跨膜转运

摘要： 目的:研究巴戟天中的有效成分水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖在人源结肠癌细胞Caco-2单层模型中的吸收特性。方法:通过细胞培养技术建立Caco-2细胞单层模型,以细胞形态学特征、细胞跨膜电阻等指标验证和筛选模型。考察不同pH、不同质量浓度的水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖对Caco-2细胞活力的影响,以确定给药pH和质量浓度。通过Caco-2细胞转运实验探究药物质量浓度、作用时间与P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖吸收转运的影响。采用高效液相色谱法(HPLC)测定水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖的累积转运量。结果:水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖在Caco-2细胞单层模型中吸收良好,三者低质量浓度的双侧表观渗透系数(P_(app))明显大于中、高质量浓度;加入盐酸维拉帕米后,三者的P_(app)变化不大,说明这3个成分的小肠吸收不需要载体。去乙酰车叶草苷酸的液相色谱图中存在少量水晶兰苷,说明去乙酰车叶草苷酸存在首过效应。结论:巴戟天中水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸和耐斯糖3个特征性成分在跨膜转运过程中均以被动转运为主,且3个成分都存在自身质量浓度抑制现象。

摘要： 以宣威火腿为原料提取火腿中生物活性肽,通过体外模拟胃肠道消化和Caco-2细胞单层膜转运实验,进一步分析火腿肽的序列及抗炎功能变化。结果表明:经模拟胃肠道消化后,宣威火腿肽的总体数量增加,其中1000 Da以下多肽的数量占比从40.18%增加到57.40%;模拟消化后火腿肽抑制RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌的作用增强,经Caco-2细胞跨膜转运后共检测到24条多肽序列,其中包括12条四肽和5条三肽,分子质量小于500 Da的小肽占62.50%;合成小肽PAG、LVG、LGV、PVL具有缓解巨噬细胞分泌NO、肿瘤坏死因子-α的功能。因此,模拟胃肠道消化可以改变火腿肽的组成,进而提升其抗炎活性;跨膜转运后的小肽具有缓解巨噬细胞炎症因子分泌的功能。

摘要： 离子通道在我们的生命体中发挥了重要的作用。本文借用拟人化的手法,介绍离子通道和人工离子通道的分类、作用、特点及其对人体健康的影响,让读者从故事中了解人工离子通道。

摘要： 目的:对聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)胶束在单层上皮细胞的转运过程进行研究.方法:采用薄膜水化法制备包载荧光探针香豆素6的PEG-DSPE胶束,建立测定香豆素6含量的荧光分析法,考察马丁达比犬肾单层上皮细胞(Madin Darby canine kindey,MDCK)对香豆素6胶束的摄取和吸附作用,考察温度、不同内吞抑制剂对胶束在单层MDCK细胞跨膜转运的影响.结果:香豆素6 PEG-DSPE胶束可以很快被细胞吸附和摄取,随时间增加,吸附和摄取达动态平衡.胶束在单层细胞上的跨膜转运受温度的影响,4°C下,跨膜转运受到明显抑制;甲基-β-环糊精、高渗蔗糖、氯丙嗪及制霉菌素对胶束的内吞均有明显抑制作用,其中甲基-β-环糊精的抑制率高达88％.阿米洛利对胶束的内吞无影响.结论:胶束在MDCK单层细胞上的跨膜转运是主动的、能量依赖性的过程,跨膜转运机制是多因素的,包括了小窝蛋白介导的内吞过程和网格蛋白介导的内吞过程.

摘要： 药物在机体内需通过跨膜转运才能进入细胞中,进而发挥治疗作用.药物载体作为能将药物装载作用于靶细胞/组织的工具,能够解决药物在生物体内运输过程中诸如半衰期短、稳定性差和难溶于水或脂质等问题,但也存在着药物包裹率低、易渗漏的缺点.自组装是指无序的基本结构单元自发排列成有序结构.自组装药物载体可以保护药物不受生物体内免疫系统的影响,使药物在合适的条件下以可控、高效和低副作用的方式作用于靶细胞.概述自组装结构药物跨膜转运的基本概念,总结近年来生物医学领域相关的研究进展及临床应用,为研究人员提供自组装结构药物跨膜转运新的设计策略.

