荚膜

摘要： 为确定引起新疆石河子及周边地区因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊细菌性病原及其生物学特性,本研究收集2018年2月～2020年1月期间7个规模化养殖场13份因呼吸道感染致死的多胎萨福克羊的肺、肝、脾、淋巴组织样品,采用常规细菌分离方法结合kmt基因检测方法分离鉴定出6株(46.15％)多杀性巴氏杆菌(Pm);利用多重PCR检测分离株荚膜血清分型、脂多糖分型,结果显示荚膜血清D型2株(33.3％)、A型1株(16.7％)、未定型3株(50％);脂多糖L3型3株(50％)、L6型2株(33.3％)、未定型1株(16.7％);利用PCR方法检测分离株25种毒力基因、11种耐药基因,结果显示6株Pm毒力基因exbB、exbD、tonB、ompA、oma87、psl、sodC、plpB、fimA、fur、sodA检出率最高为 100％,未检测到hsf1、hsf2、tbpA、plpE、ptfA、tadD、toxA基因,其中携带毒力相关基因 pmHAS、hgbB、pfhA、ompH、nanB、nanH、hgbA的菌株数分别为5株(83.3％)、4株(66.7％)、4株(66.7％)、4株(66.7％)、4株(66.7％)、3株(50％)、2株(33.3％).利用K-B纸片法检测分离菌株的耐药表型,结果显示所有菌株均对复方新诺明(磺胺类)耐药,对头孢菌素类药物中介;大部分菌株对青霉素、阿莫西林等19种抗生素敏感.6株Pm均携带喹诺酮类耐药相关基因blaTEM,未检测到其他耐药相关基因.分离菌株对磺胺类药物耐药性较强,但不携带磺胺类耐药基因,表明分离株的耐药性是由多种耐药机制共同作用的结果.本研究结果为Pm致萨福克羊呼吸道感染的流行病学和临床治疗提供参考依据.

摘要： 目的:研究宿主肠道氧化条件对肺炎克雷伯菌的影响及该菌响应氧化胁迫的机制.方法:通过体外模拟肠道氧化条件,将肺炎克雷伯菌接种在含不同浓度梯度H2O2的液体培养基中进行氧化胁迫处理;测定细菌的生长曲线、检测细菌的关键毒力因子-荚膜与生物膜的生成量.并进一步地利用qRT-PCR荧光定量分析荚膜与生物膜表型相关基因的表达差异.结果:在氧化因子胁迫下,当处于较低浓度范围(＜ 1.56 mmol/L)时,肺炎克雷伯菌早期生长受到抑制作用,中后期逐渐适应胁迫、其生长未受明显影响.此外,肺炎克雷伯菌在氧化胁迫条件下荚膜生成量明显降低,呈剂量依赖效应;但在一定浓度范围氧化因子作用下,其生物膜的形成量增加.分子检测表明荚膜结构基因magA表达量明显下调,生物膜相关基因YbaJ出现显著的上调表达.结论:肺炎克雷伯菌通过上调YbaJ基因的表达促进毒力因子生物膜形成以此响应氧化因子胁迫,本研究可为食源性肺炎克雷伯菌与宿主肠道因子互作及致病机制研究提供新思路.

摘要： 为确定新疆北疆部分地区疑似病例中分离的牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)流行的血清型、ST型及毒力相关基因的分布情况,本研究以分离的17株牛源Pm为研究对象,采用荚膜多重PCR分型法、脂多糖多重PCR分型法(LPS-mPCR)、多位点序列分型法(MLST)及PCR方法检测17株Pm分离株的荚膜型、脂多糖型、MLST型及7类共25个毒力相关基因的分布情况.结果 显示,13株Pm的荚膜脂多糖型为A∶L3型,ST型均为ST1型,4株Pm荚膜脂多糖型为B∶L2型,ST型均为ST44;17株Pm毒力相关基因(exbB、exbD、fimA、fur、hgbA、hsf2、nanB、oma87、ompA、ompH、plpB、psl、ptfA、sodA、sodC、tonB和tbpA)的检出率高达100％,toxA基因的检出率为0.结果 表明,从新疆北疆部分地区规模化牛场疑似病例中分离的Pm主要血清型为A∶L3∶ST1型.

