诱变选育

摘要： 丁烯基多杀菌素(butenyl-spinosyn)是一种由须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)产生的杀虫剂,兼具生物农药的安全性和化学农药的速效性。当前,野生型须糖多孢菌合成丁烯基多杀菌素效率低,达不到工业生产要求,获得高产菌株是亟待解决的问题。目前关于丁烯基多杀菌素的相关研究较少,由刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)产生的多杀菌素是丁烯基多杀菌素的结构类似物,具有相似的生物合成途径,本文介绍了两者的基本特性,借鉴多杀菌素的研究经验总结了丁烯基多杀菌素高产菌株已有及可用的选育和改造策略,包括传统的理化诱变方法以及代谢流调控、途径基因调控、转录调控、异源表达等更加精准的基因工程方法,以期为后续丁烯基多杀菌素的深入研究提供思路。

摘要： 本试验旨在通过诱变选育得到一株高产二十二碳六烯酸(DHA)的裂殖壶藻藻株,为进一步开发缓解幼龄动物腹泻的新型饲料奠定基础。使用裂殖壶藻原始藻株ATCC20888,通过常压室温等离子体对藻株进行诱变,再进一步通过建立丙二酸、2,2’-联吡啶及丙二酸-2,2’-联吡啶复合筛选方法对诱变藻株进行快速筛选,对筛选突变藻株进行摇瓶发酵,利用磷酸香草醛法和高效气相色谱法对突变藻株的油脂、DHA产量快速检测,得到高产DHA的藻株。结果表明:丙二酸、2,2’-联吡啶及丙二酸-2,2’-联吡啶复合筛选均可以提高裂殖壶藻藻株的平均DHA产量,较原始藻株分别提高了32.20%、25.01%和29.71%。通过丙二酸-2,2’-联吡啶复合筛选得到的诱变藻株I-F-9其DHA含量(54.56%)及产量(10.88 g/L)分别比原始菌株增加了74.62%和61.17%(P<0.05)。由此可见,通过常压室温等离子体诱变选育的裂殖壶藻藻株I-F-9较原始藻株DHA含量及产量均有显著提高,且其DHA产量处于目前同类研究前列。

摘要： 该研究采用平板酶解圈法从南海海域海藻、动物及沉积物样品中筛选产褐藻胶裂解酶细菌,对筛选菌株进行分子生物学鉴定,并利用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术选育高产褐藻胶裂解酶菌株。结果表明,共分离筛选得到酶活较高的细菌14株,16Sr DNA比对分析结果表明,它们隶属于3个门、5个纲、7个目、8个科、9个属,其中有5株菌(占35.7%)可能代表着新的分类单元。以高产褐藻胶裂解酶海藻类芽孢杆菌(Paenibacillus algicola)HB172198T作为原始菌株,利用ARTP诱变技术选育获得2株褐藻胶裂解酶活力明显提高的突变株(编号分别为30-19、80-6),其酶活力分别比原始菌株提高了32.6%和21.6%,且连续6次传代培养诱变菌株的产酶遗传性状稳定。

摘要： 研究以产核黄素的枯草芽孢杆菌C0为出发菌株,经^(12)C^(6+)重离子辐射诱变后,以8-氮鸟嘌呤作为拮抗物进行高产菌株的筛选,初步获得60个诱变菌株,进一步筛选得到4株高产菌株,最后经摇瓶发酵,发现4株诱变菌株中B13的核黄素产量最高为(401.8±9.2)mg/L,比原始菌株提高18.5%。经二次重离子诱变选育后,获得一株高产菌株BII7,核黄素产量达到(818.8±17.3)mg/L,比一次诱变菌株B13提高77.7%,表明重离子辐射对产核黄素的枯草芽孢杆菌具有良好的诱变效果。对诱变菌株BII7进行培养温度、pH值及转速等条件的优化,最适培养条件为37°C、pH 7.7、220 r/min。在5 L双联发酵罐中扩大培养高产菌株BII7,37°C、pH 7.7及溶氧浓度40%时,发酵时间缩短12 h,核黄素产量达1385.3 mg/L,比摇瓶培养提高69.2%,该诱变菌株具有较好的放大生产能力。6次传代培养实验表明该诱变高产菌株具有稳定的遗传特性。

