解淀粉芽胞杆菌

摘要： 前期研究发现解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)md8和md9对牡丹根腐病原菌具有较好的抑制作用,但其抑菌物质的组成尚不清楚。本文首先明确了2个菌株3种脂肽类物质合成的基因片段,利用酸沉淀和葡聚糖凝胶层析法进行抑菌物质的分离纯化,牛津杯对峙法检测脂肽类粗提物和凝胶层析分离组分的抑菌活性;进一步利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测菌株在拮抗根腐病原菌过程中脂肽类物质合成基因相对表达量的变化,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析抑菌物质的种类。结果表明,2个菌株的脂肽类粗提物和凝胶层析分离组分对根腐病原菌均具有良好的平板抑菌效果,RT-qPCR结果表明2个菌株合成伊枯草菌素(iturin)的基因ituD在对峙培养过程中相对表达量显著增加,芬荠素(fengycin)合成基因fenA也呈现上调表达。MALDI-TOF-MS分析表明2个菌株中具有抑菌作用的分离组分主要为伊枯草菌素类物质Iturin B和Bacillomycins D,结合实时荧光定量PCR结果,推测菌株md8和md9在拮抗根腐病原菌过程中发挥主要生防作用的物质为伊枯草菌素。

摘要： 为探究基因组上不同整合位点对外源碱性蛋白酶表达的影响,基于解淀粉芽胞杆菌TCCC 111018基因组信息,通过预测基因组上复制起始位点OriC确定了yaah基因整合位点;与此同时,通过分析6个胞外蛋白酶基因(epr、vpr、mpr、apr、bpr和nprE)单独缺失后对外源碱性蛋白酶酶活力的影响,并对发酵上清液中主要分泌蛋白的分析和质谱鉴定,确定了nprE和amyE基因位置为另外两个整合位点。在确定的3个整合位点处分别整合克劳氏芽胞杆菌来源的碱性蛋白酶基因aprE,并对整合菌株的碱性蛋白酶酶活力进行对比分析,结果表明整合菌株解淀粉芽胞杆菌18-ΔY∷aprE和18-ΔN∷aprE碱性蛋白酶酶活力分别达到784.36 U/mL和1289.09 U/mL,分别比原始菌株提高了15%和88.9%,实时荧光定量PCR和SDS-PAGE凝胶电泳表明18-ΔN∷aprE的碱性蛋白酶的转录水平和表达量均最高,这表明在nprE基因位点整合碱性蛋白酶基因可以有效提高碱性蛋白酶表达量,为进一步构建工业酶生产菌株奠定了基础。

摘要： 目前已经登记的芽胞杆菌微生物杀菌剂剂型以悬浮剂和可湿性粉剂为主,剂型相对比较单一,为进一步提高货架期和利用效率,以解淀粉芽胞杆菌Lx-11作为研究对象,筛选出纳米材料作为载体,添加各种不同功能性助剂,在高速均质机的作用下剪切、均质,研制出解淀粉芽胞杆菌Lx-11悬乳剂。解淀粉芽胞杆菌Lx-11悬乳剂配方:发酵液70%~80%,吸附载体白炭黑10%~15%,大豆油30%~50%,乳化剂Span80和Tween80复配6%~10%,分散剂脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠1%~3%,防冻剂乙二醇2%~4%,增效助剂SY-65351.5%~2.5%。该制剂的性能指标为:活菌体含量大于8×10^(8) cfu/mL,悬浮率大于85%,粘度225 mPa·s,热贮稳定性合格;各项技术指标均符合产品标准要求。田间药效试验表明:解淀粉芽胞杆菌Lx-11悬乳剂对水稻白叶枯病的防治效果显著高于其发酵液。

