二维液相色谱

摘要： 建立柱切换法液相色谱测定保健食品中VA、VD、VE含量的方法。参照GB 5009.82—2016《食品中维生素A、D、E的测定》样品前处理方法,以Agilent Poroshell 120 PFP(4.6 mm×100 mm,2.7μm)为一维色谱柱,甲醇、水为流动相梯度洗脱,分离VA和VE的4种异构体,以Agilent Zorbax Eclipse PAH(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为二维色谱柱,甲醇、乙腈为流动相梯度洗脱,分离VD_(2)和VD_(3)。以Agilent Poroshell 120 EC C_(18)(4.6 mm×5 mm,4μm)为捕获柱,捕获VD。根据VD在一维色谱柱上的出峰起止时间,确定柱切换时间。一维检测波长为325 nm和294 nm,二维检测波长为264 nm。以外标定量法测定VA、VD、VE的含量。结果表明,VA在2.50~50.0μg/mL、VD在0.10~2.00μg/mL、VE在5.00~100.0μg/mL线性范围内线性良好,相关系数均大于0.999。回收率为86%~102%,相对标准偏差为1.5%~4.0%。表明该方法测定准确,适用于保健食品中VA、VD、VE的含量测定。

摘要： 目的:基于赛默飞Vanquish液相色谱系统,建立了在线固相萃取-二维液相色谱法测定配方奶粉中维生素A、维生素D_(2)和D_(3)和维生素E异构体的方法。方法:采用能够耐受强碱溶液的聚合物基质色谱柱作为净化皂化液的在线固相萃取柱,维生素分析专用柱VITADE-005K2作为一维色谱柱分离维生素E的异构体,维生素专用柱VITADE-004K1色谱柱作为二维色谱柱分离维生素A、D_(2)和D_(3)。双三元液相的两个泵分别作为SPE泵和一维泵,另外一台四元泵作为二维泵,一维色谱可确立维生素A和D的峰切割时间,再由样品收集环收集,通过两次中心切割的方式转移到二维色谱柱上进行分离。对所建立的方法进行方法学验证,并比较该方法与国标GB 5009.82—2016方法对实际样品的测试结果。结果:维生素A、D、E标准曲线的相关系数均大于0.9990,定量限分别为维生素A 4.151 ng·mL^(-1),维生素D36.473 ng·mL^(-1),α-维生素E 7.626 ng·mL^(-1),γ-维生素E17.676 ng·mL^(-1)和δ-维生素E 13.744 ng·mL^(-1)。结论:本方法的维生素A、D和E测定结果与国标方法基本一致,方法学满足国标要求。本方法可以实现皂化液定容后直接上样测定,简化了前处理步骤,提升了分析效率,对环境更友好。

摘要： 建立了一种二维液相色谱方法,以同时检测特医食品中维生素A、E、D_(3)的含量。该方法通过六通阀对样品溶液进行切换,维生素A、E、D_(3)经过在线过滤器过滤,随后进入一维色谱柱Poroshell 120 C_(18)(2.6×100 mm,2.7μm)分离,流动相为水+甲醇,流速1 mL/min,梯度洗脱,VWD检测器先对维生素A进行检测,波长325 nm,一维色谱柱确定阀切换时间,维生素A色谱峰在5.003 min出现后,在5.95 min时六通阀从位置1自动切换为位置2,维生素D_(3)则转入二维色谱柱Eclipse PAH(2.1×100 mm,3.5μm)分离,流动相为乙腈+甲醇,流速0.3 mL/min,梯度洗脱,DAD检测器对维生素D_(3)进行检测,波长264 nm,7.02 min时VWD检测器波长由325 nm转换为296 nm,继续检测维生素E,最终达到同时检测维生素A、E、D_(3)含量的目的。结果显示,维生素A、E、D_(3)在相应浓度范围内线性良好,相关系数r值均在0.9996以上,平均回收率为87.62%~103.10%,RSD为2.62%~8.26%。本研究建立的二维液相色谱方法具有高效、快速、准确、灵敏度高以及同时检测等特点,适用于同时快速检测特医食品中维生素A、E、D_(3)的含量。