摘要： 目的:以云南马龙C3F-2016烟叶表面筛选的产淀粉酶菌株为出发菌株,诱变选育高产淀粉酶菌株并研究诱变前后酶学特性。方法:ARTP技术选育菌株后采用3,5-二硝基水杨酸法测定诱变前后菌株产生的淀粉酶酶活力,并探讨不同温度、不同pH、金属离子、紫外光对淀粉酶活力的影响。结果:诱变选育出一株酶活力有较大提高且传代稳定的突变株Bacillus koreensis FS-103,其淀粉酶活力达9050 U/mL,较出发菌株提高了90%。高产突变株FS-103所产淀粉酶的最适作用温度为60°C,最适作用pH5.5,在40~50°C和pH5~6之间具有良好的稳定性,Ca^(2+)、Mg^(2+)对淀粉酶活性具有促进作用,紫外照射对淀粉酶活力影响减弱。结论:此诱变选育产淀粉酶菌株的方法可行,为该类菌株进行酶制剂的研究与开发奠定理论基础。

摘要： 本研究利用中科院重离子加速器释放的^(12)C^(6+)重离子束作为辐射诱变源,以酸斑值(H^(12)C^(6+))和抑菌圈值为指标,对鼠李糖乳杆菌JF12-1进行功能性诱变。通过致死率和正负突变率确定诱变的最佳辐照剂量;对最佳辐照剂量下的突变菌株利用酸斑法进行初筛,抑菌圈法复筛,而后通过连续传代之后检测乳酸含量变化来测定遗传稳定性,并对遗传稳定菌株进行16S rDNA测序,定位其突变位点。结果显示辐照剂量为300 Gy时,致死率为79.86%,正突变率为30.33%,负突变率为5.38%,确定为最佳诱变剂量;酸斑法初筛最佳诱变剂量下的突变菌株,得到20株H^(12)C^(6+)值较原始野生菌株提高25%以上的突变株;抑菌法复筛得到8株体外抑菌性较原始野生菌株提高15%以上的菌株;遗传稳定性测定发现这8株突变乳酸菌株产乳酸稳定性良好;16S rDNA测序发现原始野生型菌株JF12-1的可能突变位点不在16S rRNA基因上,促使其产酸和抑菌性能增强的突变位点可能发生在其他基因区段。利用^(12)C^(6+)重离子束成功诱变选育出了高产乳酸及体外抑菌性优良的功能性鼠李糖乳杆菌稳定株,为下一步深入开发该菌株提供了较好的理论基础和应用依据。

摘要： 目的 对自主分离得到的星孢菌素产生菌HY1进行分类鉴定和诱变选育.方法 通过16S rDNA基因序列同源性比对分析,结合其形态特征、培养特征、生理生化特性对菌株HY1进行分类研究;以HY1为出发菌株,通过紫外-氯化锂(UV-LiCl)、常压室温等离子体(ARTP)及亚硝基胍(NTG)诱变,结合含色氨酸、甲硫氨酸的抗性平板进行筛选.结果 菌株HY1为链霉菌属的菌株,通过多次诱变得到突变高产菌株HY6-S36,且遗传性能稳定,发酵效价达360mg/L,比原始菌株提高了80％.结论 获得一株高产稳定的星孢菌素生产菌株,为星孢菌素产业化提供优良的菌种.

摘要： 为获得能利用葡萄糖/木糖混合糖液的高产油脂菌种,以野生酵母菌株Trichosporon dermatis ZZ-46为出发菌进行常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)-硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)复合诱变,并分别以浅蓝菌素和氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)分别为筛选因子结合尼罗红荧光染色进行高通量筛选,最终选育出1株高产菌株L7.该菌以混合糖为碳源进行摇瓶复筛后,生物量、油脂产量和油脂含量分别达到22.7 g/L、11.4 g/L和50.5％,较出发菌株分别提高12.6％、33.2％和7.8％;且该菌具有良好的遗传稳定性,其脂肪酸组成与出发菌相同,与植物油相似.结果 表明,该菌具有较好利用混合糖液生产生物柴油的潜力.

