荧光偏振免疫法

摘要： Objective To evaluate the correlation and difference of reversed phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) and fluorescence polarization immunoassay (FPIA) on determining serum concentration of carbamazepine.Methods Fifty serum samples were collected,both RP-HPLC and FPIA methods were employed to determine the concentration of carbamazepine.The results were analyzed by paired t test,Bland-Altman and Deming regression methods,respectively.Results The results of measuring 50 samples by the two methods showed that FPIA datas were significantly higher than RP-HPLC datas,and there was statistically significant difference(P<0.05) and poorer consistency between two methods;There was good correlation between carbamazepine concentrations determined by the two methods.Deming regression equation was CFPIA=1.195 3 CRP-HPLC-0.144 0,and Pearson correlation coefficient was 0.968 5.Conclusion Clinicians should pay more attention to the difference of carbamazepine concentration determination by different methods when carbamazepine individualized dosage regimen was adjusted according to therapeutic drug monitoring.%目的 比较反相高效液相色谱(RP-HPLC)法与荧光偏振免疫(FPIA)法测定血浆卡马西平浓度的差异性和相关性.方法 收集卡马西平血浆样本50例,分别采用RP-HPLC和FPIA进行测定,采用配对t检验比较两者均数的差异;Bland-Altman进行一致性分析;Deming回归法进行相关性分析.结果 FPIA法的测定结果高于RP-HPLC法,两种测定方法均数之间差异有统计学意义(P<0.05),一致性较差;Deming回归分析显示两种方法之间存在良好的相关性,回归方程为:CFPIA=1.195 3CRP-HPLC-0.144 0,Pearson相关系数为0.968 5.结论 在制定卡马西平个体化给药方案时应充分考虑不同检测方法的影响,正确解读检测结果,提高个体化用药水平.

摘要： 目的 比较酶放大免疫法(EMIT)与荧光偏振免疫法(FPIA)监测全血中环孢素A(CsA)浓度的测定结果,并进行相关性分析.方法 收集126例/次临床使用环孢素A的患者稳态浓度血样,分别用EMIT法及FPIA法测定,并考察两种方法测定结果的相关程度.结果 2种不同方法测定CsA血药浓度平均值(x±s)分别为EMIT法:(205.77±117.65)ng/mL;FPIA法:(186.49±112.16)ng/mL,以SPSS 19.0对经对数转换后的两组浓度数据进行配对样本T佥验,其P=0.00,即两种测定方法有显著性差异.将患者分为肾移植组(63例/次),肝移植组(17例/次),干细胞移植组(31例/次),肾病综合征组(15例/次).以SPSS19.0对四组浓度数据分别进行组内的配对样本T检验,得到肾移植组与肝移植组P＜0.05,差异具统计学意义.干细胞移植组与肾病综合征组P＞0.05,差异无统计学意义.结论 对CsA进行治疗药物监测时应考虑不同分析方法的影响.

摘要： 目的:对济南军区总医院3年期间住院难治性肾病综合征患者全血中环孢素A (CsA)浓度的监测结果加以分析,以便探讨其临床有效性和安全性,为更好地开展CsA浓度 监测提供参考.方法:采用荧光偏振免疫法测定92例肾病综合征患者的224次环孢素谷浓度,分析CsA血药浓度与临床疗效及合并用药之间的关系.结果: 92例难治性肾病综合征患者监测CsA浓度共224例次,平均血药浓度为(134.78±65.26)ng·mL-1((x)±s),达有效浓度(100~150 ng·mL-1)152例次(67.86%),低于100 ng·mL-1有60例次(26.79%),高于150 ng·mL-1有12例次(5.36%).结论:CsA血药浓度受多种因素的影响,对肾病综合征患者进行 CsA浓度监测具有重要的临床意义.%Objective:To analyze the results of cyclosporine A (CsA) whole blood concentration in the patients with nephrotic syndrome in our hospital during the last three years, and evaluate the efficacy and safety of CsA monitoring.Methods: 224 CsA whole blood samples in 92 patients with a plastic anemia were measured by means of lfuorescence polarization immunoassay (FPIA). Then the relationship between efifcacy and CsA blood concentration was analyzed.Result: Total of 224 samples were measured. 152 samples (67.86%) reached the effective blood concentration range (100-150 ng·mL-1), 60 samples(26.79%) were lower and 12 samples (5.36%) were higher than that. The average blood concentration of CsA was(134.78± 65.26)ng·mL-1 (n=224).Conclusion: The factors which can affect CsA whole blood concentration were complex. Monitoring CsA blood concentration can be used to guide rational use of CsA in patients with nephrotic syndrome.

