花药培养

摘要： 研究龙船花(Ixora chinensis Lam)花药诱导愈伤组织的培养条件,探索不同浓度植物生长调节剂以及低温预处理对诱导龙船花花药愈伤组织的影响.以“杏黄色龙船花”(I.coccinea cv“Apricot Gold”)和“宫粉龙船花”(“Ixora×westii”)品种为材料,分别将其单核期花药在含有不同植物生长调节剂2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-糖基氨基嘌呤(KT)浓度组合的培养基中诱导愈伤,并统计诱导率;将花药在4°C低温分别预处理0、24、48、72 h,分别进行培养后统计龙船花花药愈伤诱导率.结果表明:仅“杏黄龙船花”花药在含有不同浓度2,4-D和KT的培养基中均能诱导出愈伤,其中含4 mgL^(-1)2,4-D和2 mgL^(-1) KT组合在花药培养40 d时诱导率最高,为73.06%;在诱导前将龙船花花药进行4°C低温预处理有利于愈伤组织的诱导形成,并且低温预处理24 h后诱导愈伤效果最好,诱导率最高为75%.

摘要： 以栽培种花生为材料,开展花生单倍体培养的前沿性探索,包括离体花药诱导形成愈伤组织、愈伤组织分化形成幼芽、再生苗培养、再生植株倍性鉴定和嫁接移植等研究。通过比较外植体灭菌时间、诱导培养基、分化培养基、再生培养基和再生植株创制培养条件等试验,筛选出适合花生花药培养的方法:1%NaClO消毒灭菌9 min,愈伤组织的诱导培养采用B5N1、B3N1培养基,再分化培养采用B5N1-2培养基,再生苗培养采用SG培养基。本研究获得1株花药培养的再生植株,编号为15B8-8。荧光原位杂交技术(FISH)鉴定结果表明,该植株具有20条染色体,其中9条为A染色体、11条为B染色体,是第一例来自栽培种花生花药培养的单倍体植株;研究还表明,汕油52花生品种具有较强的花药培养力,有潜力作为花生花药培养的“桥梁品种”。

摘要： 为获得草莓品种‘小白’的脱毒原原种苗并进行组培快繁,本试验研究了不同低温预处理时间、激素种类和配比对草莓花药愈伤组织诱导、不同激素种类和配比对草莓花药愈伤组织分化以及对草莓不定芽增殖和生根的影响。结果表明,‘小白’草莓花药在4°C低温预处理24 h、MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+IAA 4.0 mg/L培养基中诱导率最高,达到75.33%;最佳愈伤组织分化和再生芽增殖培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.2 mg/L+GA 0.1 mg/L,分化率和增值系数分别达到18.67%,3.21;最佳生根培养基为1/2MS,生根率达到94.67%。建立了‘小白’草莓花药培养技术体系并获得了脱毒原原种苗。

摘要： 研究使用陕西省安康市主载马铃薯品种“秦芋32号”为材料,研究外植体消毒方式、培养基附加物、培养方式等对花药膨大以及褐化的影响。结果表明,选择花药瓣药比0.75~1.0,花药黄绿色,此时处于单核靠边期的花粉概率较高,适合用作花药组织培养,酒精+升汞消毒能有效的减轻秦芋32号花药的褐化,培养基中加入适量肌醇,有助于提高秦芋32号花药的膨大率,并降低花药褐化率,培养基中添加适量甘氨酸,对促进花药膨大有显著作用,但也加剧了花药的褐化现象,可结合酒精+升汞消毒降低褐化影响,同时,光照培养能有效促进秦芋32号花药的膨大。综合以上研究:选择瓣药比0.75~1.0的黄绿色花药,外植体采用酒精+升汞消毒,培养基添加5~10 mg/L的肌醇,50mg/L的甘氨酸,愈伤组织选择光照培养为秦芋32号花药培养的适宜条件。

摘要： 文章简述了国内外观赏植物花药培养的研究进展,分析总结了影响花药培养的因素,如供体植物基因型、花粉发育时期、预处理、基本培养基及附加成分、培养条件等,提出了花药培养过程中的技术问题,并阐述了花药培养技术的未来发展方向。