摘要： 以选育产S-腺苷蛋氨酸的高产酿酒酵母菌株为目标,利用常温常压等离子体和137 Cs γ-射线对菌株进行诱变.通过5轮常温常压等离子体诱变和4轮γ-射线诱变,结合乙硫氨酸、制霉菌素抗性筛选,获得突变株AC-10,摇瓶发酵48 h,其S-腺苷蛋氨酸产量达到1.15 g/L,与出发菌株相比提高了130.0％.摇瓶发酵最适条件为30°C、初始pH 5.5.经5L发酵罐分批补料发酵68 h,S-腺苷蛋氨酸产量达到5.62 g/L.

摘要： 采用紫外-氯化锂复合诱变对高产Monacolin K红曲霉菌株进行进一步诱变选育,得到最佳诱变条件:紫外诱变时长2min,氯化锂浓度0.6‰.经过菌落形态初筛和Monacolin K含量检测复筛,获得了高产Monacolin K并且遗传性能稳定的突变菌株QH24,其Monacolin K产量达到出发菌株的10.71倍,其中酸式Monacolin K和内酯式含量比为2.18,相对于出发菌株亦有更好改善.

摘要： 利用低能N+注入技术对具有除臭作用的菌株10 MG进行诱变选育，以进一步提高该菌株的除臭性能。采用60×2.6×10 13ions/cm2的N+注入剂量进行诱变。通过筛选编号为D63的菌株对于氨气的降解率达76.14%，比出发菌的降解率提高了10.84%；硫化氢的降解量达32.38%，比出发菌提高了7.83%。变异菌株经传5代培养，其除臭效果稳定。

摘要： 蛹虫草又称北冬虫夏草,是重要的药食用真菌,已有研究表明其主要活性成分具有与野生冬虫夏草极同的药理作用,甚至某些活性成分含量还高于冬虫夏草,可作为冬虫夏草的代替品.自蛹虫草的无性型分离以来,人们对蛹虫草无性型的液体发酵条件、菌丝体有效成分、活性物质的分离纯化及部分生理功能等进行了广泛的研究,蛹虫草无性型菌丝体含有与有性型子实体相似的生理活性物质及药用价值,可利用发酵生产蛹虫草无性型菌丝体来进行相关产品的开发.然而由于蛹虫草分布比较广泛,不同产地、不同寄主的蛹虫草的生长条件、活性成分种类以及相对含量等也有不同,其无性型—蛹草拟青霉的液体发酵条件、活性物质种类及含量也存在较大差别.在野生虫草资源日益匮乏的情况下,研究开发人工虫草,选育优良虫草菌株,探讨液体发酵条件、研究菌丝体活性成分、含量及生理功能对进一步利用和开发虫草资源具有重要的理论意义和深远的现实意义.rn 本研究以提高蛹虫草无性型深层发酵的菌丝体中腺苷含量为目标，以分离自长白山的一株蛹草拟青霉为出发菌株，在优化原生质体的形成和再生条件的基础上，以原生质体诱变的方法选育高产腺苷的蛹草拟青霉菌株。rn 以培养5d菌龄的菌丝体为基体，用1.0%纤维素酶和1.0%蜗牛酶作为复合酶，选择0.6mo1/L蔗糖为最佳的渗透压稳定剂，最佳酶解pH为6.3-6.5温度23°C，40rpm条件下，酶解3.5h，原生质体的制备率可达1.5x108个/ml，再生率为1.3%。制备的原生质体经紫外线诱变、微孔板初筛及摇瓶复筛，获得了一株的高产腺苷蛹草拟青霉菌株FY1421，经单因素及多因素的培养基及培养条件的综合优化，30L发酵罐中，其生物量(菌体干重)较出发菌株提高了26.5%,菌丝体中腺苷含量5480ug/g干重，较出发菌株提高9.36%，达到选育目标，也为进一步开发利用蛹虫草资源奠定了基础。

