莲心碱

摘要： 目的:研究莲心碱对非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝细胞炎症以及NF-κB、TNF-α凋亡相关蛋白表达的影响,探讨莲心碱对NAFLD的治疗作用和机制。方法:高脂饲料喂养大鼠8周构建NAFLD模型,模型构建成功后随机分为正常空白组、高脂模型组、莲心碱低剂量组和高剂量组,每组8只。喂养至12周末麻醉处死后取材,HE染色观察大鼠肝组织病理学改变情况,检测肝组织血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)表达水平,NF-κB、TNF-α表达情况。结果:高脂模型组NF-κB、TNF-α、ALT、TC、TG水平显著高于正常对照组(P<0.05)。相比高脂模型组,莲心碱高、低剂量组水平降低(P<0.05),且剂量越高降低越明显。结论:莲心碱可减少NF-κB、TNF-α的产生,发挥抗炎作用,从而对NAFLD引起的血脂增高和肝功能损伤起到一定保护和治疗作用。

摘要： 目的 探讨莲心碱(liensinine, lie)在脂多糖(lipid polysaccharides, lPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型中的抗炎抗氧化作用机制。方法 将细胞分为对照组(Control group),LPS组(LPS group),莲心碱(0.5、1、2μmol/L)组。采用CCK-8法筛选莲心碱的无细胞毒性浓度,Griess法检测一氧化氮(NO)的浓度,酶联免疫法(ELISA)检测前列腺素2(PGE2)的浓度以及促炎因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的含量、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测COX-2和iNOS mRNA的表达,DCFH-DA探针检测细胞中活性氧(ROS)含量,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测NF-κB、MAPK和Nrf2/HO-1通路中关键蛋白的表达情况。结果 0~4μmol/L莲心碱对细胞活力无影响,与LPS组相比,莲心碱组(0.5、1、2μmol/L)细胞中的促炎因子含量下降(P<0.05),NO和PGE2浓度下降(P<0.05),COX-2和iNOS mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB和MAPK通路被抑制(P<0.05),且具有剂量依赖性,莲心碱处理后ROS和MDA的含量显著低于LPS组(P<0.01),SOD的活性和GSH的含量显著高于LPS组(P<0.01),Nrf2/HO-1通路活性也较于LPS组显著增加(P<0.05)。结论 莲心碱通过抑制NF-κB和MAPK通路与激活Nrf2/HO-1通路发挥抗炎抗氧化作用。

摘要： 目的通过检测血管平滑肌A7R5细胞内莲心碱的含量,同时测定不同浓度莲心碱对A7R5细胞活力的影响及莲心碱的药效作用,探究莲心碱进入细胞作用的效率与对A7R5细胞表型转换的影响。方法体外培育大鼠血管平滑肌细胞A7R5细胞株,将其随机分为6组,分别用不同剂量莲心碱干预(0、5、25、50、100、200μg/mL),采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)检测不同浓度的莲心碱干预15 min时A7R5细胞质中莲心碱浓度;采用MTT法筛选莲心碱药物浓度后,选择对细胞无伤害的药物浓度,采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导建立A7R5细胞表型转换模型,将其分为空白对照组(完全培养基)、AngⅡ组(1×10^(-6) mol/L AngⅡ)、莲心碱组(1×10^(-6) mol/L AngⅡ+10μg/mL莲心碱),干预24 h后,双转盘活细胞共聚焦实时成像分析系统观察A7R5细胞中表型转换标志物α-SMA的蛋白表达情况。结果通过液质联用可检测到破碎细胞中莲心碱的含量,与干预浓度呈剂量依赖,空白对照和末次清洗细胞的PBS中未检测到莲心碱色谱峰,提示莲心碱可透过细胞膜进入细胞,且莲心碱进细胞效率为15.56%;AngⅡ诱导A7R5细胞由收缩型向合成型转换,其标志蛋白α-SMA表达减少,莲心碱干预后可抑制α-SMA表达量的降低。结论莲心碱可透过A7R5细胞膜进入细胞,且抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞表型转换,该结果可能是莲心碱抑制高血压血管重构的作用机制之一。

摘要： 目的 以莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱为湘莲莲房质量评价指标,优化提取工艺参数,建立高效液相色谱法同时测定3种物质.方法 用酸性80％乙醇作溶剂超声提取莲房生物碱类成分,碱化后分离定量.经Waters XSelect C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠为流动相进行梯度洗脱.结果 莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在1.994～79.76μg/mL(r2=0.9993,n=6)、1.951～78.05μg/mL(r2=0.9996,n=6)、1.972～78.87μg/mL(r2=0.9998,n=6)范围内线性关系良好,回收率分别为99.5％、98.2％、98.7％(n=9).结论 该方法 简便、回收率高,实验结果 为莲房中生物碱定量分析和湘莲莲房质量评价提供参考.