摘要： 近日,西北农林科技大学康振生院士团队与马里兰大学萧顺元教授团队合作在《New Phytologist》杂志在线发表了研究论文。该研究发现定位于endoplasmic reticulum(ER)的拟南芥糖转运蛋白(AtSTP8)在白粉菌侵染过程中被招募到吸器外质膜(EHM),其可能参与寄主糖分向病菌的跨膜转运过程。

摘要： 本文旨在构建球形和盘状两种不同形状的硅质体,以研究纳米载体的形状对其细胞摄取及跨膜能力的影响.经卤代、亲核加成及酰化反应合成硅质体复合脂质(cerasome-forming lipid, CFL),并利用质谱和核磁共振氢谱进行鉴定.将CFL与短链脂材1,2-dihexanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DHPC)通过薄膜水化法制备有机-无机杂化的纳米盘(nanodisc,简称纳米盘),并使用CFL制备球形硅质体(nanosphere,简称硅质体).用激光粒度仪测定硅质体和纳米盘的粒径及电位,透射电镜观察其形状.以人源结肠癌Caco-2细胞为模型,采用激光共聚焦显微镜定性考察形状对纳米载体在细胞上摄取和转运的影响,采用高效液相色谱法定量考察形状对其跨膜量的影响.结果 表明:制得的硅质体及纳米盘粒径相近,均约为110nm,电位约为-25 mV,在电镜下形状规则均一.在20 min内,纳米盘的入胞速率显著快于硅质体,进一步在Caco-2细胞单层模型上的研究结果表明,摄取更快的纳米盘在细胞单层中累积量更少,即更快地被转运出胞,在2h内纳米盘的跨膜量均高于硅质体.该结果提示通过合理设计纳米载体的形状可以调控纳米-细胞的相互作用,促进纳米载体的跨膜转运,增加药物的吸收.

摘要： 目的 研究有机阴离子转运体1和3(OAT1、OAT3)在不同药性(苦、辛、酸、甘)中药成分的跨膜转运过程中的作用.方法 建立OAT1、OAT3过表达单克隆细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3),通过100 μmol·L-1不同药性成分对OAT1、OAT3介导放射性标记探针底物转运活性的影响,预测各药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用;测定不同药性成分对OAT1、OAT3的抑制作用的半数抑制浓度(IC50);测定OAT1、OAT3过表达细胞株(MDCK-OAT1、S2-OAT3)和空白对照(MDCK-Mock、S2-Mock)对不同药性中药成分的摄取情况,判断各药性成分是否为OAT1、OAT3的底物,从而预测OAT1、OAT3在不同药性成分跨膜转运中的作用.结果 100 μmol·L-1的辛味药和酸味药对OAT1和OAT3有较强的抑制作用,其中川陈皮素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT1抑制作用的IC50分别是1.86,2.88,4.58和10.43 μmol·L-1;欧前胡素、没食子酸、原儿茶酸和β-甘草次酸对OAT3抑制作用的IC50分别是3.15,3.39,3.69和3.93 μmol·L-.与空白对照相比,OAT1转运体细胞对延胡索乙素、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力;OAT3对延胡索乙素、原阿片碱、川陈皮素、欧前胡素和异欧前胡素具有较强的摄取能力.结论 多数辛味药为OAT1、OAT3的转运底物,因此OAT1、OAT3对多数辛味药具有较强的摄取能力;而多数的酸味药为OAT1、OAT3的抑制剂,能够抑制OAT1、OAT3对其他底物的转运活性.

摘要： 生物化学教材中,与线粒体相关的跨膜转运的物质主要有丙酮酸(进入线粒体氧化脱羧)、脂酰辅酶A(从细胞质转运进基质进行氧化)、乙酰辅酶A(从线粒体基质转运到细胞质合成脂肪酸),细胞质NADH(通过苹果酸-天冬氨酸穿梭途径进入线粒体基质进行氧化磷酸化和通过3-磷酸甘油穿梭途径进入线粒体基质氧化磷酸化),酮体物质乙酰乙酸和β-羟基丁酸(转运进出线粒体基质)、草酰乙酸(从线粒体基质转运到细胞质进行糖异生代谢）等,在这些物质转运进出线粒体过程中,细胞质基质、线粒体外膜、线粒体膜间隙、线粒体内膜、以及线粒体内外膜上的转运体、酶促反应具体发生的部位和过程如何?没有具体明确或正确的表述,比较模糊,容易引起混淆.