摘要： 为了筛选到花药培养效果好的水稻材料,选取常规籼稻、籼粳杂交稻、籼型杂交稻和粳型杂交稻4种不同类型的水稻材料进行花药培养,比较它们在花药培养过程中的愈伤组织诱导率和花药培养效果,建立高效花药培养再生体系。结果表明,禾香1号和福稻99愈伤组织诱导率较高,分别为3.01%和1.55%,可作为水稻花培育种的优良亲本。以玉晶91为亲本配制杂交组合并进行花药培养,结果表明玉晶91与某些亲本间具有较好的花药培养配合力和杂种优势,在水稻花培育种中具有一定的潜在利用价值。粳型材料中,甬优1526、组合圣稻18-15//春江041/武运粳24、中浙粳18/鄂香2号和香1号/17J42均不适合作为水稻花药培养育种的材料。甬优2640的花药培养愈伤组织诱导率和绿苗分化率均较高,可以在水稻花培育种和DH群体创建中加以利用。这对创制新的种质资源、构建DH群体和培育新品种具有十分重要的意义。

摘要： 为加快抗疫病加工型辣椒细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)恢复系的创制,该试验以单生、长果自交系481-4-10为母本,以抗疫病的恢复系939-1和1021(1)-1为父本配制杂交组合,采用花药培养技术将抗疫病恢复系的Rf基因和抗疫病基因导入单生、长果自交系中,并利用分子标记辅助选择(molecular marker-assisted selection,MAS)技术鉴定DH系(Double Haploid line)的Rf基因以及抗病性,进一步用室内苗期抗性鉴定的方法验证MAS筛选的含Rf DH系对疫病的抗性。结果表明:(1)花药培养的供体亲本(481-4-10×939-1)F 1诱导出22个胚状体,成苗后经倍性鉴定获得11个花培DH系;而由供体亲本[481-4-10×1021(1)-1]F 1获得9个DH系。(2)分子标记CRF-SCAR对花培DH系进行分子标记辅助选择验证结果表明,来自供体(481-4-10×939-1)F 1的DH系中有7个可扩增出870 bp的特异条带,占63.6%;而供体[481-4-10×1021(1)-1]F 1获得的DH系中则有8个能扩增出870 bp的特异条带,占88.9%。(3)分子标记FQ01/RQ01对DH系进行分子标记辅助选择筛选结果发现,来自供体(481-4-10×939-1)F 1的DH系有5个能扩增出717 bp的特异条带,占45.5%;而来自供体[481-4-10×1021(1)-1]F 1的DH系有4个可扩增出717 bp的特异条带,占44.4%。(4)MAS技术初步筛选到7个携带Rf的抗疫病DH系,分别命名为‘渝辣选3-2/3-3/3-5/7-1/7-5/7-6/7-9’;苗期抗性鉴定结果显示,7个DH系中5个DH系抗疫病,2个中抗疫病;农艺性状调查和测交实验表明,‘渝辣选3-2’和‘渝辣选7-1’是单生朝天椒、果实较长,味辣,均为CMS恢复系。该研究创制的2个DH系为利用辣椒CMS三系配套选育抗病新品种奠定了基础。

摘要： 以"杰兔""灿烂"和"粉蓝"3个兔眼蓝莓品种的花药为试材,采用正交试验设计,研究了植物生长调节剂和不同品种对蓝莓花药愈伤组织诱导和增殖效果的影响,以期为开展蓝莓花药培养创新种质提供科学依据.结果表明,6-BA、2,4-D和NAA的浓度变化对蓝莓花药愈伤组织诱导有明显影响,其中6-BA影响最大;MS+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+0.4 mg/L NAA对"灿烂"花药愈伤组织诱导率最高,出愈率为35.67％.同时,将参试的3个品种的花药分别接种在上述培养基中,品种间的出愈率差异显著,依次分别为"杰兔"46.50％、"灿烂"35.70％和"粉蓝"29.50％.此外,以"杰兔"初代培养诱导的愈伤组织继续增殖培养,该研究处理中最佳增殖培养基为MS+1.00 mg/L IAA+1.25 mg/L 6-BA+0.25 mg/L KT+1.00 mg/LNAA,其增殖系数为0.89.

