膜片钳技术

摘要： 目的 研究黄芩苷对SD大鼠脑中动脉的影响.方法 应用压力型小动脉测量仪观察给予黄芩苷前后脑中动脉直径的变化;应用全细胞膜片钳技术和内面向外式膜片钳技术观察黄芩苷对离体的SD大鼠脑中动脉SMC电流的调节作用.结果 黄芩苷舒张SD大鼠脑中动脉血管段呈浓度依赖性.BK通道阻断剂ibTX阻断黄芩苷的舒张作用.黄芩苷增强脑中动脉SMC外向电流呈浓度依赖性.BK通道阻断剂ibTX阻断黄芩苷介导的脑中动脉SMC外向电流.黄芩苷增加BK通道开放频率.结论 黄芩苷增加BK通道开放频率,增强其介导的外向电流,舒张SD大鼠脑中动脉血管.

摘要： 目的:研究炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流(I_(Ca-L))及其动力学特征的影响。方法:选取24只大鼠随机分为空白对照组和炙甘草汤低剂量组(1.125 g/mL)、中剂量组(2.25 g/mL)、高剂量组(4.5 g/mL),每组6只。3组药物组大鼠分别按各自浓度给予相同体积的炙甘草汤药液灌胃,对照组大鼠予以等体积生理盐水灌胃。给药1周后利用酶解法对4组大鼠心房肌细胞进行急性分离,用全细胞膜片钳技术记录4组心房肌细胞I_(Ca-L)并比较I-V曲线,选取中剂量组与对照组的心房肌细胞比较I_(Ca-L)通道的动力学特征。结果:与对照组比较,炙甘草汤低、中、高剂量组的大鼠心房肌细胞I_(Ca-L)均发生不同程度的抑制效果,I-V曲线均上移。观察比较中剂量药物组与对照组的I_(Ca-L)通道动力学特征,发现2组细胞的激活曲线和半数激活电压,差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量药物组细胞的稳态失活曲线发生向右偏移,半数失活电压V_(1/2)升高(P<0.05),失活后恢复曲线向下偏移,时间常数(τ)延长(P<0.01)。结论:炙甘草汤能够抑制大鼠心房肌细胞L型钙电流,减慢心房细胞钙通道失活速度,延长失活后恢复的时间,从而起到减慢心率的作用,这可能是炙甘草汤临床上治疗房性心律失常的作用机制。

摘要： 目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-155对人胚胎干细胞(hESCs)诱导分化的心房肌细胞L-型钙通道a1c(Cav1.2)钙电流(Ica-L)、基因及蛋白表达的影响.方法诱导并鉴定H7hESCs(购自中国科学院)分化获得的人心房肌细胞(分化第8～10天可获得),向心肌细胞转染含有miR-155前体序列或反义序列的慢病毒,分为对照组、miR-155模拟物(Mimics)组、miR-155抑制子(Inhibitors)组.于72 h后,运用膜片钳、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)检测ICa-L.、mRNA及蛋白的变化.组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果成功获得心房肌细胞,转染miR-155模拟物后,miR-155表达高于对照组(25.52 ±3.63比1.00 ±0.00,t =11.713,P<0.05),差异有统计学意义.转染miR-155抑制子后,miR-155表达低于对照组(0.59 ±0.07比1.00±0.00,t =10.933,P<0.05),差异有统计学意义.膜片钳结果发现miR-155上调组ICa-L明显低于对照组(-9.79 ±3.70比-14.27±3.95,t=2.611,P<0.05),差异有统计学意义,RT-qPCR及Western blot证实,miR-155上调组Cav1.2的mRNA表达量(0.45 ±0.06比1.00±0.00,t=17.226,P<0.05)及蛋白表达量(0.71 ±0.07比1.00 ±0.00,t=7.708,P<0.05)均低于对照组,差异均有统计学意义.结论对于hESCs诱导的心房肌细胞,上调miR-155可导致Cav1.2蛋白表达水平下降,ICa-L电流减小,可能参与心房肌细胞的电重构.

