岁的马里兰州男子在接受转基因猪心脏移植手术3天后状况良好。这是人类首次成功将转基因猪心脏移植到患者体内。

摘要： 智能移动方舱亮相国内首个基于人工智能的冻伤及颌面创伤移动式智能化诊疗平台即将投入使用。由北京大学口腔医院牵头的国家重点研发计划"科技冬奥"专项研究成果——智能移动方舱更适用于冬奥会赛场救治。舱内配备了卧式锥形束CT、冻伤面部数据采集系统、心电监护仪等关键诊疗整体化装备。美国开展猪心移植近日,综合《今日美国》、美国广播公司等外媒消息,一名美国男子成为全球首位从转基因猪身上接受心脏移植的人。

摘要： 器官移植是治疗人脏器功能衰竭的理想选择之一,但是器官来源的短缺明显影响该技术在临床的应用.目前即使运用扩大供体来源的多种措施以增加器官供体来源,也不能从根本上解决供受体不平衡的状况.扩大供器官来源成为移植工作者永恒的话题,而解决器官供体来源不足最好的方法是异种移植.但因物种进化之间的差异,异种移植暂未能进入临床,因此目前一直进行猪——非人灵长类动物的临床前研究.猪因解剖及生理与人相近及容易进行基因编辑等优点,成为良好潜在的供体来源.随着基因编辑技术越来越娴熟,多基因修饰器官猪成为可能,为临床选择更优基因组合供体提供了技术保障.本文主要阐述人膜辅助蛋白在异种移植中的作用.

摘要： 转基因插入位点及其侧翼序列的分子特征对转基因动物新品系培育和生物安全评价至关重要.GHR(growth hormone receptor)显性抑制突变体转基因猪(T274)是本实验室前期制备的一种表型显著的矮小症模型,目前已形成了多世代群体,但该模型中外源突变体的插入位点尚未鉴定.本研究利用BGI-seq500测序平台,对T274转基因猪进行全基因组重测序,获得超过289 Gb的数据(106×).以转基因载体和猪基因组序列作为参考序列进行比对分析,获得该外源GHR突变体的插入位点,并利用PCR扩增和Sanger测序进行验证.所有的分析数据都支持外源显性抑制突变体插入在五指山猪1号染色体269,513,538～269,514,371之间.序列保守性及功能元件分析表明,该插入位点可能位于转录激活相关的基因间区域.不同世代个体的7种组织中该外源突变体的表达水平和表达一致性都较高,说明该插入位点可以作为一个潜在的转基因"友好位点".本研究表明全基因组重测序技术可以高效的鉴定转基因插入位点,该插入位点的获得为后期转基因猪新品系的培育奠定了基础,同时也为行业提供了一个可靠的基因组定点整合位点.

摘要： 近期,一条轰动医学界的新闻引发关注:世界首例猪肾移植人体成功。据多家外媒报道,9月25日,在美国纽约大学朗格尼医学中心,外科医生进行了一场被称为异种器官移植的手术。移植器官肾脏来源于一头转基因猪,它被移植到一位脑死亡志愿者体内,移植后的肾脏工作了54小时。

摘要： 美国纽约大学朗格尼医学中心的研究人员进行了异种器官移植的手术。移植器官肾脏来源于一头转基因猪,它被移植入一位脑死亡的志愿者体内,移植后的肾脏工作了54小时。在此期间,研究人员观察到,志愿者的尿液和肌酐水平“正常且与人类肾脏移植手术中的水平相当”,而且未见身体的排斥反应。多位专家学者表示,这一项潜在的重大突破可能为需要器官移植的患者带来新希望。

摘要： 猪不仅是重要的经济家畜,在生物医学领域也有重要应用。生猪的育种中广泛应用了辅助生殖技术,包括体外受精技术、孤雌和孤雄生殖技术等。但与体外受精胚胎相比,孤雌和孤雄胚胎的存活率级低。这一存活率差异产生的机制目前还不清楚。深入理解这一机制不仅有助于增加商业化猪育种的产仔数,也将有利于生物医学研究中转基因猪模型的建立。

