转基因检测

摘要： 1.技术概况。随着生物技术不断进步,世界各国加大了转基因作物的研发和种植。为避免转基因农作物及其产品不规范种植、生产以及潜在的环境安全风险,云南省农科院生物技术与种质资源研究所、质量标准与检测技术研究所结合多年来在转基因技术及其安全管理方面的研究和积累,联合建立了云南省唯一一个有资质开展转基因检测的“云南转基因检测室”。

摘要： 基因组DNA的提取是DNA分子水平研究和检测的重要环节.为补充完善现场检测方法,根据硅膜吸附DNA的特性,结合过滤膜和注射器,开发一种现场快速提取植物基因组DNA的方法.选取大豆、棉花、油菜、玉米、水稻5种主要作物的叶片和种子为样品提取DNA,利用PCR和普通重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase am-plification,RPA)对快速提取和QIAGNE试剂盒提取的DNA进行内源基因的扩增.结果显示,快速方法不需要离心机,现场3分钟完成DNA提取;在DNA得率上要高于QIAGEN方法,但在DNA纯度上低于QIAGEN方法.不过两种方法提取的DNA都能满足PCR和RPA的需要.利用DNA快速提取方法结合普通PCR、荧光RPA和荧光定量PCR对转基因大豆SHZD32-1进行实际检测,3种方法的检测结果一致,均能准确检出大豆SHZD32-1的转基因成分.

摘要： 目前,中国转基因技术仍不够完善,还存在一定的缺陷.为了对主要农作物转基因种子进行鉴定,文章介绍了种子转基因检测方法及应用,为其他农作物种子的转基因检测提供更多可参考的数据和经验,促进农作物转基因检测技术的发展.

摘要： 为检测食品中的植物转基因成分,自主构建ppCaMV35S、ptNOS和ptCaMV35S 3种阳性质粒作为试验阳性对照,选用2种内源基因(pUbi、pRice-actin)和3种调控基因(pCaMV35S、tNOS和tCaMV35S),利用TaqMan实时荧光PCR技术对4种转基因作物(玉米、水稻、棉花、大豆)和2种非转基因作物(玉米、小麦)进行转基因成分检测.特异性检测结果表明,构建的阳性质粒能够满足实际检测需要,且内源基因和其他调控基因均具有较好的特异性.在转基因棉花试样中分别对调控基因pCaMV35S和tNOS进行检出限试验,检测结果显示,在转基因棉花试样中pCaMV35S和tNOS的检测限度分别为1、10 ng,能够对商业化或处于中间试验阶段的转基因作物及产品进行有效筛查检测.

摘要： 玉米转基因成分的筛查可联合利用CaMV35S启动子(P-35S)和NOS终止子(T-NOS)两个元件的组合,但P-35S、T-NOS有多组可供选择的检测方法.本文通过检测标准查询、序列比对、特异性试验和灵敏度试验验证等方式,比较了检测标准中P-35S、T-NOS三组检测方法.结果 表明:3组标准检测方法对转基因玉米的筛查表现出较强的特异性,检测灵敏度均可达到1 g·kg-1.3组筛查方法可对玉米中的转基因成分进行快速、准确的筛查.

摘要： 转基因检测标准物质是获得准确、可靠、可比检测结果的物质保证,检测实验室通过使用标准物质保证转基因检测结果的量值溯源.以籽粒为原材料研制纯品粉末标准物质,工艺相对简单,量值可靠,是转基因检测标准物质的一种重要类型,广泛用于转基因产品的定量检测.本研究以转基因大豆(Glycine max)MON89788纯合种子为原材料,通过原材料鉴定、研磨、粒度测定、含水量测定、均匀性初检等步骤,制备出大豆MON89788纯品基体标准物质,规格为每瓶1 g.本批标准物质粉末中小于200μm的颗粒占80％以上,粉末含水量为(4.53±0.03)％,低于规定的10％.标准物质均匀性良好,最小取样量为100 mg;可在常温下运输1个月,长期稳定性达到6个月.本批标准物质的特性量值转基因DNA与总DNA的拷贝数比值(copy/copy)由9家实验室采用数字PCR联合测定,量值为1.00,扩展不确定度为0.07.本批标准物质可用于转基因大豆MON89788的定性和定量检测,以及MON89788特异性检测方法的评价和实验室质量控制.

摘要： 全球转基因作物产业化已经23年,种植面积增长了113倍,我国转基因技术已跻身国际先进行列,转基因作物产业化也有所突破.转基因检测标准体系是转基因生物安全管理必不可少的技术支撑.本研究对国内外主流的转基因检测标准体系进行检索,分析其转化体覆盖度、技术先进性等特点,并从定量检测方法、新型转基因产品检测方法、检测标准国际化等方面提出建议,以期为我国转基因检测标准体系进一步发展提供思路.

