脂肪氧合酶

摘要： 为探究黄金茶红茶在萎凋、揉捻、发酵等加工工序中β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,β-GC)、醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)、脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)和主要香气成分的动态变化,该研究以黄金茶一芽二叶为原料,按照红茶工艺进行加工,测定其加工过程中β-GC、ADH、LOX的活性及香气组分的变化规律。结果表明,β-GC、ADH、LOX 3种酶的活性均在萎凋工序中达到最高,随后在揉捻和发酵工序中持续下降;共检测到263种香气组分,包括53种醇、53种烯烃、70种烷烃、36种酯、14种酮、17种醛和20种其他类化合物,其中醇类和酯类物质的相对含量均远高于其他香气种类。此外,相对含量较高的香气组分有苯乙醇、香叶醇、反式-橙花叔醇、芳樟醇、水杨酸甲酯、(4 E)-4 E-己酸己酯、二氢猕猴桃内酯、苯甲醛、反-2-辛烯醛、庚二烯醛、β-环柠檬醛、α-法尼烯、(-)-α-荜澄茄油烯、顺茉莉酮、β-紫罗酮等,且黄金茶红茶香型可能属于芳樟醇及其氧化物主导型香型。该研究结果丰富了黄金茶红茶风味品质的化学基础理论,并为生产优质黄金茶红茶提供了科学依据。

摘要： 外源镍对大豆脂氧酶(LOX)催化甘油三亚油酸酯反应产率的影响较为明显,氢过氧化甘油三亚油酸酯的产率从15.2%降低至8.0%,但对亚油酸底物的过氧化产率影响很小。镍可使LOX酶的UV光谱在一定浓度范围内增强一倍,但对FS和CD光谱影响甚微,说明镍对LOX的构象影响较小,可能只发生在与镍作用的局部细小部位。镍未将LOX活性中心的铁置换出来,推测镍与LOX酶蛋白表面氨基酸序列的特定位点发生结合,从而改变其细微构象并进而影响其催化性能。

摘要： 开发了一种绿色、温和的合成十八碳二烯脂肪酸玉米油的酶–化学方法。以大豆脂氧酶好氧催化氧化玉米油所得的氢过氧化玉米油为原料,以乙醇/乙酸乙酯稀释氢过氧化玉米油酯,与溶有亚硫酸钠水相混合,还原得到十八碳二烯脂肪酸甘油酯。考察了溶剂浓度、还原剂用量、温度、时间对氢过氧化玉米油还原产率的影响。最佳工艺条件为:15°C,以90% (V/V体系)的乙醇为溶剂,n(Na2SO3):n(-OOH) = 1.2:1、反应1.5 h,氢过氧化大豆油的转化率达91%。

摘要： 利用^(31)P核磁共振比较酶促氧化前后蛋黄磷脂的组成,通过^(1)H核磁共振监测并比较空白组(未氧化)与脂肪氧合酶酶促氧化及95°C水浴加热氧化过程中脂肪酰基的相对物质的量、一级和二级氧化化合物含量的变化。结果表明:磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺是蛋黄磷脂的主要成分;蛋黄磷脂氧化后,磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺含量均下降,而溶血性磷脂含量增加;所有被氧化的蛋黄磷脂样品中总不饱和脂肪酸相对物质的量均下降,而饱和脂肪酸相对物质的量均上升;其中在pH 6酶促条件下,亚油酸降解速率最快。脂肪氧合酶在pH 6条件下催化氧化蛋黄磷脂生成更多的氢过氧化物,加热后主要生成(Z,E)-2,4-二烯醛;而在pH 9条件下蛋黄磷脂生成氢过氧化物后快速降解,在加热后生成较多正构烷醛。因此,可以利用脂肪氧合酶在pH 6条件下催化氧化蛋黄磷脂生成更多的2,4-二烯醛类风味化合物。