摘要： 猪是重要的农业经济动物,其在遗传背景、解剖学、生理病理学、营养代谢和疾病特征等方面与人类高度相似,是农业生产性状改良、人类疾病动物模型和异种器官移植研究的重要对象.随着ZFN、TALEN和CRISPR等基因编辑技术的出现,转基因或基因编辑猪的研究取得快速发展.本文将结合当前我国转基因及基因编辑猪的研究现状,对基因编辑技术在农业生产性状改良如提高产肉量、改善肉质、提高抗病能力和建立人类疾病模型、动物生物反应器、异种器官移植等方面进行综述,以期为猪遗传改良和医学研究提供参考.

摘要： 转基因技术被称之为人类历史上应用最为迅速的重大发明!1973年美国发明重组DNA技术,诞生了全球第一个转基因大肠杆菌微生物。1980年美国诞生全球首例转基因老鼠。1982年美国、比利时诞生全球首例转基因烟草。1985年美国诞生全球首例转基因猪、羊、兔。1985年中国诞生全球首例转基因鱼。1986年美国批准转基因棉花进入田间试验。

摘要： 2017年我国出栏生猪6.88亿头,存栏生猪4.33亿头,猪肉总产量5340万吨,约占全球生猪养殖量和猪肉产量的一半。如此庞大的生猪养殖量,为我国居民提供了60%以上的肉类产品,同时也带来巨大的环保压力和粮食消耗。华南农业大学吴珍芳教授小组将四个来自微生物的酶类基因转入猪基因组中,培育出氮磷污染显著减少、节约粮食.

摘要： 目的：为了减少抗生素在动物生产中的需求,需要运用新的方法来减少养殖中疾病的发生.本研究旨在探究是否能通过在猪体内过量表达猪β防御素2(PBD-2),从而提高机体对细菌感染的抵抗力. 方法：本研究利用手工克隆的方法获得PBD-2转基因猪,通过直接气管内注射法或同居感染法感染胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae),比较转基因猪和野生型猪对临床症状、病理变化和肺组织载菌量. 结果：PBD-2稳定转染细胞株培养上清有明显的抑菌圈;共获得7头过量表达PBD-2的转基因猪,PBD-2在转基因猪心、肝、脾、肺和肠道中高量表达,显著减少了肺组织的载菌量,延缓死亡时间,减少肺部损伤. 结论：结果提示,在猪体内过量表达PBD-2能增强其对A.p leuropneumoniae感染的抵抗力.

摘要： 转基因猪是指运用分子生物学技术方法,将人工分离或改造过的基因整合到猪的基因组中,并能稳定的遗传给后代.转入的基因可以使猪的某些性状向人类需要的目标发生转变,因此在猪的遗传育种、以及将猪作为药物评价、疾病模型、特异性药物生产的生物反应器和组织器官移植的供体等方面具有重要的作用.本文就目前转基因猪的研究进展、显微注射法、病毒载体转染法、精子载体法、体细胞核移植法、徒手克隆技术、转座子介导的基因转移法、ZFN, TALEN和CRISPR/Cas 9基因编辑技术进行简要的综述.

摘要： 转基因猪是指运用分子生物学技术方法,将人工分离或改造过的基因整合到猪的基因组中,并能稳定的遗传给后代.转入的基因可以使猪的某些性状向人类需要的目标发生转变,因此在猪的遗传育种、以及将猪作为药物评价、疾病模型、特异性药物生产的生物反应器和组织器官移植的供体等方面具有重要的作用.本文就目前转基因猪的研究进展、技术方法进行简要的综述.