摘要： CO2是自然界储量巨大的游离性碳资源.关于CO2的生物转化,除了人们所熟知的植物光合作用外,许多微生物亦具备此能力.微生物利用CO2的首要步骤是完成CO2从细胞外向细胞内的跨膜转运,这也是决定微生物CO2利用效率的重要环节.本文中,笔者对目前微生物CO2跨膜转运的研究进展进行了总结,重点阐述了各类微生物CO2运输元件及其工作的分子机制以及通过优化CO2转运提高微生物利用CO2能力的策略.在此基础上,笔者还提出了今后微生物转化利用CO2的研究重点和关键科学问题,可为未来通过生物路线实现CO2的资源化利用提供借鉴.

摘要： ABC转运蛋白依靠分解ATP产生的能量驱动物质的跨细胞膜转运.能量耦合因子(Energy coupling factor/ECF)转运蛋白是近年来鉴定的一类新的ABC转运蛋白,它存在于微生物和植物中负责维生素和微量营养元素(如B族维生素叶酸、泛酸、核黄素及金属离子等)的跨膜转运.ECF转运蛋白在结构上包括细胞膜上底物结合蛋白S、以及由跨膜蛋白T、胞内ATP结合蛋白A/A'形成的能量耦合模块组成.通过异源表达纯化得到了具有活性的叶酸ECF转运蛋白复合体，解析了该复合体面向细胞内状态的结构(inward-facing，即叶酸己经释放到细胞内状态)，揭示了ECF转运复合体的四个组分S,T,A,A'之间的作用方式以及能量耦合的结构基础，提出了底物通过ECF蛋白转运的独特机理:底物转运通过底物结合蛋白S在膜内的翻转实现，使人们对消耗ATP的物质跨膜转运机制有了新的认识(Xu et al,2013)。进而，通过对来源于同一物种的泛酸ECF转运蛋白复合体的结构比较与功能分析，揭示了ECF转运蛋白共享能量耦合模块的分子基础(Zhang et al,2014)。在此基础上，捕获了叶酸转运蛋白复合体中底物结合蛋白Fo1T与叶酸结合的构象，并将这一构象与复合体中不结合叶酸的Fo1T构象进行比较分析，阐释了ECF转运蛋白底物结合与释放的门控机制(Zhao et al,2015)。根据上述研究的结果，总结提出了ECF型ABC转运蛋白的工作模型(Zhang P,2013)。

摘要： 脂肪酸是动物必须的能源和结构物质,脂肪酸的吸收、转运和代谢对动物的健康具有重要影响.近年来的研究表明,一些蛋白介导了不同细胞对脂肪酸的吸收和排出.脂肪酸转运蛋白家族(FATPs)是一个膜蛋白家族,拥有六个家族成员,它们能够特异性调控脂肪酸在不同细胞的跨膜转运.本文对FATPs的家族成员、表达特点、功能调控及其参与的脂肪酸转运进行概述.

摘要： 目的:探讨胶束在马丁达比犬肾单层上皮细胞的摄取和跨膜转运机制.方法:采用溶剂挥发法制备包载荧光探针香豆素6的聚乙二醇-聚乳酸(PEG3000-PLA3000)胶束,建立了高效液相色谱法测定香豆素6含量的方法,考察空白胶束对香豆素6胶束的竞争摄取,考察温度、抑制剂对胶束在单层MDCK细胞的跨膜转运的影响,Ca2+浓度和EGTA的加入对胶束跨膜转运的影响.结果:胶束可以很快被细胞摄取,胶束的摄取可被空白胶束竞争抑制.胶束在单层细胞上的跨膜转运受温度和抑制剂的影响,说明胶束的跨膜转运是主动的、能量依赖性的过程;Ca2+浓度和EGTA可以影响胶束的跨膜转运,说明胶束可以经过细胞旁路途径跨膜转运.从单层细胞顶侧经跨膜转运到达基底侧的胶束的量相对于加入到顶侧的胶束量非常少.结论:胶束在MDCK单层细胞上的跨膜转运是细胞旁路途径和经细胞途径的结合.

摘要： Caco-2(human colon adenocarcinoma cell lines)细胞模型近年来在国外广泛用于药物吸收、排放及跨膜转运等吸收机制的研究，到目前为止仍是用来研究外源性化合物肠道吸收特性最好的体外模型。本实验采用体外培养Caco-2细胞模型研究ERB的细胞吸收与跨膜转运。结果表明，药物转运的速率受时间、给药浓度及温度等因素的影响。

