腺泡细胞

摘要： 目的通过单细胞测序数据系统分析严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体ACE2在胰腺中的表达,为新型冠状病毒感染性疾病(COVID-19)患者提供了生物信息学证据。方法利用单细胞表达谱数据库中的人类胰腺组织单细胞测序数据用于ACE2表达阳性细胞的聚类分析。Scanpy软件用于分析scRNA序列的下游数据。Seurat R软件包用于原始基因表达矩阵的进一步数据分析。然后进行功能富集分析,并使用可视化的R软件对ACE2阳性标记基因进行了基因概念网络分析。结果ACE2主要分布于胰腺腺泡细胞和导管内皮细胞,ACE2阳性细胞在与膜靶向蛋白、胞浆核糖体和内质网蛋白定位建立相关的病毒翻译相关基因集中高度富集。ACE2阳性腺泡细胞中的标记基因与各种类型胰腺炎的发生最为相关,而ACE2阳性胰腺导管内皮细胞中的标记基因与癌前病变密切相关。结论研究结果表明,人胰腺外分泌腺是SARS-CoV-2感染的潜在靶器官,可能对这种快速且高度传播的疾病的病理生理学理解产生重大影响。

摘要： 为提高对前列腺混合性神经内分泌癌-腺泡性腺癌的认识,探讨其诊治方法,分析2021年4月收治的1例前列腺混合性神经内分泌癌-腺泡性腺癌患者的临床资料。根据组织学形态及免疫组织化学染色,诊断为前列腺混合性肿瘤,术后给予比卡鲁胺片50 mg,每日1次治疗后,术后出现腹痛、慢性肾功能不全等并发症。前列腺混合性神经内分泌癌-腺泡性腺癌预后差,易转移,早期根治性切除仍是最有效的方法,晚期患者提倡化学治疗为主,加放射治疗、激素及手术的联合治疗,现今越来越多的靶向治疗药物被应用于临床。

摘要： 目的 探讨微小RNA-324-5p(miR-324-5p)靶向调控胱天蛋白酶募集域蛋白(CARD)9对急性胰腺炎(AP)腺泡细胞增殖、凋亡的影响及机制.方法 采用雨蛙肽处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建急性胰腺炎模型.实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与Western印迹技术分别检测miR-324-5p、CARD9 mRNA及蛋白表达.应用脂质体转染技术分别将miR-NC、miR-324-5p mimic、si-NC、si-CARD9转染入AP腺泡AR42J细胞,噻唑蓝(MTT)与流式细胞仪分别检测AR42J细胞增殖及凋亡.双荧光素酶报告实验验证CARD9与miR-324-5p的作用关系.Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、Bcl-2、Bax、酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3蛋白表达.结果 雨蛙肽素处理后AR42J细胞中miR-324-5p表达水平显著低于对照组,而CARD9 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);分别转染miR-324-5p mimic、si-CARD9后,由雨蛙肽素诱导的AR42J细胞凋亡明显受到抑制,而细胞增殖能力明显增强,CyclinD1、Bcl-2蛋白表达上调,p21、p27、Bax、酶切caspase-3蛋白表达下调(均P<0.05);CARD9是miR-324-5p的靶基因;CARD9过表达逆转了miR-324-5p过表达对雨蛙肽诱导的胰腺炎腺泡细胞AR42J增殖和凋亡的作用.结论 miR-324-5p可通过抑制CARD9表达进而促进AR42J细胞增殖,抑制细胞凋亡.

摘要： Q我们经常被问到一些问题,其中有一个就是,甲状腺功能亢进(甲亢)、甲状腺功能降低(甲减)、慢性甲状腺炎之间的关系是怎样的?甲状腺炎的时候,会对甲状腺的腺泡细胞产生一定影响,从而对激素等各方面都会造成影响。腺泡细胞被破坏了,可能使甲状腺素分泌减少,出现甲状腺炎合并甲状腺功能低下。当然也有的出现相反的过程,就是甲状腺炎合并有甲亢。甲状腺功能亢进,就是说它分泌的甲状腺激素过量了。