摘要： 目的:获得具有抑制猪流感病毒复制能力的表达多基因转基因猪.rn 方法:在成功培育F0代表达shRNA-Mx-RNAi三基因转基因猪的基础上,经PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot 方法鉴定,筛选出阳性转基因猪,与野生型同品种猪(WT)进行杂交繁育F1代转基因猪.通过上述分子生物学方法分析阳性转基因猪.分离与培养1日龄F1代转基因猪体细胞,100TCID50A /Swine/Guangdong/2004(H1N1)毒株感染体细胞,通过间接免疫荧光(IFA)、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、病毒滴度测定分析了转基因猪体细胞抗流感病毒活性.rn 结果:3头F0代转基因猪均为阳性转基因猪,选择其中1头阳性转基因猪与野生型同种猪繁育获得5头F1代转基因猪,1头为阳性转基因猪.与非转基因猪和WT猪相比,阳性转基因猪体细胞具有抑制流感病毒复制活性,细胞感染流感病毒16h,细胞中H1N1 PB2基因复制效率比WT降低2倍,细胞上清中病毒TCID50达1×10-2.8.rn 结论:该表达shRNA-Mx-RNAi三基因转基因猪体细胞在体外具有抑制流感病毒复制活性,为进一步在体内评价转基因猪抑制猪流感病毒病毒活性奠定了基础.

摘要： 本文利用RNAi技术，通过筛选技术平台在细胞水平筛选出6对广谱抗流感病毒的RNAi基因;克隆了天然抗病毒蛋白基因Mx，在细胞水平和转基因鼠水平证明了多靶点RNAi,Mx基因的抗流感病毒转基因育种价值。建立了猪流感病毒感染猪模型，为培育的抗流感转基因猪的评价奠定了基础。通过体细胞克隆方法成功获得6头体细胞克隆猪，成活5头，均为表达抗流感病毒基因的转基因猪;繁育FI代猪，经过对仔猪耳、尾、血液的PCR、RT-PCR,southern,Western blot分析，证明可遗传。猪流感病毒感染评价实验表明:转基因猪比非转基因猪相比具有抗病毒、抑制病毒传播的特性，培育的抗猪流感转基因猪群体感染率减少30%以上。建立了400多平米的转基因猪饲养、繁育、安全评价基地，己获得具有抗猪流感转基因猪育种新材料3个，表达抗流感RNAis和Mx基因转基因猪在黑龙江省的转基因生物安全评价中间试验获得农业部农业转基因安评批文。

摘要： 转基因试验猪场科学的生产管理和合理有效的疾病防控措施是转基因猪试验研究、商业化生产应用及保障人们的身体健康的前提条件.本文对转基因猪群饲养管理、疫病防控、繁殖、育种等技术环节进行简要综述,为制定规范化、标准化的转基因猪新品种饲养管理技术体系提供参考.

摘要： 溶菌酶是一种天然的抗生素,该酶能通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4-糖苷键,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解,具有广谱的抗菌活性.同时,溶菌酶还具有抗病毒、抗真菌、抗寄生虫、免疫调节等作用.仔猪腹泻是集约化猪场仔猪死亡的主要原因,为了解决仔猪腹泻,本文通过转基因技术,在猪乳腺中表达重组人溶菌酶,通过饲喂含有重组溶菌酶的乳汁来提高仔猪的抗病能力,以降低仔猪腹泻的发病率及死亡率,同时也降低抗生素滥用对人类自身安全造成的威胁.

摘要： 分别取转MR-1、pBMP4基因和pMR-1+pBMP4双基因小鼠的股二头肌和股四头肌组织进行肌纤维密度和直径测定、形态显微观察分析,为研究pMR-1基因和pBMP4基因调控肌肉纤维生长发育的作用,进而为转基因猪的制作提供参考数据.