摘要： 目的 建立固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度,并与荧光偏振免疫法(FPIA)测定结果进行相关性分析.方法 血清样品经C18固相萃取小柱净化后进样.色谱柱为HyperSil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05 mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈(91∶9),柱温25°C,流速1mL·min-1,检测波长236nm,进样量30μL;28例患者的血浆分别用SPE-HPLC和FPIA测定,考察2种方法的相关程度.结果 万古霉素、去甲万古霉素的标准曲线范围分别为0.4～80 mg·L-1和1～50 mg·L-1,回收率分别为87.2％和89.8％,日内、日间精密度均＜7％;SPE-HPLC和FPIA 2种方法的测定值差异无统计学意义.结论 SPE-HPLC法快速简便,准确,灵敏度高,适用于万古霉素和去甲万古霉素血药浓度检测;2种测定方法有良好的相关性.

摘要： 目的：通过测定急性心肌梗死患者血浆同型半胱氨酸的水平，了解二者的关系,及其在心肌梗死诊治中的临床意义.方法：对78例急性心肌梗死患者和同期39例健康对照者采用荧光偏振免疫法测定空腹血浆同型半胱氨酸水平.结果：血浆同型半胱氨酸高者[（Hcy）>15umol/l]，急性心肌梗死组为59例，占75.64%.对照组为6例，占15.38%.两组平均Hcy水平为21.23±4.81umol/l和11.14±1.83umol/l，差异有显著性（P<0.05）.AMI 患者治疗前后Hcy 浓度分别为21.23±4.81umol/l 及15.4±2.82umol/l，二者比较浓度显著下降（p<0.05）.结论：急性心肌梗死患者血浆同型半胱氨酸水平普遍较正常对照组的高，由此考虑血浆同型半胱氨酸水平升高与急性心肌梗死的发病存在一定关系；血浆同型半胱氨酸的检测可以作为AMI的预防和疗效观察的一项辅助指标.

摘要： Objective: To establish an HPLC and LC-MS/MS method for determining vancomycin in human serum and to compare with FPIA. Methods: Serum samples for HPLC were extracted by sedimentation with 10% perchloric acid. The chromatographic column of NovaPak C18 was used and the column temperature was kept at 35°C. The mobile phase was composed of KH2PO4 buffer solution-methanol (85∶15, v/v, pH=3.2), the flow rate was 1 mL·min-1 and the UV detection was performed at 230 nm. Serum samples for LC-MS/MS were precipitated by acetonitrile and the supernatants were used. The separations were performed on an Agilent Eclipse XDB-C18 analytical column (100 mm×2.1 mm, 3.5μm) at 40°C with the mobile phase composed of water (0.1% formic acid)-acetonitrile (90∶10, v/v) at a flow rate of 0.2 mL· min-1. ESI was used which was performed in the multiple reaction monitoring mode (MRM) using target ions m/z 725.0→144.0 (vancomycin) and m/z 718.5→144.0 (IS). Then the HPLC and LC-MS/MS methods were used to determine 95 clinical samples comparing with FPIA. Results: The linear range of the two methods were 0.4~96 and 1.2~96μg·mL-1, respectively, with LLOQ at 0.4 and 1.2μg·mL-1. The intra-and inter-day RSD were within 15%. The HPLC and LC-MS/MS methods strongly correlated with FPIA without significant differences. Conclusion: The HPLC and LC-MS/MS methods we established were rapid, sensitive, precise and reliable for the determination of vancomycin in human serum, which can be applied in the study of human vancomycin pharmacokinetics and the practice of therapeutic drug monitoring.%目的：建立HPLC法和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法检测人血浆中万古霉素的浓度，并分别与FPIA法进行比较。方法：HPLC法：100μL血浆样品加入等体积10%的高氯酸沉淀，振荡离心后取上清液进样。采用Agilent Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm，5μm），柱温为35°C，流动相为0.05 mol·L-1 KH2PO4（pH=3.2）-甲醇（74∶26，v/v），流速为1 mL·min-1，检测波长为230 nm。 LC-MS/MS法：100μL血浆样品用300μL乙腈沉淀，振荡离心后取上清液进样。色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（100 mm ×2.1 mm，3.5μm），柱温为40°C，流动相为水（含0.1%甲酸）-乙腈（90∶10，v/v），流速为0.20 mL·min-1。采用电喷雾化离子源（ESI），多离子反应模式（MRM）检测，万古霉素和内标去甲万古霉素的监测离子对分别为m/z 725.0→144.0和718.5→144.0。采用建立的HPLC法和LC-MS/MS法测定95份临床样本，并与FPIA法进行相关性和测定方法的偏倚分析。结果：HPLC法和LC-MS/MS法测定万古霉素的线性范围分别为1.2~96μg·mL-1和0.4~96μg·mL-1，低、中、高三种浓度质控品日内和日间相对标准差（RSD）均<15%。两种方法与FPIA法有很强的相关性（r=0.9621，P<0.0001和r=0.9466，P<0.0001），无明显偏倚。结论：建立的HPLC和LC-MS/MS法快速、灵敏、准确，样本测定结果与FPIA法无显著差异，适用于万古霉素的常规血药浓度监测及人体药物代谢动力学研究。