摘要： 武夷肉桂是以福建省级茶树良种肉桂(Camellia sinensis cv.Rougui)鲜叶为原料制成的乌龙茶,具有"岩骨花香"的品质特征,深受消费者青睐.除茶树鲜叶外,武夷肉桂的品质形成很大程度上取决于加工工艺,但生产加工过程中以绿叶挥发物(Green Leaf Volatiles,GLVs)和果酯类为代表的脂肪族类香气成分代谢机理的研究,尚未见报道.以武夷肉桂的鲜叶、晒青叶及做青过程叶为试材,采用顶空固相微萃取法(Headspace Solid-Phase Microextraction,HS-SPEM)结合气相色谱与高通量飞行时间质谱联用技术(Gas Chromatography-Time-of-Flight Mass Spectrometry,GC-TOF-MS)对加工过程样中的脂肪族类香气成分检测发现:脂肪族醛类在做青过程中显著降低,而大量的脂肪族醇类和酯类显著积累,其中叶醇酯类和己烯醇、酯类分别对静置失水和机械损伤存在响应;利用紫外/可见分光光度法检测加工过程样中LOX-HPL途径中关键酶活力,结果表明,脂肪氧合酶(Lipoxygenase,LOX)、乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)及乙醇酰基转移酶(Alcohol acyltransferases,AAT)的活力分别在第三次摇青叶(3T)、第四次摇青后叶(4T)及第五次摇青后叶(5T)中达到最大值;实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)结果表明,CsLOX2、CsLOX5基因主要在做青初始阶段(2T、3T)相对表达量较高,而随着工艺过程的推进,CsADH2-1、CsAAT基因在做青后期(4T、5T)开始上调表达;通过Pearson系数评估武夷肉桂加工过程中的脂肪族类香气、酶活力和基因表达量间的相关性,发现正己醇、戊酸叶醇酯、己酸己酯、丁酸甲基叶醇酯、柳酸叶醇酯等大量具有天然花果香的脂肪族醇类和酯类与CsADH2-1基因具有显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)的正相关,CsAAT基因与CsLOX2、CsLOX5基因在加工过程中具有相似的表达模式(r=0.762,r=0.732).LOX-HPL途径关键基因的共表达,驱动了脂肪族类香气在加工过程中的协同积累,是武夷肉桂馥郁香气形成的重要基础.

摘要： 首次报道了一步分离纯化大豆脂肪氧合酶(lipoxygenases,LOXs)的三相分离法.考察了溶剂、温度、pH值、(NH4)2 SO4饱和度等参数对纯化倍数和活力回收率的影响.优化后的体系条件为:粗酶液与叔丁醇的体积比为1:2.5、(NH4)2SO4饱和度为60％,pH值为8、温度为20°C、反应时间为60 min,其纯化倍数为8.2倍,活力回收率为78.2％.由三相法部分纯化的LOXs的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析显示,其分子质量约为95 kDa.结果表明三相分离法是从脱脂豆粉中部分纯化LOXs的有效方法.

摘要： 利用新鲜豆粕耦合超声波技术开发了一条高底物浓度下合成氢过氧化亚油酸(linoleic acid hydroperox-ide,LA-HPOD)的新工艺.研究了pH、温度、厎物和溶剂用量等反应参数对LA-HPOD产率的影响.结果表明,超声波因辐射作用能显著缩短反应时间,有效提高LA-HPOD的产率.40 kHz,100 W超声波辐射下,1.5 g豆粕和1.5 g亚油酸在15°C下,0.5 mL乙醇、7.5 mL pH 9硼酸盐缓冲液中反应40 min,LA-HPOD的产率为89％.该方法成功地将超声波辐射应用于脂肪氧合酶促反应,并采用成本低廉的豆粕代替昂贵的脂肪氧合酶,达到了高底物浓度下低成本绿色高效合成LA-HPOD的目的.

摘要： 不同的焙烤食品,添加剂成份各异,用途不一。比如生产面包采用的复合型添加剂,包括铵盐、钙盐、氧化剂、乳化剂、酶制剂(如淀粉酶、蛋白酶、乳糖酶、脂肪氧合酶等)、分散剂或填充剂等。由于面包添加剂的有效成分及使用量都极低,工艺上要求前期要充分混合均匀以便于大批量使用时的准确称量计量和在面团中混合分散均匀,发挥其最好的作用效果。

摘要： 面粉品质特性直接影响到焙烤制品质量。因此,为了确保产品质量,添加剂在使用前要根据其面粉品质特性使用合适的添加剂。如加工面包须考虑面粉筋力大小、淀粉酶活性、颜色白度等。生产汉堡类地副食的面粉要求蛋白质12%,湿面筋32%~33%,抗延伸阻力660 BU。主食大面包面粉蛋白质13%,湿面筋36%,抗延伸阻力750 BU。如果选用的面粉蛋白质含量和湿面筋含量达不到上述要求,用该面粉生产面包时可选用有增强筋力的面包添加剂,如抗坏血酸、葡萄糖氧化酶、脂肪氧合酶、离子型乳化剂、谷朊粉等成分的面包添加剂。

摘要： 本试验研究了从植物种子中分离、纯化大豆脂肪氧合酶的方法,研究表明经过缓冲液提取、差速离心、盐析沉淀和离子交换层析可以得到电泳纯级的大豆脂肪氧合酶.特性研究表明大豆脂肪氧合酶的最适pH值为9,在较低温度下酶活能保持较高水平,用双倒数法求的大豆中脂肪氧合酶Km=80.6μmol/L,Vmax=54.2μmol/(Lomin).