摘要： 目的 通过建立大鼠急性低氧运动模型,观察大鼠单个心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的改变,在细胞水平探究模拟高原低氧条件下力竭运动对心脏电生理的影响.方法 将40只健康雄性清洁级SD大鼠随机分为低氧运动组、低氧安静组、常氧运动组和常氧安静组,每组10只.利用小动物低压氧舱和常氧状态下进行力竭运动试验.取出各组大鼠心脏,利用灌流酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录大鼠单个心室肌细胞的瞬时外向钾电流.采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理,多组间比较采用ANOVA方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 与常氧安静组比较,+40 mV时,低氧运动组的Ito电流密度显著降低,且低于低氧安静组及常氧运动组,此效应呈现电压依赖性.门控机制研究显示,低氧运动时大鼠心肌细胞Ito稳态激活曲线失活向超极化方向移动,而稳态失活曲线则向去极化方向移动,二者综合效应使Ito电流显著降低.结论 急性低氧运动可通过改变钾通道稳态激活与稳态失活过程,降低大鼠心室肌细胞Ito,这可能是急性低氧运动导致心律失常的主要原因之一.

摘要： KATP通道是一种重要的代谢敏感性离子通道,在生理和病理机制中发挥着重要作用,是一些常见代谢疾病,如糖尿病、心肌缺血、心率失常等的药物作用靶点.该文通过施加特异性开放剂或抑制剂的方法诱导或阻断KATP通道,采用膜片钳全细胞实验方法检测豚鼠新室肌细胞膜KATP通道(sarcKATP)的电流密度.mitoKATP位于胞内线粒体膜上,可通过改变线粒体膜电位进而增强黄素荧光蛋白的自发荧光,利用激光共聚焦显微镜检测黄素荧光蛋白荧光强度的变化来间接测量线粒体KATP通道的活动.此外,诱导sarcKATP通道开放可缩短动作电位时程,降低静息膜电位,对心率有重要调节作用.

摘要： 目的 建立急性分离成年犬结状神经节神经元(VGN)电生理学研究平台.方法 通过急性分离和培养雌雄成年比格犬VGN,利用全细胞膜片钳技术分别记录动作电位,电压依赖性的外向钾电流(IK)和超极化激活的阳离子电流(Ih).结果 动作电位波形分析结果显示:①雌性比格犬VGN不仅可以记录到传统分类中的髓鞘化A型和非髓鞘化C型神经元,还可以记录到雌性特异分布的Ah型神经元;②步阶电流除极在诱发相同持续放电频率时,A型所需要的刺激强度最小,Ah型所需要的电流强度与A型近似或轻微增加,而C型需要的刺激强度最大;③河豚毒素显著降低Ah型神经元的除极速率和触及阈值;蝎毒素可显著增加A-型的神经兴奋性;④所有受试神经元均表达IK和Ih,且2种电流密度均呈现A型>Ah型>C型;⑤尽管雌雄VGN分布的传入纤维种类有别,已知的A和C型VGN放电差异性并未在本研究中探讨.结论 成年比格犬VGN可被成功急性分离,并用于动作电位、IK和Ih的记录;分类和电生理学特性足以完成药理学试验的需要,持续至少30 min的紧密封接应该满足药理学观察的需要.