摘要： 目的:比较柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法快速监测卡马西平血药浓度的结果相关性,评价柱切换-高效液相色谱法用于苯巴比妥治疗药物监测的可行性.方法:收集兰州军区兰州总医院门诊共52例癫痫患者血样,在同一天内分别用柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法同时测定苯巴比妥血药浓度.以柱切换-高效液相色谱法测定值(Ⅹ),荧光偏振免疫法测定值(Y)进行相关回归分析和配对t检验.结果:柱切换-高效液相色谱法和荧光偏振免疫法测定值之间相关性良好,回归方程为:Y=0.995 3X+0.046 2(n=52,r=0.9990);测定值两者之间差异无显著性(P＞0.05).结论:柱切换-高效液相色谱法灵敏、简单、方便、可靠,且显著降低监测成本,可适用于广大医院临床血药浓度的常规监测.

摘要： To compare the results of circulating enzymatic and fluorescence polarization im-munoassay method for serum homocysteine levels , and discuss the quick and easy detection of homocysteine . Method:20 patients with diabetes , high blood pressure , coronary heart disease and 20 cases normal healthy volunteers were selected as the observation object , serum specimens were detected by circulating enzymatic and fluorescence polarization immunoassay method, and then serum homocysteine levels was compared .Re-sult:By the circulation enzyme method to detect serum homocysteine , in low serum batch CV was 3.06%, the median serum group within the CV was 3.97%, within the high value of serum CV was 4.01%;Low CV between serum group was 3.11%, the median CV between serum group was 3.92%, the high value of serum between CV was 4.05%;The recovery rate was 102.01%;Linear regression equation was Y =0.98X+0.06, r2=0.98;When blood ammonia concentration was less than 70μmoL/L, the deviation of the homocysteine concentrations of the original value and the measured value was less 5%.By circulating enzymatic detection of diabetes, hypertension , coronary heart disease group and healthy group , serum homocysteine concentra-tions were 8.87 ±1.21 (μmoL/L), 10.21 ±1.02 (μmoL/L), 14.52 ±1.31(μmoL/L) and 1.31 ±0.14 (μmoL/L) , which were no significant difference with the fluorescence polarization immunoassay measured results, the comparing differences were no statistical significance (P >0.05).Conclusion:The circulating enzymatic automatic biochemical analyzer has been applied to the determination of serum homocysteine with good precision and recovery , and reliable and accurate results can be obtained , and the cost is lower , the operation is simpler .%比较循环酶法和荧光偏振免疫法在血清同型半胱氨酸水平测定中的结果，探讨快速简便检测同型半胱氨酸的方法。方法：选取糖尿病、高血压、冠心病患者以及正常健康志愿者各20例为观察对象，同时应用循环酶法和荧光偏振免疫法对所有患者的血清标本进行检测，比较两种方法测得的血清同型半胱氨酸水平。结果：循环酶方法检测血清同型半胱氨酸的低值血清批内CV为3．06％，中值血清批内CV为3．97％，高值血清批内CV为4．01％；低值血清批间CV为3．11％，中值血清批间CV为3．92％，高值血清批间CV为4．05％；回收率为102．01％；线性回归方程为Y＝0．98X＋0．06，r2＝0．98；血氨浓度＜70μmoL/L时，同型半胱氨酸浓度测定值与原始值的偏差均＜5％。经循环酶法检测，糖尿病组、高血压组、冠心病组和健康组观察对象血清同型半胱氨酸浓度分别为8．87±1．21（μmoL/L）、10．21±1．02（μmoL/L）、14．52±1．31和8．11±0．14（μmoL/L），比荧光偏振免疫法测得的结果无明显差别，比较差异均无统计学意义（ P＞0．05）。结论：循环酶法利用全自动生化分析仪测定血清同型半胱氨酸具有较好的精密度和回收率，可获得可靠准确的结果，且成本较低，操作较简便。