摘要： 对豆制品运用改良CTAB法、SDS法提取DNA,能够优化大豆及豆制品的检测。本文选择小黄豆、大豆油、大豆MON 89788、豆腐几种样品,运用改良CTAB法、SDS-PVP法、SDS法、CTAB法、TIANGEN试剂盒法分别提取DNA纯度。结果显示,提取大豆DNA运用改良CTAB法、SDS法提取出质量较好的DNA,纯度较高,豆腐样品中的DNA浓度最低,研究改良CTAB法、SDS法运用下的PCR产物凝胶电泳,得出扩增正常的模板DNA,显示提取的DNA未被污染,纯度较高。改良CTAB法、SDS法可得出DNA条带。对小黄豆、大豆MON 89788、豆腐运用SDS法进行实验能够得到更为清晰的基因组DNA条带,完整性更强。SDS法检测适用性较强,较为便捷,可用于大豆及豆制品的实际检测活动。

摘要： 团队针对我国转基因生物安全评价中存在的技术难题,从转基因检测技术研发及标准化、转基因检测标准物质研制、转基因分子特征分析、转基因环境安全评价、转基因科普等方向,开展技术创新与成果转化,为转基因产业健康发展提供技术支撑。

摘要： 从植物中提取出高纯度结构完整的基因组DNA是进行植物遗传学研究及转基因检测等分子生物学分析所必需的条件，传统的酚氯仿抽提取方法操作步骤繁琐，不仅浪费有机试剂，还对操作者和环境造成毒害。基于磁性微球的DNA固相提取法具有无毒害、简单、快速、可应用于高通量等特点，具有广泛的应用前景，制备一种磁响应性强、生物相容性好的新型磁性微球成为获得高质量基因组DNA的关键。 本工作首先将铁盐沉积法在多孔SiO2微球的孔内，通过灼烧得到Fe2O3-SiO2复合微球，再还原获得Fe3O4-SiO2复合磁性微球。为了防止使用过程中磁性物质泄漏，以及力求为微球下一步应用提供良好的生物兼容表面，采用Stober水解法，在微球表面包覆SiO2层。Fe3O4-SiO2磁性微球的扫描电子显微镜图显示这种方法制备的磁性微球粒径均一、分散性良好。采用振动磁强计对磁性粒子进行了磁性能的测定，四氧化三铁含量为22％的磁性微球饱和磁化率为18.15 emu/g，磁滞为3.338 emu/g。进而将这种磁性微球应用于玉米、小麦、大豆、豌豆、青菜、番茄、青椒等植物的基因组DNA的提取，经过裂解、磁吸附、洗涤、洗脱等步骤提取的基因组DNA纯度高、片段完整。对植物管家基因ndhB进行PCR扩增，可得到长度为1kb的目的片段。PCR结果表明磁性微球法提取的各种植物基因组DNA可满足后续的分子生物学检测需要，对于植物转基因检测和遗传多态性分析等方面有重意义。

摘要： 以金柑为材料,建立了其再生和遗传转化体系,获得了20余棵转基因植株.建立了三种转基因检测体系:多重PCR、T-DNA侧翼序列分析和Southern杂交,分别适于抗性芽或植株的早期、中期和后期转基因鉴定.应用所建立的转基因体系,成功地将甜橙β-胡萝卜素羟化酶反义基因导入金柑,旨在获得积累β-胡萝卜素的金柑新品种.同时也已将甜橙叶绿素酶启动子导入金柑,以探讨该启动子的表达特性.

摘要： 本文对近些年国内外百合基因克隆、遗传转化、转基因检测进行了综述.克隆的百合基因主要包括花器官发育和花粉特异基因2类.农杆菌和基因枪介导的百合遗传转化较为成熟.在百合的转基因检测中,报告基因、选择基因、PCR、RT-PCR和分子杂交技术是常用检测方式,但最终取决于植物是否发生变异.

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 蛋白质芯片技术是采用微阵列方法,对样品蛋白进行高通量、高灵敏度、高特异性的分析技术，实践证明，蛋白质芯片在食品安全分析方面具有较好的应用前景。病原微生物是食品生物性污染的最主要因素，也是引发人体食源性疾病的主要原因，蛋白质芯片技术在微生物领域的应用目前主要表现在两个方面。第一，开展微生物蛋白质组学研究，揭示蛋白质作用新的机理，开发未知蛋白质资源;第二，利用已知蛋白质分子的性质，通过蛋白质与其他生物活性分子的相互作用，实现对不同微生物的检测。农产品中高农兽药残留不仅是化学性危害的主要因素，而且对人体具有潜在的慢性危害。兽药残留蛋白芯片检测系统可同时检测动物组织中的多种残留，实现了多种兽药残留的高通量快速筛查，提高了检测效率。转基因食品在取得巨大经济效益同时，其安全性问题已引起社会各界的广泛关注。利用转基因食品因含有转基因技术导入的外源基因和外源基因在受体内的表达产物，外源基因最终是以蛋白质或多肽形式得以表达，通过对蛋白质芯片设计不同探针阵列、使用特定分析方法可使该技术在此方面具有较高应用价值，是未来转基因食品安全检测的主要发展方向，不断发展和完善蛋白质芯片技术可对转基因食品进行定性检测。作为食品原料的农作物和动物等发生病害后，也会给人类带来的危害，在农业上，蛋白质芯片可用来筛选高产、抗虫、抗病、经济价值高的作物。在畜牧业，蛋白质芯片根据显色位置的不同可判断出为何种抗体阳性，从而诊断出相应的疾病。

摘要： 本文介绍加入WTO后,除了加强对农产品检疫外,还对转基因实行检测,使转基因食品被拒之门外.

