蛋白合成

摘要： 目的:探索长期高强度间歇训练(HIIT)对中年大鼠比目鱼肌蛋白合成和蛋白降解的影响,为其在骨骼肌健康促进中的作用提供机制性的解释.方法:24只9月龄Wistar大鼠随机分为安静组(C)、中等强度持续训练组(M)和HIIT组(H),每组各8只.C组大鼠正常饮食生活,无运动训练;M组进行60％V·O2max强度的持续运动,共50 min;H组进行80％V·O2max和40％V·O2max的高低强度间歇运动,各3 min,重复6次,热身和恢复以60％V·O2max的强度进行,各7 min.运动组每周训练5次,共12周.运动干预结束后取比目鱼肌,称湿重,western blot检测比目鱼肌蛋白合成、泛素蛋白酶体关键组分和细胞自噬相关蛋白的表达,电镜观察自噬体结构.结果:相比C组:M和H组的比目鱼肌湿重均有所提高(P0.05);H组MAFbx蛋白含量有降低的趋势(P=0.052),自噬体生成增加,且LC3II和COXIV蛋白表达提高(P0.05).结论:HIIT可促进中年大鼠比目鱼肌质量的提高,可能是蛋白合成提高,MAFbx蛋白表达降低及基础自噬水平激活共同作用的结果.

摘要： 为了探讨CdCl2对犬肾上皮(MDCK)细胞的毒性作用,以终浓度为15、25、50、75和100 μmol·L-1的CdCl2处理MDCK细胞,每隔24 h观察细胞形态变化,SDS-PAGE检测细胞蛋白质合成情况,MTT法检测细胞存活率.结果显示:当CdCl2浓度大于15 μmol·L-1时,MDCK细胞的生长受到抑制,细胞贴壁状况变差,细胞变圆,存活率降低,总蛋白质含量减少;CdCl2浓度越高、处理时间越长,细胞受到的抑制作用越明显.

摘要： 为研究新型酪蛋白源抗菌肽BCp12对金黄色葡萄球菌的抑菌机理,本实验通过酶标仪、流式细胞仪、透射电子显微镜分析BCp12对金黄色葡萄球菌的壁膜损伤机制;采用荧光光谱、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究BCp12对菌体DNA结合及蛋白质合成的影响;利用赖氨酸乙酰化、琥珀酰化、2-羟基异丁酰化、丙二酰化4种泛抗体结合免疫印迹分析BCp12对菌体蛋白翻译后修饰的影响.结果 表明:BCp12的最小抑菌质量浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为2 mg/mL,经质量浓度超过MIC的BCp12处理后的菌体细胞膜疏水性显著下降(P≤0.001),通透性增加,菌体形变严重,部分细胞内容物外泄形成空腔;BCp12与溴化乙锭竞争性结合菌体DNA,使核酸合成受到抑制,胞内蛋白质量浓度显著下降(P≤0.001),特别是分子质量为15～35 kDa的蛋白变化最为明显,说明BCp12可抑制菌体蛋白质的合成;金黄色葡萄球菌蛋白存在大量的赖氨酸乙酰化、琥珀酰化、丙二酰化修饰,经BCp12处理的菌体赖氨酸丙二酰化修饰水平明显下调,而对赖氨酸琥珀酰化和2-羟基异丁酰化修饰的影响不明显.本实验揭示了BCp12对金黄色葡萄球菌的多靶点抑菌机制,对新型乳源抗菌肽的应用和保障食品安全具有一定的意义.

摘要： 结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)是一种常染色体显性遗传性多器官受累疾病冋,发病率1/6000-10000,致病基因是TSC-1和TSC-2基因[2-3]。TSC基因突变引起TSC-1/TSC-2复合体结构与功能异常,对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)去抑制,从而导致蛋白合成、细胞生长和血管生成增加,葡萄糖摄取与代谢异常,同时出现细胞定位和移行障碍[1,3]。

摘要： 缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是由于体内铁缺乏导致储存铁耗尽,进一步引起血红蛋白合成减少并最终导致贫血的一种疾病[1]。铁元素在人体内具有重要的生理作用,包括参与呼吸、能量产生、DNA合成以及细胞增殖过程[2]。Algarin C等[3]研究显示,在儿童生长发育关键时期发生IDA可对神经系统及认知发育造成不可逆的损害,可使儿童学习能力下降、行为异常,并可延续至成年期。

