超高效液相色谱-质谱联用

摘要： 目的研究祛白片正丁醇部位的化学成分,以及其对脱黑色素细胞模型的药效作用。方法制备祛白片正丁醇部位。采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术分析其化学成分。以小鼠B16黑色素瘤细胞为研究对象,建立脱黑色素细胞模型后分为模型组、阳性对照不同浓度组(8-甲氧补骨脂素10、50、100、150、200μmol/L)、溶媒组(以DMSO稀释而得)和祛白片正丁醇部位不同浓度组(10、50、100、150、200μg/mL),采用倒置显微镜观察细胞数量变化,并检测细胞增殖率、促黑色素生成率、酪氨酸酶活性促进率。结果在正、负离子模式下初步确定了祛白片正丁醇部位的53个化合物(正离子模式下29个,负离子模式下33个,重合9个),其中香豆素类化合物所占比例最大,其次是黄酮类化合物。祛白片正丁醇部位可使细胞数明显增加,且与作用时间和给药浓度呈正相关;其可显著升高细胞的增殖率、促黑色素生成率、酪氨酸酶活性促进率(P<0.01)。结论香豆素类和黄酮类化合物可能是祛白片正丁醇部位发挥抗白癜风作用的物质基础;祛白片正丁醇部位的抗白癜风作用可能是通过促进酪氨酸酶活性实现的。

摘要： 本文采用超高效液相色谱-质谱法测定水体中2,4-滴、莠去津、呋喃丹和甲萘威4种农药。取1 mL样品,直接过0.22μm滤膜,置于样品瓶中,经BEH C_(18)(2.1×100 mm×1.7μm)色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温为30°C,流速为0.3 mL/min,质谱采用电喷雾正离子电离,多反应监测模式(MRM)进行检测。结果表明,4种目标化合物在5.00μg/L~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数均>0.9996;检出限分别为0.86μg/L、0.012μg/L、0.77μg/L、0.92μg/L;RSD分别为0.51%~2.60%、0.34%~1.29%、0.80%~3.13%、0.55%~1.28%;准确度分别为0.56%、0.48%、1.31%、1.30%。由此可见,该方法操作简便,灵敏度、精密度和准确度相对较高,可满足水体中2,4-滴、莠去津、呋喃丹和甲萘威4种有机农药的同时检测。

摘要： 目的:建立血浆中替诺福韦(tenofovir,TFV)含量测定的方法,测定艾滋合并结核患者给药后血浆中替诺福韦的浓度.方法:血浆采用甲醇沉淀蛋白,色谱柱为Kinetex Phenyl-Hexyl(50 mm×3.0 mm,2.6μm),流动相为5 mmol·L-1甲酸铵溶液(A)-甲醇溶液(B),每个样品分析时间为3.5 min,进样量:10μL.采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS)中的正离子多反应监测模式(MRM)进行检测,TFV和同位素内标(TFV-d7)m/z分别是288.0→176.1,295.3→183.2.该方法用于21例艾滋合并结核患者的血浆标本检测.结果:TFV在1～200 ng·mL-1范围内呈线性关系,定量下限为1 ng·mL-1,日内和日间精密度均<15％,准确度在85％～115％,低、高浓度质控的提取回收率分别为114.36％、112.96％,基质效应89.49％、89.60％.稳定性试验和稀释质控样品实验(稀释因子=5和4)中低、高浓度质控准确度均在85％～115％.21例患者的TFV平均浓度为108.53±87.94(2.02～413)ng·mL-1.患者TFV的浓度有71.4％在线性范围内.结论:该方法简单、快速、灵敏,可用于测定该类患者血浆中TFV的含量.

摘要： 目的:分析阿胶、鹿角胶、龟甲胶和黄明胶这四类胶类药材中化合物成分的关联及差异,对样品进行鉴别分析.方法:选择阿胶、鹿角胶、龟甲胶、黄明胶四类胶类中药,共10批次,采用UPLC-MS技术,结合代谢组学的方法,检测不同胶类中药特征成分,比较不同胶类中药的质谱信号差异,探讨物质组成及分布情况,鉴别区分不同的胶类药材.结果:共检出417组离子对信息,不同胶类中药在化合物组成及相对含量上不同,样品间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:基于液质联用技术得到的化合物品种信息,结合代谢组学分析方法,在胶类药材的质量控制和品质鉴定上具有较好的指导性.

