蝉拟青霉

摘要： 为深入研究昆虫病原真菌蝉拟青霉疏水蛋白PChyd基因的功能,根据蝉拟青霉基因组信息克隆疏水蛋白PChyd基因,对该基因序列进行生物信息学分析,使用qRT-PCR技术对其在不同培养条件或阶段下的表达模式进行分析,并通过酶切酶连的方法构建了该基因的敲除载体.结果表明:PChyd基因的开放阅读框序列全长303 bp,编码100 aa,包含22 aa的信号肽序列和70 aa疏水蛋白功能区域.系统发育分析显示该基因与粗糙虫草菌亲缘关系最近.qRT-PCR结果显示PChyd基因在PDA培养的菌丝体、诱导的附着胞、诱导的芽生孢子中表达量显著高于另外2个样品,其中芽生孢子表达量最高,暗示该基因在蝉拟青霉侵染初期和在昆虫血腔中定殖阶段可能具有重要作用.凝胶电泳结果表明,成功构建了该基因的敲除载体,扩增出含有上臂、HPH、下臂的3356 bp左右的片段.本研究为进一步探究蝉拟青霉疏水蛋白PChyd基因的致病机理、生防工程菌的改造奠定了基础.

摘要： 目的:利用蝉拟青霉对黄芪进行发酵处理,探究发酵后所得菌质有效成分含量变化及其抗高尿酸血症活性.方法:采用硫酸-苯酚比色法、NaNO2-Al(NO3)3比色法、酸碱滴定法对黄芪及黄芪发酵菌质中多糖、总黄酮、总酸的含量进行测定;采用氧嗪酸钾盐诱导高尿酸血症(HUA)大鼠模型,将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、菌质(150、300 mg·kg-1)组、黄芪(150、300 mg·kg-1)组及苯溴马隆(20 mg·kg-1)组,连续灌胃给药14 d,分别对大鼠血清中的尿酸(UA)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)水平进行测定.结果:黄芪药材经蝉拟青霉双向发酵后,总多糖的含量显著升高,总黄酮的含量显著降低,总酸的含量变化不明显.与对照组比较,模型组大鼠血清中UA、BUN、TC、TG、ALT和AST水平显著升高(P<0.05,P<0.001);与模型组比较,黄芪组及黄芪发酵菌质组大鼠血清中UA、BUN、TC、TG、ALT和AST水平显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),且菌质组效果明显优于黄芪组.结论:黄芪经蝉拟青霉发酵后有效成分含量发生较大变化,所得蝉拟青霉/黄芪双向发酵菌质具有良好的抗高尿酸血症作用.

摘要： 蝉花是我国重要药用真菌,但长期以来其名称特别是学名的使用一直混乱.本文从古代医药典籍记载确认,"蝉花"是历史最久、使用最广的中名,对于其他中名具有优先权.其学名Isaria cicadae系Miquel(1838)根据巴西标本命名,但模式标本己失,原描述文字及插图均极其简单,与蝉花形态差异较大.其有性型迄今未发现,曾先后被认为是小蝉草Ophiocordyceps sobolifera和大蝉草Tolypocladium dujiaolongae(=Cordyceps cicadae Shing).本文根据文献考证澄清了国内外关于小蝉草和大蝉草的误用,分析了长期以来大量日本文献中的命名混乱对我国认知蝉花的影响,并质疑I.cicadae在中国及其他地区的分布,提出它是一复合种,因此蝉花的分类地位及学名需要进一步研究.

摘要： 采用液体发酵蝉拟青霉,对蝉拟青霉的发酵条件进行优化,以提高蝉拟青霉胞外多糖产量及生物量.摇瓶发酵条件下,在单因素基础上设计正交实验确定各因素的最佳组合.优化后得最佳发酵培养基:蔗糖8％,牛肉膏0.75％,酵母膏0.125％,MgSO4·7H2 O 0.3％,KH2 PO40.2％,麸皮0.5％.该条件下胞外多糖产量为5.96 g/L,生物量为42 g/L,较优化前提高了1倍.采用发酵罐进行扩大培养,对分批发酵时的初糖浓度进行了优化,并分析了补料分批发酵对发酵过程的影响.发酵罐培养时最适初糖浓度为5％,此时生物量最高为38 g/L,多糖含量最高为5.5 g/L;采用补料分批发酵时,多糖产量最高为5.89 g/L,生物量最高为40 g/L,效果优于分批发酵.