摘要： 为探究生防菌防病促生的土壤微生态作用机制,本试验以生防解淀粉芽胞杆菌TR2对草莓进行灌根处理,利用比色法和滴定法对不同时间段的土壤酶活性进行测定和比较,并调查了草莓生长相关数据和草莓根腐病的发生率。结果表明:解淀粉芽胞杆菌TR2处理后,草莓根际土壤脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶和磷酸酶的活性明显高于对照,且持续时间长,到第60 d仍有明显促进作用。TR2处理对草莓根际土壤脲酶活性和蔗糖酶活性的促进作用较好,分别从第7 d和第15 d开始表现明显促进作用,第30 d时最好,脲酶活性比对照高出215%,蔗糖酶活性比对照高出124%。TR2处理从第15 d和第30 d开始分别表现对磷酸酶活性和过氧化氢酶活性的明显促进作用;对过氧化氢酶活性的促进作用在第60 d时最好,比对照高出43%;对磷酸酶活性的促进作用在第15 d时最好,酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性比对照分别增加69%和45%。解淀粉芽胞杆菌TR2处理后草莓的根长、根重、叶面积和最大单果重等各项生长指标都优于对照组,对根长的促进作用在20%左右,根重在第60 d时比对照组高出92%,15 d时平均最大叶面积比对照大10 cm^(2),第30 d时平均每株比对照多长出1.2个新叶。解淀粉芽胞杆菌TR2处理有利于降低根腐病的发病率,防效在25.0%左右。

摘要： 为提高育苗基质中废弃物木质素降解速率,在废弃物堆腐生产育苗基质高温阶段取样,筛选耐高温木质素降解菌,并对菌种进行鉴定,同时测定其对秸秆木质素和菌糠木质素的降解效果。获得了1株较好的木质素高温降解菌HZ11,鉴定为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),结果显示,该菌株对秸秆木质素和菌糠木质素降解效果较好,50°C条件下,20 d木质素降解率分别为46.7%和42.4%。菌株HZ11在降解秸秆和菌糠方面具有很好的应用潜力,为利用农业废弃物生产育苗基质提供更加丰富的菌种资源,具有重要的参考价值。

摘要： 本研究通过平板对峙试验,自稻茬分离获得1株对禾谷镰刀菌具有良好抑菌活性的细菌hzq1601。经16S rDNA和gyrB基因序列比对结果表明,菌株hzq1601为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。菌株hzq1601与多菌灵相容性分析结果显示其可在1000 mg/L的多菌灵药液中正常存活。田间试验结果显示,10~8 cfu/mL的hzq1601菌液分别与50%多菌灵可湿性粉剂80 g/667m^(2)和70 g/667m^(2)联合施用的防治效果为87.1%和81.0%,与单独施用50%多菌灵可湿性粉剂100 g/667m^(2)处理的防治效果无显著性差异,但显著高于单独施用50%多菌灵可湿性粉剂80 g/667m^(2)和70 g/667m^(2)处理的防治效果,说明上述hzq1601菌液与50%多菌灵可湿性粉剂的2种组合对赤霉病的防治具有减药增效作用。对菌株hzq1601基因组的分析表明其基因组中存在13种次生代谢产物合成基因簇,显示其具有多方面的生防潜能。

摘要： 本研究旨在揭示解淀粉芽胞杆菌JK10防治蓝莓根癌病的生防机制。利用改良发酵培养基对解淀粉芽胞杆菌JK10菌株进行发酵,用盐酸沉淀、硫酸铵沉淀、乙酸乙酯萃取、大孔树脂吸附四种方法对JK10发酵液中的活性物质进行分离,利用MALDI-TOF-MS对活性最高的粗提物进行分析明确其种类;对JK10进行绿色荧光蛋白标记,明确其在蓝莓根际土及组织内的定殖能力;使用高通量测序技术对蓝莓健康根组织、根癌病根组织及JK10处理的根癌病根组织内生细菌群落结构进行分析。结果表明,四种方法得到的粗提物对根癌土壤杆菌均有良好的拮抗效果,其中大孔树脂吸附法得到的粗提物抑菌活性与产率均最高。JK10发酵液中能检测出bacillomycin D和fengycin两类脂肽类化合物、大环内酯类抗生素Divergolide D和聚酮类化合物Bacillaene;菌株JK10能够稳定定殖于蓝莓根际土、蓝莓根组织细胞间隙和蓝莓叶中,定殖数量在接种35 d后趋于稳定,在蓝莓根际土和蓝莓叶中分别为1×10^(6)、4.0×10^(5)cfu/g;蓝莓根癌病根组织在施入生防菌JK10菌株后,相比自然条件下蓝莓根癌病根组织内生细菌菌落结构发生改变,物种多样性增加,结构更加趋向于健康蓝莓根组织内生细菌。综上所述,解淀粉芽胞杆菌JK10通过产生对蓝莓根癌病菌有抑制活性的物质,稳定定殖在蓝莓根际土及蓝莓根、叶组织中,改变蓝莓根内生细菌的群落结构而达到防治蓝莓根癌病的目的。