摘要： 背景:胆碱能受体激动剂可促进放射性唾液腺损伤患者残存唾液细胞的分泌,但长期用药存在严重的不良反应且对严重放射性唾液腺损伤的治疗效果有限.骨髓间充质干细胞是一种具有多向分化潜能和几乎无限增殖能力的细胞,具备治疗放射性唾液腺损伤的潜力.目的:探索骨髓间充质干细胞修复放射性唾液腺损伤的效果和机制.方法:①从小鼠骨髓中提取骨髓间充质干细胞,采用3D共培养系统,将其与第2代唾液腺腺泡细胞共培养24 h;②取150只C57小鼠,随机等分为正常对照组、放射性唾液腺损伤组以及骨髓间充质干细胞组,后2组通过电子直线加速器以15 Gy照射剂量建立放射性唾液腺损伤小鼠模型.照射后1周,骨髓间充质干细胞组于唾液腺局部多点皮下注射2×109 L-1骨髓间充质干细胞悬液,另2组注射等量生理盐水.结果与结论:经共培养24 h后,骨髓间充质干细胞可以向唾液腺腺泡细胞分化,类似多角形,并表达α-淀粉酶.与正常对照组相比,放射性唾液腺损伤组小鼠唾液流量、唾液腺质量以及唾液淀粉酶水平明显减少,腺泡细胞结构出现明显损伤,唾液腺中Notch的表达水平降低;而与放射性唾液腺损伤组相比,骨髓间充质干细胞组小鼠唾液流量、唾液腺质量以及唾液淀粉酶水平明显恢复,腺泡细胞结构损伤减轻,唾液腺中Notch的表达水平恢复.说明骨髓间充质干细胞移植可有效治疗放射性唾液腺损伤,且其作用可能是通过调节Notch的表达水平实现的.

摘要： Objective To evaluate the biochemical function of rat nature three-dimensional acellular pancreatic bioscaffold (3D-APB).Methods The fresh pancreas from 10 rats were perfused to produce 3D-APB.The biocompatibility of 3D-APB were evaluated.The experiment was divided into 4 groups based on 4 kinds of three-dimensional media for AR42J culture:blank control group,extracellular matrix (ECM) group,Poly-lactic-co-glycolic-acid (PLGA) group and 3D-APB group.We compared the proliferation and differentiation of AR42J pancreatic acinar cell at 3 days,5 days,7 days,10 days after seeding among 4 groups.Results The 3D-APB represents a biocompatible scaffold capable of integrating within host tissue.The proliferation rate of AR42J cell on 3D-APB is higher (P =0.011)while the apoptosis rate is lower (P =0.017) than on other 3 medias with significant difference,respectively.The protein expression of pancreatic duodenal homeodomain containing transcription factor (PDX-1)and pancreatic exocrine transcription factor (PTF-1) in 3D-APB were higher than other 3 groups with statistical significance (PPDX-1 =0.013,PPTr-1 =0.012).Also,the gene expression of PDX-1 and PTF-1 mRNA in 3D-APB were higher than other 3 groups with statistical significance (PPDx-1 =0.013,PPTF-1 =0.012).Conclusion 3D-APB can promote cell proliferation and differentiation which is benefit for regeneration medicine utility compared with other kinds of chemosynthesis and native component scaffolds.%目的 体外评估大鼠天然全胰腺脱细胞3D支架(3D-APB)促进种植细胞增殖和分化的功能.方法 利用改良灌注技术制备大鼠3D-APB,随即将实验分为4组,评估培养后第3、5、7、10天细胞的增殖活性及细胞分化功能.结果 3D-APB组细胞增殖率高于其他3组(P=0.011),而凋亡率低于其余3组(P=0.017),且差异有统计学意义;3D-APB组胰十二指肠同源结构域转录因子(PDX-1)和胰腺外分泌转录因子(PTF-1)蛋白表达均高于其余3组,且差异有统计学意义(PPDX-1 =0.013,PPTF-1=0.012);3D-APB组PDX-1和PTF-1基因表达含量均高于其余3组,且差异有统计学意义(PPDX-1 =0.013,PPTF-1=0.012).结论 3D-APB更有利于促进细胞增殖及分化,更适合应用于再生医学领域.