摘要： 取奶粉样品,加入脂肪酶、蛋白酶和水,在(37±2) °C的水浴中振荡2小时进行酶解后,再加入醇溶剂混合,再加入正己烷,离心,取上清液,浓缩,经稀释液稀释,作为待测样品溶液,采用二维切割色谱法进行测定;通过三水平浓度加标回收试验,得出不同加标浓度回收率均在90%~100%之间。而且采用该文方法测定奶粉中维生素K的检出限能达到0.2 μg/g,精密度小于5.0%,方法稳定性比较好,适合日常检测活动。

摘要： 中药质量控制是保证其药效及安全的关键因素,也是中医药产业良性发展的重要保障。高效液相色谱技术作为一种经典、高效的检测技术,具有强大的分离效能,能够对中药中复杂成分进行有效分离及含量测定,已广泛应用于中药的质量控制中。随着液相技术的发展,二维液相色谱技术的出现弥补了一维液相色谱技术中样品前处理复杂,基体干扰较大等缺点,其灵敏度更高,分离度更好,能够快速,准确对中药做出分析、评价及质量控制。二维液相色谱技术因其普适性与简便性,使得中药分析更加全面、更加完善。从二维液相色谱技术在中药化学成分的系统分离、全面定性、精准定量、风险物质检测等多个方面,阐述二维液相色谱技术在中药分析及质量控制中发挥的作用。

摘要： 目的:建立注射用头孢他啶阿维巴坦钠中聚合物杂质的分析方法.方法:采用水为溶剂制备头孢他啶阿维巴坦钠的聚合物浓溶液;采用高效凝胶色谱法(HPSEC)和柱切换-LC/MSn法对聚合物浓溶液的弱保留值杂质进行分离和结构鉴定,并评估HPSEC法分析聚合物杂质的专属性;采用C18型反相色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 3.4)-甲醇-乙腈为流动相进行梯度洗脱,建立RP-HPLC分析方法,并进行方法学验证.结果:在聚合物浓溶液中鉴定出5种头孢他啶的聚合物杂质以及若干小分子杂质;HPSEC法分离聚合物杂质时,小分子杂质与聚合物杂质共出峰,方法专属性与定量准确性差;RP-HPLC法分析能够检出4种头孢他啶指针性聚合物杂质,未检出与阿维巴坦钠相关的聚合物杂质.结论:HPSEC法不能对注射用头孢他啶阿维巴坦钠的聚合物杂质进行有效质控,建立的RP-HPLC法分析注射用头孢他啶阿维巴坦钠聚合物杂质的专属性良好,样品中的聚合物杂质均来自头孢他啶,阿维巴坦钠不产生聚合物杂质.

摘要： 目的 对二维液相色谱应用的发展与原理进行概述.方法 介绍了二维液相色谱仪的构造与二维液相色谱技术的应用范围,着重描述了该技术在中药定性和定量中的研究进展.结果和结论 展望了在中药质量控制中二维液相色谱的应用前景.

摘要： 食品的种类繁多且基质复杂,往往需要使用特异性强、灵敏度高、重现性好的分析方法.二维液相色谱以峰容量大、分辨率和灵敏度高等优势,在食品行业中得以广泛应用.本文旨在论述二维液相色谱技术在食品分析中的应用进展和发展前景.

摘要： 食品的种类繁多且基质复杂,往往需要使用特异性强、灵敏度高、重现性好的分析方法。二维液相色谱以峰容量大、分辨率和灵敏度高等优势,在食品行业中得以广泛应用。本文旨在论述二维液相色谱技术在食品分析中的应用进展和发展前景。

摘要： 目的 采用回顾性调查方法探究氨磺必利血药浓度在中国人群中的分布情况.方法 采用二维液相色谱(2D-LC-UV)建立的氨磺必利血药浓度的检测方法收集服用氨磺必利住院患者的血药浓度,根据患者血药浓度、服药剂量、年龄和性别进行分析.结果 测定的179例成人患者服用氨磺必利平均血药浓度为567.93 ng/ml,男性平均浓度为548.88 ng/ml,女性为631.45 ng/rnl,明显高于现有指南的参考范围.结论 二维液相色谱检测方法结果显示,中国人群中氨磺必利的血药浓度水平明显高于AGNP推荐的有效浓度范围,提示中国人群中氨磺必利的血药浓度与西方国家有所不同,这可能与多种影响因素有密切关系,应引起关注.