摘要： 目的 探讨电针延缓大鼠失神经骨骼肌萎缩的可能机制.方法 雄性Sprague-Dawley大鼠18只随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)和电针组(n=6).后两组钳夹伤右侧坐骨神经制备失神经骨骼肌萎缩模型.造模后第2天,电针组电针右侧足三里穴和环跳穴,共2周.取双侧腓肠肌称重,计算腓肠肌湿重比;HE染色测量肌纤维横截面积和直径;Western blotting检测大鼠骨骼肌中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、70KD核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)和磷酸化p70S6K(p-p70S6K)蛋白表达;实时定量聚合酶链反应检测大鼠骨骼肌中mTOR、p70S6K基因表达.结果 与假手术组相比,模型组和电针组腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积及直径显著下降(P<0.001),电针组明显高于模型组(P<0.01).与假手术组相比,模型组右侧腓肠肌mTOR、p-mTOR、p70S6K和p-p70S6K蛋白表达升高(P<0.01);电针组高于模型组(P<0.05).与假手术组相比,模型组右侧腓肠肌mTOR、p70S6K基因表达升高(P<0.05);电针组高于模型组(P<0.05).结论 电针可延缓失神经骨骼肌萎缩,可能与激活mTOR/p70S6K信号通路,影响骨骼肌蛋白合成有关.

摘要： 本文主要综述了与乳蛋白合成调控相关的激素(催乳素、生长激素、胰岛素)、乳腺氨基酸转运蛋白、葡萄糖转运蛋白和主要信号传导通路(JAK2-STATS与mTOR)的研究进展，为乳蛋白的进一步研究提供理论依据。

摘要： 本文对中医“肝脾相关”理论进行了分析探讨,对肝病实脾、健脾益气方药治疗肝硬化腹水的作用机制提出了新的研究思路.血浆蛋白的合成与分泌在内质网,并是一个耗能的过程,其能量主要来源于线粒体;而线粒体的结构和功能发生改变,也会影响到内质网合成和分泌蛋白的功能.本研究基于健脾益气方药提高血浆蛋白的作用机制可能通过改善线粒体的结构和功能,为内质网合成蛋白提供必要能量的认识,以“肝脾相关”理论为突破口,以“肝病从脾治”为切入点,采用中医学、分子生物学等多学科交叉,拟对健脾益气方药对肝细胞蛋白合成功能的影响进行深入研究,以揭示健脾益气方药提高血浆蛋白的作用机制,丰富“肝脾相关”的理论内涵.

摘要： 目的：探讨面粉增白剂过氧化苯甲酰(Benzoyl Peroxide,BPO)对小鼠肝肾蛋白合成代谢及必需元素的影响。rn 方法：64只昆明种小鼠随机分为4组,分别为对照组、低、中、高剂量组,雌雄各半,分笼饲养。灌胃6周后,测定血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)含量及肝肾组织中必需元素钙(Ca)、锌(Zn)、镁(Mg)的含量。rn 结果：与对照组比较,高剂量组血清TP、ALB含量明显降低,而BUN含量明显升高(P0.05)。rn 结论：BPO影响肝肾正常的蛋白合成与代谢功能,尚不能认为对必需元素Ca、Zn、Mg没有影响。