摘要： 以香菇菌种沪农2号与P18为出发菌株,紫外诱变处理其原生质体后,通过47°C热处理初筛得到了沪农2号耐高温突变株24株,P18耐高温突变株57株.对出发菌株以及所有的突变株进行高温栽培试验,沪农2号与P18的突变株中都有超亲菌株出现,对突变株的出菇性状进行综合分析发现:沪农2号中的N15、N14、N21、N24以及P18中的N6、N44、N24综合性状较好,表明紫外诱变定向选育香菇耐高温菌株的技术路线可行.

摘要： 由于粮食价格的持续上升,为了缓解能源紧张,成本低廉、来源广泛的木质纤维素原料成为科学家研究的目标,这使得研发第二代与第三代生物燃料势在必行.纤维素是地球上最广泛的碳水化合物之一,也是数量最大的可再生资源.植物每年通过光合作用合成的纤维素量大约占全球植物量的1/2，毛竹为刚竹属,是重要的木材替代品,把毛竹应用到木质纤维素转化乙醇的研究中具有重大的意义. 本文拟从毛竹纤维素高效降解菌的筛选、诱变选育、固体产酶培养基的优化、高效毛竹预处理等方面、以毛竹粉纤维质为原料，研发毛竹纤维质燃料乙醇的糖化生产工艺。

摘要： 以自主分离的优势浸矿菌种At.fLD-1为原始菌,采用微波处理和化学药剂对其进行了微波—化学复合诱变,重点研究了复合诱变对At.fLD-1菌生长、氧化活性以及含铜尾矿浸出体系的影响.结果表明,微波—化学复合诱变能使菌种产生明显变异,能很好提高菌种氧化活性和生物浸出能力.复合诱变菌在9K培养基中,24h后Fe2+氧化率达到100％,而在相同条件下,原始菌的Fe2+氧化率达到100％则需48h;在含铜尾矿浸出体系中,浸出30d时,铜浸出率为34.20％,比原始菌提高了31.5％,到达浸出终点的时间比原始菌提前了5～8d,充分表明复合诱变菌浸出含铜尾矿的性能得到了很大提高.

摘要： 本文就农用抗生素的研究现状、新品种、作用机理等方面进行了全面阐述,对其在农业上的应用进行了综合的归纳,并对今后的研究进行了展望.总结出了今后应加强农用抗生素菌种的诱变选育工作，进而丰富抗生素的品种，使产量和品质得到进一步的提高和改进，利用发酵工程技术研究农用抗生素发酵代谢规律，旨在创制出有利于提高产素水平的发酵控制关键技术，获得大幅度提高发酵水平的新工艺;分析不同抗生素的结构和特性，选择高效安全的生物化工制剂等方面的研究展望。

摘要： 本研究拟采用紫外线对菌株进行诱变处理，筛选出酶活提高的突变菌株，并对其酶学性质进行初步探索，为今后的进一步深入研究及工业化生产和应用提供了科学依据。表明菌株经紫外线诱变成功获得了一株突变株，在一定程度上达到了诱变的目的。由于酶的应用要受到各种因素的影响，因此在研究产酶菌株时还必须对这温度、pH等参数进行摸索，这样才能筛选出适合动物体内应用的产纤维素酶益生芽孢杆菌，为生产实践提供有效的活菌饲料添加剂。

摘要： 稳定性同位素标记后的氨基酸作为示踪剂，对于研究蛋白质的结构和功能具有不可替代的作用，13C标记L-亮氨酸作为示踪剂，已被广泛应用于医学、生物、化工等行业。随着蛋白质工程、分子生物学以及多肽药物的发展，它将迎来更加美好的应用前景。以黄色节杆菌ATCC39106为出发菌株，通过诱变选育，获得突变株TS151，并研究了适用于13C标记L-亮氨酸生产的发酵工艺、提纯工艺，高丰度产酸稳定在15g/L以上，提取收率稳定在70％。