摘要： 目的:探索中药壁虎经蝉拟青霉发酵后菌质粗提物中蛋白质及体外抗肿瘤活性的变化.方法:分别用冻融、超声、Tris-HC1提取壁虎和壁虎/蝉拟青霉菌质抗肿瘤活性成分,通过蛋白质浓度检测、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析壁虎发酵前后蛋白含量与分子量的变化;MTT检测壁虎发酵前后抗HepG2肿瘤细胞活性的变化及不同提取方式抗肿瘤活性的差异.结果:壁虎发酵后菌质3种提取方式所得蛋白质含量均减少约30％,分子量＞10 kDa的蛋白电泳条带均消失;体外抗HepG2肿瘤细胞增殖活性增加,且超声提取物诱导HepG2肿瘤细胞凋亡的IC50值为10.769 mg·mL-1,比发酵前降低了约50％.结论:蝉拟青霉的生长代谢分解了壁虎中的部分蛋白,且壁虎经蝉拟青霉发酵后抗HepG2细胞增殖活性增强.

摘要： 蝉花虫草粗多糖中杂有蛋白、 核酸、 酚类等物质,给多糖的分离纯化带来许多干扰,为了排除杂质干扰,获得较为纯净的多糖组分,采用Sevag法和大孔树脂吸附法相结合对蝉花虫草粗多糖进行了脱蛋白试验.结果表明:采用大孔树脂法或Sevag法均不能完全去除粗多糖中的游离蛋白,两种方法结合脱蛋白除杂效果较为理想,蛋白去除率达96％以上.初步分离获得大孔树脂水相洗脱部位和20％乙醇洗脱部位2种主要多糖组分.综合分析,先用Sevag法脱蛋白2～3次,再用大孔树脂AB-8吸附分离,或先大孔树脂AB-8吸附分离获得不同多糖组分,再用Sevag法辅助脱蛋白1～2次,两种方法去除蝉花虫草粗多糖中蛋白的效果均较好.

摘要： 目的:建立蝉拟青霉/黄芪药材、黄芪药渣双向发酵体系,探究发酵过程中有效成分含量变化.方法:选取正交设计法对接种量、发酵温度、湿度进行优化,并采用硫酸-苯酚比色法、NaNO2-Al(NO3)3比色法及香草醛-高氯酸氧化法对发酵黄芪及黄芪药渣菌质中的多糖、总黄酮、总皂苷的含量进行测定.结果:药材菌质最优发酵条件为温度26°C,湿度90％,接种比例3 mL/5 g,药渣菌质最优发酵条件为温度26°C,湿度80％,接种比例3 mL/5 g;经发酵后,黄芪药材菌质中多糖、总皂苷含量略减少,而黄酮含量有所增加;黄芪药渣菌质中黄酮、皂苷含量均增加.结论:蝉拟青霉可对黄芪药材和药渣基质进行发酵,且发酵后菌质中有效成分的得率显著增加,增强了黄芪药材的药用价值,并为药渣的处理提供了新的思路.

摘要： 抗菌肽是昆虫天然免疫的重要成分,在抵御病原物的侵染中发挥着重要的作用.昆虫Gloverin抗菌肽是一类仅在鳞翅目昆虫中存在的富含甘氨酸抗菌肽.本研究在转录组测序的基础上对小菜蛾抗菌肽gloverin like基因进行了克隆,其开放阅读框序列全长519 bp,编码172 aa,信号肽为1-17 aa.序列分析表明其序列中甘氨酸的比例为15％,与鳞翅目昆虫Gloverin抗菌肽具有较高的同源性.qRT-PCR结果表明小菜蛾抗菌肽gloverin like基因在脂肪体和血细胞组织中表达量较高.蝉拟青霉、金黄色葡萄球菌及大肠杆菌均可诱导小菜蛾抗菌肽gloverinlike基因上调表达,蝉拟青霉诱导12 h后表达量达到最高.利用LC-MS方法在蝉拟青霉侵染的小菜蛾幼虫血淋巴中鉴定出小菜蛾Gloverin like、Gloverin抗菌肽以及Lysozyme Ⅱ、Transferrin、Prophenoloxidase等抗菌效应蛋白.与对照相比,蝉拟青霉侵染后小菜蛾Toll通路4个免疫基因(βGBP、Toll、Cactus和Dorsal)表达量上升.本研究在抗菌肽方面为进一步研究小菜蛾抵御病原真菌入侵的分子机制提供基础信息,也为新的害虫防治方法提供了思路和靶标.

