视网膜节细胞

摘要： 背景:视神经是广泛用于研究促进或抑制中枢神经系统中轴突再生因素的主要载体之一.目的:对视神经再生机制研究进展予以综述.方法:以"Optic nerve,Axon regeneration,Retinal ganglion cell"为英文检索词,以"视神经,轴突再生,视网膜节细胞"为中文检索词,检索发表在PubMed、CNKI、万方数据库的相关文献.结果与结论:在成年个体中视网膜神经节细胞并不具有再生能力,但是在过去几十年的研究中发现,在适当条件的刺激下,其轴突仍具有部分再生的潜能.通过外周神经片段移植、神经营养性因子治疗、增强眼内炎症反应、阻断轴突生长抑制因子和增强或阻断特定的信号通路等方式,或者将上述方法组合应用,视网膜节细胞轴突可再生通过损伤区域,并延伸视神经全长,通过视交叉准确投射到视觉中枢,建立突触后反应.视神经再生的研究不仅可能帮助患者恢复视觉,而且也有助于其他中枢神经系统损伤治疗的研究.

摘要： 背景:视神经是广泛用于研究促进或抑制中枢神经系统中轴突再生因素的主要载体之一。目的:对视神经再生机制研究进展予以综述。方法:以“Optic nerve,Axon regeneration,Retinal ganglion cell”为英文检索词,以“视神经,轴突再生,视网膜节细胞”为中文检索词,检索发表在PubMed、CNKI、万方数据库的相关文献。结果与结论:在成年个体中视网膜神经节细胞并不具有再生能力,但是在过去几十年的研究中发现,在适当条件的刺激下,其轴突仍具有部分再生的潜能。通过外周神经片段移植、神经营养性因子治疗、增强眼内炎症反应、阻断轴突生长抑制因子和增强或阻断特定的信号通路等方式,或者将上述方法组合应用,视网膜节细胞轴突可再生通过损伤区域,并延伸视神经全长,通过视交叉准确投射到视觉中枢,建立突触后反应。视神经再生的研究不仅可能帮助患者恢复视觉,而且也有助于其他中枢神经系统损伤治疗的研究。

摘要： 目的检测视觉发育敏感期视网膜节细胞中瞬时受体蛋白香草酸亚型3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)蛋白的表达变化,探讨其在弱视发病机制中的可能作用。方法2周龄SD大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组缝合大鼠单侧眼睑(左侧)4周,建立剥夺性弱视模型。苏木精-伊红染色(HE染色)观察视网膜各层,尤其是节细胞层的形态学改变。免疫组织化学技术、免疫荧光、蛋白质免疫印迹(western-blot,WB)检测TRPV3蛋白的表达情况。结果实验组缝合侧眼视网膜HE染色与对侧比较:细胞层次结构更紊乱,细胞形态不规则,节细胞层细胞数目变少,细胞核染色更深,这提示单眼形觉剥夺性弱视大鼠视网膜存在细胞损伤或细胞数目的减少。实验组剥夺眼视网膜节细胞与对侧眼视网膜节细胞和正常对照组视网膜节细胞比较,TRPV3蛋白的表达明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。WB结果与免疫组织化学结果一致。结论视觉发育敏感期内,单眼形觉剥夺后,视网膜节细胞TRPV3蛋白表达降低,可能导致视网膜神经节细胞内Ca2+的运输障碍,从而可能影响了节细胞的生长发育和功能发挥,可能是弱视发生发展的机制之一。

摘要： 目的 检测视觉发育敏感期视网膜节细胞中瞬时受体蛋白香草酸亚型3(transient receptor potential va-nilloid 3,TRPV3)蛋白的表达变化,探讨其在弱视发病机制中的可能作用.方法 2周龄SD大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组缝合大鼠单侧眼睑(左侧)4周,建立剥夺性弱视模型.苏木精-伊红染色(HE染色)观察视网膜各层,尤其是节细胞层的形态学改变.免疫组织化学技术、免疫荧光、蛋白质免疫印迹(western-blot,WB)检测TRPV3蛋白的表达情况.结果 实验组缝合侧眼视网膜HE染色与对侧比较:细胞层次结构更紊乱,细胞形态不规则,节细胞层细胞数目变少,细胞核染色更深,这提示单眼形觉剥夺性弱视大鼠视网膜存在细胞损伤或细胞数目的减少.实验组剥夺眼视网膜节细胞与对侧眼视网膜节细胞和正常对照组视网膜节细胞比较,TRPV3蛋白的表达明显减少,差异有统计学意义(P0.05).WB结果与免疫组织化学结果一致.结论 视觉发育敏感期内,单眼形觉剥夺后,视网膜节细胞TRPV3蛋白表达降低,可能导致视网膜神经节细胞内Ca2+的运输障碍,从而可能影响了节细胞的生长发育和功能发挥,可能是弱视发生发展的机制之一.