摘要： 目的:构建广西巴马小型猪p-PSP-Intron-Cafp载体并生产转植酸酶基因的猪. 方法:根据GenBank上登录的猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因序列设计合成一对特异性引物,利用PCR技术扩增广西巴马小型猪的PSP基因启动子序列,并与连有Cafp基因的重组质粒进行酶切、连接、转化,构建p-PSP-Intron-Cafp载体,利用电转方法将p-PSP-Intron-Cafp载体转入胎猪成纤维细胞中,通过荧光观察及细胞PCR鉴定的方法,证明转染成功.再将此细胞用于手工克隆的供体,生产转植酸酶基因环保猪,并进行鉴定. 结果:成功构建了p-PSP-Intron-Cafp载体,并验证其在细胞中成功表达,并生产转植酸酶基因的猪. 结论:成功获得转植酸酶基因猪.

摘要： 目的:构建广西巴马小型猪p-PSP-Intron-Cafp载体并生产转植酸酶基因的猪. 方法:根据GenBank上登录的猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因序列设计合成一对特异性引物,利用PCR技术扩增广西巴马小型猪的PSP基因启动子序列,并与连有Cafp基因的重组质粒进行酶切、连接、转化,构建p-PSP-Intron-Cafp载体,利用电转方法将p-PSP-Intron-Cafp载体转入胎猪成纤维细胞中,通过荧光观察及细胞PCR鉴定的方法,证明转染成功.再将此细胞用于手工克隆的供体,生产转植酸酶基因环保猪,并进行鉴定. 结果:成功构建了p-PSP-Intron-Cafp载体,并验证其在细胞中成功表达,并生产转植酸酶基因的猪. 结论:成功获得转植酸酶基因猪.

摘要： 本发明公开了一种唾液腺组织特异性表达外源蛋白的转基因载体及其构建方法，所述表达载体是通过将葡聚糖酶基因、木聚糖酶基因、以及植酸酶基因构建重组的融合基因插入到腮腺组织特异性的转基因载体中构建得到的；将该载体导入猪的基因组，并采用体细胞核移植技术生产出转基因猪。本发明针对大麦原料葡聚糖酶，小麦、玉米中木聚糖酶，和植物性饲料中的植酸酶都有水解作用，利用猪唾液腺做为反应器，终生分泌，达到永久代替饲料中这些酶制剂的添加，更好的发挥这些酶的作用；本发明的表达载体具有piggyBac转座子，极大地提高了转基因效率，且将普通质粒串联重组的转基因整合模式变成了单位点单拷贝整合，更好的模拟生物基因的内环境。

摘要： 本发明属于基因工程领域。涉及一种突变型隐色素基因1和突变型隐色素基因1的转基因猪。本发明还涉及突变型隐色素基因1的核苷酸、核酸构建体、转基因动物细胞或其培养物以及制备非人转基因动物的方法。具体地，所述突变型隐色素基因1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示。本发明制得的转基因猪出现了明显的生物节律紊乱和炎症因子高表达，具有作为筛选治疗和/预防和/或辅助治疗和/或调节生物节律紊乱的药物或者筛选治疗和/预防和/或辅助治疗炎症的药物的潜力。

摘要： 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型的表达载体和转基因猪及其构建方法，属于基因工程领域。所述表达载体是通过分别将H1启动子和pPB-sh2序列连接到pUC57-H1质粒上，再将含有loxP-Neo/EGFP基因表达盒的融合片段连接到pPB-H1-sh2上构建得到的。将该载体导入猪的基因组，并采用体细胞核移植技术生产出转基因猪。本发明的表达载体具有piggyBac转座子，极大地提高了转基因效率，且将普通质粒串联重组的转基因整合模式变成了单位点单拷贝整合，更好的模拟生物基因的内环境。构建的转基因猪通过自身合成siRNA来降解PCV2mRNA，可从根本上抑制猪圆环病毒2型的感染。