摘要： 通过比较不同提取方法及设计正交试验确定了蝉拟青霉中虫草素的最佳提取工艺：采取管式离心机离心发酵醪，收集菌丝体50°C热空气烘干，按菌粉:石油醚=1:1的量用石油醚脱脂，用布氏漏斗抽滤收集菌丝体烘干，最后用75%乙醇、45°C超声波浸提虫草素，提取4 次，每次提取40min，料液比为1:20。

摘要： 蝉拟青霉GZUIFR-JZD3菌株在沙氏培养基上可产生孢子型(编号JZD3-1)和菌丝型(编号JZD3-2)两类不同的角变。比较了两个角变株与原始菌株(编号JZD3)在不同培养基上的生长及产孢量,研究了它们对甘蓝蚜的致病性,测定了它们的胞外多糖、蛋白酶、蛋白质、SOD和POD的含量。结果表明:三个菌株形态差异较大,在多数培养基上,JZD3生长最快,产孢量最大;胞外多糖、SOD、POD含量以及对蚜虫致病率也是JZD3菌株最佳;而蛋白酶和蛋白质含量则分别是JZD3-1和JZD3-2较高。

摘要： 从蝉拟青霉T-1上分离获得的6个单孢子菌株,经过诱发、分离、鉴定,保存了7个nit突变株,并通过营养亲和试验筛选出蝉拟青霉异核体菌株55-57、56-57、58-57,以及稳定性好的亲本菌株55、56、57、58,比较分析各菌株对蚜虫的致病力以及胞外多糖的含量,数据显示55-57、56-57、58-57菌株的LT50、LT90较低,而且它们的胞外多糖含量稳定且高于55、56、57、58各亲本菌株.说明胞外多糖与高致病性有相关性,是影响致病力的因素.

摘要： 为了发挥生物多样性在害虫控制中的威力,我们从云南西双版纳采集到一株蝉拟青霉(P.cicade) T-1对一种重要的蔬菜害虫-蚜虫的防治研究.

摘要： 从云南、贵州两省采集的7个蝉拟青霉菌株上分离出32个单孢子菌株,在含氯酸盐的培养基上诱导处理后,共获得了抗氯酸盐的不利用硝酸盐突变菌株(nit突变体)60株,经配对组合进行营养亲和分析,结果只有来自北回归线站云南墨江的7个nit菌株有营养亲和现象,其他菌株内或菌株间皆不亲和.菌落融合区菌丝经荧光染色观察,大量存在双核和多核细胞菌丝以及"H"型菌丝接合现象.

摘要： 蝉拟青霉菌粉经脱脂,水提,丙酮沉淀,蒸溜水透析后得到糖蛋白提取物GP,经苯酚~硫酸法测定总糖含量为34.79﹪;Lowry法测定蛋白质含量为63.45﹪;糖蛋白提取物GP上sephdexG-25柱层析,逐管用紫外吸收法(280nm)检测,发现有两个峰(PS和PS).PS总糖含量为21.11﹪,蛋白质含量为77.1﹪,PS总糖含量为44.98﹪,蛋白质含量为53.02﹪.

摘要： 目的：探讨蝉拟青霉-甘草渣双向发酵过程中生物活性物质的变化机理.方法：采用硫酸-苯酚比色法、NaNO2-Al(NO3)3比色法及高效液相色谱法分别对发酵过程中菌质的多糖、总黄酮、三萜类成分甘草酸及黄酮类成分甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素的含量进行测定.结果：随着发酵时间的延长,多糖、总黄酮、甘草酸及甘草素、异甘草素的含量升高,而甘草苷、异甘草苷含量下降.结论：经蝉拟青霉发酵后,甘草渣中有效成分的提取率显著增加,且发酵后甘草渣中黄酮类物质的分子结构发生变化,采用双向发酵对甘草渣进行二次开发具有积极意义.