摘要： [目的]从葡萄中克隆并鉴定钾离子通道基因VviSKOR,在转录水平分析其组织特异性表达特征及对缺钾、氯化钠(NaCl)与脱落酸(ABA)等胁迫的响应情况,通过膜片钳电生理技术研究其生理学功能.[方法]通过同源克隆法,在葡萄基因组中筛选并鉴定钾离子通道基因VviSKOR;借助多种生物信息学软件分析葡萄SKOR及其编码蛋白的特征;利用MEGA 7.0软件建立葡萄、拟南芥、水稻、玉米、高粱、短柄草、大豆、番茄、黄瓜、白杨、桃、梨、草莓、苹果、木瓜、柑橘、香蕉、凤梨等18种不同科属植物SKOR同源蛋白成员的系统进化树;利用实时荧光定量PCR分析VviSKOR在葡萄不同组织部位的表达模式及对缺钾、NaCl、ABA与sorbitol等胁迫的响应情况;利用膜片钳电生理系统分析葡萄VviSKOR的生理学功能.[结果]在葡萄基因组中克隆获得一个钾离子通道基因VviSKOR,其编码蛋白含有环核苷酸结合域、离子通道跨膜域、Ankyrin repeats和KHA功能结构域,属于典型的Shaker类钾离子通道;18种不同科属植物SKOR蛋白在氨基酸水平具有58.92％的一致性,系统进化树表明葡萄VviSKOR与黄瓜CsaSKOR紧密聚在一起,其遗传进化关系上较近,4种禾本科植物(玉米、水稻、短柄草和高粱)SKOR家族成员在系统进化树上更倾向于聚在一起,而同属蔷薇科植物(草莓、苹果、梨和桃)SKOR在进化关系上紧密聚在一起;亚细胞定位预测表明葡萄VviSKOR蛋白主要定位于细胞质膜,且含有6个跨膜区,其等电点PI为6.24,表明该蛋白含有偏酸性氨基酸残基较多;在VviSKOR启动子区域预测到12种顺式作用元件,主要包括胁迫响应、激素响应和细胞周期调控等不同生命活动相关的调控元件;数据库表达谱分析结果表明葡萄VviSKOR在多种组织或器官中均有表达,在葡萄树根中的表达水平最高,其次是叶和木质部;实时荧光定量PCR分析表明VviSKOR在7年生'马瑟兰'葡萄树根部和幼苗根部的表达水平均最高;幼苗中,VviSKOR在转录水平对高钾处理没有响应,但对缺钾、ABA和NaCl胁迫处理较为敏感,其在检测幼苗根部、茎部和叶片中的表达量均被缺钾和ABA抑制而降低,却受NaCl胁迫诱导而显著增强;转染pTracer-CMV3-SKOR质粒的HEK293-T细胞记录到外向电流,且随细胞外钾离子浓度的增加而降低,表明VviSKOR为一外流型钾离子通道,此外,记录到的电流随着电压的增加而增加,说明VviSKOR也是电压依赖型钾离子通道.[结论]葡萄VviSKOR与黄瓜CsaSKOR在遗传进化关系上最为相近;VviSKOR主要在葡萄根部(成年树和幼苗)表达,幼苗中VviSKOR在转录水平受缺钾、ABA和NaCl胁迫的调控;VviSKOR是葡萄根部主导钾离子外排的钾离子通道.

摘要： 目的 探讨环维黄杨星D对过氧化氢(H2 O2)损伤大鼠心房肌细胞L型钙通道的作用,阐明环维黄杨星D可能通过影响L型钙通道动力学参数发挥抗心律失常、抗氧化应激的作用机制.方法 用Lan-gendorff灌流装置系统逆行灌流心脏,急性酶解法分离获得成年SD大鼠心房肌细胞,用100μmol/L H2 O2对大鼠心房肌细胞进行预处理,细胞分为3组(n为细胞数):对照组(n=8):细胞不经过任何处理;H2O2组(n=8):细胞经100 mol/L的H2O2培养0.5 h;环维黄杨星D组(n=9):细胞预先经100 mol/L H2O2培养0.5 h后加入20μmol/L环维环维黄杨星D培养0.5 h,使用全细胞膜片钳技术记录心房肌细胞L型钙电流(ICaL)、失活曲线、恢复曲线,观察对照组、H2 O2组,环维黄杨星D组L型钙通道电生理特性的变化.结果 与对照组相比,H2O2组的ICaL密度增大[(-4.49±0.59)pA/pF vs.(-7.47±0.68)pA/pF,P<0.05];与H2O2组相比,环维黄杨星D组ICaL密度减小[(-7.47±0.68)pA/pF vs.(-4.95±0.48)pA/pF,P<0.05].结论 H2 O2增大ICaL密度,环维黄杨星D抑制ICaL密度,环维黄杨星D组对L型钙通道激活失活曲线无影响,环维黄杨星D可能通过改变ICaL密度发挥抗心律失常、抗氧化应激的作用.