摘要： 萱草属植物自交亲和性差,杂合度高,导致优良种质创新进程缓慢,基因组学研究开展困难.为创制含有单套遗传信息的单倍体植株,研究以28份萱草属植物为试验材料,通过醋酸洋红染色压片法观察不同长度花蕾内小孢子的发育时期;通过对不同基因型萱草属植物小孢子单核靠边期的花药进行培养,探究不同激素配比和蔗糖浓度对花药诱导愈伤的影响.结果表明,萱草属植物小孢子发育过程可分为6个时期,各发育时期与花蕾长度密切相关,其中,单核靠边期对应的花蕾长度分布区间为5.57～8.74 mm,筛选出4个适宜花药培养的基因型,分别为H0003、H0006、H0021、H0095,且花药培养最适蔗糖质量浓度为60 g/L,最适愈伤诱导激素配比为1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT.研究结果可为萱草属植物选择小孢子的适宜选材时期和最佳培养基提供直接证据,为小孢子培养单倍体植株奠定前期基础.

摘要： 以4个茄子品种的花药为外植体,研究茄子诱导花药愈伤组织及不定芽分化.结果表明,西安绿茄,豫艺2号主要分化黄白色紧密型愈伤,这种类型的愈伤分化不定芽较多,翠绿二号,黑仙子分化黄白色松散型愈伤.松散型和紧密型愈伤组织均能分化出绿苗,但松散型愈伤分化的绿苗畸形率高,容易生长缓慢,玻璃化.豫艺2号和西安绿茄适合在F1培养基上分化,而翠绿二号和黑仙子在F2上更适合.翠绿二号、西安绿茄、豫艺2号在第5周转分化时分化率最高,黑仙子在第4周转时分化率最高,分别为20％,107％,78％,20％.

摘要： 马铃薯单倍体培养能获得相对稳定的纯系,提高育种效率,创造新的种质.本研究以二倍体马铃薯野生种S.chacoense的花药为供试材料进行花药培养,初步建立了二倍体马铃薯的花药培养体系.研究结果表明,花药接种前,4°C低温预处理3d,可显著提高其愈伤组织诱导率.花药接种后,进行35±1°C热激处理18h,其愈伤组织诱导率最高.本实验条件下,接种了7366个花药组织,共诱导出565个愈伤组织,愈伤组织诱导率为7.70％;其中,有16个愈伤组织分化出29个再生植株,平均的愈伤组织分化率为2.8％.再生植株的检测结果表明,可能均来源于花药壁组织,并没有获得单倍体或纯合二倍体,需在后续的试验中进一步优化条件.

摘要： 本文阐述了草莓再生脱毒植株的发展现状及意义;综述影响花药培养效果的各种因素如基因型、基本培养基、外源激素、糖种类及浓度、培养基添加物等;分析了花药再生脱毒植株技术存在的问题并展望了前景.

摘要： 草莓花药培养组织起源是能否获得单倍体的关键.本试验通过对不同的激素和蔗糖浓度的花药培养过程的组织学观察,发现了在低细胞分裂素浓度(1.0mg/L)和蔗糖浓度(3％、6％)下,组织基本上都是起源于药隔和花丝断口处,而高的细胞分裂素浓度(3.0mg/L和5.0mg/L)和蔗糖浓度(9％、12％和15％)可以完全抑制花药壁和花丝断口处愈伤组织的产生,但对药隔愈伤组织的产生抑制不完全,在15％的蔗糖浓度下仍然有药隔细胞启动分化,但愈伤组织的增殖得到抑制.本试验虽然有花粉细胞启动分裂,然后分生组织化,但是没有观察到花粉组织产生.