摘要： 中药的物质体系复杂,对其组分的分离、鉴定和制备需要更高的分离度.而多维液相色谱已成为复杂样品研究的重要工具.其中二维液相色谱能将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联构成分离系统,应用于复杂基质的中药材及中药复方制剂的分析,可显著提高峰容量和色谱峰鉴定的可靠性,降低色谱峰重叠,使分离效率与分析通量大为提高.本文在介绍多维液相色谱原理与方法的基础上,讨论了二维液相色谱接口切换技术的近期发展并综述了其在中药中的应用研究新进展.

摘要： 中药的物质体系复杂,对其组分的分离、鉴定和制备需要更高的分离度.而多维液相色谱已成为复杂样品研究的重要工具.其中二维液相色谱能将分离机理不同而又相互独立的两支色谱柱串联构成分离系统,应用于复杂基质的中药材及中药复方制剂的分析,可显著提高峰容量和色谱峰鉴定的可靠性,降低色谱峰重叠,使分离效率与分析通量大为提高.本文在介绍多维液相色谱原理与方法的基础上,讨论了二维液相色谱接口切换技术的近期发展并综述了其在中药中的应用研究新进展.

摘要： 本文使用Thermofisher Ultimate 3000流分收集双梯度液相色谱系统分别实现在线和离线二维液相色谱纯化和分析单克隆抗体。Ultimate 3000流分收集双梯度二维液相色谱可实现复杂蛋白的全自动分析，其自动进样器具有进样、收集样品和再进样的功能，整个过程可通过赛默飞变色龙软件实现全自动运行。

摘要： 目的：建立了二维液相色谱方法分离中药复方银黄口服液的成分。方法：按照中国药典银黄口服液项下比例制备，以CN柱作第一维色谱柱，甲醇和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱分离；以C18柱作第二维色谱柱，乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱分离。结果：搭建的二维液相色谱的峰容量显著高于一维色谱，分离效率得到了明显的提高。结论：该方法操作简便，可作为中药等复杂体系分离分析的有效手段。

摘要： 目的:解决正相色谱/反相色谱联用中存在的两维流动相不兼容等问题。rn 方法:以常规正相色谱为第一维，常规反相色谱为第二维，构建真空辅助溶剂蒸发接口的二维液相色谱系统。采用标准样品和甜橙精油对该二维液相系统进行评价。rn 结果:接口可以实现1.0 mL/min正相溶剂的在线实时蒸发，样品在接口中得到浓缩。rn 结论:该接口解决了正相色谱/反相色谱联用中两维溶剂不兼容等问题,第一维和第二维均可以在各自最优条件下进行分离，从而提高了二维液相系统的总分离效能。

摘要： 本文阐述了使用二维液相提高生物制药表征效率。具体分析了二维液相色谱基本原理、如何让高盐体系做到质谱兼、容提升复杂蛋白样品的峰容量、复杂糖型的二维表征分析。

摘要： 生物制药中治疗性重组蛋白几乎都是通过高效的宿主细胞表达,宿主细胞同时表达了大量自身蛋白可能对重组蛋白药物造成污染.目前常用的基于ELISA的HCP检测方法存在仅能对已知的HCP进行检测等问题.本文中建立了基于LC-MS的二维液相色谱分离,MSE或HDMSE定性定量的HCP分析流程,常规的2D-LC/MSE可以定性定量至几十ppm级别的HCP,利用CSHC18色谱柱结合HDMSE可以定性和定量1-100ppm的低丰度残留HCP.该方法快速简便,重现性好,能够发现和定量未知的HCPs,而且也与目前制药行业中QbD(质量源于设计)理念相一致,具有巨大的应用价值.

摘要： 目的:合成一种同时具有弱阳和疏水性质的二维色谱固定相。rn 方法:将带有多功能基团的分子通过共价健合到固定相上来实现对基质的化学修饰，通过对标准蛋白的分离情况来对合成的二维固定相进行评价。rn 结果:在离子交换和输水两种模式下，仅用一种流动相，以改变流动相中强和弱的洗脱液顺序的方法，对标准蛋白进行分离，得到了相当不错的效果。rn 结论:用这类色谱柱可完成通常用两根色谱柱和在两种流动相条件才能实现的在线蛋白“二雏色谱”分离。