摘要： 以磁性石墨烯为吸附剂,建立分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定水果中多种农药残留量的方法.样品采用乙腈磷酸作提取剂,以石墨烯作为吸附剂祛除杂质后丙酮洗脱,用超高效液相色谱-串联质谱仪进行测定.结果发现,空白样品在0.01 mg/kg、0.05 mg/kg和0.50 mg/kg添加下,回收率范围为85％～106％,相对标准偏差4.6％～8.2％,线性良好,相关系数均大于0.995,且定量限可达到0.05 mg/kg.方法操作简便、快速、成本较低,适于水果中多种农药残留的检测.

摘要： 目的建立一种测定盐酸雷尼替丁及制剂中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)的方法。方法采用超高效液相色谱-质谱联用法,ACE Excel C_(18)-AR(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流动相为含0.1%甲酸的水和含0.1%甲酸的乙腈,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1)。采用电喷雾离子源,在正离子平行反应监测(PRM)模式下对m/z 75.0558离子进行选择性监测。结果N-亚硝基二甲胺的检测限为0.03 ng·mL^(-1),定量限为0.2 ng·mL^(-1);在1.01~100.7 ng·mL^(-1)浓度范围内,线性关系良好(R^( 2)=1);精密度、重复性、稳定性试验的RSD均<5%;平均回收率为97.7%~98.9%,RSD为3.0%~4.1%(n=9)。结论本方法操作简单,准确,专属性强且重现性好,适用于盐酸雷尼替丁及制剂中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺的检测。

摘要： 目的 建立一种测定盐酸雷尼替丁及制剂中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(NDMA)的方法.方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法,ACE Excel C18-AR(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流动相为含0.1％甲酸的水和含0.1％甲酸的乙腈,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1.采用电喷雾离子源,在正离子平行反应监测(PRM)模式下对m/z 75.0558离子进行选择性监测.结果 N-亚硝基二甲胺的检测限为0.03 ng·mL-1,定量限为0.2 ng·mL-1;在1.01～100.7 ng·mL-1浓度范围内,线性关系良好(R2=1);精密度、重复性、稳定性试验的RSD均<5％;平均回收率为97.7％～98.9％,RSD为3.0％～4.1％(n=9).结论 本方法操作简单,准确,专属性强且重现性好,适用于盐酸雷尼替丁及制剂中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺的检测.

摘要： 目的:利用QuEChERS法提取,采用超高效液相色谱-质谱建立同时测定蜂蜜中10种农药(多菌灵、啶虫脒、氯虫苯甲酰胺、杀扑磷、倍硫磷、乙螨唑、溴氰菊酯、哒螨灵、氯菊酯、联苯菊酯)残留的方法.方法:以Accucore aQ C18色谱柱(2.6μm,2.1 mm×150 mm)进行色谱分离,通过质谱的MRM扫描模式进行定性筛查和定量检测.结果:10种农药残留在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,定量限(LOQ)为3～5μg/kg.空白蜂蜜样品在2.5μg/kg、5.0μg/kg和10.0μg/kg 3个加标水平的平均回收率为73.6％～110.8％,相对标准偏差为0.1％～7.5％.结论:该方法适合蜂蜜中农药多残留的快速筛查和定量分析.