摘要： 本发明公开了一种唾液腺组织特异性表达外源蛋白的转基因载体及其构建方法，所述表达载体是通过将葡聚糖酶基因、木聚糖酶基因、以及植酸酶基因构建重组的融合基因插入到腮腺组织特异性的转基因载体中构建得到的；将该载体导入猪的基因组，并采用体细胞核移植技术生产出转基因猪。本发明针对大麦原料葡聚糖酶，小麦、玉米中木聚糖酶，和植物性饲料中的植酸酶都有水解作用，利用猪唾液腺做为反应器，终生分泌，达到永久代替饲料中这些酶制剂的添加，更好的发挥这些酶的作用；本发明的表达载体具有piggyBac转座子，极大地提高了转基因效率，且将普通质粒串联重组的转基因整合模式变成了单位点单拷贝整合，更好的模拟生物基因的内环境。

摘要： 本发明属于基因工程领域。涉及一种突变型隐色素基因1和突变型隐色素基因1的转基因猪。本发明还涉及突变型隐色素基因1的核苷酸、核酸构建体、转基因动物细胞或其培养物以及制备非人转基因动物的方法。具体地，所述突变型隐色素基因1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示。本发明制得的转基因猪出现了明显的生物节律紊乱和炎症因子高表达，具有作为筛选治疗和/预防和/或辅助治疗和/或调节生物节律紊乱的药物或者筛选治疗和/预防和/或辅助治疗炎症的药物的潜力。

摘要： 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型转基因猪。该抗猪圆环病毒2型转基因猪的抗猪圆环病毒2型siRNA基因序列整合在第10号染色体上，可以高效特异表达抗猪圆环病毒2型siRNA，来抑制猪圆环病毒2型的表达及生物活性，从而起到防治猪感染圆环病毒疾病的作用。同时，该转基因猪删除了外源标记基因，减少了外源基因对转基因猪个体健康的影响，同时也可以简化转基因猪安全评价程序，有利于该转基因猪的产业化推广及应用。

摘要： 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型病转基因猪的构建方法。目前在该病的防治领域，从技术上取得的效果上收效甚微。本发明方法首先设计能有效阻止猪圆环病毒2型病增殖和复制的靶向基因shRNA；其次获得能有效阻止猪圆环病毒2型病感染的胚胎成纤维细胞克隆；然后借助核移植、胚胎移植技术和常规育种技术培育抗圆环病毒2型转基因猪；最后检测抗圆环病毒2型病转基因猪基因组中目的插入基因。本发明从遗传的角度根除猪圆环2型病毒的感染，减少养猪的疫病控制成本，减少猪圆环病毒对环境的污染，为生命科学研究提供合格的实验用猪，从根本改变疫病控制的传统策略，开启一个疫病控制研究的新时代。

摘要： 本发明是一种高表达猪HDAC6且具有高抗病毒感染能力的转基因猪及其制备方法。该方法是将序列表中序列1或序列2的DNA序列导入哺乳动物细胞中，获得高表达猪HDAC6蛋白的转基因细胞；以所述转基因细胞为核移植供体细胞，离体的卵母细胞为核移植受体细胞，通过核移植技术获得克隆胚胎；将所述的克隆胚胎通过非手术法移入家畜子宫内进行妊娠，获得转基因家畜。本发明的方法能在转基因猪体内稳定表达猪HDAC6，显著提高猪的抗病毒感染能力。

摘要： 本发明公开了一种抗猪圆环病毒2型的表达载体和转基因猪及其构建方法，属于基因工程领域。所述表达载体是通过分别将H1启动子和pPB-sh2序列连接到pUC57-H1质粒上，再将含有loxP-Neo/EGFP基因表达盒的融合片段连接到pPB-H1-sh2上构建得到的。将该载体导入猪的基因组，并采用体细胞核移植技术生产出转基因猪。本发明的表达载体具有piggyBac转座子，极大地提高了转基因效率，且将普通质粒串联重组的转基因整合模式变成了单位点单拷贝整合，更好的模拟生物基因的内环境。构建的转基因猪通过自身合成siRNA来降解PCV2mRNA，可从根本上抑制猪圆环病毒2型的感染。