摘要： ε-聚赖氨酸(ε-PL)是一种L-lysine同聚物,主要由链霉菌科和麦角真菌产生.但是,ε-PL野生菌株的生产能力较低,这一定程度上制约对它的进一步研究和利用.对于包括链霉菌在内的大多数细菌,ε-PL的前体物lysine一般是通过天冬氨酸途径合成的.这条途径中的第一个关键酶Ask活性会受到氨基酸终产物的调节.而且,天冬氨酸还可以反馈抑制上游磷酸烯醇式丙酮酸脱羧酶的活性.为了解除上述反馈调节,提高ε-PL产生菌的产量,我们利用(SG+ Gly+L-lysine+ AHV)复合抗性,筛选出一种高产菌株L9.最终,我们得到了一株淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)L9,其摇瓶产量为0.69g/L,比出发菌株高13％.经代传稳定性研究证明其产酸量和抗性标记均可稳定遗传.

摘要： 本发明公开了一种低能N

摘要： 本发明涉及一种利用ARTP诱变技术选育的藤仓赤霉突变株——水稻恶苗病菌GA‑347(Fusarium fujikuroi GA‑347)及其应用，本发明的菌株命能大规模应用于工业化生产。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，邮编430072，保藏编号：CCTCC NO：M 2019378，保藏日期2019年5月20日。本发明菌株生长过程中不产生分生孢子，接种到液体种子培养基中，待细胞长成熟后，转接到发酵培养基中，发酵水平大幅度提高，赤霉素产率达到野生菌的22倍，为国际领先。赤霉素在胞外分泌，可直接从发酵液汇总获取，有利于固液分离，提取收率升高。同时，提高了设备和原料的利用率，大大降低了生产成本，具有显著的经济效益与社会效益。

摘要： 本发明涉及一种利用ARTP诱变技术选育的白色栗蘑品种及选育方法，属于食用菌新品种选育领域。技术方案是：命名为迁白M‑520，在栗蘑迁西1号菌株的基础上选育而成，该品种的菌株在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏登记入册编号：CGMCC No.15876。白色栗蘑品种利用ARTP诱变技术选育，将10μL栗蘑原生质体悬液载片放到ARTP诱变仪器固定位置后，在气流量为8 SLM，诱变处理时间设为30‑40s条件下，可获得突变体。本发明的有益效果：菌盖为白色，且栗蘑香味浓郁；加工煮熟后依然为白色，为制作色、香、味俱全的美味菜肴提供了一种新食材。

摘要： 一种快速选育空间诱变矮杆和低镉积累水稻的方法，属于水稻育种技术领域。所述方法为：对水稻种子进行空间诱变处理得到SP0代种子；种植收获主穗种子得到SP1代，种植SP1代种子得到SP2代，在其中选择具有目标性状1的突变株连续严格自交到SP5代；根据目标性状2设计查找目标基因OsHMA3；根据目标性状2基因序列设计用于qRT‑PCR检测的引物；将具有目标性状2的水稻突变株在三叶期移栽种植；严格自交到SP7代，获得稳定遗传且满足目标性状的单株。本发明利用返回式卫星搭载水稻种植进行空间诱变，使得种子通过空间辐射和微重力下过产生高频、有益的突变，这减少了耗费在挑选不符合目标性状变异株上的时间，也避免了转基因技术带来的不安全因数。

摘要： 本发明公开了一种利用EMS试剂诱变进行耐盐百合新品系选育的方法，该方法步骤如下：a、诱导百合胚性愈伤组织；b、配置耐盐诱变培养基；c、耐盐诱变：把愈伤组织放置于含EMS试剂的耐盐诱变培养基上诱变；d、诱导成苗：存活的愈伤组织依次接种到成苗培养基、鳞茎培养基上培养，长出直径为0.1cm‑0.5cm的百合小鳞茎备用；e、耐盐筛选：把培养好的直径为0.1cm‑0.5cm的百合小鳞茎转接到筛选培养基上培养，正常生长的耐盐百合鳞茎即为耐盐百合新品系。本发明的方法通过在盐环境培养条件下进行定向诱变而选育出耐盐百合新品系的方法，操作简单、可操作性强且利用诱变效率高，短时间内可极大丰富百合耐盐种质资源。

