花粉管通道

摘要： 为研究不同玉米材料花粉管通道形成时间,对S173、S192等2个玉米材料在授粉后去除花丝统计结实粒数,确定其花粉管通道形成的时间段.结果表明,雌穗结实顺序为中部、下部、顶部,结实过程需要一段时间;2个材料结实均在授粉后15 h开始,之后在一定时间段内结实粒数呈明显上升趋势,但该趋势因温度不同而有差异;相同温度条件下,S192结实要早于S173,不同温度条件下同一材料温度越高结实越早,说明温度对不同材料结实起始时间有很大影响;通道形成时间段验证试验中,在满足温度条件下,通道形成时间段内转化所得阳性株率要高于非时间段内.

摘要： 小麦作为重要的粮食作物,其基因工程改良始终是人们关注的焦点.为提高小麦作物产量,改善小麦的品质,越来越多的研究者开始研究转基因技术.本文先从花粉管通道和农杆菌介导转换两方面入手,对小麦转基因技术研究现状进行分析.然后在抗病、抗虫和提升小麦产量与品质的基础上,详细阐述小麦转基因技术的具体应用和作用.

摘要： To establish a novel plant bioreactor based on sesame oil body expression system, the binary vector PBI121 containing the insulin gene was transformed into sesame Jiheizhi No. 1 via pollen⁃tube pathway. The transformed plant with Kanamycin resistance was confirmed by PCR amplification and PCR⁃Southern hybridization. The results showed the insulin gene was integrated into the genome of sesame seeds, and could be passed onto generation T5 . In conclusion, it is feasible to genetically transform insulin gene into sesame oil body via a pollen⁃tube mediated pathway.%为建立芝麻油体表达体系这一新型植物生物反应器，采用花粉管通道法，将含有胰岛素基因的双元表达载体PBI121质粒转入冀黑芝1号芝麻。对转化株后代进行卡那霉素筛选、PCR扩增及PCR⁃Southern杂交检测。结果显示：胰岛素基因已整合到受体芝麻的基因组DNA中，并获得了T5转化株，胰岛素基因可以遗传到第5代转化株。说明芝麻花粉管介导胰岛素基因的遗传转化油体表达体系可行。

摘要： 为建立并研究利用油葵油体表达系统表达重组人胰岛素蛋白的方法,采用PCR技术构建植物种子特异性表达载体,经花粉管通道用重组人胰岛素基因转化油葵.利用PCR法检测目的基因的转化情况,用SDS-PAGE和Western blot对胰岛素蛋白的表达进行鉴定.结果表明,合成了重组人胰岛素与花生油体蛋白融合基因,并获得植物种子特异性表达载体pBINOI.花粉管通道转化油葵的适宜条件为,花柱剪切1/2,质粒浓度为50 ～ 100 ng/μl转化效率最高.PCR结果显示,油葵花粉管通道法转胰岛素基因总转化率为3.2％,温室转化率(5.20％)高于大田转化率(1.12％).获得T1～T5代转基因种子,播种为T1～T5代植株.获得的l号转基因株系T5代植株阳性/阴性植株为11∶1.经SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测结果显示,融合蛋白约为23 kDa,重组人胰岛素基因在油葵种子中得到了表达.本实验建立了转基因油葵油体表达系统,且该系统能够成功表达重组人胰岛素.

摘要： [目的]对适宜的水曲柳DNA浓度及滴加时间进行初步探索,获得具有水曲柳优势性状的杨树植株.[方法]通过花粉管通道法,将携带水曲柳基因组的DNA导入杨树.人工授粉后一定时间在花柱基部进行横切,把不同浓度DNA溶液滴加到子房切口端,10 d后统计结实率.[结果]在同一时间点,随着水曲柳DNA浓度的增加,结实率呈现逐渐降低趋势;随着授粉与滴加DNA时间的延长,同一浓度下呈现出结实率先降低后升高趋势.当水曲柳DNA溶液滴加时间控制在人工授粉后6h左右,DNA浓度为50 μg/ml时是在杨树上运用花粉管通道法转化水曲柳基因最适宜的条件,结实率可达17％.[结论]滴加时间与外源DNA不同梯度水平对转化结实率有很大影响.