摘要： 本文总结介绍了辣椒花药培养及再生植株研究概况及进展,并讨论了辣椒花药培养研究方面存在的问题和进一步研究方向.辣椒花药培养技术的研究虽然应用前景越来越广，研究起步也较早，但在走向应用的道路上还没有突破性的进展，分析原因，主要存在以下问题：影响因素对诱导效果的表观研究很多，而各影响因素对花药培养效果的影响机理研究较少，因此在诱导过程中，各影响因素的调整随机性很大，诱导效果的重复性很差，在实际应用中很难实现DH纯系的大量获得，也就很难获得有价值的育种材料的筛选群体，也就无法在育种上实现真正意义上的应用。花药培养胚状体发生分子水平的机理尚待研究，这也许是突破花药培养中诱导率低，出苗率低两大难题的技术关键。辣椒花药培养另一个需要研究者关注和解决的问题是由内生菌引起的培养过程中的大量污染问题，这也是目前造成诱导率低，工作效率差的关键问题之一。

摘要： 以茄子未成熟的花药为外植体进行组织培养技术研究,结果表明:适于进行茄子花药培养的形态特征为:花药颜色淡花色,未展开的花瓣高于萼洼处2-3mm,该时期多数处于单核靠边期;茄子花药培养愈伤组织的最适培养基为:MS+1mg/LKT+0.5mg/L2,4-D+0.25mg/L TDZ+8mg/LVc+3％糖+6g/L琼脂+8％椰乳,最佳分化培养基为MS+2mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.01μg/L BR+8mg/L Vc+2％糖+6g/L琼脂+6％椰乳,最佳生根培养基为(1/2-1/4)MS+0.1mg/L IBA+3％糖+5g/L活性炭+6g/L琼脂,最终发育成完整的植株.

摘要： MS、B5和改良Keller三种培养基中,改良Keller更适合根用芥菜的花药培养,不添加激素的处理出胚率更高;4°C预冷处理5天与3天在胚状体诱导率上存在显著差异,处理0d、1d、3d都有较好的出胚率,处理3d时,出胚率最高;32.5°C热激处理1d、2d与不进行热激处理之间在出胚诱导上存在显著差异,热激处理1d和2d之间没有显著差异,但热激处理两天出胚率稍高.

摘要： 苹果花药培养是单倍体育种的重要方法之一.花药培养产生胚状体,胚状体发生自然加倍后发芽生长,获得再生植株个体.此种再生植株的染色体来源于同一单倍体的加倍,所以也叫做双单倍体或者加倍单倍体.培育双单倍体材料对于育种和遗传分析有着极其重要的意义.据报道目前日本福岛县果树研究所从千秋花药培养得到的双单倍体植株,和欧洲的一个研究小组由'Alkmene'品种的花药培养得到的双单倍体植株已经开花结果.本研究为了培育获得苹果的双单倍体材料,用9个品种(祝、富士、红玉、王林、珊夏、千秋、红星、津轻、Wijcik)的花药进行培养,探讨不同品种以及培养基中生长调节剂的含量对胚状体形成的影像.试验结果表明，培养基中生长调节剂浓度不同显著影响胚状体的形成率，同时品种间对生长调节剂浓度要求也有差异。

摘要： 利用单倍体培养技术快速获得西瓜(Citrullus lanatus)纯系，缩短育种年限，提高育种效率是西瓜育种家和科研人员多年的心愿。然而由于其固有的生物学特性，西瓜花药再生培养研究一直未取得重要突破。本试验中探讨不同因素对西瓜花药愈伤组织诱导、分化及生根的影响，以期初步建立起西瓜花药培养的再生体系。

摘要： 大白菜是中国北方的重要蔬菜之一，根肿病是危害大白菜生产世界性病害，利用花药培养可以大大加速杭根肿病大白菜杂交育种工作的进程。对33份杭根肿病大白菜品种(品系)进行花药培养，有24个品种诱导出胚，品种诱导率为72．7％，以东方皇冠×C11的诱导率最高，为1．86胚/蕾。对大部分基因型来说，在培养基中添加0．4/L谷氨酞胺的诱导效果最好。研究还发现生长在温室中的供体植株更容易诱导出胚状体。变绿的子叶型胚转到B5+0．2 mg/L BA+0．1 mg/L NAA+0．1％活性炭的胚分化培养基上可诱导生芽。