摘要： 目的 建立UPLC-MS/MS法对富马酸丙酚替诺福韦原料药及其片剂中基因毒性杂质9-丙烯基腺嘌吟进行定量测定.方法 选用ZOR-BAX Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm),以0.1％甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱[0 min(95％A-5％B)→3 min(40％A-60％B)→3.5 min(40％A-60％B)→3.6 min(95％A-5％B)→5 min(95％A-5％B)],流速为0.4 mL·min-1,进样量为2 μL.ESI正离子化MRM模式下对9-丙烯基腺嘌吟进行检测,定量离子对为176.1→136.0,定性离子对为176.1→119.0.结果 检测限为0.06ppm,定量限为0.13ppm;浓度在0.061～317.14ng·mL-1范围内,线性方程为y=3156.2x+21549,r=0.9971;精密度试验杂质峰面积RSD为1.2％(n=6);重复性试验富马酸丙酚替诺福韦和富马酸丙酚替诺福韦片中杂质含量RSD分别为1.9％和2.1％(n=6);稳定性试验表明供试品溶液和对照品溶液在室温下至少28 h内稳定;耐用性试验富马酸丙酚替诺福韦和富马酸丙酚替诺福韦片中杂质含量绝对差值均小于5 ppm;富马酸丙酚替诺福韦和富马酸丙酚替诺福韦片中平均回收率分别为95.5％和91.0％,RSD分别为5.4％和4.5％(n=9).结论 该法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于富马酸丙酚替诺福韦原料药及其片剂中9-丙烯基腺嘌吟的测定,为其质量控制提供参考.

摘要： 本发明公开了一种超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-PDA-MS）技术和“化学模糊识别”对中药复杂成分配伍相互作用进行研究的方法。本发明通过大量实验对色谱条件与质谱条件、TQ-MS和PDA检测条件等进行了系统优化，确定了最佳的检测方法，方法学检测结果表明该方法具有灵敏度高，精密度和准确度高，重复性好，稳定可靠的优点法，该方法可以克服中药复杂成分鉴定中鉴定步骤复杂、对照品稀缺、难以全面而准确鉴定结构等缺点，同时又能满足中药复杂成分配伍相互作用变化规律研究的要求。

摘要： 本发明公开了一种全自动在线萃取超高效液相色谱串联质谱联用快速测定水中磺胺类抗生素的方法，属于分析检测技术领域。本发明通过特定全自动在线固相萃取条件配合特定超高效液相色谱串联质谱联用条件，实现了样品富集、净化、分离和测定全自动化分析水中15种磺胺类抗生素。本发明方法方便、高效、快速，样品仅需过滤后由仪器自动完成所有分析步骤，实现了全自动化操作，全部测定时间仅需17min，检出限达到ng/L级，通过甲醇/纯水净化在线固相小柱的方式，克服了复杂基质样品分析中常见的基质效应问题，满足了水中磺胺类抗生素的超痕量检测要求。

摘要： 本发明公开了一种利用超高效液相色谱‑质谱联用技术同时检测白芍中11种有机磷类农药残留的方法，包括以下步骤：白芍药材用丙酮超声提取，提取溶液置于装有90mg石墨化碳黑的离心管中，涡旋净化，取上清液氮吹至干，加乙腈定容，用超高效液相色谱‑串联质谱在多反应监测模式下检测，基质标准曲线外标法定量。11种有机磷农药在2.5‑200ng/mL范围内线性拟合度高，11种农药在浓度为0.05mg/kg时的回收率在70％‑130％，相对标准偏差≤15％，方法检出限≤0.002mg/kg。该方法快速简便，灵敏度高，精密度高，准确度高，适合于白芍中11种有机磷类农药的分析检测。

摘要： 本发明公开了一种超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-PDA-MS）技术和“化学模糊识别”对中药复杂成分配伍相互作用进行研究的方法。本发明通过大量实验对色谱条件与质谱条件、TQ-MS和PDA检测条件等进行了系统优化，确定了最佳的检测方法，方法学检测结果表明该方法具有灵敏度高，精密度和准确度高，重复性好，稳定可靠的优点法，该方法可以克服中药复杂成分鉴定中鉴定步骤复杂、对照品稀缺、难以全面而准确鉴定结构等缺点，同时又能满足中药复杂成分配伍相互作用变化规律研究的要求。

摘要： 本发明提供一种附子的高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法，属于药物检测技术领域，所述高效液相色谱检测方法是取附子供试品溶液利用0.04mol/L的乙酸铵‑乙腈作为流动相进行高效液相色谱检测，即得检测结果；所述高效液相色谱质谱联用检测方法利用上述附子的高效液相色谱检测条件进行检测。本发明通过调整色谱条件及附子的前处理过程，再分别采用高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法对附子进行检测，能够有效将活性成分分离并检出。