摘要： 目的：提出了用一根色谱柱来实现离子交换和疏水色谱快速分离整体蛋白的新方法。rn 方法：采用二维色谱柱为研究对象，通过考察其对标准蛋白和实际样品的分离来研究单柱二维色谱法在实际分离中的应用。rn 结果：在选择合适的固定相、流动相、缓冲液交换方法及二次进样的条件下，在1 h内用同一根色柱完成了通常用两根色谱柱和在两种流动相条件才能实现的“二维色谱”分离。rn 结论：通过对人血清蛋白的分离结果证明，将单柱二维色谱用于未知样品中蛋白的快速预分离，特别是为在蛋白组学研究中，在样品来源极其有限的情况下，为进行活性蛋白预分离提供了一种新的解决思路。

摘要： 本文建立了一种可用于蛋白质分离的在线二维液相色谱分离平台,并将其用于马鹿鹿茸提取蛋白的分离。第一维离子交换色谱分离后的蛋白质,经过两根平行的反相捕集柱捕集后,交替送入第二维反相色谱进行分离,系统峰容量达到480。

摘要： 本发明涉及一种液相色谱馏分可在线连续切割检测的液相‑气相二维色谱，其包括液相色谱分析装置(16)和位于其下游的气相色谱分析装置(20)；所述液相色谱分析装置(16)与气相色谱分析装置(20)之间设有至少两个在线浓缩装置，所述在线浓缩装置用于将所述液相色谱分析装置(16)按保留时间切割的多段流出馏分依次或交替进行浓缩后再分别进样到所述气相色谱分析装置(20)中。本发明还涉及使用该液相‑气相二维色谱的分析方法及应用。本发明的装置和方法可将经液相色谱分离的每一段馏分都可切割进入到气相色谱中，实现全二维色谱分析模式，用以解决现有技术中灵敏度低、对转入气相色谱进样口的溶剂量有限制、对组分不能连续切割等问题。

摘要： 本发明涉及一种基于固相萃取的液相‑液相二维色谱测定NNK及其代谢物的系统和方法。该方法是将制备好的样品进样后通过一级色谱高效净化，切割一级色谱中NNK和NNAL流出的部分馏分，切割的馏分用稀释泵稀释降低馏分的溶剂强度，通过混合器混合后再通过固相萃取柱富集。固相萃取富集完成后，通过阀切换，用二级色谱的分析泵输送流动相，从和样品富集相反的流向把固相萃取柱上富集的NNK和NNAL洗脱下来，并通过超高效液相色谱柱分离、串联质谱检测。本发明方法可同时实现样品的高效净化和高倍数富集，方法的分析灵敏度大大提高，分析样品前处理得到了很大的简化，可准确测定血液和尿液样品中ng/L数量级的NNK和NNAL。为吸烟与健康的相关性研究提供了灵敏、准确、可靠的新方法。

摘要： 本发明涉及一种亲水作用色谱‑反相色谱组合二维液相系统及其分析方法，该系统包括亲水作用色谱柱、反相色谱柱、检测器、自动进样器、第一泵组件、第二色谱泵、第三色谱泵、混合器、样品环和切换阀；所述第一泵组件与所述亲水作用色谱柱接通，所述第二色谱泵和第三色谱泵分别与所述混合器接通，所述混合器与所述反相色谱柱接通；所述切换阀至少具备以下2种连接状态：连接状态1：将检测器的入口与亲水作用色谱柱的出口接通，并将样品环的两个端口分别与第二色谱泵、混合器接通；连接状态2：将检测器与反相色谱柱接通，并将样品环的两个端口分别与亲水作用色谱柱和系统外接通。该系统可实现对极性差异较大的多组分目标物的一次性分析。

摘要： 本发明涉及一种液相色谱馏分可在线连续切割检测的液相-气相二维色谱，其包括液相色谱分析装置(16)和位于其下游的气相色谱分析装置(20)；所述液相色谱分析装置(16)与气相色谱分析装置(20)之间设有至少两个在线浓缩装置，所述在线浓缩装置用于将所述液相色谱分析装置(16)按保留时间切割的多段流出馏分依次或交替进行浓缩后再分别进样到所述气相色谱分析装置(20)中。本发明还涉及使用该液相-气相二维色谱的分析方法及应用。本发明的装置和方法可将经液相色谱分离的每一段馏分都可切割进入到气相色谱中，实现全二维色谱分析模式，用以解决现有技术中灵敏度低、对转入气相色谱进样口的溶剂量有限制、对组分不能连续切割等问题。