摘要： 本文通过建立三周大运动量和两周减量训练大鼠跑台运动模型,模拟运动员赛前大运动量和减量训练过程.研究赛前减量训练过程中骨骼肌蛋白合成能力的变化规律和与骨骼肌蛋白合成关系密切的骨骼肌雄激素受体(AR)变化特点;从骨骼肌蛋白合成角度探讨赛前减量训练对运动员成绩提高的作用机制,为赛前减量训练应用提供理论依据.选取7周龄SD雄性大鼠48只，按体重随机分为对照组4组，运动组4组，每组6只。对照组不运动，运动组进行3周大运动量和2周减量训练。大运动量训练阶段，运动强度：大强度（10%坡度、26m/min，相当于80%～85%VO2max强度）与中等强度（10%坡度、20m/min，相当于70%～75%VO2max强度）相结合；训练频次：每周训练6天，其中大强度训练2天，中等强度训练4天；每天1次，共三周；每次训练时间：大强度训练每次60min；中等强度训练，首次训练时间90min，每周递增，第三周训练时间120min。两周减量训练分为三个阶段，第Ⅰ阶段3天，第Ⅱ阶段3天，第Ⅲ阶段6天；依据赛前减量训练原则，采用阶梯式减量方式：训练强度和训练频次保持不变，与大运动量训练期间相同；但通过减少单次训练时间降低运动量（第Ⅰ阶段每次训练时间是大运动量训练第三周训练时间的50%；第Ⅱ阶度与第Ⅲ阶段，每次训练时间相同，是第Ⅰ阶段训练时间的50%）。在大运动量训练结束和减量训练每阶段结束，随机选取对照组和运动组各1组，取腹主动脉血和白腓肠肌。测试大鼠体重、腓肠肌湿重；脲酶UV法测试血清血尿素（BUN）；Western blot法测试大鼠骨骼肌肌球蛋白重链（MHC）、AR蛋白表达和AR（Ser210）磷酸化水平。数据采用独立样本T检验。结果显示：赛前减量训练可有效降低大鼠前期大运动量训练所累积的疲劳，促进骨骼肌蛋白合成。在赛前减量训练的早期，骨骼肌蛋白合成能力增强，但在后期增强效应不明显。赛前减量训练对大鼠骨骼肌蛋白合成能力的促进作用通过提高AR蛋白表达实现，但AR通路似乎只是在赛前减量训练中后期发挥作用。建议从骨骼肌合成角度而言，延长赛前减量训练时间，对骨骼肌肥大不会有进一步的促进作用；赛前减量训练对骨骼肌蛋白合成促进作用可能主要通过其他信号通路完成，有待进一步研究；以后的研究中可以通过组织化学和生物力学手段，更全面的认识对赛前减量训练对骨骼肌合成及工作能力的影响。

摘要： 目的：通过建立一个中强度和高强度运动模型，观察mTOR及其下游信号的变化规律，深入探讨急性运动后骨骼肌蛋白合成的规律。方法：SPF级8周龄雄性SD大鼠，动物进行一周的适应性喂养和适应性训练后分为三大组:安静对照组、中强度运动组和大强度运动组。用Western Blot法检测骨骼肌MHC、mTOR ( Ser2448)磷酸化、p70S6K (Thr389 )磷酸化和4EBP1 (Thr37/46)磷酸化表达。结论：1.急性运动后mTOR及其下游信号表达明显增强，但骨骼肌蛋白尚未见明显增长。2.急性中强度和高强度运动后，mTOR及其下游信号均于恢复期6小时左右达到峰值。

摘要： 目的：丰富运动促进骨骼肌蛋白合成的细胞信号通路机制。方法：8周龄雄性SD大鼠16只，进行为期3天的适应性跑台训练以短期耐力运动为干预手段，探讨运动对大鼠骨骼肌AMPK/TSC2信号通路以及MHC蛋白表达的影响，研究运动对AMPK/TSC2信号通路以及MHC蛋白表达的影响在快慢肌中的差异，结论：(1)短期耐力运动促进大鼠慢肌蛋白合成明显。（2)大鼠快肌中AMPK (Thr172)磷酸化表达水平高于慢肌。(3)短期耐力运动对大鼠骨骼肌AMPK(Thr172)磷酸化水平改变不明显。(4)大鼠快肌中TSC2(Thr1462)磷酸化表达水平高于慢肌。(5)短期耐力运动提高慢肌TSC2(Thr1462)磷酸化表达，降低快肌TSC2(Thr1462)磷酸化表达。

摘要： IGFs家族在动物细胞生长、发育、分化、增殖方面起着重要的调节作用，国内外对IGFs家族基因在生长和繁殖方面的影响开展了广泛的研究。其中，胰岛素样生长因子2受体基因(IGF2R)在刺激生长、蛋白合成、细胞分化和卵巢发育的调节等方面具有重要的作用。本研究拟以北京油鸡为材料，进一步研究IGF2R基因的多态性及其与鸡的生长和繁殖性状的关系，为分子标记辅助选择提供依据。

摘要： 镁在人体广泛存在于细胞内，具有特殊功能，可激发人体内300多个酶系统的活性，抑制神经兴奋，因细胞外液的镁离子与钙、钾、钠都有协同作用，共同维持肌肉神经系统的兴奋性。镁参与体内糖的代谢及呼吸酶的活性，镁是在细胞内的阳离子，主要集中于线粒体中。镁离子与乙酞辅酶的形成有密切关系，同时还与脂肪酸的代谢有关。除此之外，镁还参与蛋白质的合成，镁离子主要在RNA联结核蛋白体上进行蛋白合成时起催化作用。