摘要： 探究蝉拟青霉/甘草渣发酵菌质多糖对免疫功能的影响.将不同发酵时间的蝉拟青霉/甘草渣发酵菌质多糖(15.625,31.25,62.5,125,250μg/mL)加入到巨噬细胞RAW264.7的培养体系中,测定其对巨噬细胞增殖率和吞噬率的影响.将小鼠随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量[400,200,100mg/(kg·bw)]处理组,连续灌胃给药8d,采用酶联免疫吸附反应分析多糖对小鼠胸腺指数、脾脏指数及血清中IL-2、TNF-α生成水平等指标的影响.菌质多糖可增强巨噬细胞R AW264.7的增殖和吞噬能力;菌质多糖高剂量组能显著提高模型小鼠的脾脏和胸腺指数(P＜0.01),显著提高IL-2、TNF-α因子的生成水平(P＜0.01);多糖中剂量组对IL-2的水平也有显著的提升作用(P＜0.01).蝉拟青霉/甘草渣发酵菌质多糖对体内外免疫功能具有增强作用.

摘要： 本文介绍了蝉花的生物学特性、研究现状;惊厥作用的临床表现、发病机理;抗惊厥作用的药物,蝉花抗惊厥作用的研究方法以及开发应用前景.

摘要： 本文介绍了蝉花的生物学特性、研究现状;惊厥作用的临床表现、发病机理;抗惊厥作用的药物,蝉花抗惊厥作用的研究方法以及开发应用前景.

摘要： 本发明提供蝉拟青霉发酵培养基、蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法，其中该蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)发酵培养基的原料组分包括笋头、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸镁。该蝉拟青霉发酵培养基可作为蝉拟青霉制备麦角甾醇的发酵培养基；同时，该蝉拟青霉发酵培养基以笋头为主要原料，能够合理利用笋头资源，解决了食用或加工后绝大多数的笋头残渣被随意丢弃或进行简单填埋处理，造成资源浪费又带来了环境污染的问题，具有潜在经济价值,市场前景非常广阔。

摘要： 本发明公开了一种蝉拟青霉甘露聚糖及其制备和用途。该蝉拟青霉甘露聚糖由重量百分含量为99％以上的多糖组成；多糖的组成为甘露糖；多糖的结构以(1→2)连接的α‑甘露糖残基为主链，且每9个(1→2)连接的α‑甘露糖残基组成一个重复单元；每个重复单元中有5个α‑甘露糖残基的O‑6位上分别被支链取代。该蝉拟青霉甘露聚糖的制备包括：由蝉拟青霉菌在添加有由黄精、无花果和重楼三者组成的中药复合水提液的培养基中深层发酵所得菌丝体经热水提取、酶‑Sevage法去蛋白、透析袋分离和凝胶过滤层析纯化，真空冷冻干燥分离纯化得到蝉拟青霉甘露聚糖。该蝉拟青霉甘露聚糖具有显著的免疫增强作用，可作为免疫调节剂或用于制备免疫调节剂。

摘要： 本发明公开了一种黄芪‑蝉拟青霉发酵菌质及其用途。所述发酵菌质以黄芪药材粉末作为发酵底物，蝉拟青霉作为发酵菌种，通过固体发酵制备得到。本发明的黄芪‑蝉拟青霉发酵菌质具有显著的治疗高尿酸血症和高甘油三酯血症的作用。

摘要： 本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种壁虎‑蝉拟青霉双向固体发酵物，并进一步公开其制备方法，以及用于制备治疗肝癌药物中应用。本发明所述壁虎‑蝉拟青霉双向固体发酵物，在现有壁虎药材的基础上，以蝉拟青霉菌液进行进一步发酵所得，利用壁虎及蝉拟青霉所特有的药性及功能成分，通过二者的深层次相互作用提升壁虎药材的抗肿瘤功能。本发明所述壁虎‑蝉拟青霉双向固体发酵物通过加水提取的方式获得其有效成分，该水提物对HepG2肝癌细胞有显著的抑制作用，其抑制率范围在60‑80％，相比于相同浓度的壁虎水提物的抗HepG2肝癌细胞活性大幅提高，可用于制备治疗肝癌的药物。

