表面增强激光解析电离飞行时间质谱

摘要： 目的 利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱( SELDI-TOF-MS)技术快速鉴定鲍曼不动杆菌.方法 收集临床分离鉴定的鲍曼不动杆菌60株及对照菌160株,将其所有菌株分成训练组和验证组.运用SELDI-TOF-MS技术检测鲍曼不动杆菌和对照菌的蛋白表达,筛选鲍曼不动杆菌特征性蛋白.用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据,结果经Bio-Marker Wizard和BioMarker Pattern分析建立分类树模型.利用该模型对20株鲍曼不动杆菌和51株非鲍曼不动杆菌进行盲法验证.结果 在相对分子量3000~30000 Da范围内共检测到72个蛋白峰,其中具有统计学差异的蛋白峰有56个( P ＜0.01). BioMarker Pattern软件判别分析,择优选出质荷比( M/Z)为1 6737.8和5763.61的蛋白质峰建立鲍曼不动杆菌分类树模型.盲法验证结果表明SELDI-TOF-MS对鲍曼不动杆菌诊断的灵敏性和特异性分别为85%(17/20)、100%(51/51).结论 利用SELDI-TOF-MS可快速鉴定鲍曼不动杆菌.

摘要： 目的:建立一种快速方便提取大肠杆菌膜蛋白的方法.方法:收集临床分离的大肠杆菌,利用TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白,Bradford法测定蛋白浓度,运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)进行质谱分析,采用CiphergenProteinchip软件采集数据.重复测定20次大肠杆菌的混合标本,评价TritonX-114去污剂法提取大肠杆菌膜蛋白的重复性.结果:TritonX-114去污剂法成功提取出了大肠杆菌膜蛋白.重复测定20次大肠杆菌的混合标本,蛋白峰的分子量变异系数均小于0.05%.结论:T r i t o n X-114去污剂法可以快速方便的提取大肠杆菌膜蛋白,并具有很好的重复性,这不仅对大肠杆菌耐药机制和治疗方法的研究起着重要作用,也为膜蛋白的快速提取提供了新的思路.

摘要： 目的 应用SELDI研究干燥综合征疾病的特异性差异蛋白.方法 选用CM10芯片,应用表面增强激光解析离子飞行时间质谱技术,比较SS疾病组与正常组血清的蛋白及SS疾病组中关节肿痛组与无关节肿痛组血清的蛋白质表达差异.结果 (1) SS组与正常组的血清中有68个差异质谱峰(P＜0.05),并鉴定出11个蛋白在SS组中10个上调表达,1个下调表达;(2)未发现与关节肿痛相关的特异性差异蛋白;(3)将11个差异蛋白分别与临床资料进行分析对比,未发现明显相关性.结论 (1) SS患者与正常人血清中蛋白质的表达有差异;(2)伴关节肿痛症状SS患者无特异性差异蛋白;(3)检测出的α-1抗糜蛋白酶、纤维蛋白原α链、β淀粉样蛋白前体、转甲状腺素蛋白、β2-微球蛋白都可能参与SS的发病,上述物质均可引起淀粉样变,损伤机制可能与淀粉样变相关.

摘要： 目的应用SELDI研究干燥综合征疾病的特异性差异蛋白.方法选用CM10芯片,应用表面增强激光解析离子飞行时间质谱技术,比较SS疾病组与正常组血清的蛋白及SS疾病组中关节肿痛组与无关节肿痛组血清的蛋白质表达差异.结果 （1）SS组与正常组的血清中有68个差异质谱峰（P〈0.05）,并鉴定出11个蛋白在SS组中10个上调表达,1个下调表达;（2）未发现与关节肿痛相关的特异性差异蛋白;（3）将11个差异蛋白分别与临床资料进行分析对比,未发现明显相关性.结论 （1）SS患者与正常人血清中蛋白质的表达有差异;（2）伴关节肿痛症状SS患者无特异性差异蛋白;（3）检测出的α-1抗糜蛋白酶、纤维蛋白原α链、β淀粉样蛋白前体、转甲状腺素蛋白、β2-微球蛋白都可能参与SS的发病,上述物质均可引起淀粉样变,损伤机制可能与淀粉样变相关.