摘要： Objective To explore a simplified and economical method to isolate the murine primary pancreatic acinar cells.Methods The collagenase and trypsin inhibitor dissolving in DMEM solution were used to digest the murine pancreas,and 4％ BSA dissolving in DMEM solution was used to purify and isolate primary pancreatic acinar cells from pancreas.CCK-8 method was applied to check the ability of pancreatic acinar cells to secret amylase.Results After digestion,shaking in the water bath,resuspension,filtration and precipitation,murine primary pancreatic acinar cells could be obtained within 2 hours.Pancreatic acinar cells in good conditions appeared in clusters,and their basolateral domains were round and devoid of blebs,and the cytoplasm appeared clear.Their apical domain were surrounded by hundreds of zymogen granules which looked darker.The nucleus was located in the basal area of the vesicular region.The basal level of amylase release as a percent of total release from pancreatic acinar cells was around 2.5％ in CCK8-unstimulated group.This rate started to increase after CCK-8 stimulation and reached its peak [(12.83 ± 1.04) ％] at a concentration of 50 pmol/L of CCK-8,but the ratio of the amylase level secreted by the pancreatic acinar cells to the total amylase level displayed a decreasing trend with the increase of CCK-8 concentration.Conclusions This optimized method had the advantage of being fast and simple,low technical difficulty and good repetition.It was a new simplified and cheap method for isolating murine pancreatic acinar cells.%目的 探索一种简单、经济的小鼠胰腺腺泡细胞分离提纯的新方法.方法 采用胶原酶、胰蛋白酶抑制剂溶于DMEM细胞培养液消化小鼠胰腺,DMEM联合4％ BSA溶液提纯胰腺腺泡细胞.采用CCK-8法检测胰腺腺泡细胞分泌淀粉酶的能力.结果 经过消化、水浴、重悬、过滤、沉淀,在2h内即可快速分离出小鼠原代胰腺腺泡细胞.状态较好的腺泡细胞多呈团状,其基底外侧区域表面呈光滑圆形且没有泡状物,胞质清晰,顶端区域被数百个酶原颗粒包围,颜色较暗,细胞核位于囊泡状区域的基底部.未加CCK-8刺激组腺泡细胞的淀粉酶基础分泌水平约占总淀粉酶分泌水平的2.5％,CCK-8刺激后腺泡细胞分泌的淀粉酶水平升高,在CCK-8浓度为50 pmol/L时达到峰值[(12.83±1.04)％],之后随着CCK-8浓度增加细胞分泌的淀粉酶水平/总淀粉酶水平百分比下降.结论 本研究改进的方法具有快速、简便、技术难度小、重复性好的特点,是一种简化而又经济的小鼠胰腺腺泡细胞分离纯化新方法.

摘要： 目的:探讨柴芩承气汤(Chaiqinchengqi decoction,CQCQD)对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)信号传导通路的影响.方法:将18只SD大鼠随机分成对照组、AP组及CQCQD组,每组6只,采用8％左旋精氨酸4g/Kg腹腔注射制作AP大鼠模型.CQCQD组管喂CQCQD 1mL/100g,1次/2h;各组于6h取胰腺组织分离胰腺腺泡细胞,观察胰腺腺泡细胞PLC,3磷酸肌醇(3 phosphoinositide,IP3)及Ca2+浓度变化.结果:AP组病理评分(6.2±1.1)高于对照组(2.8±0.4)及CQCQD组(3.8±0.8,P＞0.05)；CQCQD组病理评分高于对照组(P＜0.05); AP组胰腺腺泡内PLC浓度(1187.2±228.18),与CQCQD组(905.25±78.49),对照组(682.50±121.84)相比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CQCQD组与对照组比较,无统计学差异(P＞0.05)；AP组腺泡细胞内IP3浓度(872.2±88.4),与CQCQD组(611.0±42.5),对照组(518.4±115.8)相比较,差异有统计学意义(P＜0.05);AP组胰腺腺泡细胞内[Ca2+]i的荧光强度(34.8±27.0),与CQCQD组(12.6±2.5)及对照组(5.1±2.2)相比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；CQCQD组与对照组相互比较,腺泡细胞内[Ca2+]i的荧光强度无统计学差异(P＜0.05).结论:CQCQD可降低该胰腺腺泡细胞PLC信号传导,缓解胰腺腺泡细胞钙超载,减轻胰腺组织病理损伤.