摘要： 目的 比较酶扩大免疫法(EMIT)和荧光偏振免疫法(FPIA)监测环孢素A(CsA)血药浓度的相关性.方法 收集肾移植患者服药后达稳态的谷浓度血样,分别用EMIT法和FPIA法进行测定,考察两种方法测定结果的相关程度.结果 两种方法测定结果高度相关,差异有显著性.结论 EMIT法和 FPIA法测定CsA血药浓度结果差异具有统计学意义,在CsA治疗药物监测中应予以关注并作相应调整.

摘要： 目的：研究环孢素A、丙戊酸的血药浓度在化学发光微粒子法、荧光偏振法两种方法下的相关性.rn 方法：将同一标本在同一天内采用两种方法进行测定,进行相关性统计分析并给出线性回归方程Y=bX+a,以AxSYM测定结果为X,以ARCHITECT i1000测定结果为Y.rn 结果：两种测定方法下环孢素A和丙戊酸的线性回归方程分别为：Y=1.187X-16.077(r=0.985,n=122),Y=0.998X+4.077(r=0.976,n=54).环孢素A和丙戊酸血药浓度在两种方法下的测定值相比,环孢素A为1.09±0.17,丙戊酸为1.08±0.10.rn 结论：环孢素A和丙戊酸血药浓度在化学发光微粒子法、荧光偏振免疫法两种测定方法下相关性良好,化学发光微粒子法可以代替荧光偏振免疫法进行测定环孢素A和丙戊酸血药浓度.

摘要： 治疗药物的血药浓度监测(TDM)是采用荧光偏振免疫法(FPIA)方法，该法是荧光偏振及利用抗原(标准物，带有荧光物质)与半抗原(待测药物)和抗体竞争结合的免疫反应原理，参照偏振强弱，检测游离荧光物质的浓度，绘制标准曲线，以达到检测治疗药物血药浓度检测的目的。药物的疗效并不取决于剂量，而是取决于血药浓度，药物从吸收分布代谢排泄这一过程中，将会受到多种因素的影响，患者即使服用相同剂量的药物，血药浓度也会不一致，药效也不一样。因此以药代动力学原理为指导的血药浓度检测，分析测定药物在血液中的浓度，用以评价疗效或确定给药方案，使给药方案个体化，以提高药物治疗水平，达到临床安全、有效、合理用药的目的。

摘要： 目的:探讨儿科治疗药物监测技术的研究进展。rn 方法:通过查阅国内外近期相关文献，考察儿科常见几种治疗药物监测技术的最新进展，并结合本院的研究经验提出意见。rn 结果:目前国内儿科治疗药物监测主要采用荧光偏振免疫法和高效液相色谱法测定血浆或血清中药物总浓度。rn 结论:应加强游离型药物浓度监测技术的研究和加快行业标准的制订，以更好地服务于临床。