摘要： 马铃薯具有很高的经济价值,已成为仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物.吉林省位于东北地区的中间地带,属高纬度地区,日照充足、昼夜温差大,适于马铃薯生长,为中国马铃薯种薯、食用鲜薯和淀粉加工用薯的优势种植区域之一.其中,具有高产、优质、抗病以及加工鲜食兼用等特性马铃薯品种的选育与推广,对促进农民增收和维护粮食安全发挥重要作用.马铃薯双单倍体培育体系可以为马铃薯种质创新提供新途径，实际研究过程中有诸多瓶颈问题有待于科研人员深入解决。

摘要： 本发明方法公开一种适用于甜菊花药培养的花药分离方法，属于植物组织培养技术领域。该方法主要技术是在甜菊植物花蕾期采集适宜大小的头状花序，在无菌条件下先将花序用75％乙醇消毒30秒后，1％升汞浸泡3‑4分钟，再用无菌水清洗3‑4次，然后将花序放置于铺有无菌滤纸的培养皿中晾干，用小镊子从花序中拔取花蕾，并将其置于左手食指指腹上，右手持解剖针刺破花蕾的花冠顶部，再用解剖针针尖从花冠基部向顶部滚动式挤压，花药即可被挤出且保持完整，所得花药可直接用于离体培养。本发明方法首次公开从长约2毫米的甜菊微小花蕾中分离花药的操作方法，简单、快速且能保持花药完整，提高了分离成功率，并有效降低了花药培养中的污染情况。

摘要： 本发明公开了一种提高燕麦花药培养愈伤组织诱导率的培养基，属于植物组织培养技术领域。本发明公开的一种提高燕麦花药培养愈伤组织诱导率的培养基，以K培养基为基础培养基，添加2,4‑D、KT、TDZ、麦芽糖和植物凝胶，pH值为5.8‑6.2。本发明公开的培养基能够有效提高燕麦花药愈伤组织诱导率。

摘要： 本发明提供一种利用花药培养获得马铃薯双单倍体植株的方法及其培养基，属于植物细胞工程技术领域。所述方法包括以下步骤：摘取现蕾期至初花期的马铃薯四倍体栽培种花蕾放入4～6°C环境中预处理48～72h；花蕾进行灭菌后，挑取花蕾中的花药接种于诱导培养基，在30～35°C条件下处理48～72h，再在22～26°C条件下诱导培养40～50d；将获得的花药愈伤组织，转入分化培养基中进行分化培养60～80d，挑取分化出绿色芽点的愈伤组织转入分化培养基中进行继代培养30‑50d，获得马铃薯小苗；将马铃薯小苗转入生根培养基中培养，获得马铃薯完整植株。试验表明，分化率达到6.1～16.9％，成功获得双单倍体植株。

摘要： 本发明公开了一种提高籼稻及籼粳交花药培养效率的培养基及应用，属于作物育种技术领域。具体涉及：设计出一种新的水稻花药培养的培养基，是指对比M8和N6培养基后花药在经过测试的组织培养基上直接分化成苗，并可直接移栽。利用该培养基能够简化花药培养程序，提高培养效率，为拓展花培技术在水稻育种领域的应用增加了可能，从而创建了一个高效的花药培养的系统，解决水稻花药组织培养过程中水稻基因型的狭窄和组织培养的低效率、以及产苗率难以满足育种群体需要等问题，同时该技术能够适应生产上大规模获得水稻组培苗的轻简模式，降低了劳动强度，减少生产成本。

摘要： 本发明公开了一种通过花药培养获得制干辣椒单倍体植株的方法，属于植物细胞工程技术领域。该培养方法包括如下步骤：（1）取花蕾，4°C预处理1~7天；（2）花蕾消毒；（3）剥取花药；（4）接种；（5）愈伤组织和胚状体诱导；（6）分化调控；（7）生根培养；（8）驯化与移栽；（9）加倍处理。本发明中基本培养基为改良的MSB培养基，由MS无机盐和B5有机物构成，有利于胚状体和再生植株根的分化，本发明为辣椒花药培养获得单倍体提供了一种方便、快捷和有效的方法，具有较好的社会效益和经济效益。