摘要： 本文内容包括： 一、维生素D的经典作用及其进展 活性维生素D(即1,25(OH)2VitD3,又称钙三醇)是机体调节钙磷代谢、PTH分泌和甲状旁腺增生的重要物质.1,25(OH)2D3一方面可直接促进小肠对钙、磷的吸收,增加骨钙磷的释放,导致血钙磷升高,间接抑制PTH分泌;另一方面还能直接与甲状旁腺细胞胞核内特异性受体(VDR)结合,引起VDR迅速磷酸化,同时吸引核内维甲酸受体(RXR),形成VDR-RXR异二聚体,进而与PTH基因启动子中VDRE紧密结合,抑制RNA聚合酶Ⅱ介导的PTH基因转录及蛋白合成;而PTH又可通过肾脏1α-羟化酶促进1,25(OH)2D3产生,这两种激素相互影响,是维持机体钙磷代谢平衡的主要体液因素. 此外,在许多组织中(如甲状旁腺、血液淋巴细胞生成系统、肌肉组织、生殖系统、皮肤、成纤维细胞等),1,25(OH)2D3还具有抑制细胞生长和诱导分化的作用.对于非经典的靶细胞(心血管系统、骨骼肌、睾丸、胰腺、垂体、肝脏等),1,25(OH)2D3可通过基因性及非基因性调控,影响细胞内钙平衡,诱导或抑制某些特殊蛋白质合成,调节细胞功能,如抑制细胞因子和抗体产生,调节免疫反应;调节血压;影响心血管钙化、心室肥大等. 二、CKD患者维生素D系统的改变 三、CKD患者维生素D治疗进展

摘要： 微量元素在人体中直接参与一些重要蛋白合成、影响许多重要酶的活性,与脑血管疾病关系较密切;近年来研究表明:脑血管病的发病可能与血清微量元素水平异常有关;因此,微量元素检测和调整人体元素的平衡对防治脑血管病有重要意义.

摘要： 本发明的目的旨在提供下述的在设计和构建具有通用性、翻译模板活性高且可简单构建的无细胞蛋白质合成用的转录模板时使用的3’端PCR引物、5’端PCR引物以及使用它们的转录模板的构建方法。作为3’端PCR用引物，提供具有可与存在于传病媒介的抗药性遗传基因等的标记基因的转录终止子序列与Ori之间的碱基序列形成互补链的各种传病媒介固有的碱基序列的多核苷酸；作为5’端PCR用引物，提供满足仅使用其中一种引物时由所构建的DNA不引起转录的条件的两种引物，也就是，具有与从启动子的5’端开始至少含有启动子功能一部分的碱基序列互补的序列的多核苷酸和具有与从启动子的3’端开始至少含有一部分RNA聚合酶识别部位的碱基序列互补的序列的多核苷酸。

摘要： 本发明涉及在微生物中异源产生表面活性剂蛋白Lv‑ranaspumin‑1(Lv‑Rsn‑1)预测同种型的经修饰形式，所述表面活性剂蛋白Lv‑Rsn‑1预测同种型的序列是从对来自东北胡椒蛙(Leptodactylus vastus)巢的泡沫蛋白质提取物进行的分析中推理而来。更具体地，本发明涉及以下：两种表面活性剂蛋白，其由Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式组成；两种合成基因，其各自编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的所述经修饰形式之一；两种表达盒，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一的合成基因之一；两种表达载体，其各自包含编码Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式的合成基因之一；以及两种转基因微生物(细菌和酵母)，其各自被所述合成基因之一转化并异源产生Lv‑Rsn‑1预测同种型的经修饰形式之一。Lv‑Rsn‑1尤其具有表面活性剂特性、乳化和分散特性，并且其异源产生使得其能够用于多种应用和工业产品，而无需从来自蛙巢的泡沫中提取。