摘要： 通过花粉管通道介导玉米、稗草总DNA导入4个冬小麦品种(系)9411,955159,96266,鲁麦21中,研究外源DNA导入对转基因D1代种子萌发和植株生长的影响.结果表明:各受体的转基因D1代T1(导入玉米DNA)、T2(导入稗草DNA)处理的种子发芽势和发芽率与对照ck相比呈显著或极显著降低,而T1和T2间无显著差异；以冬小麦9411和鲁麦21为受体的T1株高和ck相比差异极显著,而T2株高与ck间差异不显著；96266为受体的T1处理的第1节间长与对照相比差异显著；9411 T1和T2处理稳长与ck相比差异均达到极显著水平.

摘要： Two commonly used techniques of introducing exogenous total DNA into plant directly were introduced ,which were pollen - tube pathway method and ion beam implantation method.The establishment,development and application achievements of the two techniques were introduced from their principles and methods,development and application,mechanism and verification,problems and prospect.%文中介绍了2种较常用的外源总DNA直接导入植物的方法—花粉管通道法和离子束介导法,分别从原理与方法、发展与应用、机理与验证、问题与展望4个方面综述了这2种方法的创立与发展以及应用此方法取得的研究成果.

摘要： 将来源于极细链格孢菌的蛋白激发子基因pesT1克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,成功构建了含有增强子和多联终止子的植物表达载体pCAM BI A2300-G4AS-peaT1.通过花粉管通道法转化棉花,经卡那霉素抗性筛选、PCR和RT-PCR检测获得一株转基因棉花植株,其植株茎粗和成铃数均高于非转基因对照株.

摘要： Pollen tube pathway was direct translation technology which useed plant antilogous egg cells or fertilized egg cells as the transformation object.It was a distinctive transgenic technology. This test added GeneFinderTM nucleic acid dye to exogenous DNA, after introduction exogenous DNA,ultraviolet imager showed the light different comparison of corn filament at different stage, which could observe the deformation path of exogenous DNA at different stage, so this way provided another new testing way to study introduction path of exogenous DNA.%花粉管通道法是一种借助于植物自身卵细胞或受精卵为转化对象的直接转化技术，是一种颇具特色的转基因技术。本试验将GeneFinder^（TM）核酸染料加入外源DNA中，通过紫外成像仪对外源DNA导入后不同时期玉米花丝在亮度上的对比差异来观察外源DNA不同时间段所通过的路径变化，因而为研究外源DNA导入路径提供了一种新的试验方法。

摘要： 以牡丹品种"凤丹白"为研究材料,人工授粉后于不同时间剪除柱头,根据胚珠发育状况初步探明了牡丹花粉管通道形成所需的时间,结果表明,授粉后1h,牡丹已形成花粉管通道.为牡丹花粉管通道法转基因技术体系的建立奠定了一定的理论基础.

摘要： 本文采用周光宇的花粉管通道技术，无须事先识别分离目的基因，以盐生植物红树、红柳等DNA作为基因供体，蔬菜(豇豆、辣椒、茄子、番茄等)作为受体，开展了耐盐作物分子育种研究。在海滩上试种，用海水直接灌溉，通过多次单株筛选，已获得了一批耐盐能力明显增强和相对稳定的新种质材料和新品系。对转化株后代进行蛋白质SDS-PAGE电泳、RAPD反应和染色体原位杂交分析，表明转化植株其耐盐性的提高与基因组的变异有关。同时还首次从红树植物秋茄和盐藻中分离克隆了十几个耐盐相关基因和基因片段，其中秋茄液泡膜内在蛋白全长cDNA (Kctipl)(GenBank:AF521135)，亲环素蛋白全长cDNA (kccypl) (GenBank:AYIa0052)，成功登录国际基因库。为深入开展耐盐植物基因工程奠定了必要的基础。

摘要： 对不同棉花品种进行花粉管注射结果分析,发现品种类型对花粉管注射进化率有明显影响,不同熟期品种其最佳注射时期各异;以不同基因、不同质粒浓度进行花粉管注射,发现基因类型及质粒浓度对花粉管注射转化率的影响不甚明显;通过比较安阳、海南两地花粉管注射转化率的差异,发现海南花粉管注射的转化率远高于安阳,因此气候条件可能对花粉管注射的转化率有较大影响.同时研究了注射(机械损伤)本身对成铃率影响,观察到注射本身可引起成铃率明显降低.

摘要： 对不同棉花品种进行花粉管注射结果分析,发现品种类型对花粉管注射进化率有明显影响,不同熟期品种其最佳注射时期各异;以不同基因、不同质粒浓度进行花粉管注射,发现基因类型及质粒浓度对花粉管注射转化率的影响不甚明显;通过比较安阳、海南两地花粉管注射转化率的差异,发现海南花粉管注射的转化率远高于安阳,因此气候条件可能对花粉管注射的转化率有较大影响.同时研究了注射(机械损伤)本身对成铃率影响,观察到注射本身可引起成铃率明显降低.