摘要： 环抱素(cyclosporine，CsA)是一种强效免疫抑制剂，广泛应用于临床器官移植及自身免疫性疾病治疗。由于CsA治疗窗较窄，个体差异大，易产生肝肾毒性等严重不良反应，必须监测其血药浓度，为临床制定个体化给药方案提供参考依据，而准确的血药浓度是合理给药方案的前提。

摘要： 丙戊酸镁是临床常用的抗癫痈药物，其测定方法主要为气相色谱(GC)法，高效液相色谱(HPLC)法和荧光偏振免疫法(FPLA)法等，为了使测试时间大大缩短，提高分析工作效率，本实验在文献报道的基础上进一步研究，通过优化色谱和质谱条件，建立了一种简单、高效和灵敏的HPLC-MS/MS测定血浆中丙戊酸镁的方法，并应用于大鼠血浆中丙戊酸镁的药代动力学研究。

摘要： 生物医学光学是近年来受到国际光学界和生物医学界广泛关注的研究热点,荧光技术已经成为生命科学研究的重要手段之一。荧光偏振免疫法是基于荧光偏振及免疫学原理发展起来的分析方法。本项目研究一种基于医学、生物学、光学实验于一体的演示实验教学系统。系统以简单的实验步骤和通俗易懂的实验原理,演示应用于生物医学检测的技术。

摘要： 目的：探讨癫痫患儿使用丙戊酸钠缓释片时的血药浓度监测。rn 方法：采用荧光偏振免疫法(FPIA)，对299例次服用德巴金缓释片(Depakine Chrono，DK)患儿、166例次服用丙戊酸钠糖浆(Sodium Valproate Syrup，VPA Syr)患儿进行血药浓度监测。 rn 结果：DK qd的血药谷浓度(Cmin)为74.13±20.33 mg/L(n=133)，与DK qn服用，次日晨取血测定的血药浓度96.10±25.27 mg/L(n=29)相比有显著性差异(P<0.01)。DK q12h的Cmin为97.26±23.28 mg/L(n=137)，明显高于DKqd(P<0.01)。VPA Syr q12h的Cmin为58.14±23.69 mg/L(n=166)，明显低于DK qd(P<0.01)。 rn 结论：临床评价丙戊酸钠缓释片的监测结果时，同时应考虑给药次数以及取血时间的影响。

摘要： 目的: 探讨循环酶法(Enzvmatic cycling assay)测定血清同型半胱氨酸水平的临床应用价值.rn 方法: 将循环酶方法与荧光偏振免疫法测定结果进行比较；首先利用高低值质控血清评价循环酶方法测定同型半胱氨酸的稳定性,并收集在我院住院且明确诊断的20例糖尿病患者、20例高血压患者、20例冠心病患者、20例心梗脑梗患者、20例慢性肾功能不全患者及20例健康查体者的血清标本；另收集53例不同疾病患者血清标本,利用循环酶法与荧光偏振免疫法(FPIA)同时平行测定血清同型半胱氨酸水平.rn 结果: 本方法的批内变异系数为3.99%与4.21%,批间变异系数分别为4.79%与4.58%.本法与荧光偏振免疫法相关性良好(r=0.994,n=53).循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸水平分别为健康人(8.15±1.89),糖尿病组(8.88±1.36),高血压组(10.664±1.60),冠心病组(14.024±3.42),心梗或脑梗组(14.45±3.83),慢性肾功能不全组(15.21±3.50),结果与FPIA法测定值没有统计学差异.rn 结论: 循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸结果与临床上常规应用的FPIA法结果一致,但循环酶法可利用全自动生化分析仪快速、简便测定Hcy.