摘要： 本发明公开了水通道蛋白AqpSS9及其应用。AqpSS9来源于嗜压菌P.？profundum？SS9，与大肠杆菌水通道蛋白AqpZ的同源性高达67%，具有水通道蛋白的标志性功能位点标志性功能位点（NPA）、6个跨膜区域以及5个环状连接结构。本发明通过构建了AqpSS9表达质粒pIVEX-2.4c-AqpSS9，并通过在无细胞体系中添加0.7%的去污剂Brij-78，可溶性的AqpSS9的产量达到565mg/L。并进一步确证AqpSS9具有水通道蛋白的透水功能，AqpSS9的单体水通透因子P

摘要： 本发明涉及与粉碎或切断洋葱等植物时发生催泪成分的生成有关的表现出将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分的作用的蛋白质或多肽、编码该蛋白质或多肽的DNA(催泪成分合成酶基因)、使用用于属于葱属植物的催泪成分合成酶基因分离的引物以及使用该引物分离该基因的方法、含有上述DNA的重组载体、包含含有上述DNA的重组载体的转化体、对用含有上述DNA的重组载体转化的宿主细胞进行培养制造具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的方法、具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽、以及具有抑制具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的mRNA翻译的功能的核酸分子。

摘要： 本发明提供鸡冠花素II的合成方法、甜菜黄素的合成方法、β淀粉样蛋白聚合抑制剂或阿尔茨海默治疗或预防剂、淀粉样蛋白肽凝聚抑制剂以及HIV‑1蛋白酶活性抑制剂；从藜麦分离出具有鸡冠花素II合成能力的基因，构建了本发明的鸡冠花素II的合成方法；此外，还确认了鸡冠花素II等是β淀粉样蛋白聚合抑制剂或者阿尔茨海默治疗或预防剂、淀粉样蛋白肽凝聚抑制剂、以及HIV‑1蛋白酶活性抑制剂的有效成分。

摘要： 本发明公开了一种人工合成的纳米银合成蛋白基因及其表达的蛋白和应用，根据铁硫蛋白家族蛋白序列共有特征，依靠蛋白质工程的相关技术支撑，人工设计了出具有一定还原性的纳米银合成蛋白。所述蛋白的DNA序列如SEQ NO:1，氨基酸序列如SEQ NO:2所示。本发明的到的蛋白质能够高效合成纳米银，合成效率高，合成的纳米银溶液呈褐色，具有良好的广谱抗菌性且抗菌效果显著。

摘要： 本发明提供了一种用于体外蛋白质合成的蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法，具体地，本发明提供的体外无细胞表达系统不仅可以极其高效地合成蛋白，而且可以合成复杂蛋白，并且用本发明的体外无细胞表达系统，所合成的荧光素酶活性的相对光单位值比目前商业化体系(如兔子网织红细胞体外表达体系)高至少一个数量级(≥10倍或更高)。

摘要： 本发明公开了一种卧式自搅拌体外蛋白合成反应器及体外蛋白合成方法，所述反应器包括机架、卧式罐体、罐盖组件和驱动装置；所述卧式罐体可转动地安装在所述机架上，所述罐盖组件可拆卸地密封于所述卧式罐体的至少一个端部，所述驱动装置用于驱动所述卧式罐体旋转；所述卧式罐体的内壁上布设有自搅拌桨叶组件，所述自搅拌桨叶组件适于在所述卧式罐体的旋转过程中对其内的蛋白合成反应液进行搅拌。本发明能使反应液充分混合，提高反应效率，保持制品活性，可进行工业化放大。

摘要： 本发明提供了一种体外蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法，所述体外蛋白合成体系，包括组分：(a)细胞提取物，(b)吸附剂：所述吸附剂用于提高蛋白合成效率，(c)氨基酸，(d)无或NTPs，(e)外源DNA分子。本发明提供了一种提高体外蛋白合成效率的方法，所述方法采用本发明第一方面所述合成体系，包括步骤：(1)混合，(2)加入外源DNA分子，（3）孵育合成，（4）后处理，以及还包括一步骤：在所述步骤（1)或（2）之后，加入吸附剂。此外，还提供了一种体外蛋白合成体系的试剂盒。本发明可显著提高外源蛋白的合成效率。

摘要： 本发明提供了一种用于体外蛋白质合成的蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法，具体地，本发明提供的体外无细胞表达系统不仅可以极其高效地合成蛋白，而且可以合成复杂蛋白，并且用本发明的体外无细胞表达系统，所合成的荧光素酶活性的相对光单位值比目前商业化体系(如兔子网织红细胞体外表达体系)高至少一个数量级(≥10倍或更高)。