摘要： 目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选出肺癌组织和癌旁组织中的差异蛋白,并探讨其临床意义.方法 选用CM10芯片、SELDI-TOF-MS技术检测8例肺癌和癌旁组织蛋白质质谱,采用生物信息学方法找到差异蛋白.结果 结果在分子量1~50 kD范围内共检测到4个峰组织中蛋白质的成分差异有统计学意义(P<0.05).其中2个峰(1 187.8 Da、1 420 Da)在癌组织中呈高表达,2个峰(9 999.5 Da、11 908 Da)呈低表达.结论 肺癌组织和癌旁组织存在蛋白水平差异,使用SELDI-TOF-MS技术有可能筛选出肿瘤标志蛋白模式.

摘要： 目的 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测壶腹癌患者血清蛋白指纹图,并建立诊断模型.方法 用Ciphergen公司生产的PBSII/c型蛋白质指纹图谱仪和ProtienChip CM10蛋白芯片采集27例壶腹癌、30例对照组(良性胆道梗阻患者)血清蛋白质谱图,采用Biomaker Wizard 3.1版分析软件筛选差异蛋白.结果 发现壶腹癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有32个差异表达的蛋白质(P＜0.05),其中M/Z 6 583.93敏感性为74.1％,特异性为63.3％,受试者工作特征曲线下面积(AUC) =0.706;M/Z 8 612.67敏感性为77.8％,特异性为80.0％,AUC=0.787.以此建立的壶腹癌的诊断模型敏感性为88.9％,特异性为83.3％,AUC=0.86.通过蛋白质数据库检索M/Z 6 583和M/Z 8612分别得到2和4个候选蛋白.结论 利用SEL-DI-TOF-MS技术能发现壶腹癌患者血清中的特征蛋白,对壶腹癌的早期诊断具有重要意义.

摘要： Objective The identification of differentially expressed proteins in the serum of patients with active systemic lupus erythematosus ( SLE) , quiescent SLE, and normal control. To define the total serum levels of these proteins so as to uncover novel biomarkers. Methods The protein mass spectra of sera of 40 patients with active SLE, 40 patients with quiescent SLE and 40 normal controls were examined using SELDI-TOF-MS and weak cation ex-change protein chip ( CM10chip) . The data on the chip were read using the Protein Chip Biomarker System II-C pro-tein chip reader. Hierarchical clustering and principal component analysis of data from the different groups were per-formed. Proteins thus selected were identified using a bioinformatics database. Results 53 protein peaks on mass spectrometry of sera were significant differences between active SLE and quiescent SLE ( p<0.05) . 21 of the proteins were up-regulated while another 32 were down-regulated in the active SLE group. 22 proteins peaks on mass spec-trometry of sera were significant differences between quiescent SLE and normal controls ( p<0.05) . 15 of the proteins were up-regulated while another 7 of them were down-regulated in the quiescent SLE. 44 proteins peaks on mass spectrometry of sera were significant differences between active SLE group and normal control ( P<0.05) , 17 of them were up-regulated while 27 of them were down-regulated in the active SLE group. The data of bioinformatics database revealed the the expression of hepcidin, neurosecretory protein growth factor and amyloid beta a4 proteinwas was increased in the active SLE group compared to that of the quiescent SLE group and normal control group;the ex-pression of neutrophil defensin 1, neutrophil defensin 3, plasma protease c1 inhibitor fragment and complement C3 fragment and alpha-1-antichymotrypsin was decreased in the active SLE group compared to that of the quiescent SLE group and normal control group;the expression of inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain h4 fragment was also de-creased in the quiescent SLE group compared to that of the normal control group. Conclusion There have difference in proteins expression between SLE group and normal control group sera. Hepcidin maybe associated with SLE renal flare, and hope to be biomarker of SLE flare. Neutrophil defensin 1 and neutrophil defensin 3 have function of chemo-taxis, regulatory effect on phagocytosis, cytotoxicity, and complement activation. Complement C3 maybe has signifi-cant clinical value in diagnosis of SLE.%目的：筛选出系统性红斑狼疮活动组、稳定组与正常对照组血清中的差异蛋白，从整体水平寻找SLE患者血清的异常蛋白，寻找SLE的分子标记物。方法选用弱阳离子交换蛋白芯片( CM10芯片)，用Protein Chip Biomarker System II－C型蛋白质芯片阅读仪读取芯片信息，应用表面增强激光解析离子飞行时间质谱( SELDI－TOF—MS)技术，分别检测SLE活动组40例、稳定组40例及正常人群40例血清的蛋白质质谱图，对不同分组数据进行差异表达统计分析、层次聚类分析和主成分分析，筛选出差异蛋白，并用生物信息学鉴定。结果① SLE活动组与稳定组的血清中有53个有统计学差异的蛋白峰( P<0.05)，活动组血清中的差异蛋白有21个上调表达，32个下调表达；② SLE稳定组与正常对照组的血清中共存在22个有统计学差异的蛋白峰( P<0.05)，稳定组血清中的差异蛋白有15个上调表达，7个下调表达；③ SEL活动组与正常对照组的血清中共存在44个有统计学差异的蛋白峰( P<0.05)，活动组血清中的差异蛋白有17个上调表达，27个下调表达；④应用生物学信息鉴定出铁调素、神经分泌蛋白生长因子片段、β淀粉样肽前体，活动组较正常组/稳定组表达升高；中性粒细胞防御素3和中性粒细胞防御素1、血浆蛋白酶c1抑制剂片段、补体C3片段、α－1抗胰糜蛋白酶，活动组较正常组/稳定组表达都下降；交联－α－胰蛋白酶抑制物H4重链片段，稳定组较正常组表达升高。结论① SLE患者血清中蛋白质表达和正常人血清有差异；②铁调素与狼疮肾炎活动有关，有望成为SLE活动的生物学标签；③中性粒细胞防御素3和中性粒细胞防御素1具有趋化作用、调理吞噬作用、细胞毒性、参与补体激活；④血清C3的下降可以成为诊断SLE的辅助性指标。