摘要： 目的 通过产地调研对比5个产区莲子心中莲心碱含量,分析影响莲心碱含量的主要因素.方法 在莲子心主产区(江西、湖南、湖北、福建、四川)进行调研与样品收集,依据《中华人民共和国药典》2015年版测定莲子心中莲心碱的含量,分析影响莲心碱含量的主要因素.结果 江西、湖南、湖北、福建、四川五省莲子心莲心碱合格率分别为0,31.0％,100.0％,0,0.结论 产地、采收期、品种是影响莲子心莲心碱含量的主要因素.

摘要： 【目的】建立高效液相色谱法测定莲子心提取物中指标成分莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的方法,为莲子心提取物的质量控制提供依据。【方法】Gemini-NX5U C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-甲醇-水-三乙胺(40∶20∶40∶0.12)作为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长282 nm,柱温30°C。【结果】莲心碱在进样质量0.067~0.670μg,异莲心碱在进样质量0.107~1.070μg,甲基莲心碱在进样质量0.148~1.480μg线性关系良好。方法稳定性、重复性好。莲心碱平均回收率为99.75%、异莲心碱平均回收率为100.53%、甲基莲心碱平均回收率为101.05%;RSD值分别为1.57%、1.54%和1.14%。【结论】所建立的高效液相色谱法简单快速,稳定性高,重复性好,可以用于莲子心提取物的质量控制。

摘要： 目的:分析莲子心中3种生物碱类成分含量的影响因素,为制订合理的莲子心质量标准提供依据.方法:用HPLC法测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量.采用SPSS19.0软件行单因素方差分析,比较不同采收期、不同加工方式、不同品系莲子心中3种生物碱类成分含量的差异.结果:莲子心不同采收期的甲基莲心碱、莲心碱含量有较大差异,嫩莲明显低于麻莲和铁莲(P＜0.05);不同加工方式对其含量也有影响;不同品系莲子中莲子心生物碱类成分含量差异无统计学意义(P＞0.05);3种成分单一量与生物碱总量均呈极显著正相关.结论:应严格执行中国药典关于莲子心的采收期和加工方式的规定,建议选择甲基莲心碱作为莲子心含量测定指标性成分.

摘要： 为了解决提取效率低而导致的市售莲子心含量项鲜有合格的问题,对莲子心饮片中有效成分的提取方法进行优化.分别对莲心碱的提取方式、提取溶剂以及提取溶剂体积进行了考察,利用优化后的提取方法制备莲子心饮片供试品溶液,选用Kromasil 100-5-C18(4.6 mm×150 mm)色谱柱,以乙腈-0.015 mol/L十二烷基磺酸钠溶液-冰醋酸(体积比55:44:1)为流动相,在流速为1.0 mL/min,柱温为30°C,检测波长为284 nm,进样量为10μL条件下,进行含量测定.结果表明,最佳的提取条件为选择25 mL 0.08％盐酸甲醇溶液作为提取溶剂,超声提取40 min;优化后的提取方法使莲心碱的含量测定较稳定,莲心碱的提取效率得到显著的提升;莲心碱进样量在36.9～369.5 ng时,线性关系良好,平均回收率为99.9％,RSD为1.79％.优化后的提取方法操作简便,提取率高,重复性好,方法准确,可为莲心碱的提取以及后续莲子心饮片质量标准的制定提供参考依据.