摘要： 本实验为了探究表面活性素(Surfactin)对解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)抑制金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的影响,在 Bamyloliquefaciens HZ-12中敲除了 Surfactin 合成关键基因 srfAC.结果显示,缺失菌B.amyloliquefaciens HZ-12ΔsrfAC对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显提高,相对抑制率比对照菌提高了 64％.对工程菌B.amyloliquefaciens HZ-12ΔsrfAC的培养基碳氮源进行了优化,在玉米淀粉30 g/L和豆粕40 g/L的条件下,B.amyloliquefaciens HZ-12ΔsrfAC的生物量达到3.3×1010 CFU/mL,是优化前的2.23倍.本研究首次证实敲除srfAC基因可明显提高B.amyloliquefaciens对S.aureus的抑制作用,并获得了高效培养B.amyloliquefa ciens HZ-12ΔsrfAC 的培养基配方,具有重要的理论意义和潜在的应用价值.

摘要： 以对马铃薯黑痣病菌具有拮抗效果的解淀粉芽胞杆菌Z17-2为供试生防菌,采用单因素和正交试验相结合的方法对培养基及培养条件进行优化.结果 表明最优培养基成分为:麦芽糖20 g/L,豆饼粉10g/L,NaCl 1 g/L,CaCl2 1g/L,MgSO4·7H2O1 g/L;最优培养条件为:接种量2％,装液量50 mL/250 mL,初始pH 6.0,温度35°C,摇床转速220 r/min.在最优培养条件下,Z17-2培养30 h后达到稳定期,发酵液OD值达到1.591,较未优化前提高120％,抑菌活性提高43.8％.

摘要： 为筛选和优化解淀粉芽胞杆菌固态发酵当归培养基,以当归多糖含量为指标,采用单因素试验对当归固态发酵培养基成分筛选,采用响应面分析试验对培养基组分进行优化.结果显示,在所筛选成分中,最适宜菌株发酵的固态培养基成分为当归、黄豆粉、碳酸钙和水.优化的固态发酵培养基各组分含量分别为:当归320.914 g/L、黄豆粉109.918 g/L、碳酸钙1.532 g/L、水544.159 mL/L,37°C发酵培养72 h,固态发酵物中的多糖质量分数达24.91 mg/g.结果表明,优化的当归固态发酵培养基适宜解淀粉芽胞杆菌生长,易于多糖的释放,所筛选的发酵培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件要求.