摘要： 目的 探讨大鼠外伤性视神经损伤(TON)后玻璃体腔内注射骨髓间充质细胞(BMSCs)对视网膜神经节细胞(RGCs)保护及其轴突再生的作用.方法 选取72只健康SD大鼠为研究对象,随机分为TON+BMSCs移植组(BMSCs组)、TON+磷酸缓冲盐溶液(PBS)移植对照组(PBS组)与假手术组(Sham组),每组各24只.损伤后即刻行移植干预,各组分别于伤后第1、2、3、4周统计RGCs数量,伤后第4周观察损伤处轴突再生情况.结果 在各个时间点,BMSCs组与PBS组RGCs存活数量均低于Sham组,而BMSCs组RGCs存活数量均高于PBS组(均P＜0.05).在距离视神经夹伤起始部位200、500、1000、1500μm位置,BMSCs组新生轴突数量高于PBS组(均P＜0.05);造模后4周,BMSCs组显示有大量新生轴突穿过损伤部位,而PBS组只有少量新生轴突.结论 应用BMSCs玻璃体腔内注射能促进TON后RGCs存活数量及轴突再生,对视神经损伤具有一定的修复作用.

摘要： 目的探讨脂肪干细胞(ADSC)移植对创伤性视神经损伤(TONI)后的视网膜节细胞(RGC)及其轴突的作用。方法选取72只健康SD大鼠为研究对象,随机分为TONI+ADSC移植组(ADSC组)、TONI+磷酸缓冲盐溶液(PBS)移植对照组(PBS组)与假手术组(Sham组),每组各24只。损伤后即刻行移植干预,各组于分别伤后第3、7、14、28天观察RGC数量,伤后第28天观察RGC轴突再生情况。结果与PBS组比较,ADSC组在第7、14、28天均明显促进RGC的存活,差异均有统计学意义(P<0.05)。与PBS组比较,ADSC组在伤后第28天轴突明显再生,在距离损伤0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 mm处,ADSC组中存在的轴突均多于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ADSC移植能促进TONI后RGC的存活和轴突的再生。

摘要： 目的:探讨黄芪甲苷(AST)在成年大鼠视神经切断后对视网膜节细胞(RGCs)存活的影响.方法:动物分为正常组、单纯切断视神经组、AST处理组和生理盐水对照组.用荧光金(FG)逆行示踪标记法及定量解剖学技术观察正常和经AST处理的SD大鼠于视神经切断后5、7、14d的RGCs的密度.结果:正常组RGCs平均密度为(2 230±156)/mm2.单纯视神经切断组RGCs平均密度与生理盐水对照组相比较,无显著性差异;AST处理组与单纯切断视神经组和生理盐水对照组相比较,在各个时间点上均存在显著性差异.结论:黄芪甲苷可提高成年大鼠视神经切断后视网膜节细胞短期存活.

摘要： 目的:探讨视网膜色素变性模型rd1小鼠视网膜退变中期各类视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)功能的变化情况.方法:运用多电极阵列(multi-e1ectrode arrays,MEA)记录方法,记录视网膜退变中期(出生后20 d,P20)的rd1小鼠或正常对照小鼠视网膜中多个节细胞动作电位的发放,并比较自发发放和光反应特征等指标,评价幸存的节细胞功能变化.另外,采用免疫组化染色方法验证视网膜感光细胞的退化情况.结果:免疫组化的结果表明rd1小鼠视网膜感光层的厚度显著低于正常小鼠.根据节细胞光反应特性的不同,可以将其分成6类:ON sustained、ON transient、ON-OFF sustained、ON-OFF transient、OFF sustained和OFF transient RGCs,但OFF sustained RGCs所占比重极小(1.0％～3.1％).rd1小鼠视网膜中保持光反应的节细胞比例显著低于正常小鼠.rd1小鼠节细胞的自发发放显著高于正常小鼠,而不同类型的节细胞变化情况有所不同.rd1小鼠视网膜各类节细胞的光反应强度及光敏感度均显著低于正常小鼠.结论:在rd1小鼠退变的中期,视网膜感光层明显退变;rd1小鼠退变中期的视网膜节细胞发生明显的功能退变,而且不同类型的节细胞变化情况有所不同.

