蛋白质药物

摘要： 随着生物医药技术的发展,蛋白质作为药物研究中的主要靶点或治疗制剂,逐渐应用于临床各种适应症.而研究蛋白质的结构变化对理解候选药物的作用方式及功能至关重要,因此在蛋白质类药物设计及生产过程中往往需要进行高级结构(HOS)表征、抗原表位作图、构象变化及动力学等研究.氢氘交换质谱(HDX-MS)技术作为一种高灵敏,快速,高通量的蛋白质结构动力学表征技术,由于其对大分子蛋白构象表征的优势,逐步发展成为药物研发特别是蛋白质类药物设计和生物治疗学研究的重要工具.本文详细介绍了HDX-MS技术的发展历史及基本原理,并对该技术在蛋白质类药物研发领域的研究进展进行了系统回顾与展望.

摘要： 与其他类型的药物(尤其是小分子)相比,蛋白质疗法通常对生化指标更有效、更具选择性。蛋白质会在体内被酶迅速降解或被肾脏从血液中清除,因而常需要大幅提高服药剂量以达到理想治疗效果,这可能会引起副作用,从而限制了该类药物在临床的使用。钴胺素(维生素B12,Cbl)的4种衍生物在柯林环的Co金属上连接不同的取代基。甲基和腺苷Cbl衍生物的Co-C键被330~550 nm范围的光线照射后会发生均相裂解。此前研究人员利用这种化学方法从B12支架(Cbl-Co-CH 2Drug)中释放多种小分子药物。蜜蜂肽(Mel)是一种有效的溶血剂,在蜜蜂中以蜂毒肽前体蛋白的形式存在,该蛋白由带正电荷的Mel和带负电荷的抑制性前结构域(BS)组成。

摘要： 单克隆抗体(简称单抗)作为治疗性生物制品中发展最为迅速的一类药物,已广泛应用于多种疾病治疗.虽然抗体在临床上显示了其巨大的应用价值,但人类疾病的广度和复杂性督促我们不断寻求新作用方式的新型药物,避免仅仅局限于单抗这一类蛋白质药物.这其中,抗体Fc融合蛋白药物正成为新的研发热点,并且在众多人类疾病治疗方面都显示出巨大的临床应用前景.目前已上市的抗体Fc融合蛋白通常以受体和配体间的相互作用为主要设计策略,进而开发出更加安全且有效的临床药物.本文将对抗体Fc融合蛋白配受体间相互作用这一药物设计策略以及应用进行探讨.%Monoclonal antibodies ( McAb ) , a rapidly expanding class of therapeutic biological products, have been widely used in the treatment of various diseases. Although antibodies have shown tre-mendous clinical value, the breadth and complexity of human diseases urge researchers to constantly develop new drugs with new modes of action rather than to confine them to monoclonal antibodies alone. Fc fusion proteins are becoming a new research hotspot and have shown great potential in the treatment of many human diseases. At present, Fc fusion proteins on the market usually take the interaction between receptors and lig-ands as the main guiding strategy to develop more safer and effective clinical drugs. This article mainly fo-cused on the ligand-receptor interaction as the drug design strategy and the application. of Fc fusion pro-teins.

摘要： 蛋白质聚集现象是生物制药行业面临的重大问题之一,对蛋白质药物有效性、安全性、质量可控性有很大影响.体积排阻色谱技术是蛋白质药物及其聚集体检测分析的标准技术,具有操作简单、分离条件温和、基本不破坏蛋白质药物结构等优点.但由于蛋白质与固定相存在非特异性相互作用,采用该法检测时存在洗脱延迟、色谱峰拖尾、基线漂移、蛋白质回收率低等问题.该文介绍了体积排阻色谱的分离原理及实际应用,并对该技术在蛋白质药物检测中存在的非特异性吸附问题及相关方法优化做了简要概述.同时列举了几种与体积排阻色谱互补的可用于蛋白质药物聚集体分析的技术.最后,对体积排阻色谱技术的发展前景进行了展望.