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测番茄转基因元件和品系的引物对组合、试剂盒及检测方法。所述的检测番茄常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增11种常用番茄转基因元件、1种转基因品系特异性序列以及1种番茄内参基因Sl_LAT52的引物组。本发明还涉及检测番茄转基因元件和品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高，检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性等特点；可用于转基因番茄及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测甜菜转基因成分和转基因品系的引物组合、试剂盒、检测方法及应用。所述的检测甜菜常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增13种常用甜菜转基因元件、2种转基因品系特异性序列以及1种甜菜内参基因Bv_GLuA3(glutamine synthetase leaf isozyme gene)的引物组。本发明还涉及检测甜菜转基因元件、转基因品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高；检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性；可用于转基因甜菜及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测小麦转基因成分和转基因品系的引物组合、试剂盒、检测方法及应用。所述的检测小麦常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增9种常用小麦转基因元件、3种转基因品系Ta_B73‑6‑1、Ta_B72‑8‑1、Ta_B102‑1‑2特异性序列以及2种小麦内参基因Ta_Waxy‑D10和Ta_GAG56D的引物组。本发明还涉及检测小麦转基因元件和品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高，检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性等特点；可用于转基因小麦及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测马铃薯转基因成分和转基因品系的引物组合、试剂盒、检测方法及应用。所述的检测马铃薯常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增15种常用马铃薯转基因元件、2种转基因品系特异性序列以及1种马铃薯内参基因ST‑LS1(light‑inducible tissue‑specific gene)的引物组。本发明还涉及检测马铃薯转基因元件、转基因品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高；检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性；可用于转基因马铃薯及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

摘要： 本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异地检测CaMV35S启动子，检测灵敏度高且可再生，便于使用。采用该探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够灵敏高效特异性地检测含有CaMV35S启动子的转基因植物及其相关产品。

摘要： 本发明提供多种产生胶原蛋白的植物事件、用于检测植物事件的DNA分子及所述DNA分子在植物育种方法中的用途。

摘要： 本发明属分子生物学及基因工程技术领域，为解决目前转基因植物检测中用一系列操作复杂、耗时、高成本体外分子检测的技术。提供一种用荧光素酶报告分子活体整株检测转基因玉米的方法，荧光素酶报告基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。用超声波介导花粉的转化方法将荧光素酶基因导入到玉米中去，用植物活体成像技术活体、整株、实时检测转基因玉米中的荧光素酶的荧光信号,通过信噪比的引入和应用可鉴定高表达的转基因植株。直观、准确、实时、低成本地淘汰大量非转基因和表达不强的植株或株系,为植物功能基因组学研究中转基因植株的鉴定提供了操作简单、准确、快速、低成本的鉴定方法。

摘要： 本发明公开了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt‑Cry1AbAc的方法，包括如下步骤：将待测植物进行清洗烘干，清洗烘干结束后，将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎，粉碎时间5‑10分钟，将容器和搅拌棒进行消毒，再将经过粉碎的待测植物倒入容器中，缓慢均匀的加入水溶液，并同时用搅拌棒进行搅拌，盖上容器盖子，将容器上下摇晃15‑20S，将溶液静置5‑8分钟，固体物质沉淀分层，取上层溶液于试管中，拆开测试试纸，将测试试纸的样品端垂直向下，插入装有溶液的试管中，浸泡1‑2分钟，取出测试试纸，开始计时，5‑10分钟后，读取测试结果。

摘要： 本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测cry1A基因，检测灵敏度高、样品无需标记且可再生，便于使用；该传感器克服了传统转基因检测PCR方法的耗时长、费用高且不可重复检测的缺点，且实践证明对于物种间存在差异的DNA序列，同样可设计简并单链核酸探针用于转基因检测，可以实现多种抗虫(cry1A)基因的转基因产品大规模、高通量检测。

摘要： 本公开涉及一种用于检测转基因植物的探针、探针组、表面等离子共振生物传感器及检测转基因植物的方法。所述探针的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。本公开的探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够特异性地检测NOS终止子，检测灵敏度高且可再生，便于使用。采用该探针及含有该探针的表面等离子共振生物传感器能够灵敏高效特异性地检测含有NOS终止子的转基因植物。本公开的方法克服了传统转基因检测PCR方法耗时长、费用高且不可重复再生检测的缺点，具有灵敏度高、重复性及稳定性好的优点。整个样品分析过程中芯片表面探针活性和结构不受影响，因此可实现传感器的重复利用。