摘要： 目的利用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI—TOF—MS）筛选慢性阻塞性肺疾病（COPD）血清特异标志物。方法应用SELDI—TOF—MS技术检测30例COPD稳定期患者和30例健康对照者血清蛋白指纹图谱，采用Biomarker pattern软件进行分析，建立COPD的诊断模型。结果COPD患者血清蛋白图谱与对照组相比，在相对分子质量2000-15000范围内共检测到75个蛋白峰，发现19个有统计学差异的蛋白峰（P〈0．05）。通过对COPD组与对照组间的数据作进一步分析，经BPS软件分析，建立质荷比（M／Z）3167、4645的差异蛋白组成的诊断模型，其诊断敏感度为96．67％，特异度为96．67％。结论SELDI-TOF-MS技术是一种快速、简单易行、用量少和高通量的分析方法。能直接筛选出COPD血清中特异表达标志物，用特异表达标志物建立的诊断模型能有效区分COPD患者与健康对照者，有望成为COPD诊断的辅助指标。

摘要： 目的 对比分析结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白、分泌蛋白指纹图谱,评价表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术在结核病快速诊断中的价值.方法 结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌标准菌株经BACTEC960仪培养30 d,灭活菌株,离心沉淀物提取菌体蛋白,上清液提取分泌蛋白.利用SELDI-TOF-MS进行蛋白质/多肽谱分析.结果 结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白指纹图谱存在差异,有33个差异蛋白峰;结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌分泌蛋白指纹图谱存在差异,有51个差异蛋白峰;结核分枝杆菌有其特征性蛋白峰.结论 结核分枝杆菌与胞内分枝杆菌菌体蛋白、分泌蛋白指纹图谱有明显的差异蛋白峰,应用SELDI-TOF-MS技术可以早期、快速、简便地诊断结核病.

摘要： 目的：探讨利用表面增强激光解析电离-飞行时间质谱（SELDI-TOF MS）比较不同中医证型胃癌患者的血清蛋白指纹图谱并筛选其差异蛋白。方法选取本院收治的36例胃癌患者，依据中医证型的不同分为虚证组19例与实证组17例。针对两组样本均应用SELDI TOF-MS检测其血清的蛋白指纹图谱，并通过相关数据处理软件进行分析。结果实证组与虚证组患者中4620 m/z的蛋白质峰具有显著差异，其原始判别中特异度为94.1%（16/17），灵敏度为94.7%（18/19），准确率为94.4%（34/36）。结论应用SELDI-TOF MS检测胃癌患者的蛋白指纹图谱对其中医辨证分型具有可靠的筛选作用，能够对中医治疗起到一定的指导作用。%ObjectiveTo screen different protein of different patterns of TCM syndrome in gastric cancer by SELDI-TOF MS.MethodsTo taly 36 gastric cancer patients were enroled in this study. Their patterns of TCM syndrome were diagnosed, 19 deficiency patterns of TCM syndrome and 17 excess patterns of TCM syndrome respectively. We detect the serum protein fingerprint of two groups samples using SELDI-TOF MS.ResultsBy comparing protein fingerprint of two groups, it found significant differeration, the specificity 94.1%, the sensitivity 94.7%, the accuracy 94.4%, respectively. Conclusion There was reliable screening effect to distinguish different patterns of TCM syndrome in gastric cancer, by detecting the serum protein fingerprint of two groups samples using SELDI-TOF MS. It can play a guiding role to TCM treatment.