摘要： 21世纪是生物制药的黄金时代,以重组蛋白药物和治疗性抗体为代表的蛋白质药物已成为生物技术药物的重要组成部分,其对恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染等重大疾病的治疗效果和生物安全性远高于小分子化学药物.但是蛋白质稳定性差,在生产、纯化、运输和储存等过程中,容易因环境刺激或自身稳定性等因素产生团聚,从而导致药效降低,并可能引发免疫反应.发展灵敏度高、分辨率好、简便实用的蛋白质团聚检测技术和方法,对蛋白质药物的研发和改良可起到积极的推动作用.本文针对蛋白质团聚的检测技术和方法进行综述,从检测原理、性能和应用范围等方面,对体积排阻色谱法、凝胶电泳法、分析超速离心法、场流分离法、浊度法、动态光散射法、纳米颗粒跟踪分析技术、流式细胞术和电子显微技术等进行分析比较,并对蛋白质团聚检测技术未来的发展趋势进行了展望.

摘要： 蛋白质药物在口服过程当中,具有一定的方便性,所以具有良好的发展前景.本文主要从蛋白质的药物生物利用程度开始分析,主要阐述了蛋白质药物口服的具体形式,以及进展研究,提高蛋白质药物口服的稳定性.

摘要： Multiple buffer solutions, stabilize, surface active agent and osmo-regulator by buffer solution screening and formulation development were studied, and a formulation of antibody A was established, which benefits the sta-bility study of drug product. The results showed that the formulation is 30mg/ml recombinant human monoclonal an-tibody A, 20mM Histidine/Histidine Hydrochloride, 150mM trehalose, 55mM sodium chloride, 0.01% polysorbate 80, pH value is 5.5. Developed formulation can ensure the stability, uniform and bioactivity of drug product.%通过缓冲体系筛选和制剂处方开发,对多种缓冲体系、稳定剂、表面活性剂及渗透压调节剂等进行了研究,建立抗体A的制剂处方,筛选出有利于本产品稳定的制剂处方.结果表明:制剂处方组成为30mg/mL重组全人单克隆抗体A,20mM组氨酸/盐酸组氨酸,150mM海藻糖,55mM氯化钠,0.01%聚山梨酯80,pH值为5.5.选定的制剂处方可以保证药品的稳定性、均一性和生物活性.

摘要： 糖基化修饰是蛋白质的一种常见且复杂的翻译后修饰,在生物体内主要有介导生物活性、受体介导识别、提高蛋白质溶解度以及延长蛋白质半衰期和促进蛋白质构象稳定等功能.治疗性蛋白质药物中有许多属于糖基化修饰蛋白质,而"正确"的糖基化修饰使得蛋白质药物具有临床疗效.在细胞培养过程中,许多外界因素包括溶解氧、pH值、碳源以及温度都会影响蛋白质的糖基化修饰,特别是重组蛋白质药物较细胞本身蛋白质在细胞内往往属于高表达,这会影响酶或其他功能性蛋白质介导的糖基化修饰,因此细胞培养的环境主要决定了蛋白质药物的糖基化修饰类型及含量.蛋白质药物"不正确"的糖基化修饰在人体内容易产生免疫反应,会被免疫系统清除,从而降低药物的治疗效果,这类糖型主要包括高甘露糖(High Mannose)、α-半乳糖类寡糖(α1,3-galactose-β1,4-galactose-N-GlcNAc)和N-羟乙酰神经氨酸(NGNA).另外,对于治疗性抗体药物,唾液酸及岩藻糖含量也会影响抗体药物的ADCC及CDC活性.本摘要采用荧光标记试剂RapiFluor对释放的糖基进行衍生化标记,通过荧光检测器串联质谱检测器对不同治疗性蛋白质药物的N-连接寡糖进行快速分析.快速荧光标记N-连接寡糖试剂盒结合质谱检测器能够在2小时间内对蛋白质药物从N-连接糖释放、标记以及定性定量进行系统的分析,方便对细胞发酵过程工艺优化和监测.