摘要： 本文主要研究了解淀粉芽胞杆菌HN对模拟污水中亚硝态氮、氨氮的耐受力、转化能力及转化的最佳条件,以探讨其水体修复特性,并在养殖水体中对其水体修复特性进行了验证试验。结果表明：菌株HN对亚硝态氮和氨氮具有较强的耐受性,在1～100mg/L亚硝态氮浓度范围内都能正常生长,且所试浓度亚硝态氮对HN生长有一定的促进作用；在不高于80mg/L的氨氮的培养基上能正常生长且培养基中加入一定浓度的氨氮对HN的生长起到促进作用,但高浓度氨氮对HN的生长有一定的抑制作用;对初始浓度为10mg/L亚硝态氮转化效率最高,在25°C～35°C条件下,24h内能将初始浓度为10mg/L亚硝态氮去除98％以上,且在中性和偏碱性条件下的去除效果优于偏酸性环境,亚硝态氮的最大去除量为每升20mg左右,但对氨氮的去除效果较差；养殖水体验证试验结果表明,在试验第3d,菌株HN能将初始浓度为4.50mg/L的亚硝态氮彻底转化,第5d,对硝态氮的转化率为83.5％,对有机质的降解率为47.8％,在亚硝态氮和硝态氮转化的同时不累积氨氮。

摘要： 为了开发基于发酵法基础上的新型谷朊粉深加工产品,本研究选取解淀粉芽孢杆菌为发酵菌株,以发酵后底物中的有效谷氨酰胺含量为评价指标,通过单因素和正交试验确定了发酵谷朊粉的最佳发酵工艺为:种子液/谷朊粉/水=2∶5∶8,发酵时间16h,发酵温度为40°C.在此条件下,发酵谷朊粉获得的肽中有效谷氨酰胺含量为204.62mg.g-1.通过与市售酶解谷朊粉产品进行对比发现,发酵谷朊粉具有更高的有效谷氨酰胺、水溶性蛋白和小分子肽含量(P＜0.05).发酵谷朊粉具有更好的健康功效和应用潜力,这为谷朊粉的深加工利用开辟了新的思路.

摘要： 优势小基因组菌株是保留有菌株特殊功能基因簇的小基因组菌株。是基因组减少了冗余基因，改善了代谢效率，减少了代谢调节网络中的冗余。优势小基因组菌株可以提高目标产物的合成量和含量，尽可能的消除副产物，提高菌株的生长繁殖速率，降低原料消耗，缩短生产周期。本研究是在完成门多萨假单胞菌NK-01(Pseudomonasmendocina NK-01)和解淀粉芽胞杆菌LL3(Bacillus amylaliguefaciens LL3)的全基因组测序基础上，开展了门多萨假单胞菌NK-O1和解淀粉芽抱杆菌LL3的优势小基因组菌株的构建。

摘要： 本发明公开了一株用于香蕉鞘腐病防控的解淀粉芽胞杆菌ZKY01及其应用。解淀粉芽胞杆菌ZKY01，已于2019年11月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学；保藏号为CCTCC NO:M 2019948。该菌株能够对多种植物病原真菌和细菌具有较好的平板拮抗活性，包括引起香蕉鞘腐病的変栖克雷伯氏菌在内的土传维管束病害具有很好的拮抗能力，并在温室和田间表现出良好的防治效果；在珠海平沙开展喷叶防控粉杂1号鞘腐病、恢复台风受损的粉杂1号粉蕉和珍珠芭乐的大田试验，对粉杂1号鞘腐病的防治效果达到85.71％，能够在台风后1个月恢复严重受损的粉杂1号和珍珠芭乐的正常生长。

摘要： 本发明属于基因工程领域，具体公开了强化表达yvbW基因在提高解淀粉芽胞杆菌吲哚乙酸产量中的应用，本发明通过基因工程方法在解淀粉芽胞杆菌LX‑12中强化表达了

摘要： 本发明提供了一株高效抑制金黄色葡萄球菌的解淀粉芽胞杆菌工程菌，通过基因工程的方法敲除了解淀粉芽胞杆菌HZ‑12的基因组内表面活性素Surfactin合成相关基因

摘要： 本发明属于微生物应用领域，公开了一株解淀粉芽胞杆菌及其在半夏抗病促生长中的作用，所述的解淀粉芽胞杆菌的保藏编号为：CCTCC NO:M2021822。本发明首次提供了一株，对半夏块茎腐烂病病原菌茄病镰刀菌和褐斑病病原菌链格孢菌具有强烈抑制效果的解淀粉芽胞杆菌8‑2，同时，该菌具有较强的解磷和促进半夏快速生长发芽的功能，为半夏微生物肥料的研制提供了优质的种子菌株，在半夏的病害防治和种植上有较好的应用前景。