摘要： 本发明涉及一种通过使用合成校正粒子的免疫荧光法自动测定免疫荧光灶点的方法，以及实施该方法的系统和试剂盒。在一个优选实施方案中，该方法特征在于免疫荧光灶点是γH2Ax灶点。

摘要： 一种使用荧光标记物质的荧光偏振免疫分析，其中用荧光染料标记单结构域抗体。使用通过用荧光染料标记对目标物质具有结合能力的单结构域抗体(如VHH抗体或vNAR抗体)而获得的荧光标记物质。所述荧光偏振免疫分析包括用于将荧光标记物质结合到目标物质的结合步骤；以及用于测量与目标物质结合的荧光标记物质的荧光偏振的变化的测量步骤。

摘要： 本发明公开了一种基于AMF为荧光素标记物的双酚A荧光偏振免疫分析检测方法，旨在提供一种具有较好的特异性和灵敏度的检测方法，该方法是利用双酚酸BVA作为半抗原偶联AMF荧光素合成得到荧光标记物，并以双酚A为标准品，用双酚A单克隆抗体作为抗体，建立双酚A的荧光偏振免疫分析检测方法该方法；属于荧光偏振免疫检测技术领域。

摘要： 本发明公开了一种荧光素标记物及基于荧光偏振的有机磷农药均相多残留免疫检测方法。本发明通过将待测样品、荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体混合，荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体结合后产生可检测的荧光偏振值，测量混合物的荧光偏振值，通过一系列已知浓度的有机磷农药标准物建立的标准曲线，利用标准曲线计算待测样品中有机磷农药的浓度。本发明方法样品前处理简单，反应过程中无需洗涤分离，检测时间低于3～5min，操作方便；可以同时测定20种有机磷农药，灵敏度在0.003～1.0mg/kg之间；采用96微孔板可以同时测定42个样品（每个样品2次平行），是一种快速、简便、高灵敏度的有机磷农药高通量检测方法。

摘要： 本发明提供了一种用于免疫活性肽免疫活性检测的荧光偏振方法，包括一个确定流感病毒荧光标记物工作浓度的步骤；一个确定HLA‑DRB

摘要： 本发明涉及一种通过使用合成校正粒子的免疫荧光法自动测定免疫荧光灶点的方法，以及实施该方法的系统和试剂盒。在一个优选实施方案中，该方法特征在于免疫荧光灶点是γH2Ax灶点。

摘要： 本发明提供一种用于检测多粘菌素的荧光偏振免疫分析方法。所述方法包括：1)配制不同浓度的多粘菌素标准品溶液，将多粘菌素标准品溶液分别与荧光标记物溶液和多粘菌素单克隆抗体溶液混合孵育，进行竞争反应，测定所得体系的荧光偏振值；以测定的荧光偏振值为纵坐标，多粘菌素标准品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线；以待测样品代替步骤1)中的多粘菌素标准品，按照步骤1)中的方法，测定待测样品的荧光偏振值，根据步骤1)中的标准曲线，计算出待测样品中多粘菌素的浓度。本发明提供的多粘菌素荧光偏振免疫分析技术是一种无需分离和洗涤的均相免疫方法，具有高通量、便捷和可靠等优点。

摘要： 本发明涉及一种测定抗体浓度的荧光偏振免疫分析方法，所述方法包括以下步骤：1).制备带有荧光基团的抗体结合蛋白作为抗体荧光追踪分子；2).将所述荧光追踪分子与待测样品溶液混合并孵育；3).孵育完成后，用带有荧光偏振检测功能的酶标仪检测孵育后溶液的水平及垂直方向上光强，分别记为I

摘要： 本发明提供一种荧光偏振光路结构及免疫分析仪，其中荧光偏振光路结构包括：用于产生入射平行光的光源组件；第一偏振光路组件，设置在所述光源组件的出射光路上，用于将入射平行光转换成偏振光并将偏振光照射在测试样品上；接收光路组件，设置在所述测试样品的一侧，用于接收来自被照射的所述测试样品的发射荧光并将反射荧光进行反射，使得发射荧光的方向与入射平行光的方向相反；第二偏振光路组件，设置在所述接收光路组件的出射光路上，用于将发射荧光转换成出射聚焦光；光学检测器，设置在所述第二偏振光路组件的出射光路上，用于接收出射聚焦光。本发明结构紧凑，减少占用空间，能增强发射荧光的荧光强度，减少由于杂散光在光路中的影响因素。

摘要： 提供了一种用于荧光偏振免疫分析的支撑件、试剂盒及其方法，所述支撑件包括用于样品中的目标物质的荧光偏振免疫分析的反应部分，所述反应部分装载有具备与目标物质的结合能力的抗体和采用荧光染料来标记所述目标物质的荧光标记物质。