摘要： 目的 研究巨噬细胞刺激因子(macrophage stimulating factor,MSF)及巨噬细胞抑制因子(macrophage inhibitory factor,MIF)对视网膜节细胞(retinal ganglion cell,RGC)轴突再生的影响.方法 实验性研究.费希尔大鼠9只,施行视神经损伤术7d后取出眼球并剥离视网膜,把剥离下来的视网膜平铺,放射状剪成8片,每一片视网膜粘铺于已包被好的培养板孔中,分为对照组、MSF组、MIF组,分别加入培养基及MSF/MIF等处理因素试剂;培养7d后对视网膜培养块进行固定及免疫荧光染色,分别计数RGC再生神经轴突的数量及长度和外迁巨噬细胞的数量.结果 与对照组相比,MSF及MIF可以一定程度上分别增多及减少迁移巨噬细胞的数量(P＞0.05),与此同时,MIF可以减少RGC再生神经轴突的数量及长度(P＜0.05),MSF虽未能增加神经突的长度,但还是有效地增加了再生神经突的数量(P＜0.05).结论MSF可以促进RGC神经轴突的再生,与此相反MIF可以抑制神经轴突的再生.

摘要： Objective To observe the effect of hypoxic preconditioning on the retinal ganglial cells (RGCs) survival in long time acute ocular hypertension rat model.Methods 25 healthy adult female Fischer344 rats were used for this study.The acute ocular hypertension group:right eye of rat was induced acute ocular hypertension (height of 1496 mm,2 h,n=10);the combined group:hypoxic preconditioning (11％ O2,2 h) combined acute ocular hypertension (n=10);normal control group (n=5).RGCs of both groups were counted after 7 days and 18 days.Data were statistically analyzed by using one-way analysis of variance and Bonferroni test.Results The mean RGCs density of the acute ocular hypertension group and combined group after 7 days was (1815.0±84.9)mm2,(1697.4±291.0) mm2 respectively,and after 18 days was (1468.9±92.0) mm2 and (1373.4±87.0) mm2 respectively.There was no statistically significant difference between the two groups (P =0.775,P =0.318).The mean RGCs density of normal control group was (2259.0±163.8) mm2.Either experimental group had statistically significant difference with normal control group (P ＜0.05).Conclusion Hypoxic preconditioning has no significant effect on RGCs survival in acute ocular hypertension rat model with extend increased time of ischemia.%目的 观察低氧预处理对长时间大鼠急性高眼压模型视网膜节细胞存活的作用.方法 实验研究.对2011年2月至2012年12月在汕头大学·香港中文大学联合汕头国际眼科中心应用健康成年Fisch-er344雌性大鼠,8～12周龄,前房灌注生理盐水诱导急性高眼压模型(灌注高度1 496 mm,2 h)作为急性高眼压组(n=5),低氧预处理(氧浓度11％,2 h)联合急性高眼压为联合组(n=10),及正常对照组(n=10),前房灌注后7天及18天后进行视网膜节细胞计数;多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Bonferroni检验.结果 急性高眼压组及联合组前房灌注后7天的平均视网膜节细胞密度分别为(1 815.0±84.9) mm2,(1 697.4±291.0) mm2,18天分别为(1 468.9±92.0) mm2,(1 373.4±87.0) mm2.正常对照组平均视网膜节细胞密度为(2 259.0±163.8) mm2,急性高眼压组和联合组7天及18天组间视网膜节细胞皆差异无统计学意义(P =0.775,P=0.318),两组各时间点的平均视网膜节细胞密度与正常对照组间差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 低氧预处理对延长缺血时间的大鼠急性高眼压的视网膜节细胞无显著保护作用.

摘要： 本试验利用免疫组化法研究松果体摘除后组胺在视网膜节细胞层的分布情况.结果显示,松果体摘除后,视网膜节细胞层组胺阳性细胞(组胺-RGCs)分布位置从视网膜周边区向中央区转移、细胞密度和胞体大小逐渐增加,且以中等大小细胞为主.结果表明,组胺-RGCs在视网膜节细胞层的分布受松果体调控,提示组胺-RGCs的表达与昼夜节律有关.