摘要： 蛋白质/多肽药物正在逐步成为一类越来越重要的药物,但是由于其在体内易降解,造成体内半衰期很短,需要频繁注射给药,给患者带来极大的痛苦和经济负担。用高分子微球包埋蛋白质/多肽药物,可保护药物被降解,并可缓慢释放出药物,实现长效注射制剂,通过微球的合理设计还可构建口服制剂。但是,高分子微球作为蛋白质/多肽药物载体仍存在巨大的挑战,例如,微球一般采用机械搅拌、喷雾、均相乳化等方法制备,所获得的微球粒径均一性差,造成制备重复性差、用药重复性差。另一方面,蛋白质药物在包埋过程中,容易因搅拌剪切、和疏水性聚合物接触等而变构并失去活性。本研究针对上述问题提出解决的策略,构建粒径均一、能高度保持蛋白质活性的生物可降解高分子微球载体,解决聚乳酸、壳聚糖包埋蛋白质药物过程中的上述问题,并分别用于蛋白质药物长效注射制剂和口服给药制剂。

摘要： 随着蛋白质化学和分子生物学的发展,聚乙二醇修饰技术已成为改良蛋白质药物有效的技术之一.该技术得到了越来越广泛的应用,目前已有二十余种聚乙二醇修饰的蛋白药物上市,在临床疗效和安全方面表现良好.随着PEG修饰技术的日益成熟,许多PEG衍生化试剂商品化,PEG修饰蛋白药物的陆续上市,可以预测药物的PEG修饰研究将得到越来越广泛和深入的重视,特别在提高蛋白、多肽药物的稳定性、延长半衰期,降低抗肿瘤药、抗真菌药、抗生素、免疫抑制剂的毒副作用和提高这些药物的靶向性等方面,PEG修饰更具有持续发展的魅力和广阔的应用前景.然而对于聚乙二醇修饰剂的质量控制,首先应当考虑聚乙二醇修饰剂的端基取代率和纯度,药物修饰用的聚乙二醇修饰剂其端基取代率和纯度都要求至少在90％以上.端基取代率过低,将影响药物的聚乙二醇化效率和纯化效率.本QC小组历经6个月时间，通过对PEG端基取代率的检测方法的研究，建立PEG端基取代率的蒸发光检测方法，为公司购入的原料药--（甲氧基聚乙二醇）2NHS酯的质量检测，寻找简便、快速、结果准确、可靠的分析方法，使得蒸发光检测技术质量标准的规范化、标准化。为多种产品的蒸发光检测及改善奠定了基础。无形收获：通过努力，小组达到了预期的活动目标，成功解决了生产过程中出现的问题，掌握mPEG2-NHS酯蒸发光检测关键步骤、完成检测方法的优化、建立质量检测标准。提高了小组成员的技术水平和活动的积极性，并且使我们的个人能力、TQC知识等得到了很大的提高。

摘要： 本试验利用超高效液相色谱电喷雾四极杆飞行时间串联质谱对重组人生长激素全序列进行了确证。试验方法简单，准确，为蛋白质药物的质量控制提供了借鉴。

摘要： 电喷雾电离(ESI)和基质辅助激光解吸电离(MALDI)是最近发展起来的生物质谱技术,本文概述生物质谱技术在蛋白药物研究中分子质量的测定、蛋白质全谱分析、肽指纹谱测定、肽序列测定等方面的应用.方法灵敏、准确、快速,而且可实现高通量和自动化.它们已成为蛋白药物研究的关键性支撑技术,对蛋白质药物的研究和分析具有重要意义.