摘要： 本发明一种茄子花药培养直接获得植株的方法和培养基，属于植物组织培养技术领域。所述培养方法包括：(1)、新鲜花蕾的选取；(2)、花蕾的表面消毒、无菌花药的获得；(3)、将单核靠边期的无菌花药接种于花药培养固体培养基中，33～37°C黑暗培养2～8天，转至25‑28°C光照培养30‑40天；(4)、将子叶型胚状体转至健苗生根固体培养基中继续培养，长成完整植株。本发明的培养方法具有以下优点：本发明所采用的培养方法简单易行，由花药离体培养直接诱导胚状体获得单倍体植株，避免了花药培养诱导形成的愈伤组织转接至分化培养基，再诱导植株再生的过程；也避免了由花药壁等二倍体体细胞参与愈伤组织形成而出现的染色体倍性混杂现象。

摘要： 本发明方法公开一种适用于甜菊花药培养的花药分离方法，属于植物组织培养技术领域。该方法主要技术是在甜菊植物花蕾期采集适宜大小的头状花序，在无菌条件下先将花序用75％乙醇消毒30秒后，1％升汞浸泡3‑4分钟，再用无菌水清洗3‑4次，然后将花序放置于铺有无菌滤纸的培养皿中晾干，用小镊子从花序中拔取花蕾，并将其置于左手食指指腹上，右手持解剖针刺破花蕾的花冠顶部，再用解剖针针尖从花冠基部向顶部滚动式挤压，花药即可被挤出且保持完整，所得花药可直接用于离体培养。本发明方法首次公开从长约2毫米的甜菊微小花蕾中分离花药的操作方法，简单、快速且能保持花药完整，提高了分离成功率，并有效降低了花药培养中的污染情况。

摘要： 本发明公开了一种提高燕麦花药培养愈伤组织诱导率的培养基，属于植物组织培养技术领域。本发明公开的一种提高燕麦花药培养愈伤组织诱导率的培养基，以K培养基为基础培养基，添加2,4‑D、KT、TDZ、麦芽糖和植物凝胶，pH值为5.8‑6.2。本发明公开的培养基能够有效提高燕麦花药愈伤组织诱导率。

摘要： 本发明提供了一种用于香石竹花药培养的诱导培养基，其组成成分包括KNO3、NH4NO3、KH2PO4、CaCl2·2H2O、Mg2SO4·7H2O、KCl、FeSO4·7H2O、Na2‑EDTA、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、维生素B1、维生素B6、生物素、核黄素、D‑泛酸钙、天冬氨酸、甘氨酸、丙酮酸钠、延胡索酸、半胱氨酸盐酸盐、水解酪蛋白、肌醇、5‑氮杂胞嘧啶核苷、植物血凝素、马来酰肼、2，4‑D、6‑BA、香石竹伤流液、亚硫酸氢钠、海藻糖、蔗糖、植物凝胶。该培养基适用于香石竹花药培养诱导愈伤组织，其诱导率最高达到20.15%，为建立高效、稳定的香石竹花药培养体系奠定基础。

摘要： 本发明公开了一种用于香石竹花药培养的分化培养基，属于花卉培育技术领域。该培养基的组成成分包括KNO3、NH4NO3、H2PO4、K2HPO4、MgSO4·7H2O、Ca（NO3）2、甘氨酸铁、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、维生素B1、维生素B6、烟酸、叶酸、维生素E、芦丁、核苷酸、丁基羟基茴香醚、NaHS、乙烯亚胺、氨氧乙酸、苯丙氨酸、豌豆冷浸液、β‑葡聚糖、肌醇、2‑IP、NAA、KT、蔗糖和植物凝胶。利用本发明的分化培养基对香石竹花药愈伤组织进行分化培养，平均绿苗分化率最高可达40.94%，对于建立完整的香石竹花药培养体系具有重要意义。