摘要： 目的:探讨柴芩承气汤(CQCQD)对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠胰腺腺泡细胞胆囊收缩素受体1 (Cholecystokinin receptor 1,CCKR1)的影响.方法:将18只SD大鼠随机分成对照组、AP组及CQCQD组,每组6只,采用8％左旋精氨酸4g/Kg腹腔注射制作AP大鼠造模.CQCQD组管喂CQCQD 1mL/100g,1次/2h;于6h取胰腺组织分离胰腺腺泡细胞,观察胰腺腺泡CCKR1受体的基因及蛋白表达及Ca2+浓度变化.结果:AP组胰腺腺泡细胞内[Ca2+]i的荧光强度(34.8±27.0)高于CQCQD组(12.6±2.5)及对照组(5.1±2.2,P＜0.05),CQCQD组与对照组相互比较,无统计学差异(P＜0.05).AP组与对照组相比较,CCKR1 mRNA表达上调(表达率=1.761,P=0.024)；CQCQD组与AP组,CCKR1 mRNA表达下调(表达率=0.311,P=0.035).AP组CCKR1与β-actin灰度值的比值(1.43±0.17)高于对照组(0.70±0.15)及CQCQD组(0.79±0.11,P=0.000);但CQCQD组与对照组相比较,差异无统计学意义(P=0.309).结论:精氨酸诱导的AP大鼠胰腺病理改变不但与血清CCK-8水平升高有关,还与胰腺腺泡细胞CCK受体的mRNA和蛋白表达上调,细胞内PLC及IP3水平升高引起的胰腺腺泡细胞钙超载有关.2、CQCQD可下调胰腺腺泡细胞CCKR1的mRNA和蛋白表达,缓解胰腺腺泡细胞钙超载.

摘要： 目的：ACE2-Ang(1-7)-Mas轴在胰腺炎病理生理中的作用尚不明了.p38MAPK/NF-κB信号通路在细胞的炎症反应过程中起重要作用.然而,p38MAPK/NF-κB通路是否介导了ACE2-Ang(1-7)-Mas轴在胰腺炎发病机理中的作用还不清楚.本研究的目的在于探讨ACE2-Ang(1-7)-Mas轴在胰腺腺泡细胞炎症反应中的作用以及ACE2-Ang(1-7)-Mas轴和p38MAPK/NF-κ B通路的关系.rn 方法：用10nmol/L的雨蛙素刺激小鼠胰腺腺泡癌细胞MPC-83,分别在2h,6h,12h,24h,及48h收集细胞.用不同浓度的Ang(1-7)和A779预处理MPC-83细胞30min,然后用雨蛙素刺激24小时后,通过Western Blotting技术检测ACE2,Mas受体,p38MAPK,p-p38MAPK和NF-κB的表达.细胞免疫荧光法定位检ACE2,Mas受体和p38MAPK的表达.实时荧光定量PCR检测p38MAPK,NF-κB,TNF-α and IL-6 mRNA的表达.rn 结果：与对照组相比,雨蛙素刺激MPC-83细胞的2～48hACE2蛋白水平显著升高(p＜0.05),24h达到高峰.Mas受体在雨蛙素刺激的6～小时至24h显著升高(p＜0.05),12h达到高峰.p38MAPK和p-p38MAPK蛋白水平在显著性增加,24h达高峰.Ang(1-7)上调ACE2和Mas受体的表达,下调p38MAPK、p-p38MAPK、NF-κ B蛋白及IL-6和TNF-α mRNA的表达.应用A779处理细胞可得到与Ang(1-7)相反的结果.rn 结论：ACE2-Ang(1-7)-Mas轴通过抑制p38MAPK/NF-κB通路减轻胰腺腺泡细胞炎症反应.