摘要： 本发明涉及α‑羟基神经酰胺检测技术领域，尤其涉及基于超高效液相色谱‑质谱联用技术的α‑羟基神经酰胺的检测方法。具体包括如下步骤：(1)将血清与提取液混合，进行第一静置，离心取最下层，得物料1，将物料1与内标液混合，挥干得物料2，将物料2与复溶剂混合，进行第二静置，取上清得物料3；(2)将步骤(1)得到的物料3进行超高效液相色谱串联质谱分析。本发明基于LC‑MS/MS首次建立同时测定血清6种α‑羟基神经酰胺的分析方法，该方法具有良好的精密度，准确度，以及较宽的线性范围。

摘要： 本发明公布了一种土壤中敌草隆农药的超高效液相色谱‑三重四级杆质谱检测方法。所述方法：1）将土壤进行冻干、研磨等前处理，与有机混合溶剂混合，使用快速溶剂萃取仪萃取并收集萃取液，萃取液经过净化、浓缩后，甲醇溶液定容，得到待测样；2）配制敌草隆的标准工作溶液，采用超高效液相色谱‑三重四级杆质谱仪检测，获得敌草隆的标准工作曲线；3）将待测样进行检测，测得待测样中敌草隆的峰面积，通过标准工作曲线进行定量。该方法的多次加标回收实验结果表明，敌草隆的回收率在71.2%~90.3%之间；敌草隆方法检出限为0.000287μg/g。本发明具有灵敏度高，分离效果好，检出限低，重现性好，回收率较好，前处理操作简便快捷且易于自动化处理的优点。

摘要： 本发明公开了一种测定同位素稀释超高效液相色谱质谱联用方法，步骤如下：1)选取三种目标化合物：吡哆醛；5‑甲基四氢叶酸；甲钴胺；2)以目标化合物与其同位素内标的浓度比为X轴，目标化合物与其同位素内标的峰面积比为Y轴，建立校正曲线，计算上述三种水溶性维生素的含量；3)蛋白沉淀剂配制；4)血清样本的前处理；5)标准曲线的配制与处理。运用蛋白沉淀与液液萃取相结合的前处理方式对血清样本处理，一方面使样本中蛋白质变性沉降得以去除，另一方面脂类杂质得到去除，使处理后的样本在检测过程中受较少基质的干扰；运用相对简便的前处理方式，及快速的检测方法，建立一种能同时检测多种水溶性维生素代谢产物。

摘要： 本发明公开了一种测定同位素稀释超高效液相色谱质谱联用方法，步骤如下：1)选取三种目标化合物：吡哆醛；5‑甲基四氢叶酸；甲钴胺；2)以目标化合物与其同位素内标的浓度比为X轴，目标化合物与其同位素内标的峰面积比为Y轴，建立校正曲线，计算上述三种水溶性维生素的含量；3)蛋白沉淀剂配制；4)血清样本的前处理；5)标准曲线的配制与处理。运用蛋白沉淀与液液萃取相结合的前处理方式对血清样本处理，一方面使样本中蛋白质变性沉降得以去除，另一方面脂类杂质得到去除，使处理后的样本在检测过程中受较少基质的干扰；运用相对简便的前处理方式，及快速的检测方法，建立一种能同时检测多种水溶性维生素代谢产物。

摘要： 本发明属于分析化学技术领域，涉及一种超高效液相色谱质谱联用检测利伐沙班有关物质含量的方法，包括以下步骤：步骤a：利用稀释剂配制含利伐沙班的样品溶液；步骤b：将样品溶液注入超高效液相色谱仪，流动相A和流动相B混合后对样品溶液进行梯度洗脱，所述超高效液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；步骤c：洗脱后进入质谱仪，利用MRM多反应监测模式检测利伐沙班中间体的有关物质，离子源为ESI+。本发明提供的检测方法灵敏度高、准确度高、重现性好，可以有效分析检测利伐沙班有关物质含量，从而进行利伐沙班原料药杂质限度的质量控制，最终保证产品安全有效。