摘要： 目的:探讨荚膜厚度不同的鲍曼不动杆菌激活鼠巨噬细胞Raw 264.7炎症复合体能力的差异.方法:采用刚果红染色法观察鲍曼不动杆菌荚膜,筛选出荚膜厚度差异显著的两株菌株.将两株菌分别感染Raw 264.7,以实时定量PCR法分析感染6 h的细胞NOD样受体家族3(NOD-like receptors,NLRP3)、Caspase-1和IL-1β基因表达量;流式细胞术分析感染1、3和6h的细胞活性氧表达量.结果:刚果红染色可以清晰地观察到鲍曼不动杆菌周围一圈不着色的荚膜,选择出荚膜厚度差异显著的两株鲍曼不动杆菌用于感染细胞.不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌感染均可刺激Raw 264.7细胞NLRP3、Caspase-1和IL-1βmRNA表达上调,其中厚荚膜菌株诱导细胞NLRP3和IL-1βmRNA表达能力显著高于薄荚膜菌株(P<0.05);不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌感染3 h和6 h时,细胞活性氧表达量均显著高于对照组(P<0.05),且厚荚膜菌株诱导活性氧表达能力显著高于薄荚膜菌株(P<0.05).结论:不同荚膜厚度的鲍曼不动杆菌活化鼠巨噬细胞炎症复合体能力存在差异,厚荚膜菌株诱导炎症复合体活化的能力更强.

摘要： 为确定2018年7-11月西藏那曲牦牛发病的死亡原因,以安多县、班戈县、聂荣县和色尼区的26头病死牦牛内脏组织为研究对象,利用常规细菌培养法和特异性基因PCR方法,对分离菌进行鉴定,并对其荚膜血清类型、毒力基因以及致病性进行研究.结果 表明:纯化得到13株分离菌,分离菌的菌落特征、菌体形态、生化鉴定结果均与多杀巴氏杆菌相符,并扩增出多杀巴氏杆菌特异性基因Kmt-1和16S rDNA,菌株Pm-1和Pm-2的Kmt-1基因序列与印度、伊朗、巴基斯坦、俄罗斯的牛源多杀巴氏杆菌的同源性均达98％o以上;13株菌的荚膜分型鉴定结果均为B型;对分离菌进行已知的23种毒力基因检测结果显示,此次分离到的13株菌毒力基因的数量在16～19种,ptfA、fimA等16种毒力基因检出率为100％,tadD、toxA等4种毒力基因检出率为0,且每个地区分离株毒力基因的分布相同;致病性试验中对照组小鼠全部存活,处理组小鼠死亡时间为24～72 h,死亡率为100％,病变主要表现为脾脏、肺脏、肝脏、心脏出血坏死.导致此次那曲地区牦牛发病死亡的原因为荚膜B型多杀巴氏杆菌病,本研究可为该病的防治提供依据,也为下一步预防疫苗的研究提供了优势菌株.

摘要： 细菌对传统抗生素的耐药程度十分严重,寻找克服耐药性的新型抗菌药物已成为当务之急.抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是当下较有前景的抗菌药物之一.虽然通常认为,AMPs优先攻击细胞膜的特点使其不会引起广泛的耐药性,但其对特定靶标的识别能力仍为基因突变和细菌耐药性的产生提供了可能.此外,一些细菌还显示出了抵御宿主AMPs的杀伤作用并与宿主细胞共存的能力,相应的细菌防御机制也使其对治疗性AMPs产生抗性,这种交叉抗性近年来也备受关注.这些耐药现象的发现均对AMPs的开发提出了新挑战.本综述就细菌对AMPs耐药的分子机制进行了研究进展的总结,并且对治疗性AMPs与宿主防御肽交叉抗性的相关机制研究进行了归纳,以期寻求新的对抗耐药性的策略.