摘要： 目的:建立大鼠急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型,探讨大柴胡汤加减方对急性胰腺炎大鼠胰腺外分泌功能的影响.方法:选取正常Wistar大鼠30只,随机分为3组,包括A组(正常对照组)10只、B组(AP模型组)10只、C组(AP模型+大柴胡汤加减方灌胃组)10只.制备大鼠AP动物模型方法及灌胃方式同上,即给予A组大鼠生理盐水50μg/(kg·h)腹腔注射,连续六次,AP动物模型制备成功后立即给予大柴胡汤加减方灌胃(浓度同上)治疗,6h后活体取胰腺组织,检测胰腺腺泡钙-镁ATP酶活性和胰腺腺泡细胞内钙离子浓度,探讨大柴胡汤加减方对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡钙-镁ATP酶活性及腺泡细胞内Ca2+浓度的影响.结果:1.B组胰腺腺泡内Ca2+浓度较C组明显增高,两组比较有统计学意义(P＜0.05).2.3组钙-镁ATP酶活性的变化:光镜下可见胰腺腺泡细胞的细胞膜、细胞浆及核膜上分布有深浅不一的棕色颗粒.正常对照组除少量切片外其余切片都显示阳性,AP组切片以显示阴性多见,大柴胡汤加减方治疗组以阳性多见,但较A组少,B组和C组之间比较有统计学意义(P＜0.05).结论:大柴胡汤加减方可能通过增加腺泡细胞钙-镁ATP酶活性来减少腺泡细胞中的Ca2+浓度,从而减轻腺泡细胞内钙超载,改善胰腺外分泌的功能.

摘要： 采用消化法分别培养涎腺细胞和脂肪来源干细胞，将两种细胞用transwell培养小室和24孔培养板进行共培养，内室接种涎腺细胞，外室接种脂肪来源干细胞，培养基采用含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养基，并添加含质量分数为0.5％‑5％的富血小板纤维蛋白浸提液的诱导脂肪干细胞转分化为涎腺腺泡样细胞；本发明方法能有效提高脂肪干细胞向涎腺腺泡样细胞转分化的效率，为组织工程技术、再生医学研究和应用提供种子细胞和转分化新方法。

摘要： 采用消化法分别培养涎腺细胞和脂肪来源干细胞，将两种细胞用transwell培养小室和24孔培养板进行共培养，内室接种涎腺细胞，外室接种脂肪来源干细胞，培养基采用含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养基，并添加含质量分数为0.5％-5％的富血小板纤维蛋白浸提液的诱导脂肪干细胞转分化为涎腺腺泡样细胞；本发明方法能有效提高脂肪干细胞向涎腺腺泡样细胞转分化的效率，为组织工程技术、再生医学研究和应用提供种子细胞和转分化新方法。

摘要： 本发明公开了一种模拟体内微环境的胰腺导管上皮细胞和胰腺腺泡细胞共培养体系的构建方法，属于细胞生物学技术领域。本发明将原代小鼠胰腺腺泡细胞接种于Transwell双层培养室上层中，将人胰腺导管上皮细胞接种到Transwell双层培养室下层共培养，向Transwell双层培养室下层的胰腺导管上皮细胞中加入牛磺胆酸钠，观察上层胰腺腺泡细胞活力、形态、凋亡。本发明把胰腺导管上皮细胞损伤与胰腺腺泡细胞结合起来，采用非接触式共培养方式搭建胰腺导管上皮细胞和胰腺腺泡细胞共培养体系。共培养体系中上述两种细胞可以通过Transwell跨膜交换胞外分泌物质。该体系能够更好地模拟胆汁淤积诱导的胰腺炎，提供了一种更真实反映胆汁淤积诱导胰腺炎的体外细胞模型。

摘要： 本发明公开了一种在胰腺腺泡细胞特异表达PIK3C3 S282A的小鼠模型的构建方法，属于医药技术领域。该构建方法包括如下步骤：构建人PRSS1启动子‑Cre外源质粒；构建LoxP‑PIK3C3的外源质粒；制备PRSS1‑Cre小鼠；制备LoxP‑PIK3C3胚胎干细胞；制备LoxP‑PIK3C3小鼠；制备在胰腺腺泡细胞特异表达PIK3C3 S282A的小鼠。本发明是在Cre‑LoxP系统中引入了一种新的胰腺腺泡细胞特异表达的启动子,即人PRSS1启动子，扩大了基因编辑的范围，且比现有技术的大鼠CELA1启动子的特异性更强。