摘要： 由于生物样品中含有大量与蛋白质药物结构类似的杂质，给其中浓度很低的蛋白质药物分析带来了困难。本文建立了固相亲和层析提取与生物质谱分析结合，对给药动物血清中的重组蛋白质药物进行提取并予以鉴定的方法。利用固相金属螯合亲和层析分离提取并富集给药猕猴血清中含有6×His序列的微量重组人内皮抑制素，采用电喷雾串联质谱分析结合互联网数据库检索对提取得到的蛋白质药物rh-ET进行了识别、鉴定。

摘要： 对Candida utilis来源的尿酸酶进行定点修饰,并对修饰前后尿酸酶酶学性质的改变进行了研究.PEG修饰使尿酸酶的最适pH往中性偏移,最适温度反应曲线展宽,与底物亲和力增加但最大反应速率降低,在低离子强度条件下更加稳定,对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用.研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质,也可能通过影响尿酸酶亚基解离、亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质.这些结果为新药开发PEG-尿酸酶提供了基础.

摘要： 对Candida utilis来源的尿酸酶进行定点修饰,并对修饰前后尿酸酶酶学性质的改变进行了研究.PEG修饰使尿酸酶的最适pH往中性偏移,最适温度反应曲线展宽,与底物亲和力增加但最大反应速率降低,在低离子强度条件下更加稳定,对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用.研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质,也可能通过影响尿酸酶亚基解离、亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质.这些结果为新药开发PEG-尿酸酶提供了基础.

摘要： 对Candida utilis来源的尿酸酶进行定点修饰,并对修饰前后尿酸酶酶学性质的改变进行了研究.PEG修饰使尿酸酶的最适pH往中性偏移,最适温度反应曲线展宽,与底物亲和力增加但最大反应速率降低,在低离子强度条件下更加稳定,对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用.研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质,也可能通过影响尿酸酶亚基解离、亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质.这些结果为新药开发PEG-尿酸酶提供了基础.

摘要： 对Candida utilis来源的尿酸酶进行定点修饰,并对修饰前后尿酸酶酶学性质的改变进行了研究.PEG修饰使尿酸酶的最适pH往中性偏移,最适温度反应曲线展宽,与底物亲和力增加但最大反应速率降低,在低离子强度条件下更加稳定,对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用.研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质,也可能通过影响尿酸酶亚基解离、亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质.这些结果为新药开发PEG-尿酸酶提供了基础.

摘要： 本发明提供了一种研究蛋白质及药物‑蛋白质复合体构象多态性的分子成像方法，该方法涉及如下步骤：获得多肽/蛋白的自组装结构或与伴侣分子的共组装结构的STM图像之后，加入待测分子，得到待测分子在肽链上的结合结构、位点和数量，并在分子水平上研究多肽和待测分子的相互作用，测定待测分子在多肽上的优势构象。

摘要： 本发明涉及蛋白及其编码基因，进一步涉及一种蛋白质及编码该蛋白质的基因，及其用于抗肿瘤的用途及其作为治疗肿瘤药物辅助药剂的应用。为了解决现有治疗肿瘤、特别是胶质瘤治疗效果不理想的问题，本发明提供一种蛋白质及编码该蛋白质的基因。所述蛋白质包括或选自下面的氨基酸序列：(a)如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；或者(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有抑制肿瘤细胞功能的由(a)衍生的蛋白质；所述蛋白质及编码该蛋白质的基因用于抗肿瘤，并作为治疗肿瘤药物辅助药剂应用。

摘要： 本发明涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，更具体地涉及一种筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的物质的方法，所述方法包括使用一种固定有包含溶胶-凝胶材料与蛋白质的混合物的位点的蛋白质芯片。根据本发明，蛋白质芯片可以容易地用溶胶-凝胶材料在96孔板中制造，从而可以容易地从天然物质的文库中筛选抑制蛋白质-蛋白质相互作用的抑制剂。