摘要： 新型隐球菌是一种具有荚膜的重要临床致病真菌.本课题组在前期工作中发现CNAG_01032基因可能引起不同来源菌株的表型差异,本研究在此基础上以新型隐球菌临床来源菌株IFM56800(C1)、IFM56769 (C2)为背景构建CNAG_01032基因敲除突变体,并检测突变株和野生型菌株经典毒力因子变化情况;使用API 20C AUX测试系统测试突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况;使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测.结果 显示:成功构建以临床株C1、C2为背景的CNAG-01032基因敲除突变株;突变株在37°C生长、黑色素产生与野生型菌株无显著差异,但荚膜厚度分别比C1、C2减少16.4％、18.2％;两基因敲除菌株均不能分解利用纤维二糖;致病性与野生型菌株无显著差异.新型隐球菌CNAG_01032基因可能参与临床来源菌株IFM56800、IFM56769的荚膜合成和纤维二糖的代谢.

摘要： 荚膜是某些细菌的特殊结构,具有黏附、抗吞噬作用,与细菌的致病性有关,在细菌的鉴定中有重要意义.猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是猪的重要致病菌,可以引起脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎、肺炎等疾病,也可导致生猪从业人员感染和死亡.根据其荚膜抗原的不同，猪链球菌分为33个血清型。钌红可作为电镜组织学用着色剂，与戊二醛一同使用进行黏多糖染色，与四氧化锇一同使用增加对比度，清晰标记细菌荚膜超微结构。本研究探讨钌红染色方法是否能用于观察猪链球菌荚膜的超微结构。电镜下猪链球菌呈圆形或卵圆形，单个或呈链状排列。细胞内核质呈丝状，核糖体散在分布。细胞壁完整，与细胞质膜结合紧密。细胞表面包被一层荚膜，荚膜厚而肥大，呈网状，电子致密度高。大多数细菌的荚膜是多糖，钌红是多聚阳离子染料，具有与多聚阳离子聚合物如酸性多糖反应的特异性。Luft首次把钌红用于电镜下观察多聚糖结构。电镜超薄切片所使用的常规固定方法不能有效地保存细菌的荚膜成分，这是因为荚膜成分高度亲水，在脱水和包埋过程中其结构会发生崩解。在戊二醛固定过程加入赖氨酸能改善对细菌荚膜的保护。赖氨酸与戊二醛反应时能形成大的聚合物。大多数胺在生理pH下带正电荷，这样的集合物能够与细菌荚膜内带负电的点形成交联。不同长度的横桥提供了非常有效的交联，因此在随后的脱水过程中提高荚膜成分的稳定性。结果显示，使用钌红染色和戊二醛-赖氨酸固定方法适于观察猪链球菌荚膜结构，为研究猪链球菌的致病机制提供了技术基础。

摘要： 鸭疫里默氏杆菌感染是危害养鸭业的重要疫病之一.本研究用盐浸法提取了Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌的荚膜,其免疫原性测定结果表明:用荚膜粗提物免疫雏鸭可得到很好的免疫保护效果(8/10).同时进行了鸭疫里默氏杆菌荚膜与各常规佐剂疫苗的免疫效力比较,免疫保护效果依次为:荚膜油乳剂苗、油乳剂灭活苗、蜂胶灭活苗、铝胶RA灭活苗、无佐剂RA灭活苗.

摘要： 炭疽杆菌的荚膜是一种侵袭因子,在体内抵抗细胞的吞噬作用,在引起感染的过程中起重要作用.一旦与致死毒素和水肿毒素协同作用,荚膜就使强毒炭疽杆菌在感染宿主体内实际上无限制地生长.炭疽杆菌荚膜在体外能掩盖噬菌体受体,防止噬菌体的裂解作用.