摘要： 本发明公开了一种胰腺腺泡细胞的原代培养方法。本发明胰腺腺泡细胞的原代培养方法包括如下步骤：(1)制备胰腺腺泡细胞悬液；(2)Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化胰腺腺泡细胞。通过本发明方法可以成功培养出胰腺腺泡细胞，并可以顺利进行传代，细胞活性达96％以上，为胰腺腺泡细胞有关疾病的发病机理或药物治疗的研究奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种模拟体内微环境的胰腺导管上皮细胞和胰腺腺泡细胞共培养体系的构建方法，属于细胞生物学技术领域。本发明将原代小鼠胰腺腺泡细胞接种于Transwell双层培养室上层中，将人胰腺导管上皮细胞接种到Transwell双层培养室下层共培养，向Transwell双层培养室下层的胰腺导管上皮细胞中加入牛磺胆酸钠，观察上层胰腺腺泡细胞活力、形态、凋亡。本发明把胰腺导管上皮细胞损伤与胰腺腺泡细胞结合起来，采用非接触式共培养方式搭建胰腺导管上皮细胞和胰腺腺泡细胞共培养体系。共培养体系中上述两种细胞可以通过Transwell跨膜交换胞外分泌物质。该体系能够更好地模拟胆汁淤积诱导的胰腺炎，提供了一种更真实反映胆汁淤积诱导胰腺炎的体外细胞模型。

摘要： 本发明包括用于将细胞转化成葡萄糖应答性的胰岛素生成细胞的组合物和方法，其使用表达β细胞素和PDX1的构建体，例如，利用一种或多种载体来转化胰腺腺泡细胞，所述载体使用超声靶向破坏微泡(UTMD)来表达β细胞素和PDX1。

摘要： 本发明涉及例如扩增哺乳动物腺泡细胞的方法，包括在包含细胞培养基和细胞附着表面的细胞培养体系中培养细胞，条件是其中所述的腺泡细胞经过3－4倍的扩增并转分化为显示腺泡细胞和肝细胞特征的修饰的细胞表型(IP细胞)。本发明还涉及体外将这些IP细胞转化至胰岛素产生细胞的方法，包括在新的、限定的培养基中培养所述细胞。本发明还公开了适于进行这些方法的培养基、具有IP细胞表型和/或由这些方法产生的分离的细胞，以及完成这些方法的试剂盒。

摘要： 本发明公开了一种山羊胰腺腺泡细胞的分离培养及鉴定方法，所述方法包括如下步骤：（1）将1‑3mm3山羊胰腺组织清洗后离心，弃上清，然后向离心后的沉淀中添加消化液进行山羊胰腺组织消化处理；（2）终止消化后，离心并弃上清，用原代培养基混匀离心后的沉淀，得山羊胰腺腺泡悬液；（3）依次采用差时消化、差时贴壁及细胞刮取的方式对山羊胰腺腺泡细胞悬液中的山羊胰腺腺泡细胞进行纯化处理；（4）将纯化处理后所得的山羊胰腺腺泡细胞接种至传代培养基中进行传代培养；（5）对传代培养后的山羊胰腺腺泡细胞进行鉴定。

摘要： 本发明公开了一种在胰腺腺泡细胞特异表达PIK3C3 S282A的小鼠模型的构建方法，属于医药技术领域。该构建方法包括如下步骤：构建人PRSS1启动子‑Cre外源质粒；构建LoxP‑PIK3C3的外源质粒；制备PRSS1‑Cre小鼠；制备LoxP‑PIK3C3胚胎干细胞；制备LoxP‑PIK3C3小鼠；制备在胰腺腺泡细胞特异表达PIK3C3 S282A的小鼠。本发明是在Cre‑LoxP系统中引入了一种新的胰腺腺泡细胞特异表达的启动子,即人PRSS1启动子，扩大了基因编辑的范围，且比现有技术的大鼠CELA1启动子的特异性更强。