摘要： 利用活体鸡脑内注射示踪物逆行标记视网膜节细胞(RGCs)胞体、与细胞内注射将标记细胞全树突野可视化相结合，根据其胞体和树突野的大小和树突分支特征，研究鸡投射至下丘脑的RGCs细胞类型。结果显示，鸡投射至下丘脑的RGCs(hy-RGCs)分为3群，且各群细胞树突分支简单，均为简单型，即小细胞体和小树突野的Is亚群细胞、中等细胞体和树突野的IIs亚群细胞、中等细胞体和大树突野的IIIs亚群细胞，各亚群的比例分别为Is 20.0％、IIs 52.0％、IIIs 28.0％;hy-RGCs树突在内网状层的分层方式以3、8亚层出现的频率最高，为14.0％;ON型和ON／OFF型hy-RGCs分别占细胞总数的36％和64％。结果表明，鸡投射至下丘脑的RGCs树突分支简单，以ON／OFF型细胞为主。

摘要： 目的:研究单色光对鸡视网膜节细胞(RGCs)形态类型的影响.方法:应用逆行示踪法标记视网膜节细胞,根据其胞体和树突野大小及树突分支特点进行形态学分析.结果:不同光色下鸡RGCs分为4群、8亚型.Ⅰ群RGCs胞体而积差异显著(P＜0.05),白光Ⅰ群RGCs胞体面积比绿光大14.91％,绿光与白光胞体而积差异极显著(P＜0.01);不同光色下Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ群RGCs胞体面积差异不显著(P＞0.05).不同类型的RGCs树突野面积,蓝绿光树突野面积始终大于红白光,且Ⅰ群RGCs树突野面积蓝光与红光存在显著差异(P＜0.05).不同光色下不同类型RGCs中,Ⅰ c和Ⅱc亚型以绿光所占比例最多,分别为40.00％和19.26％;Ⅲs亚型以蓝光所占比例最多,为4.96％.结论:Ⅰ c、Ⅱc亚型RGCs对绿光较为敏感.Ⅲs亚型RGCs对蓝光较为敏感.

摘要： 用于移植研究的周围神经,一般为取自动物后肢坐骨神经分支的胫神经或腓神经,也有采用整条坐骨神经者.在啮齿动物,取下供移植的腓神经长度可达3cm.通常将周围神经移植于视网膜内或被切断的视神经眶侧断端上,为节细胞轴突再生提供适宜的环境.周围神经是中枢神经再生的极好桥梁,因为:(1)溃变的髓鞘和存在于周围神经髓鞘内的抑制因子(如髓鞘相关糖蛋白)被同时清除;(2)周围神经内不存在中枢神经髓鞘内的抑制因子;(3)神经损伤后施万细胞大量分裂,在基底层Bungner带内形成条索状细胞管道.施万细胞和成纤维细胞还可分泌不同类型的神经营养因子,其中有些可能具有促进节细胞存活和轴突再生的重要作用;(4)施万细胞管的基底膜含有多种细胞黏连分子,如L1、J1、intergins及laminin,这些物质均有促进轴突生长的作用.将小段周围神经(常采用长约2mm的腓神经远侧段)值入玻璃体,也可提高节细胞的再生潜力.

摘要： 许多已明确功能的神经营养因子都已被证实对视网膜神经节细胞具有营养支持作用.这些因子可能与视网膜神经节细胞存活和轴突再生的临床应用有关.本综述简要叙述这些重要的视网膜营养因子.

摘要： 本发明公开了一种诱导人iPSc源性的3D视网膜定向分化为视网膜神经节细胞的方法。它是将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接入诱导分化培养基中进行培养，种子细胞分化成视网膜神经节细胞，所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基。本发明从干细胞诱导分化的角度提供了获得一种功能性RGCs新的研究途径，为人iPSc‑RGCs的定向分化提供了一种新的研究思路，为探讨人iPSc‑RGCs的调控机制提供了新的研究线索，为神经组织工程的研究提供了一种新的种子细胞，并为干细胞移植治疗视觉损伤奠定了理论和实验基础。