摘要： 耳蜗毛细胞(Hair Cells,HCs)通过顶部纤毛的运动将声信号转换为听神经纤维电信号,通过脑干听觉核团等听觉中枢传导至听觉皮质而产生听觉.目前,应用膜片钳电生理技术,证实了毛细胞膜上可表达多种离子通道及转运蛋白等,而各种病理状态下的HCs均伴有某些特定离子通道的电变化.对这些电变化的研究,将为我们明确许多遗传性耳聋和听觉损伤复杂的发病机理,进一步拓展在细胞以及分子水平上诊断和治疗许多由内耳疾病所导致的耳聋和听力损伤新理念、新思路.

摘要： 目的 探索caveolin 3蛋白与Kv1.5钾通道是否存在相互作用,并进一步明确caveolin3对心脏Kv1.5钾通道功能的调控作用.方法 (1)将携带caveolin 3的N端片段的pGBKT7载体转染Y187,与含人类心脏cDNA文库进行酵母双杂交,筛选与caveolin 3存在相互作用的心肌蛋白;(2)免疫荧光细胞化学分析:pEGFP-N3-KCNA5和质粒pDsRed2-N1-cav3共转染HEK293细胞,应用荧光显微镜观察caveolin 3蛋白和KCNA5蛋白的细胞亚定位情况;(3)细胞电生理检查:应用膜片钳技术记录表达caveolin 3蛋白时,观察Kv1.5钾通道电流幅度和电流密度比的变化.结果 (1)经过严格筛选,人类心脏cDNA文库中发现Kv1.5钾通道与caveolin 3-NT存在相互作用.(2)荧光免疫细胞化学分析发现在哺乳细胞中Kv1.5与caveolin 3存在细胞共定位,并主要在细胞膜上表达.(3)膜片钳技术检测发现,在电压分别为-10、0、10、20、30、40、50、60 mV时,caveolin 3蛋白的表达明显减小了Kv1.5钾通道电流幅度和电流密度比,具有统计学意义(P<0.05).结论 Caveolin 3蛋白对心脏Kv1.5钾通道的功能具有负性调控作用.

摘要： 膜片钳技术——一种新兴的电生理技术，自它发明以来在医学科学的各个领域发挥出巨大的作用，但在中医药领域还没有得到充分的应用。如果能够借助膜片钳技术对离子通道(尤其是Ikr／hERG通道)的检测而对中药注射液是否具有致恶性心律失常的不良反应进行有效的预测和筛选，这将为中药注射液的安全性评价及新药的研发产生指导作用。

摘要： 膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”，应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在，与其它技术结合用于离子通道分子结构与生物学功能关系的研究，近年已成功用于药物筛选。血清药理学通过研究给药动物血清的生物学活性来揭示药物作用机制，目前已广泛用于中药药理作用机制的探讨。本文综述了二者的现状，并对两种技术方法结合运用于中药机制研究的前景进行展望。

摘要： 研究熊果酸对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用,以及熊果酸对CNE-2Z细胞容积的影响.采用膜片钳技术记录熊果酸激活的CNE-2Z全细胞氯电流,应用离子置换、改变细胞外渗透压、氯通道阻断剂等观察熊果酸诱导的氯电流的特性,活细胞动态图像分析技术测量细胞容积变化.结果表明熊果酸可以激活低分化鼻咽癌细胞的氯通道，使氯离子外流，进而引起细胞容积减小。