摘要： 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的离子推斥方法，涉及飞行时间质谱仪。提供可使基质离子在到达检测器之前被电场偏转出去，以实现检测器仅接收样品离子，延长检测器的使用寿命，同时增加仪器信噪比的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的离子推斥方法。在飞行时间质量分析器无场区设置偏转电极组；检测并同步激光脉冲信号，将所述激光脉冲信号展宽；将所述激光脉冲信号展宽进行放大，转换为同步高压脉冲，并施加于偏转电极组上；基质小分子在到达检测器前，受脉冲电场作用发生偏转无法到达检测器，而样品大分子在脉冲作用时间后经过偏转电极，不受电场影响正常检测。

摘要： 本发明公开一种用于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱的加载装置，包括形成有容纳腔室的壳体；位于容纳腔室内的载靶台；以及进样装置；载靶台包括本体部，以及挡板；进样装置包括有供载靶台本体部进出的进样通道，壳体侧壁上包括有窗口；沿窗口周向，窗口内壁面向内凹陷形成有第一环槽，第一环槽与进样通道通道口边缘所对应的进样装置侧壁外表面之间形成沟槽，该沟槽内设置有密封件；当载靶台本体部进入进样通道后，挡板的靠近进样装置的角部抵压在密封件内端部的一侧表面上。该加载装置在生物靶板加载和取出的过程中，能够保证装置容纳腔室的真空隔离，并可通过装置自身结构的调节实现容纳腔室与进样通道之间存在较大压力差时的有效密封。

摘要： 本发明公开了一种用于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的激光系统，包括激光器、光纤耦合器、紫外多模光纤和光斑匀化装置；光斑匀化装置包括光纤折弯机构和光纤振动机构；光纤折弯机构包括托板，托板的板面上间隔固定有多个凸台，紫外多模光纤依次绕过每个凸台；光纤振动机构包括振动底板，设置在振动底板上的振动电机，振动底板的上板面间隔设置有光纤卡扣，振动底板的下板面均布设置有橡胶减震固定支脚，紫外多模光纤卡接在至少两个所述的光纤卡扣上。本发明优点在于解决了固体激光器产生的单模态脉冲光在多模光纤中的散射现象，达到提高基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的样品离子化效果目的。

摘要： 本发明公开了一种基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪样品靶处理系统，包括抽真空系统，设有舱门的真空进样腔室，用于干燥待测样品靶的真空干燥腔室；真空进样腔室内设置有用于承载样品靶槽的移动部，样品靶槽用于承载待测样品靶；位于真空进样腔室的进样口处设置有过渡腔室，过渡腔室用于当样品靶槽移动至进样口处时，使得样品靶槽与进样口和舱门围合形成密闭空腔；在真空干燥腔室的抽真空气路中设置有排气过滤器，用于过滤真空干燥腔室内的有害杂质；进样口通过阀门与大气相通。本发明优点在于无需等待样品靶干燥即可完成质谱检测，使得质谱检测工作步骤大大缩短，同时避免了干燥过程中的生物安全问题。

摘要： 本发明公开了一种适于激光解析电离飞行时间质谱仪的真空交互系统，包括外侧设置有抽真空装置的真空室，真空室的密封盖板上设置有压力检测单元，密封盖板的样品进出口处密封设置有样品进出仓门；真空室内设置有由动力单元驱动的样品靶拖，动力单元包括驱动样品靶拖水平运动的水平驱动机构和驱动样品靶拖竖直运动的升降机构，升降机构包括通过限位螺钉连接在真空室底壁上的固定底座，固定底座上方通过由第一动力源驱动的剪刀形升降架连接有与样品进出口上下对应的顶升凸台，固定底座与真空室底壁之间的压缩间隙内间隔设置有复位弹簧。本发明优点在于结构简单，升降机构的运行稳定性好，保证更换样品工作顺利进行，降低了机器故障率。