摘要： 为了分析远志皂苷与莲心碱对七氟烷诱发新生大鼠急性和远期认知功能损伤的改善作用及机制,将36只新生SD大鼠随机分为中药组(n=12)、模型组(n=12)和空白组(n=12),中药组、模型组暴露于2.5％七氟烷环境中麻醉诱导2 h·d-1,连续3 d,空白组暴露在不含七氟烷的相同环境中,中药组于麻醉前30 min腹腔注射远志皂苷与莲心碱1:1配伍溶液(30 mg·kg-1),模型组和空白组腹腔注射等量0.9％氯化钠溶液,比较各组大鼠血气指标、皮质脑电图结果、Morris水迷宫行为和血清皮质酮含量,并采用Western blot法检测海马Bcl2、Bax和Caspase-3表达水平.中药组大鼠皮质脑电图癫痫波总时长、平均时长以及数量均低于模型组(P<0.05);定位航行实验结果显示,中药组大鼠逃避潜伏期短于模型组(P<0.05);空间探索实验结果显示,中药组大鼠探索时间长于模型组(P<0.05);中药组大鼠血清皮质酮含量低于模型组(P<0.05);中药组大鼠海马组织Bcl2/Bax表达水平高于模型组(P<0.05),cleaved Caspase-3表达水平低于模型组(P<0.05).结果表明,远志皂苷与莲心碱可改善七氟烷诱发新生大鼠急性和远期认知功能损伤,其机制可能与调控凋亡相关基因Bcl2、Bax和Caspase-3表达水平有关.

摘要： 目的 研究莲心碱对七氟烷诱发新生大鼠皮层癫痫样脑电图波的影响及机制.方法 将SD新生大鼠随机分为模型组(n=15)、对照组(n=15)和低(n=15)、高(n=15)剂量实验组.将各组大鼠放入麻醉箱中吸入6.0％七氟烷3 min进行麻醉诱导,然后持续吸入2.1％七氟烷维持麻醉,持续1 h.低、高剂量实验组于麻醉后30 min腹腔注射2.5、5.0g·L-1莲心碱10μL,对照组给予100 g·L-1左乙拉西坦10μL,模型组腹腔注射生理盐水5μL·g-1.以血气分析仪检测各组大鼠血气指标,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清皮质醇含量,监测大鼠皮层脑电图,以蛋白质印迹法检测各组大鼠海马组织中pAkt、pS6、pAMPK蛋白的表达.结果 模型组、对照组及低、高剂量实验组大鼠癫痫波总时长分别为(45.56±9.23),(13.56±5.41),(37.53±7.53),(12.36±5.69)s,平均时长分别为(8.56±3.35),(2.69±0.33)(6.69±2.52),(2.36±0.25)s,癫痫波个数分别为(7.25±1.24),(1.52±0.42),(5.16±0.56),(1.69±0.58)个;血清中皮质酮含量分别为(416.28±23.58),(124.05±62.18),(362.58±46.28),(139.52±37.85)ng·mL-1,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 莲心碱可剂量依赖性抑制七氟烷诱发的新生大鼠皮层癫痫样脑电图波,可能通过调节mTOR通路进而发挥脑保护作用的.

摘要： 本文将膜分离和吸附联合,应用于莲心碱的提纯,将分子量相差不多的叶绿素和莲心碱有效的分离.和原工艺相比,缩短了生产周期,简化了分离提纯路线,降低了有机溶剂的用量,提高了成品中有效成分含量.

摘要： 本发明涉及从莲子心中提取莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的方法，是以莲子心为原料，经过下述步骤：(1)粗提取物浸膏的制备；(2)大孔树脂预分离；(3)高速逆流色谱纯化，得纯度在98％以上的莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱。本发明以乙醇提取莲子心药材中的生物碱，以大孔树脂预分离，以乙醇为洗脱剂，以高速逆流色谱进行纯化，工艺过程绿色环保，对环境无严重危害。

摘要： 本发明公开的从莲子心中分离莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的方法，采用的是逆流色谱方法，用于分离的溶剂可为正构烷烃、卤代烃、脂肪醇、脂肪酮、脂肪酯、醚类或水中的两种或两种以上的混合物，该方法能直接分离大量粗提样品或合成混合物，具有能保证较高的峰型分辨度，分离量大、样品无损失、回收率高、分离环境缓和，节约溶剂的特点。适用于用各种型号的逆流色谱仪对各种途径获得的粗品提纯、分离制备莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱单体，分离结果纯度可达到95%以上。

摘要： 一种从莲子心中提取纯化异莲心碱和莲心碱的制备工艺，首先用甲醇浸出法从莲子心中提取以甲基莲心碱、异莲心碱、莲心碱为主要碱的非水溶性总碱，再从非水溶性总碱中分离出含有异莲心碱和莲心碱的强酚性总碱，然后以结晶法分离强酚性总碱得异莲心碱和莲心碱；本发明提供的从莲子心中提取、纯化异莲心碱和莲心碱的方法，与现有的方法相比，具有成本低、收得率高、品质优-含量大于90%、适合于工业化生产等突出的优点。