摘要： 目的：阐明英膜唾液酸缺失对2型猪链球菌引起脑膜炎的影响,为研究2型猪链球菌致脑膜炎机制奠定基础。方法：以HBME为宿主靶细胞,通过涂板计数的方法检测野生株和突变株对HBMEC的黏附、入侵；从HBMEC细胞系系统、小鼠及人的全血细胞水平,运用ELISA法检测实验菌株刺激后细胞炎性因子的分泌水平。结果：与野生株相比较,突变株对HBMEC的黏附能力增强,突变株对宿主细胞的黏附能力显著增加,但实验菌株入侵HBMEC的效率均较低下；细菌/HBMEC相互作用不同时间点后,实验菌株刺激IL-6分泌的水平无显著差异；小鼠及人的全血细胞刺激显示相互作用8h后,突变株组体外刺激IL-6分泌的水平显著提高。结论：英膜唾液酸是2型猪链球菌穿透血脑屏障手致脑膜炎的重要毒力因子,在致脑膜炎过程中的有着至关重要的作用。

摘要： 扬子化工厂循环水系统泄漏特定的有机介质,从而使系统中产生了大量难以杀灭的带有荚膜的特种粘泥菌,严重时直接影响了生产的正常运行.针对这一情况,研制开发了一种新型微生物生长调节剂(WBEM),较好地控制了粘泥菌的生长繁殖,达到了理想的处理效果.WBEM的成功应用对发生类似情况的厂家也具有很好的指导意义及借鉴价值.

摘要： 本发明涉及可以特异性地杀死产气荚膜梭菌细胞的肌尾噬菌体科噬菌体Clo‑PEP‑1，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12664BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗产气荚膜梭菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了荚膜型和非荚膜型流感嗜血杆菌的RPA‑LFS检测引物探针组合及其应用；本发明的引物探针组合具有很好的特异性，对其他的菌株均无交叉扩增，能检测1CFU/ul的流感嗜血杆菌，并且检测灵敏度不受其他病原菌的干扰。本研究与双重PCR检测的结果一致，分别从209份样本中检出203份流感嗜血杆菌和63份荚膜型流感嗜血杆菌，检出率分别为97.1％和63.2％。RPA‑LFS与双重PCR具有相同的实际应用性。本研究成功建立了基于Omp6和BexA基因检测荚膜型和非荚膜型流感嗜血杆菌的RPA‑LFS检测方法，为后续快速检测流感嗜血杆菌提供了方案，确保了患者的及时诊断和抗生素治疗。

摘要： 本发明提供一种脆弱拟杆菌两性离子荚膜多糖或/和改性的两性离子荚膜多糖的新应用。主要涉及脆弱拟杆菌的荚膜多糖提取物在制备抗焦虑症的药物中的应用，所述脆弱拟杆菌的保藏编号为CGMCC NO.10685，所述荚膜多糖提取物为荚膜多糖A的提取物。与传统技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明的发明人发现，脆弱拟杆菌ZY312的荚膜多糖A提取物对焦虑症显效，并且该效果通过在大鼠模型上进行高架十字迷宫行为学测定和旷场实验得以验证。

摘要： 本发明公开一种牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型荚膜多糖疫苗及其制备方法，属于兽用疫苗技术领域。提供的荚膜多糖疫苗由牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型荚膜多糖和由包括精制司本‑80和精制吐温‑80的原料制成的疫苗佐剂配制而成，该荚膜多糖疫苗能够有效防控A型Pm引起的牛纤维素性化脓性肺炎，并且具有良好的安全性，可以用于为健康易感犊牛、健康孕期母牛以及健康产奶奶牛提供安全有效的防护作用。