摘要： 木栓质是一种以甘油酯—酚类为基本单元的生物聚酯,包含聚脂肪族和聚芳香族两个结构域.典型的聚脂肪族聚酯包括ω-羟基脂肪酸、α,ω-双羧基酸、脂肪酸和伯醇,阿魏酸则是聚芳香族的主要成分.木栓质通常沉积于特定组织的细胞壁,例如根内皮层、外皮层、周皮、种皮以及其他的边缘组织,形成木栓层.木栓层作为一种保护性屏障,不仅在控制根系径向水分及营养元素运输中发挥重要作用,而且能有效抵御病原菌和有毒气体的入侵.近年来随着生物化学分析技术及遗传学研究方法的发展,木栓质的相关研究取得了极大进展.本文在概述木栓质在植物体内的分布、化学组成和超微结构、木栓质单体的跨膜转运及其聚合组装的基础上,重点对木栓质合成途径及其在植物响应非生物胁迫及生物胁迫中的功能等方面的最新研究进展进行总结讨论,为通过改变植物根系适应性结构特征以改良作物及牧草提供重要的理论参考.

摘要： 血脑屏障是指物质在通过血-脑间界面时的一种选择性屏障,它在维持脑内环境恒定,保持中枢神经系统正常功能中具有重要意义。本实验用大鼠脑毛细血管内皮细胞和大鼠脑星形胶质建立了血脑屏障体外模型并证明该模型具有血脑屏障作用。在此基础上,我们利用扫描电子显微镜,免疫荧光,荧光分光光度分析法和感偶等离子质谱分析法等方法,研究了铽─转铁蛋白与铁-转铁蛋白配合物的跨膜转运途径,从而为血脑屏障中的稀土转运提供实验依据。实验表明:在转铁蛋白跨膜过程中,铁离子的跨膜能力和总转运量都明显大于转铁蛋白的蛋白质部分；前者是后者的1.5倍。这提示我们Fe离子是通过以下形式转运进入血脑屏障的:当FeTf一起转运过内皮细胞的AP端细胞膜后,在内皮细胞内释放铁离子,然后铁离子转运跨过血脑屏障.其中可能通过了Ferroportin途径。而在转铁蛋白-铽离子络合物的跨膜过程中,铽离子的跨膜能力比铁离子或转铁蛋白弱45倍左右,这可能是由于铽离子难以通过Ferroportin途径排出细胞。以上实验说明铽离子难以通过转铁蛋白介导途经通过血脑屏障。

摘要： @@Caveolin-1(Cav-1)是caveolae的主要结构蛋白，在内皮细胞中表达丰富。本文探讨Caveolin-1(Cav-1)对氧化应激致肺血管通透性增加的两条途径的调节作用及其调控机制。

摘要： @@Caveolin-1(Cav-1)是caveolae的主要结构蛋白，在内皮细胞中表达丰富。本文探讨Caveolin-1(Cav-1)对氧化应激致肺血管通透性增加的两条途径的调节作用及其调控机制。

摘要： 本发明涉及一种具有pH依赖性阴离子跨膜转运活性的方酰胺‑双苯并咪唑共轭物、及其合成方法，本发明设计合成了13个方酰胺‑双苯并咪唑共轭物，本发明合成的方酰胺‑双苯并咪唑共轭物对氯离子有中等强度的亲和能力，并通过阴离子交换机制促进氯离子的跨膜运输，每个共轭物在酸性pH条件下的氯离子转运活性均高于在生理pH下的活性，并且合成的共轭物对选定的实体瘤细胞还表现出中等强度的毒性。

摘要： 本发明提供了一种高效脂肪细胞靶向的跨膜转运脂质体药物载体及其制备方法和用途。本发明首次将透明质酸修饰改造的脂质体与脂肪细胞靶向肽修饰改造的脂质体相结合，这两种修饰方式协同提高了脂质体药物载体对脂肪细胞的靶向作用。本发明首次借助寡聚赖氨酸修饰的阳离子脂质分子提高脂质体对大分子蛋白质和核酸的包载效率，可以实现蛋白、核酸等靶向进入脂肪细胞。

摘要： 本发明公开了一种柿原花青素前体跨膜转运基因DkMATE5及其应用，属于植物基因工程技术领域，本发明通过转录组数据库首次筛选获得DkMATE4和DkMATE5基因，并发现DkMATE5蛋白具有原花青素转运功能。通过大肠杆菌体内互补实验分析进一步证明了DkMATE5基因促进柿原花青素前体儿茶素、表儿茶素以及表儿茶素没食子酸的偏好性跨膜转运。该发明为不同脱涩类型柿品种原花青素成分和含量差异的解析以及甜柿遗传改良提供了科学依据和新的基因资源。