摘要： 本发明提供了从多不饱和脂肪酸(PUFA)来源由脂氧合酶(LOX)催化的产生脂族不饱和C10‑醛化合物的新方法。本发明还涉及来自不同藻类来源的新颖的优选双功能LOX的分离和表征，以及来自不同细菌来源的结构和/或功能相关的LOX的鉴定。本发明还涉及衍生自所述新鉴定的酶的酶突变体的提供。本发明的另一形态涉及所述酶的相应编码序列、重组载体和重组宿主细胞，它们适合于产生此类LOX并用于执行脂族不饱和C10‑醛化合物的新产生方法。本发明的另一形态涉及根据本发明获得的特定醛或醛混合物作为调味成分或者食品或饲料组合物的成分的用途。

摘要： 本发明公开了一种催化效率与热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明通过对铜绿假单胞菌来源的脂肪氧合酶进行分子改造，经过定点突变或饱和突变，筛选获得催化效率和热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体，催化效率提高了1.4至9.2倍，在50°C下孵育，半衰期T1/2可达到11.6min，较野生型提升了165.7％。可以显著提高脂肪氧合酶的催化效率和热稳定性，为其工业应用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了杨树芽提取物在制备脂肪氧合酶抑制剂中的用途，本发明还公开了一种杨树芽提取物的制备方法。本发明首次提供了杨树芽提取物在制备脂肪氧合酶抑制剂中的用途，利用该用途，可将杨树芽提取物制成食品添加剂，用于改善果蔬等加工制品的风味口感，防止含油食物发生劣变，延长其贮藏期，另外还有可能用于制备哮喘、过敏性鼻炎等治疗药物，用于缓解过敏症状等，具有非常广泛的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种大豆乳清废水逆pH梯度提取脂肪氧合酶的方法，属于食品加工废水利用技术领域。本发明对大豆乳清废水预处理后，通过逆pH梯度法提取脂肪氧合酶，先在远离脂肪氧合酶等电点的pH下除去杂蛋白，然后再在脂肪氧合酶等电点处析出脂肪氧合酶，再结合超滤及凝胶色谱得到精制脂肪氧合酶。本发明利用大豆乳清废水获得工业价值高的脂肪氧合酶，而且脂肪氧合酶提取率高、纯度高、酶活性好。本发明方法便于操作，安全高效，成本低，可用于工业上的大豆乳清废水中脂肪氧合酶开发利用，以实现资源化回收利用，具有显著的经济效益和社会效益。

摘要： 本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法，其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列；构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点，然后以重组质粒为模板，在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物，进行全质粒PCR反应，构建3个定点饱和突变库，然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库；最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变，通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高，具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。

摘要： 本发明公开了一种酸性脂肪氧合酶及其制备方法与应用。本发明从Myxococcus xanthus DK1622菌株基因组中，克隆并获得一种脂肪氧合酶基因MxLOX，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。该酶在pH3.0,30°C条件下活性最高，pH2.5‑5.0，30°C条件下活性稳定。重组脂肪氧合酶rMxLOX可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、甲基蓝的降解，在酸性工业废水的处理中具有潜在的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种催化效率与热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明通过对铜绿假单胞菌来源的脂肪氧合酶进行分子改造，经过定点突变或饱和突变，筛选获得催化效率和热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体，催化效率提高了1.4至9.2倍，在50°C下孵育，半衰期T1/2可达到11.6min，较野生型提升了165.7％。可以显著提高脂肪氧合酶的催化效率和热稳定性，为其工业应用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种重组脂肪氧合酶及其诱导表达方法和用途。本发明重组脂肪氧合酶，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。重组脂肪氧合酶的诱导表达方法，包括以下步骤：将基因工程菌在液体培养基中培养，至菌液OD600值为0.8‑1.0时，加入IPTG诱导表达；取菌液离心，弃上清，加入PBS缓冲液重悬并超声破碎，再次离心，收集上清液，经纯化后得到重组脂肪氧合酶。本发明所获得的脂肪氧合酶vvLOX具有更好专一催化性和优良的的稳定性，可明显提高氢过氧化酶活。

摘要： 本公开的各种实施方式涉及具有式(I)、式(IA)、式(IB)、式(IC)、式(ID)、式(IE)的化合物和/或其药学上可接受的盐。所述化合物可适于抑制脂肪氧合酶、和/或治疗相关疾病如阿尔茨海默病。在一些实施方式中，所述化合物可作为药物制剂的一部分给予患者。

摘要： 本发明属于大豆乳清废水资源化利用技术领域，涉及一种双水相萃取大豆乳清蛋白废水中脂肪氧合酶的工艺。采用PEG6000‑(NH4)2SO4双水相体系进行萃取。本发明提出PEG6000‑(NH4)2SO4双水相萃取体系分离提取大豆乳清废水中LOX,并提出最优的提取条件，结合优化模型得以相互验证,本发明采用双水相萃取分离技术对大豆乳清废水中LOX进行分离，能降低废水中的COD和BOD，减少资源浪费及环境污染，实现大豆乳清废水高值化利用。