摘要： 由下述氟树脂形成了与蛋白质或包含蛋白质的组合物接触的表面的容器及用于制造蛋白质或包含蛋白质的组合物的器材具有显著的低蛋白质吸附性，其中，所述氟树脂为选自四氟乙烯‑六氟丙烯系共聚物及四氟乙烯‑全氟烷基乙烯基醚系共聚物中的至少1种氟树脂，并且，所述氟树脂的熔点为320°C以下，所述氟树脂中的相对于每1×10

摘要： 本发明提供能减小使用了特异性地结合的物质的测定中的由肝型脂肪酸结合蛋白质引起的测定值的变动幅度的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、评价该制剂的方法、制作肝型脂肪酸结合蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。一种用使用了用10mM的氧化剂在25°C下进行1小时的氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值与使用了未进行上述氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值的比表示的氧化变动系数设定为1.4以下的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、用于该制剂的肝型脂肪酸结合蛋白质、编码该蛋白质的DNA、由该DNA转化得到的细胞、该蛋白质的制造方法、评价该制剂的方法、抑制使用该制剂的测定中的测定值的变动幅度的方法、制作该蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。

摘要： 本发明提供一种糖化蛋白质测定试剂，其至少包含Trinder’s试剂、4‑氨基安替比林、蛋白酶、蛋白酶的稳定剂以及亚铁氰化物，其中，至少Trinder’s试剂包含在含有Trinder’s试剂的部分组合物中，至少4‑氨基安替比林包含在含有4‑氨基安替比林的部分组合物中，蛋白酶的稳定剂是使亚铁氰化物与该蛋白酶的稳定剂混合后的氧化还原电位大于0.058V的稳定剂，氧化还原电位是包含蛋白酶的稳定剂和亚铁氰化物、不包含糖化蛋白质的反应体系的氧化还原电位。

摘要： 本发明提供能够以优异的安全性将蛋白质导入到细胞中的蛋白质导入方法。通过使目标蛋白质承载在由粘土矿物构成的蛋白质导入用载体上并将其添加到细胞中，可以将所述目标蛋白质导入到所述细胞内中。所述粘土矿物优选为层状粘土矿物，可以使用蒙脱石、蛭石、伊利石等。

摘要： 本发明涉及与粉碎或切断洋葱等植物时发生催泪成分的生成有关的表现出将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分的作用的蛋白质或多肽、编码该蛋白质或多肽的DNA(催泪成分合成酶基因)、使用用于属于葱属植物的催泪成分合成酶基因分离的引物以及使用该引物分离该基因的方法、含有上述DNA的重组载体、包含含有上述DNA的重组载体的转化体、对用含有上述DNA的重组载体转化的宿主细胞进行培养制造具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的方法、具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽、以及具有抑制具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的mRNA翻译的功能的核酸分子。

摘要： 本发明提供了一种研究蛋白质及药物‑蛋白质复合体构象多态性的分子成像方法，该方法涉及如下步骤：获得多肽/蛋白的自组装结构或与伴侣分子的共组装结构的STM图像之后，加入待测分子，得到待测分子在肽链上的结合结构、位点和数量，并在分子水平上研究多肽和待测分子的相互作用，测定待测分子在多肽上的优势构象。

摘要： 本发明涉及一种与蛋白质类药用活性成分结合使用的配体，所述配体由牛磺胆酸和甘氨胆酸组成。本发明还提供一种口服蛋白质类药物制剂，具体为以所述配体与蛋白质类药用活性成分形成的结合物为中心、外侧包裹纳米脂质体的微粒；所述纳米脂质体包裹层可以增加对核心结构的保护，且当活性成分为胰岛素时可为胰岛素质粒接触受体时产生自磷酸化提供磷离子。本发明提供的以胰岛素为活性成分的口服蛋白质类药物制剂不但能调节血糖、血脂，主要的是能防治II型糖尿病的并发症；其生物利用度高于注射胰岛素，不会引起低血糖，更不会至低血糖引起脑死亡；采用口服方式，给药方便，给药后血糖平稳，对机体的内环境的稳定更有益，具有良好且广泛的应用前景。