摘要： 提供了通过使干细胞分化为视网膜神经节细胞来制备视网膜神经节细胞的方法，通过该方法分化的视网膜神经节细胞，使用通过该方法分化的视网膜神经节细胞来筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的方法，包含通过该方法分化的视网膜神经节细胞的用于筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的试剂盒，包含视网膜神经节细胞的用于治疗青光眼或视神经病变的药物组合物，包括向疑似患有青光眼或视神经病变的个体施用视网膜神经节细胞的步骤来治疗青光眼或视神经病变的方法，以及制备成熟视网膜神经节细胞系的方法。

摘要： 本发明涉及一种用于在体外获得人类视网膜祖细胞的方法，该方法包括以下步骤：(i)将人类多能干细胞的贴壁培养物放置于促神经培养基中；以及，(ii)使所述培养物保持在所述促神经培养基中，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可进行额外的步骤，以获得RPE细胞和/或神经视网膜前体。

摘要： 本发明公开了一种诱导人iPSc源性的3D视网膜定向分化为视网膜神经节细胞的方法。它是将人iPSc源性的3D视网膜的神经纤维层消化为单细胞，以该单细胞作为种子细胞接入诱导分化培养基中进行培养，种子细胞分化成视网膜神经节细胞，所述的诱导分化培养基为含有神经营养因子和维持浓度的视网膜分化营养液组成的培养基。本发明从干细胞诱导分化的角度提供了获得一种功能性RGCs新的研究途径，为人iPSc-RGCs的定向分化提供了一种新的研究思路，为探讨人iPSc-RGCs的调控机制提供了新的研究线索，为神经组织工程的研究提供了一种新的种子细胞，并为干细胞移植治疗视觉损伤奠定了理论和实验基础。

摘要： 本发明涉及干细胞领域，提供一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法，用于解决视网膜神经的修复问题。本发明提供的一种干细胞体外诱导培育视网膜神经节细胞的方法，包括：S11.取自体干细胞制成单细胞悬液；S12.将单细胞悬液计数后用分化培养基将其稀释成10‑5~10‑3cells/mL的干细胞悬液，接种到培养皿中，获取拟胚体；S13.将拟胚体增殖后转移到诱导分化培养基中，在37°C、5%CO2、饱和湿度下进行干预分化培养。自体干细胞分化形成的视网膜神经节细胞可用于视觉神经损伤后恢复视网膜神经节细胞的数目和功能，不仅有助于减缓视神经损伤病人病情的恶化，促进患者视觉功能的恢复，也必将促进损伤视神经结构和功能的重建。

摘要： 本发明提供了可任选地在无饲养层的条件下、以及进一步任选地在无异物的条件下，由多能干细胞生产视网膜神经节(RG)祖细胞和成熟RG细胞的方法。此外，本发明提供了RG祖细胞和成熟RG细胞的组合物、以及它们的使用方法，包括它们的治疗用途。示例性的方法可以生产RG祖细胞和成熟RG细胞的基本纯的群体和培养物。

摘要： 提供了通过使干细胞分化为视网膜神经节细胞来制备视网膜神经节细胞的方法，通过该方法分化的视网膜神经节细胞，使用通过该方法分化的视网膜神经节细胞来筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的方法，包含通过该方法分化的视网膜神经节细胞的用于筛选视网膜神经节细胞的死亡抑制剂或增殖促进剂的试剂盒，包含视网膜神经节细胞的用于治疗青光眼或视神经病变的药物组合物，包括向疑似患有青光眼或视神经病变的个体施用视网膜神经节细胞的步骤来治疗青光眼或视神经病变的方法，以及制备成熟视网膜神经节细胞系的方法。

摘要： 本发明总体上涉及通过使用胶质细胞系衍生神经营养因子(GDNF)来治疗视网膜神经节细胞损伤或变性的方法。本发明具体涉及治疗与青光眼相关的视神经损伤或变性的方法。

摘要： 本发明涉及一种用于获得人视网膜祖细胞的体外方法，包括以下步骤：(i)将人多能干细胞的贴壁培养物置于干细胞特异性促神经培养基中，所述培养物不含饲养细胞；和(ii)在所述干细胞特异性促神经培养基中维持所述培养物，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可以进行另外的步骤以获得RPE细胞和/或神经视网膜的前体。

摘要： 本发明涉及一种用于在体外获得人类视网膜祖细胞的方法，该方法包括以下步骤：(i)将人类多能干细胞的贴壁培养物放置于促神经培养基中；以及，(ii)使所述培养物保持在所述促神经培养基中，直至出现色素细胞和/或神经上皮样结构。有利地，可进行额外的步骤，以获得RPE细胞和/或神经视网膜前体。