摘要： 目的：观察交泰丸(JTW)浸膏粉溶液对豚鼠心室肌细胞膜电位的影响。rn 方法：使用Langendorff灌流系统离体灌流心脏，急性酶解法分离获得单个心室肌细胞。全细胞膜片钳技术电流钳模式记录膜电位。rn 结果：0.2％交泰丸浸膏粉使静息电位(RP)从用药前(-85.91±6.24)mV下移至(-99.64±6.62)mV(n=8，P<0.01)，0相除极幅度(APA)从用药前(128.91±1.39)mV上升至(139.74±2.67)mV(n=8，P<0.01)，复极至50％时动作电位时程(APD50)从用药前(505.49±30.97)ms缩短至(329.94±44.32)ms(n=8，P<0.01)，复极至90％时动作电位时程(APD90)从用药前(524.96±30.99)ms缩短至(358.41±43.51)ms(n=8，P<0.01)，复极至50％到复极至90％的动作电位时程(APD50-90)从用药前(16.56±1.48)ms延长至(27.31±3.62)ms(n=8，P<0.01)，动作电位3相复极速率(V3)从用药前(-2.93±0.33)V/s减慢至(-1.95±0.28)V/s(n=8，P<0.01).0.1%、0.4％交泰丸浸膏粉对各项指标的影响与0.2％交泰丸浸膏粉的变化趋势一致。rn 结论：交泰丸浸膏粉引起心室肌细胞RP下移，APA上升，APD50缩短，APD90缩短，APD50-90延长和V3减慢。以上影响可能是其在临床上具有抗心律失常作用的电生理学机制。

摘要： 瞬时外向钾电流具有维持兴奋性细胞静息电位，决定细胞的兴奋性等重要作用，本实验采用频率为50Hz、强度为2.0mT的工频电磁场对小鼠的脑皮层神经细胞进行刺激，而后应用全细胞膜片钳技术测量并研究其瞬时外向钾电流特性。实验发现工频电磁场对瞬时外向钾电流IA有一定的抑制作用，工频电磁场作用可显著地影响通道的激活，对照组和工频电磁场作用组通道半数激活电压分别为19.96±2.87mV和8.12±1.67mV(n=9，P<0.05)，斜率因子分别为22.28±2.09和19.77±1.71(n：9，P<0.05)。结果表明工频电磁场作用皮层神经细胞可以改变其瞬时外向钾通道特性，从而影响动作电位的形成和发放频率，调节神经元的生理功能，有利于受损神经元的恢复和再生。

摘要： 目的:观察交泰丸(JTW)浸膏粉溶液对豚鼠心室肌细胞膜电位的影响。rn 方法:使用Langendorff灌流系统离体灌流心脏，急性酶解法分离获得单个心室肌细胞。全细胞膜片钳技术电流钳模式记录膜电位。rn 结果:0.2％交泰丸浸膏粉使静息电位(RP)从用药前(-85.91±6.24)mV下移至(-99.64±6.62)mV(n=8，P＜0.01)，0相除极幅度(APA)从用药前(128.91 ±1.39)mV上升至(139.74±2.67)mV(n=8，P＜0.01)，复极至50％时动作电位时程(APD50)从用药前(505.49±30.97)ms缩短至(329.94±44.32)ms(n=8，P＜0.01)，复极至90％时动作电位时程(APD90)从用药前(524.96±30.99)ms缩短至(358.41±43.51)ms(n=8,P＜0.01)，复极至50％到复极至90％的动作电位时程(APD50-90)从用药前(16.56±1.48)ms延长至(27.31±3.62)ms(n=8，P＜0.01)，动作电位3相复极速率(V3)从用药前(-2.93±0.33)V/s减慢至(-1.95±0.28)V/s(n=8，P＜0.01)。0.1％、0.4％交泰丸浸膏粉对各项指标的影响与0.2％交泰丸浸膏粉的变化趋势一致。rn 结论:交泰丸浸膏粉引起心室肌细胞RP下移，APA上升，APD50缩短，APD90缩短，APD50-90延长和V3减慢。以上影响可能是其在临床上具有抗心律失常作用的电生理学机制。