摘要： 本发明公开了一种全二维气相色谱仪，包括进样口、一维柱、二维柱、热调制器和检测器，所述热调制器包括第一热调制位置和第二热调制位置，其中进样口与一维柱进口连接，一维柱出口通过管路与第一热调制位置的进口连接，第一热调制位置的出口通过管路与第二热调制位置的进口连接，第二热调制位置的出口通过管路与二维柱的入口连接，二维柱的出口与检测器连接，一维柱出口到二维柱入口之间的管路为调制柱，调制柱亦可以由一维柱的下游一段或二维柱的上游一段充当。所述调制柱仅在其部分长度上的内部涂敷有固定相。通过本发明，能够针对全二维应用获得最佳的调制效果。

摘要： 本发明涉及一种基于固相萃取的液相‑液相二维色谱测定NNK及其代谢物的系统和方法。该方法是将制备好的样品进样后通过一级色谱高效净化，切割一级色谱中NNK和NNAL流出的部分馏分，切割的馏分用稀释泵稀释降低馏分的溶剂强度，通过混合器混合后再通过固相萃取柱富集。固相萃取富集完成后，通过阀切换，用二级色谱的分析泵输送流动相，从和样品富集相反的流向把固相萃取柱上富集的NNK和NNAL洗脱下来，并通过超高效液相色谱柱分离、串联质谱检测。本发明方法可同时实现样品的高效净化和高倍数富集，方法的分析灵敏度大大提高，分析样品前处理得到了很大的简化，可准确测定血液和尿液样品中ng/L数量级的NNK和NNAL。为吸烟与健康的相关性研究提供了灵敏、准确、可靠的新方法。

摘要： 本实用新型涉及一种液相色谱馏分可在线连续切割检测的液相-气相二维色谱，其包括液相色谱分析装置(16)和位于其下游的气相色谱分析装置(20)；所述液相色谱分析装置(16)与气相色谱分析装置(20)之间设有至少两个在线浓缩装置，所述在线浓缩装置用于将所述液相色谱分析装置(16)按保留时间切割的多段流出馏分依次或交替进行浓缩后再分别进样到所述气相色谱分析装置(20)中。本实用新型还涉及使用该液相-气相二维色谱的分析方法及应用。本实用新型的装置和方法可将经液相色谱分离的每一段馏分都可切割进入到气相色谱中，实现全二维色谱分析模式，用以解决现有技术中灵敏度低、对转入气相色谱进样口的溶剂量有限制、对组分不能连续切割等问题。

摘要： 本实用新型公开了一种用于全二维气相色谱仪的调制柱、调制器及全二维气相色谱仪，其中全二维气相色谱仪包括进样口、一维柱、二维柱、热调制器和检测器，所述热调制器包括第一热调制位置和第二热调制位置，其中进样口与一维柱进口连接，一维柱出口通过管路与第一热调制位置的进口连接，第一热调制位置的出口通过管路与第二热调制位置的进口连接，第二热调制位置的出口通过管路与二维柱的入口连接，二维柱的出口与检测器连接，一维柱出口到二维柱入口之间的管路为调制柱，调制柱亦可以由一维柱的下游一段或二维柱的上游一段充当。所述调制柱仅在其部分长度上的内部附着有固定相层。通过本实用新型，能够针对全二维应用获得最佳的调制效果。

摘要： 本发明提供了一种生产型二维液相色谱接口及生产型二维液相色谱分离系统，包括生产型二维液相色谱接口、第一维液相系统和第二维液相系统。本发明通过一个基于富集柱阵列的生产型二维液相色谱接口，解决了第一维液相色谱分离与第二维液相色谱分离的同步冲突与控制问题，能实现生产型二维色谱分离的连续高效运行。

摘要： 本发明提供了一种全二维液相色谱分析烟草指纹图谱的方法及全二维液相色谱装置和系统。该方法：对烟草进行样品前处理后，采用全二维液相色谱分析烟草指纹图谱，第一维液相色谱采用苯基‑己基柱，第二维液相色谱采用C18柱。该系统包括连通的前处理装置和全二维液相色谱装置；所述全二维液相色谱装置包括第一维色谱单元、双两位四通阀和第二维色谱单元；所述第一维色谱单元包括第一维泵、第一维色谱柱和第一维定量环；所述第二维色谱单元包括第二维泵、第二维色谱柱、第二维定量环和检测器。该方法和系统以全二维液相色谱(LC×LC)为基础，通过搭建LC×LC分析平台，建立烟草全二维指纹图谱分析方法，实现不同类型烟草样品进行比较分析。