摘要： 对不同棉花品种进行花粉管注射结果分析,发现品种类型对花粉管注射进化率有明显影响,不同熟期品种其最佳注射时期各异;以不同基因、不同质粒浓度进行花粉管注射,发现基因类型及质粒浓度对花粉管注射转化率的影响不甚明显;通过比较安阳、海南两地花粉管注射转化率的差异,发现海南花粉管注射的转化率远高于安阳,因此气候条件可能对花粉管注射的转化率有较大影响.同时研究了注射(机械损伤)本身对成铃率影响,观察到注射本身可引起成铃率明显降低.

摘要： 对不同棉花品种进行花粉管注射结果分析,发现品种类型对花粉管注射进化率有明显影响,不同熟期品种其最佳注射时期各异;以不同基因、不同质粒浓度进行花粉管注射,发现基因类型及质粒浓度对花粉管注射转化率的影响不甚明显;通过比较安阳、海南两地花粉管注射转化率的差异,发现海南花粉管注射的转化率远高于安阳,因此气候条件可能对花粉管注射的转化率有较大影响.同时研究了注射(机械损伤)本身对成铃率影响,观察到注射本身可引起成铃率明显降低.

摘要： 对不同棉花品种进行花粉管注射结果分析,发现品种类型对花粉管注射进化率有明显影响,不同熟期品种其最佳注射时期各异;以不同基因、不同质粒浓度进行花粉管注射,发现基因类型及质粒浓度对花粉管注射转化率的影响不甚明显;通过比较安阳、海南两地花粉管注射转化率的差异,发现海南花粉管注射的转化率远高于安阳,因此气候条件可能对花粉管注射的转化率有较大影响.同时研究了注射(机械损伤)本身对成铃率影响,观察到注射本身可引起成铃率明显降低.

摘要： 本发明公开了一种运用花粉管通道转化法培育耐寒热带睡莲的方法，收集开花第三天的花粉，用柱头液制备含有CodA基因的农杆菌侵染液，以开花第一天的热带睡莲为受体进行侵染，种子成熟后，用潮霉素筛选溶液进行种子萌发培养和筛选，抗性植株育苗后进行大田种植，露地越冬筛选抗冻植株，再以转基因植株为父本，非转基因热带睡莲优良单株作为母本进行杂交，露地越冬筛选出耐寒优良后代。本发明为彻底解决在温带地区热带睡莲露地自然越冬问题奠定了坚实基础，同时也将推动热带睡莲基因工程的发展。

摘要： 本发明属于玉米转基因技术领域，具体为一种借助花粉管通道在玉米中实现基因编辑的方法，包括步骤一：玉米果穗选取，选取自授粉后的24‑28h，抽丝期一致的玉米果穗；步骤二：基因编辑质粒的制备；步骤三：花粉介导转化：借助花粉管通道将基因编辑载体导入，用待转化的质粒溶液处理花粉粒，使花粉粒携带含有Cas9基因和sgRNA的质粒，然后授粉；步骤四：后代材料的抗性筛选；步骤五：后代遗传性特征研究和PCR检测结果，本发明利用花粉管进入胚囊时所形成的通道，将外源DNA导入受体，实现基因编辑，具有无基因型限制和易于实现大规模转化的特点，可以对玉米实现基因编辑，而且不需要昂贵的仪器设备和繁复的组织培养，并省去了组织培养过程。

摘要： 本发明公开了一种基于花粉管通道导入的水稻基因定向编辑方法，属于生物技术领域。本发明利用花粉管通道将CRISPR/Cas9载体导入水稻胚囊，实现tms5目的基因的定向编辑。本发明建立的基于花粉管通道的基因定向编辑方法不依赖愈伤组织的遗传转化，并能获得目的基因突变，操作过程简单及可靠。

摘要： 本发明公开了一种基于萱草花粉管通道导入EMS诱变育种的方法，包括如下步骤：(1)于田间选取萱草花朵自交进行授粉；(2)将授粉的花剥离雄蕊和花瓣，截取并保留2mm长的花柱，用微量注射器吸取10μl诱变剂，沿花柱柱头纵轴注射，然后用湿棉花包住子房；诱变剂为浓度0.00001‑0.00005％的EMS溶液，以磷酸缓冲液作为溶剂；(3)35d后收获种子，将种子在水中浸泡12h后剥去外种皮，在育苗盒中于植物培养间25°C条件下培养，本发明通过花粉管通道注射诱变剂的方法，授粉后使EMS溶液能够沿着花粉管通道形成的途径渗透，经过珠心进入胚囊，最终诱变尚不具备正常细胞壁的合子或早期胚胎细胞，相比于传统的诱变育种方法，该方法操作简单，容易掌握，省时省力。