摘要： 目的:观察环维黄杨星D(Cyclovirobuxine D，CVB-D)返针晶结晶体对豚鼠单个心室肌细胞动作电位的影响。rn 方法:使用Langendorff灌流系统离体灌流心脏，急性酶解法分离获得心肌细胞。全细胞膜片钳技术电流钳模式记录动作电位。Tyrode氏液和药物溶液交替反复灌流单个心室肌细胞。rn 结果:中浓度组用药后动作电位0相除极幅度(action potential amptitude，APA)从(113.3±6.3)mV下降至(110.2±6.4)mV(n=6，P＜0.01)，复极至50％时动作电位时程(action potential duration of repolarization50％,APD50)从(616.3±68.0)ms延长至(657.4±79.5)ms(n=6,P＜0.01)，复极至9096时动作电位时程(actionpotential duration of repolarization 90％，APD90)从(633.5±71.2)ms延长至(669.2±74.4)ms(n=6，P＜0.01)，复极50％至90％动作电位时程(action potentialduration of repolarization 50％to repolarization90％，APD50-90)从(15.9±6.0)ms延长至(20.1±5.2)ms(n=6，P＜0.01)，动作电位3相复极速率(decay slope of phase 3，v3)从(-2.6±0.8)V/s减慢至(-2.4±0.7)V/s(n=6，P＜0.01)。高浓度组Tyrode氏液和药物溶液交替反复灌流后APD50-90呈递增趋势而V3呈递减趋势，其它指标的变化趋势与中浓度组一致。低浓度组各项指标的变化趋势缺乏统计学意义。rn 结论:体外应用CVB-D返针晶结晶体引起心室肌细胞APA减小，APD50、APD90、APD50-90延长，V3减慢。以上影响可能是其在临床上具有增强心肌收缩力和抗心律失常作用的药理机制。

摘要： 本文综述膜片钳技术、免疫组织化学技术、受体的放射性配基结合分析和分子生物学技术等现代生物学新技术在临床中药学研究中的应用，进而探讨其对临床中药学发展的影响。

摘要： 目的：比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异，并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法：采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果：采用全细胞膜片钳法记录到的L型钙通道电流峰值在15分钟内衰减了34+23％(n=10)，采用穿孔膜片钳方法记录到的L型钙通道电流峰值15分钟内仅衰减了2.7±3.4％(n=9)；采用穿孔膜片钳方法能够记录到人参皂苷Re(100μmol.L-1)的抑制效应，而采用全细胞膜片钳方法产生的电流衰减几乎完全掩盖了人参皂苷Re的效应。脱氢紫堇碱(10,100μmmol·L-1)能够抑制L型钙通道的电流峰值，抑制率分别为97±5％(n=5)；28.6±8.5％(n=5).结论：穿孔膜片钳方法较全细胞膜片钳方法在对L型钙通道电流记录方面更具稳定性和准确性，脱氢紫堇碱能够浓度依赖性的抑制L型钙通道。

摘要： 目的：比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异，并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法：采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果：采用全细胞膜片钳法记录到的L型钙通道电流峰值在15分钟内衰减了34+23％(n=10)，采用穿孔膜片钳方法记录到的L型钙通道电流峰值15分钟内仅衰减了2.7±3.4％(n=9)；采用穿孔膜片钳方法能够记录到人参皂苷Re(100μmol.L-1)的抑制效应，而采用全细胞膜片钳方法产生的电流衰减几乎完全掩盖了人参皂苷Re的效应。脱氢紫堇碱(10,100μmmol·L-1)能够抑制L型钙通道的电流峰值，抑制率分别为97±5％(n=5)；28.6±8.5％(n=5).结论：穿孔膜片钳方法较全细胞膜片钳方法在对L型钙通道电流记录方面更具稳定性和准确性，脱氢紫堇碱能够浓度依赖性的抑制L型钙通道。