摘要： 本发明提供隐球菌荚膜多糖及其制备方法，所述制备方法包括以下步骤：S1：对灭菌后的隐球菌的菌液离心后保留第一上清液；S2：在所述第一上清液中加入醋酸钙和冰醋酸得到第一混合液；S3：在所述第一混合液中加入无水乙醇，离心弃去上清，得到隐球菌荚膜多糖粗提物；S4：在所述隐球菌荚膜多糖粗提物中依次加入去离子水和氯化钠，得到第二混合液；S5：在所述第二混合液中加入十六烷基三甲基溴化铵，得到第三混合液，将所述第三混合液离心后得到第一沉淀；S6：在所述第一沉淀中依次加入氯化钠溶液和无水乙醇后离心并弃去上清，得到隐球菌荚膜多糖纯品。本发明能降低纯化制备成本，简化制备步骤和提高制备效率，且隐球菌荚膜多糖纯度高。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离的长尾病毒科噬菌体Clo‑PEP‑2(登录号：KCTC 13185BP)，所述长尾病毒科噬菌体Clo‑PEP‑2具有杀死产气荚膜梭菌的能力并且具有以SEQ ID NO:1表示的基因组，并且涉及一种使用含有长尾病毒科噬菌体Clo‑PEP‑2作为活性成分的组合物来预防或治疗产气荚膜梭菌导致的疾病方法。

摘要： 本发明涉及可以特异性地杀死产气荚膜梭菌细胞的肌尾噬菌体科噬菌体Clo‑PEP‑1，其具有由SEQ ID NO：1的核苷酸序列表示的基因组（登记号：KCTC 12664BP），以及使用包含所述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和治疗产气荚膜梭菌感染的方法。

摘要： 本发明公开了纯化荚膜多糖的方法，包括：将荚膜细菌发酵液离心，收集上清液，超滤浓缩，乙醇沉淀，收集上清液；乙醇沉淀，收集沉淀，注射水复溶；加入蛋白酶酶解，超滤蛋白酶解液；加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.2％-0.3％，离心，收集上清液；加入十六烷基三甲基溴化铵和NaCl，该NaCl的质量百分比终浓度为0.1％-0.15％，离心，收集沉淀，溶解沉淀；加入乙醇沉淀，收集沉淀，注射水复溶；超滤，膜过滤。本发明的纯化方法荚膜多糖回收率高，蛋白质及核酸含量低，去除了传统提纯中利用有毒有机试剂的步骤，简化了纯化步骤，节省了时间和成本。

摘要： 本发明公开了一种分别定量细菌荚膜多糖和脂多糖的方法，属于生物技术领域。该方法包括利用物理方法将细菌样品的菌体外膜上的脂多糖释放出来，离心分别收集第一上清液和第一沉淀；将第一上清液去除蛋白和脂质杂质后，加入沉淀剂，得到脂多糖干粉，复溶得到脂多糖溶液，利用硫酸‑苯酚法定量脂多糖；将第一沉淀用清洗液洗涤后加入表面活性剂处理，离心收集第二上清液；将第二上清液去除蛋白和脂质杂质后，加入沉淀剂，得到荚膜多糖干粉；将荚膜多糖干粉加入低浓度盐酸复溶，室温孵育后，得到荚膜多糖溶液，利用糖醛酸内酯测定法定量荚膜多糖。该方法实现在不裂解细菌菌体的情况下同时分离并定量脂多糖和荚膜多糖，提高了纯度和准确度。

摘要： 本发明公开了一种产气荚膜梭菌抑制剂及其应用，属于生物技术领域。具体而言，本发明提供了鹤草芽在制备抑制产气荚膜梭菌的试剂中的应用。本发明还提供了一种鹤草芽提取物以及包含所述提取物的组合物。本发明具有如下的有益效果：(1)鹤草芽是一味中药，使用鹤草芽或其提取物作为抑制产气荚膜梭菌的试剂具有安全、毒副作用小的优点；(2)鹤草芽具有廉价易得的优势，其获取更为便利，价格更为低廉，更适用于大面积的推广使用；(3)鹤草芽提取物及鹤草酚对于产气荚膜梭菌的抑制效果好、有效浓度低，可单独用于抑制产气荚膜梭菌，也可以与其他试剂一起联用，为产气荚膜梭菌的防治提供了新的策略。