摘要： 本发明属于植物或获得新植物的方法；通过组织培养技术的植物再生技术领域，公开了一种利用箭竹DNA结合花粉管通道水稻新种质的获取方法，利用禾本科高山箭竹全基因组DNA结合花粉管通道法处理水稻品种恩恢142产生变异，从450朵颖花产生的318棵苗中筛选表型与对照有明显差异的单株经过连续自交，获得表型稳定的变异株系13个；利用49对SSR分子标记对变异株系与对照进行分析，发现变异株与对照之间以及变异株系间的遗传背景都存在差异；将变异材料和对照分别与光温敏核不育系杂交配组。利用箭竹DNA结合花粉管通道法可以为水稻育种创制新种质，为水稻的种质资源创新提供一种新途径。

摘要： 本发明公开了一种运用花粉管通道转化法培育耐寒热带睡莲的方法，收集开花第三天的花粉，用柱头液制备含有CodA基因的农杆菌侵染液，以开花第一天的热带睡莲为受体进行侵染，种子成熟后，用潮霉素筛选溶液进行种子萌发培养和筛选，抗性植株育苗后进行大田种植，露地越冬筛选抗冻植株，再以转基因植株为父本，非转基因热带睡莲优良单株作为母本进行杂交，露地越冬筛选出耐寒优良后代。本发明为彻底解决在温带地区热带睡莲露地自然越冬问题奠定了坚实基础，同时也将推动热带睡莲基因工程的发展。

摘要： 本发明提供了一种确定玉米花粉管通道形成时间的方法，所述方法包括套袋、授粉、切开苞叶、去除花丝、恢复苞叶至原状，每隔1‑3小时去除一次花丝，并时时记录温湿度，收获时取回雌穗，并统计结实粒数，根据去除花丝的时间及平均结实粒数，确定玉米花粉管通道形成的时间。所述方法在田间进行，与实际的种植情况最接近，结果可靠性高；所述方法的步骤简单，易于本领域技术人员掌握和操作；该方法的可行性高，可重复性好，可在不同材料间使用；另外，本发明所述方法对操作条件的要求较低，成本低廉。

摘要： 本发明公开一种运用花粉管通道转化技术培育耐盐水稻的方法，包括以下步骤：(1)提取芦苇叶片DNA；(2)外源DNA的导入受体水稻；(3)发芽期的盆筛；(4)人工盐池筛选和大田选育；(5)稳定株系在盐滩田间种植。本发明运用花粉管通道技术，将盐生植物的总DNA转移到普通水稻，实现超远缘遗传物质的转移，省略了组织培养过程，避免了植物组织培养过程中可能产生的各种无法预测的不利影响，能同时导入多个基因，达到耐盐植物分子育种的目的。

摘要： 本实用新型涉及农业种植技术领域，涉及一种杂交用花粉管通道设备，包括储液仓整体以及安装在储液仓整体上的推进加压装置，储液仓整体包括储液仓，储液仓呈圆柱形，储液仓内部为空腔结构，储液仓内部安装有活塞，活塞与储液仓内壁尺寸相匹配，活塞与储液仓滑动连接，活塞顶端连接有滑动柱，滑动柱上开设有限位槽，限位槽内部设置有滑动限位柱，滑动限位柱与滑动柱滑动连接，滑动限位柱一端一体成型有限位柱，通过设置的储液仓整体和推进加压装置，使得在使用装置相植物注射目的基因DNA溶液时，可以控制注射溶液的数量，避免人工控制导致注射溶液数量不准确，导致溶液浪费或注射溶液过少，影响注射效果。

摘要： 本实用新型公开了一种提高玉米花粉管通道转化效率的装置，所述装置包括注射器（1）和漏斗（5），所述注射器的活塞末端有活塞皮垫（2），所述漏斗的咀部通过塑料管（4）与注射器针筒末端的排气小孔（3）相连，漏斗的斗部与乳胶管（6）粘连。所述装置可以安置在已剪掉苞叶和花丝的玉米雌穗顶端，通过快速吸取雌穗内部的水分，使花丝处于一种相对干爽的状态，这样便可保证DNA溶液和花丝的完全接触，增加DNA片段进入花粉管内的几率，最终提高花粉管通道法的转化效率。