摘要： 本发明公开了一种适于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的光路系统，包括离子源室、真空室、质量分析器、检测器、激光器、激光位置调节器、CCD成像装置；CCD成像装置和激光位置调节器分别设置在离子源室外壁位于质量分析器的两侧；离子源室内位于离子飞行管两侧分别通过角度调节支架设置有激光反射镜和成像反射镜；激光位置调节器的平凸透镜光轴通过激光反射镜与激光聚焦透镜光轴相重合，从而构成激光光路；CCD成像装置的滤光片光轴通过成像反射镜与CCD成像镜头光轴相重合，从而构成CCD成像光路。本发明优点在于最大限度的利用激光系统发射的光，形成高清晰的图像呈现在操作界面上，方便使用者实时对样靶状态进行观察，操作方便。

摘要： 本实用新型公开一种用于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱的加载装置，包括形成有容纳腔室的壳体；位于容纳腔室内的载靶台；以及进样装置；载靶台包括本体部，以及挡板；进样装置包括有供载靶台本体部进出的进样通道，壳体侧壁上包括有窗口；沿窗口周向，窗口内壁面向内凹陷形成有第一环槽，第一环槽与进样通道通道口边缘所对应的进样装置侧壁外表面之间形成沟槽，该沟槽内设置有密封件；当载靶台本体部进入进样通道后，挡板的靠近进样装置的角部抵压在密封件内端部的一侧表面上。该加载装置在生物靶板加载和取出的过程中，能够保证装置容纳腔室的真空隔离，并可通过装置自身结构的调节实现容纳腔室与进样通道之间存在较大压力差时的有效密封。

摘要： 本实用新型公开了一种基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪样品靶处理系统，包括抽真空系统，设有舱门的真空进样腔室，用于干燥待测样品靶的真空干燥腔室；真空进样腔室内设置有用于承载样品靶槽的移动部，样品靶槽用于承载待测样品靶；位于真空进样腔室的进样口处设置有过渡腔室，过渡腔室用于当样品靶槽移动至进样口处时，使得样品靶槽与进样口和舱门围合形成密闭空腔；在真空干燥腔室的抽真空气路中设置有排气过滤器，用于过滤真空干燥腔室内的有害杂质；进样口通过阀门与大气相通。本实用新型优点在于无需等待样品靶干燥即可完成质谱检测，使得质谱检测工作步骤大大缩短，同时避免了干燥过程中的生物安全问题。

摘要： 本实用新型公开了一种适于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪的光路系统，包括离子源室、真空室、质量分析器、检测器、激光器、激光位置调节器、CCD成像装置；CCD成像装置和激光位置调节器分别设置在离子源室外壁位于质量分析器的两侧；离子源室内位于离子飞行管两侧分别通过角度调节支架设置有激光反射镜和成像反射镜；激光位置调节器的平凸透镜光轴通过激光反射镜与激光聚焦透镜光轴相重合，从而构成激光光路；CCD成像装置的滤光片光轴通过成像反射镜与CCD成像镜头光轴相重合，从而构成CCD成像光路。本实用新型优点在于最大限度的利用激光系统发射的光，形成高清晰的图像呈现在操作界面上，方便使用者实时对样靶状态进行观察，操作方便。

摘要： 本实用新型公开了一种适于激光解析电离飞行时间质谱仪的真空交互系统，包括外侧设置有抽真空装置的真空室，真空室的密封盖板上设置有压力检测单元，密封盖板的样品进出口处密封设置有样品进出仓门；真空室内设置有由动力单元驱动的样品靶拖，动力单元包括驱动样品靶拖水平运动的水平驱动机构和驱动样品靶拖竖直运动的升降机构，升降机构包括通过限位螺钉连接在真空室底壁上的固定底座，固定底座上方通过由第一动力源驱动的剪刀形升降架连接有与样品进出口上下对应的顶升凸台，固定底座与真空室底壁之间的压缩间隙内间隔设置有复位弹簧。本实用新型优点在于结构简单，升降机构的运行稳定性好，保证更换样品工作顺利进行，降低了机器故障率。