摘要： 一种蝉拟青霉的人工培育方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：从自然界分离选育了一株生命力强，镇痛代谢活性物质产量高的蝉拟青霉GZUIFR04606，将菌接种到PDA试管斜面上，25°C恒温培养7d；（2）种子培养：用接种环将已活化的试管斜面菌种接种到装有50mL液体培养基的250mL的三角瓶中，25°C，150r/min，摇床振荡培养72～96h；（3）发酵培养：将种子培养液按5%的接种量即7.5ml接种到装有150mL液体培养基的500mL的三角瓶中，25°C，150r/min，摇床振荡培养72～96h。以该蝉拟青霉为原料，用纯水匀浆，离心，经凝胶柱层析，得到具有活性组分的蝉拟青霉镇痛水提物。该蝉拟青霉镇痛水提物具有明显的镇痛作用，毒副作用小，稳定性好，无成瘾性。

摘要： 本发明公开了一种黄芪‑蝉拟青霉发酵菌质及其制备方法和用途。所述发酵菌质以黄芪酶解液作为发酵底物，蝉拟青霉作为发酵菌种，通过液体发酵制备得到；其中，所述黄芪酶解液是将黄芪药材经过纤维素酶和果胶酶酶解得到的。本发明的黄芪‑蝉拟青霉发酵菌质中黄芪多糖含量显著提高，且具有显著的治疗高尿酸血症和/或高甘油三酯血症的作用。

摘要： 本发明公开了一种蝉拟青霉及在制备抗菌剂、益生菌制剂及抗菌保鲜膜中的应用，首次从野生虫生真菌蝉花中分离得到一株新菌株—蝉拟青霉CH 113.1，该菌株发酵产物对常见病原微生物具有抑制作用，对大肠杆菌的抑制率可达70％以上，该生物抑菌剂能应用在食品保鲜中。本发明显示出该菌株在食品等领域具有良好的应用前景。

摘要： 本发明提供蝉拟青霉发酵培养基、蝉拟青霉发酵制备麦角甾醇的方法，其中该蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)发酵培养基的原料组分包括笋头、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸镁。该蝉拟青霉发酵培养基可作为蝉拟青霉制备麦角甾醇的发酵培养基；同时，该蝉拟青霉发酵培养基以笋头为主要原料，能够合理利用笋头资源，解决了食用或加工后绝大多数的笋头残渣被随意丢弃或进行简单填埋处理，造成资源浪费又带来了环境污染的问题，具有潜在经济价值,市场前景非常广阔。

摘要： 本发明公开了一种蝉拟青霉甘露聚糖及其制备和用途。该蝉拟青霉甘露聚糖由重量百分含量为99％以上的多糖组成；多糖的组成为甘露糖；多糖的结构以(1→2)连接的α‑甘露糖残基为主链，且每9个(1→2)连接的α‑甘露糖残基组成一个重复单元；每个重复单元中有5个α‑甘露糖残基的O‑6位上分别被支链取代。该蝉拟青霉甘露聚糖的制备包括：由蝉拟青霉菌在添加有由黄精、无花果和重楼三者组成的中药复合水提液的培养基中深层发酵所得菌丝体经热水提取、酶‑Sevage法去蛋白、透析袋分离和凝胶过滤层析纯化，真空冷冻干燥分离纯化得到蝉拟青霉甘露聚糖。该蝉拟青霉甘露聚糖具有显著的免疫增强作用，可作为免疫调节剂或用于制备免疫调节剂。

摘要： 本发明公开了一种具有降血糖功效的蝉拟青霉提取物，其制备如下：（1）斜面培养：将菌种接到已制作完成灭菌后的PDA试管斜面上，在25°C条件下培养7 d以备用；（2）液体培养：分为种子培养和发酵培养。（3）蝉拟青霉降血糖水提物的制备：将发酵培养的菌液处理，采用葡聚糖凝胶SephadexG‑50对上清液进行凝胶过滤层析，过滤液冷冻干燥后得到降血糖活性组分，将其配制成含活性组分2.00 mg/mL的水溶液即蝉拟青霉降血糖水提物。本发明用于研制调控血糖的药物或功能性食品保健品，为天然降血糖药物开发提供一定的实验依据。