摘要： 本发明属于基因工程和微生物代谢工程技术领域，公开了一株高效降解咖啡因的解淀粉芽胞杆菌工程菌及应用，申请人将咖啡因降解的5个基因ndmA，ndmB，ndmC，ndmD和ndmE加上枯草芽胞杆菌168的启动子P43和淀粉酶终止子TamyL，通过同源重组整合解淀粉芽胞杆菌LX‑12的基因组噬菌体位点,筛选后，得到整合菌株解淀粉芽胞杆菌HZ‑12::ndmABCDE，成功实现咖啡因降解。该菌株在500mg/L咖啡因的基础培养基中，对咖啡因的降解率为52.6%，比原始菌株提高31.5%，为低咖啡因茶和咖啡的制作及其废弃物再利用奠定了基础。

摘要： 本发明属于基因及生物发酵领域，公开了鸟氨酸环己烷酶在提高解淀粉芽胞杆菌生产伊枯草菌素A产量中的应用。本发明以质粒pHY300PLK为基础，通过构建来源于谷氨酸棒杆菌中的鸟氨酸环己烷酶Ocd的过表达载体pHY‑ocd，成功在解淀粉芽胞杆菌LX‑12中强化表达了基因ocd，得到了解淀粉芽胞杆菌工程菌LX‑12/pHY‑ocd。与对照菌LX‑12/pHY300相比，工程菌株LX‑12/pHY‑ocd的IturinA产量至少提高了37%以上。

摘要： 一种从解淀粉芽胞杆菌中分离纯化杆菌霉素的方法，包括如下步骤：将BaX030 发酵上清液通过大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱处理，减压浓缩，得到粗提物；将粗提物进行RPC反相色谱柱于ÄKTA avant 25进行一次色谱分离，收集合并馏分，减压浓缩，得到杆菌霉素 Lb粗品；经RPC反相色谱柱进行二次纯化，减压浓缩，得到目标化合物杆菌霉素 Lb。本发明的优点在于采用大孔树脂吸附法进行分离纯化杆菌霉素 Lb，工艺简单易行，易回收重复利用，生产成本低，适合工业化生产，并且得到的脂肽化合物杆菌霉素 Lb具有广谱的抗肿瘤活性。

摘要： 本发明公开了一株解淀粉芽胞杆菌表达宿主，以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌，敲除基因

摘要： 本发明公开了一种提高血红素产量的解淀粉芽胞杆菌工程菌及其构建方法，该工程菌以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌株，在出发菌株强化表达了解淀粉芽胞杆菌自身的关键基因hemZ，通过上述基因操作得到血红素产量显著提高的解淀粉芽胞杆菌工程菌HPHZ，该菌株在液态发酵培养中血红素的产量达到0.55 mg/L，比野生型菌株HZ‑12提高了18倍。

摘要： 本发明公开了一株解淀粉芽胞杆菌HZ‑12及其应用，涉及微生物技术领域，针对目前苹果防霉物理方法由于价格昂贵不能普遍应用，化学方法中过度依赖传统杀菌剂导致化学物质残留、环境污染、病原菌对杀菌剂抗性增加等一系列问题，不利于人体健康与生态环境的问题，现提出如下方案，一株解淀粉芽胞杆菌HZ‑12，菌体短杆状，革兰氏染色阳性，芽胞近似圆形，偏端生。本发明首次获得可在与金黄色葡萄球菌共培养中抑制金黄色葡萄球菌的解淀粉芽胞杆菌，该菌株既高效拮抗有害真菌(禾谷镰刀菌、黑曲霉、绳状篮状菌、木霉、产黄青霉、聚多曲霉)又可高效降解呕吐毒素，该菌株在苹果中抗霉防腐方面具有较高的应用价值。