摘要： 本发明公开了莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱中的一种或几种在制备GLUT4活性促进剂中的用途，且GLUT4的活性通过AMPK信号通路来介导。本发明发现莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱均具有良好的促GLUT4上膜的活性，且异莲心碱活性最强。但是这三种化合物的活性均能被AMPK抑制剂Compond C完全抑制，说明莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱通过AMPK信号通路来发挥其活性作用。发现了异莲心碱可以激活AMPK代谢通路。还发现了异莲心碱能提高GLUT4蛋白的表达。本发明为以GLUT4和AMPK信号通路为靶点的新药开发提供了一种新的选择和资源，将更有助于细致深入开发此类药物打下了良好的基础。

摘要： 本发明涉及从莲子心中提取莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的方法，是以莲子心为原料，经过下述步骤：(1)粗提取物浸膏的制备；(2)大孔树脂预分离；(3)高速逆流色谱纯化，得纯度在98％以上的莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱。本发明以乙醇提取莲子心药材中的生物碱，以大孔树脂预分离，以乙醇为洗脱剂，以高速逆流色谱进行纯化，工艺过程绿色环保，对环境无严重危害。

摘要： 本发明公开的从莲子心中分离莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱的方法，采用的是逆流色谱方法，用于分离的溶剂可为正构烷烃、卤代烃、脂肪醇、脂肪酮、脂肪酯、醚类或水中的两种或两种以上的混合物，该方法能直接分离大量粗提样品或合成混合物，具有能保证较高的峰型分辨度，分离量大、样品无损失、回收率高、分离环境缓和，节约溶剂的特点。适用于用各种型号的逆流色谱仪对各种途径获得的粗品提纯、分离制备莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱单体，分离结果纯度可达到95％以上。

摘要： 本专利具体涉及异莲心碱在制备抗肝纤维化药物中的应用。中药莲子心中的生物碱类成分包括莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱等，本发明经动物实验研究表明，异莲心碱、甲基莲心碱能降低CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型血清中ALT、AST的浓度，以及血清中HA、LN、PC‑III、IV‑C的浓度，改善肝组织病理症状，具有良好的抗肝纤维化作用，且异莲心碱作用效果优于甲基莲心碱，而莲心碱对肝纤维化没有显著治疗作用。细胞实验表明异莲心碱、甲基莲心碱降低肝星状细胞LX‑2及T6的活力，显著抑制肝星状细胞的活化指标表达，诱导活化型肝星状细胞死亡，且异莲心碱作用效果优于甲基莲心碱。因此可用于制备抗肝纤维化药物。

摘要： 一种从莲子心中提取纯化异莲心碱和莲心碱的制备工艺,首先用甲醇浸出法从莲子心中提取以甲基莲心碱、异莲心碱、莲心碱为主要碱的非水溶性总碱,再从非水溶性总碱中分离出含有异莲心碱和莲心碱的强酚性总碱,然后以结晶法分离强酚性总碱得异莲心碱和莲心碱;本发明提供的从莲子心中提取、纯化异莲心碱和莲心碱的方法,与现有的方法相比,具有成本低、收得率高、品质优——含量大于90%、适合于工业化生产等突出的优点。

摘要： 本发明涉及一种由甲基莲心碱制备和纯化甲基莲心碱高氯酸盐的方法。取1份甲基莲心碱粉末，加适量市售高氯酸反应完全后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为1%‑50%，再加适量水饱和的二氯甲烷萃取1‑3次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得甲基莲心碱高氯酸盐。现有生物碱成盐工艺多采用在有机溶剂中先成盐、后重结晶的方法，但结晶时间长，收率低。本发明提供的一种简单快速制备和纯化甲基莲心碱高氯酸盐的方法，较现有工艺更简便、更高效，且适合工业化大生产。

摘要： 本发明公开了莲心碱在制备治疗肺动脉高压药物中的应用。本发明属于生物医药技术领域。本发明通过缺氧(10％)诱导构建了肺动脉高压疾病小鼠模型。通过腹腔注射莲心碱后，观察肺动脉高压小鼠模型的皮毛、饮食、活动、死亡等情况。结果发现，莲心碱(式I所示)具有显著改善肺动脉高压动物肺血管重构、减轻右心室肥厚和右心衰、改善肺动脉高压动物的生存质量(提高进食、进水量)以及提高肺动脉高压动物的生存率的作用。因此，本发明的提出为肺动脉高压的预防和治疗提供了新的技术手段，也将使莲心碱在防治肺动脉高压疾病方面具有广阔的应用前景。