摘要： 本发明涉及利用多重复合诱变技术选育高产RNA酵母菌株的生产工艺，包括以下步骤：1)将斜面保藏的酿酒酵母菌株接一环至装有100mLYEPD液体培养基的擢瓶中活化，培养条件为180r/min，30摄氏度，培养12h；2)再将活化好的液体菌液接种至实验诱变筛选培养基，接种量为2％，培养条件为180r/min，30摄氏度，培养12h；3)将化学诱变试剂五氟尿嘧啶设置浓度0.03％‑0.09％，将其添加到液体菌液中，静置1h后将菌液稀释至10‑5；4)然后涂布在固体平板上，在紫外光线下照射，期间避免可见光源，设置照射时间为30s‑90s，以致死率为70％‑80％为标准。该方案利用优化发酵培养基对诱变菌株进行培养，RNA含量达8.11％，比高了18.22％，同时生物量达到188g/L(湿质量)，实现了酿酒酵母高产RNA的高密度发酵。

摘要： 本实用新型公开了一种优质种子选育用诱变育种机，包括箱体、转动架和滑动架，所述箱体内的一侧通过轴承安装转动架，所述箱体内的底部开设有插槽，所述箱体的另一侧设置有滑动架，且滑动架通过底部滑块与插槽滑动连接，所述滑动架的内侧通过轴承安装与转动架对应的转动辊，所述转动辊的外围通过螺栓连接转动叶片。本实用新型一种优质种子选育用诱变育种机，结构简单可靠，而且使用稳定方便，实用价值高，适合被广泛推广和使用。

摘要： 本实用新型公开了一种利用诱变来选育水土保持灌草的自动化观测系统，包括若干个种植池，所述种植池通过管道连接水源和排水口，所述种植池内设置有若干个诱变种植区和若干个参照种植区，每一个所述诱变种植区的种植土壤内均种植有一种或者多种太空诱变后的灌草植物种子，每一个所述参照种植区的种植土壤内均种植有一种或者多种太空诱变前的灌草植物种子，所述诱变种植区和所述参照种植区的种植土壤内均设置有植物生长测量仪，所述植物生长测量仪通过有线或者无线通讯装置连接后台服务器。本实用新型通过跟踪观察分析诱变前后的灌草植物的植株形态、根系特征及生理生化指标的变化特征，筛选出具有优良水土保证效果的太空诱变灌草植物。

摘要： 本发明公开了一种低能N+注入诱变选育云芝菌株的方法及所选育的菌株，菌株保藏编号为CGMCC No.8651；选育方法包括筛选要诱变的云芝出发菌株、融合子的获得、选择融合菌株的原生质体作为低能氮离子注入诱变的材料、氮离子注入诱变、诱变菌株的筛选、遗传性状稳定性验证等步骤。本发明筛选到一株遗传性状稳定的云芝子实体抗病高产菌株，其云芝产量高于高产出发菌株10.3%，抗病性明显高于抗病出发菌株5%。

摘要： 本发明公开了一种高产A40926菌株的基因重组迭代复合诱变选育方法，对A40926产生菌出发菌株采用ARTP诱变处理，结合缬氨酸抗性筛选，获得相对高产菌株；选择一株或几株相对高产菌株制备(混合)菌悬液，添加溶菌酶溶液酶解处理一定时间，获得原生质体悬液，原生质体悬液均分后分别热灭活和紫外灭活后得到双亲本灭活标记原生质体，将双亲本灭活标记的原生质体融合，涂布于抗性再生培养基中，融合子菌株经摇瓶发酵培养，筛选获得第一代高产A40926菌株，然后进行多轮迭代“ARTP‑原生质体融合“的复合诱变选育，获得可稳定高产A40926的菌株；该菌株最终产量可达到2.0～2.2g/L，且传代6代以内具有较好的遗传稳定性。同时，与出发菌株相比，代谢产物A40926组分A1和B1含量明显提高。