摘要： 本发明公开了一种柿原花青素前体跨膜转运基因DkMATE7及其应用，属于植物基因工程技术领域，本发明通过转录组数据库首次筛选并获得差异表达基因DkMATE7基因，同时首次发现了DkMATE7蛋白具有原花青素转运功能。大肠杆菌体内互补实验分析进一步证明了DkMATE7基因促进柿原花青素前体儿茶素、表儿茶素以及表儿茶素没食子酸的偏好性跨膜转运。为深入研究甜柿中原花青素转运和积累提供了科学依据，也为遗传改良提供了新的基因资源。

摘要： 本发明涉及生物医学技术领域，具体是一种抗肠道病毒71型感染的新靶点及应用。本发明以人结肠癌细胞(Caco‑2)作为靶细胞，采用RNA干扰技术下调靶细胞转运相关膜蛋白的表达，来寻找可有效抑制EV71感染人结肠癌细胞的宿主因子，达到从源头(肠道)阻断EV71感染的目的。本发明发现ATP结合盒跨膜转运亚家族C成员3(ABCC3)在EV71感染Caco‑2细胞中发挥着重要的作用，下调ABCC3的表达，能明显抑制EV71的感染。本发明提供了ABCC3在制备预防或治疗肠道病毒71型感染药物中的应用，为临床预防和治疗因EV71感染所导致的手足口病、脑膜炎、脑干脑炎或脊髓灰质炎等疾患提供了新的靶点和治疗方案。

摘要： 本发明提供了一种高效脂肪细胞靶向的跨膜转运脂质体药物载体及其制备方法和用途。本发明首次将透明质酸修饰改造的脂质体与脂肪细胞靶向肽修饰改造的脂质体相结合，这两种修饰方式协同提高了脂质体药物载体对脂肪细胞的靶向作用。本发明首次借助寡聚赖氨酸修饰的阳离子脂质分子提高脂质体对大分子蛋白质和核酸的包载效率，可以实现蛋白、核酸等靶向进入脂肪细胞。

摘要： 本发明公开了一种利用QCM‑D实时动态监测细胞跨膜转运有机小分子的分析方法，属于细胞跨膜转运小分子过程监测与生物传感器技术领域。本发明创造性地将具有纳克级别灵敏度的QCM‑D与小分子跨膜转运机制结合在一起，提供了一种以QCM‑D技术实时动态监测细胞在不同介质刺激下跨膜转运有机小分子的在线分析新方法，包括传感界面构建、流通池中细胞的黏附、不同介质刺激下黏附细胞跨膜转运有机小分子的监测以及流通体系条件的控制，具有高灵敏度、操作简单、原位无损、实时动态监测等优点，有望在生理学、药理学、基础医学及临床诊断等研究领域推广应用。

摘要： 本发明公开了一种柿原花青素前体跨膜转运基因DkMATE7及其应用，属于植物基因工程技术领域，本发明通过转录组数据库首次筛选并获得差异表达基因DkMATE7基因，同时首次发现了DkMATE7蛋白具有原花青素转运功能。大肠杆菌体内互补实验分析进一步证明了DkMATE7基因促进柿原花青素前体儿茶素、表儿茶素以及表儿茶素没食子酸的偏好性跨膜转运。为深入研究甜柿中原花青素转运和积累提供了科学依据，也为遗传改良提供了新的基因资源。

摘要： 本发明公开了一种柿原花青素前体跨膜转运基因DkMATE5及其应用，属于植物基因工程技术领域，本发明通过转录组数据库首次筛选获得DkMATE4和DkMATE5基因，并发现DkMATE5蛋白具有原花青素转运功能。通过大肠杆菌体内互补实验分析进一步证明了DkMATE5基因促进柿原花青素前体儿茶素、表儿茶素以及表儿茶素没食子酸的偏好性跨膜转运。该发明为不同脱涩类型柿品种原花青素成分和含量差异的解析以及甜柿遗传改良提供了科学依据和新的基因资源。

摘要： 本发明涉及一种具有pH依赖性阴离子跨膜转运活性的方酰胺‑双苯并咪唑共轭物、及其合成方法，本发明设计合成了13个方酰胺‑双苯并咪唑共轭物，本发明合成的方酰胺‑双苯并咪唑共轭物对氯离子有中等强度的亲和能力，并通过阴离子交换机制促进氯离子的跨膜运输，每个共轭物在酸性pH条件下的氯离子转运活性均高于在生理pH下的活性，并且合成的共轭物对选定的实体瘤细胞还表现出中等强度的毒性。