摘要： 一种平面膜片钳装置，具有：电绝缘性基板(2)，其在细胞配置区域(4)内具有不使细胞通过但能够使液体通过的贯通孔(3)；第一贮液部(6)，其以能够与贯通孔(3)连通的方式设置在基板(2)的第一表面(2S)侧，且保持第一导电性液体；第一电极部(7)，其配置为能够与第一贮液部(6)电导通；第二贮液部(6′)，其以能够与贯通孔(3)连通的方式设置在基板(2)的第二表面(2S′)侧，且保持第二导电性液体；第二电极部(7′)，其配置为能够与第二贮液部(6′)电导通；送液流路(8)，其向第二贮液部(6′)输送第二导电性液体；排液流路(9)，其从第二贮液部(6′)排出第二导电性液体；以及阀(10)，其设置于送液流路(8)以及/或者排液流路(9)，能够允许或者停止第二导电性液体的流通，并且能够允许或者停止第二贮液部(6′)与第二电极部(7′)的电导通。

摘要： 本发明描述了一种聚合物材料的箔，它包括多个膜片部分和在所述膜片之间排列的网格部分。每一膜片部分通过一个或多个连接元件与网格部分相连。在X‑Y平面内每一膜片部分通过剥离部分与网格部分相分离，所述剥离部分在X‑Y平面内的拉伸强度低于所述膜片部分和所述网格部分二者的拉伸强度，使得一旦在所述膜片部分和所述网格部分之间采用拉伸力，则所述箔优先在所述剥离部分处断裂。本发明涉及使用所述箔，生产细胞‑捕获芯片的方法，和通过所述方法生产的细胞捕获芯片。

摘要： 一种平面膜片钳装置，具有：电绝缘性基板(2)，其在细胞配置区域(4)内具有不使细胞通过但能够使液体通过的贯通孔(3)；第一贮液部(6)，其以能够与贯通孔(3)连通的方式设置在基板(2)的第一表面(2S)侧，且保持第一导电性液体；第一电极部(7)，其配置为能够与第一贮液部(6)电导通；第二贮液部(6′)，其以能够与贯通孔(3)连通的方式设置在基板(2)的第二表面(2S′)侧，且保持第二导电性液体；第二电极部(7′)，其配置为能够与第二贮液部(6′)电导通；送液流路(8)，其向第二贮液部(6′)输送第二导电性液体；排液流路(9)，其从第二贮液部(6′)排出第二导电性液体；以及阀(10)，其设置于送液流路(8)以及/或者排液流路(9)，能够允许或者停止第二导电性液体的流通，并且能够允许或者停止第二贮液部(6′)与第二电极部(7′)的电导通。

摘要： 本发明描述了一种聚合物材料的箔，它包括多个膜片部分和在所述膜片之间排列的网格部分。每一膜片部分通过一个或多个连接元件与网格部分相连。在X‑Y平面内每一膜片部分通过剥离部分与网格部分相分离，所述剥离部分在X‑Y平面内的拉伸强度低于所述膜片部分和所述网格部分二者的拉伸强度，使得一旦在所述膜片部分和所述网格部分之间采用拉伸力，则所述箔优先在所述剥离部分处断裂。本发明涉及使用所述箔，生产细胞‑捕获芯片的方法，和通过所述方法生产的细胞捕获芯片。

摘要： 本实用新型公开了一种膜片钳银丝以及用于膜片钳银丝的电镀装置，其包括电镀盒体、电镀盖体和电源模块，所述电镀盒体与电源模块的负极连接用于放置电镀液，所述电镀盖体与电源模块的正极连接，所述电镀盖体用于固定膜片钳银丝，这样，本实用新型利用电镀的原理设计用于膜片钳银丝的电镀装置，能够快速、便携、稳定地对膜片钳银丝进行电镀，并且能够在膜片钳银丝的表面获得一层致密、均匀、牢固的AgCl层；此外，采用本实用新型对膜片钳银丝进行电镀，是直接对银丝和膜片钳探头焊接后的膜片钳银丝进行电镀，能够避免将银丝与连接金属拆卸、电镀、电焊的步骤，同时便于银丝的安装，操作简单，极大地提高了电镀的效率。

摘要： 本发明公开了一种细胞膜片钳实验中内面向外式膜片的构建方法，该方法包括，按照常规技术手段进行内面向外式膜片钳实验，当电流记录过程中检测到的电流信号减小或消失时，将电极从浴液中提起暴露于空气中，用恒定压强、流速均匀的气流，对准电极尖端吹气，吹气完成后，将电极放入浴液中，此时囊泡消除，内面向外式膜片形成。本发明方法简单方便，能快速有效的使电极尖端形成的囊泡破裂并形成单层膜片，特别适用于膜片钳技术内面向外式构型形成中容易产生囊泡及囊泡结构稳定、不易破裂的状况，可克服内面向外式膜片钳实验中电极尖端易形成囊泡的缺陷，提高实验成功率。

摘要： 本发明属于膜片钳技术领域。具体而言，涉及一种新型碳纤电极，适用于膜片钳电化学技术中，在玻璃微管内对所钳制膜片进行电化学信号的采集。本发明采用硅橡胶作为绝缘材料，在保持较高信噪比的同时避免传统的高温加热方法对设备和手法的依赖性，制备方法简单易行。套管材料选用外径较小(约0.2毫米)的聚丙烯管，整体外形纤细，易于在玻璃微管内移动。尾端部分的设计使得电信号的传导连接方式更为简单，且可以插拔的方式进行碳纤电极的更换，易于操作。

摘要： 本发明提供一种利用膜片钳技术筛选乳源中促睡眠肽粗提物的方法，包括：在牛乳加入水和胰蛋白酶和胃蛋白酶进行酶解，灭酶后经喷雾干燥得粉状酪蛋白水解物；酪蛋白水解物通过等电点沉淀分离；采用反相钢柱，将电点沉淀所得纯化物通过制备液相，再次对样品进行分离纯化，根据样品极性的不同，将样品分为若干段，通过建模，对该促睡眠粗体物进行活性评价；采用全细胞膜片钳技术，给予30‑60PA,3000‑4000ms诱发动作电位，给药100‑150μmol/L,记录电生理图谱，通过放电数目和频率，筛选出具有较好促睡眠的活性片段。本发明操作简单，分离效果好，所得粗提取不仅可以缩短入睡的时间，还可以调节睡眠节律，为失眠症患者的健康提供更好的保障。

摘要： 本发明公开了一种细胞膜片钳实验中内面向外式膜片的构建方法，该方法包括，按照常规技术手段进行内面向外式膜片钳实验，当电流记录过程中检测到的电流信号减小或消失时，将电极从浴液中提起暴露于空气中，用恒定压强、流速均匀的气流，对准电极尖端吹气，吹气完成后，将电极放入浴液中，此时囊泡消除，内面向外式膜片形成。本发明方法简单方便，能快速有效的使电极尖端形成的囊泡破裂并形成单层膜片，特别适用于膜片钳技术内面向外式构型形成中容易产生囊泡及囊泡结构稳定、不易破裂的状况，可克服内面向外式膜片钳实验中电极尖端易形成囊泡的缺陷，提高实验成功率。

摘要： 本实用新型涉及电生理研究实验装置技术领域，具体涉及一种膜片钳技术应用载玻片，载玻片上设有高低围边，防止膜片钳技术实验中灌流管给药液体直接冲击载玻片，对载玻片上细胞带来较大冲击，又可保障实验条件灌流液覆盖细胞，且使能有效实现圆形载玻片夹取，又不会对载玻片上的细胞造成破坏。高围边和低围边的设计，可进一步使适用于不同设计条件下的实验目的实现，提高了钳夹细胞的稳定度利于实验进行。