胶原诱导性关节炎

摘要： 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因不明的慢性自身免疫性疾病,病变主要位于四肢小关节,随着疾病发展,可累及全身各个系统,其中ILD是最常见的关节外改变。RA患者中有2%~10%可发展为类风湿性关节炎间质性肺疾病(rheumatoid arthritis-interstitial lung disease,RA-ILD)[1];近年来RA的总体死亡率有所下降,但ILD却成为RA患者主要死亡原因之一,并呈逐年上升趋势,占所有RA相关死亡的7-13%[2]。

摘要： 目的基于白细胞介素(IL)-23/辅助性T细胞17(Th17)炎症轴探讨豨莶草对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型的治疗作用。方法建立CIA大鼠模型,将建模成功大鼠随机分为模型组、豨莶草组、豨莶草+IL-23组,每组10只;另外10只作为阴性对照组。观察大鼠形态并称量体质量,运用水容积法测定大鼠足趾肿胀度、5级评分法测关节炎指数;苏木精-伊红染色(HE)检测滑膜组织形态学情况;酶联免疫吸附(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平;流式细胞术检测腹主动脉血和滑膜组织中Th17细胞百分比。结果与阴性对照组相比,模型组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高(P<0.05);与模型组相比,豨莶草组大鼠体质量升高,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均降低(P<0.05);与豨莶草组相比,豨莶草+IL-23组大鼠体质量降低,足趾肿胀度、关节炎指数、腹主动脉血和滑膜组织中IL-23、IL-17、IL-6、IL-22、IL-21含量及mRNA水平、Th17细胞百分比均升高(P<0.05)。结论豨莶草可通过抑制IL-23/Th17炎症轴从而降低炎症水平,实现对CIA大鼠的治疗。

摘要： 目的 研究中医“散寒除湿”和“清热祛湿”两种治法的代表方乌头汤和四妙散分别对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)DBA/1小鼠的白细胞介素-17 (interleukin-17,IL-17)、转化生长因子-β (transforming growth factor β,TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响,从“以方测证”角度探讨DBA/1小鼠CIA模型的中医证候属性。方法复制DBA/1小鼠CIA模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、乌头汤低剂量组、乌头汤高剂量组、四妙散低剂量组、四妙散高剂量组、甲氨蝶呤组,另设一组空白组,每组6只,连续给药35 d。观察记录关节炎指数的变化,ELISA法检测血清中IL-17、TGF-β及TNF-α的含量水平,免疫组化法检测炎症关节组织中IL-17、TGF-β及TNF-α的表达。结果 与空白组比较,模型组关节炎指数评分明显升高(P<0.01);模型组关节滑膜增生明显,软骨表面组织变性、坏死;关节组织、血清中IL-17、TNF-α、TGF-β表达显著增高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,从第21天起给药组关节炎指数评分明显下降(P<0.05或P<0.01);关节滑膜增生、关节软骨表面损伤减轻;乌头汤低/高剂量组、四妙散高剂量组、甲氨蝶呤组关节组织中IL-17、TNF-α、TGF-β表达明显降低(P<0.05或P<0.01);乌头汤高剂量组、四妙散低/高剂量组、甲氨蝶呤组血清中IL-17、TNF-α表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。各给药组之间相比较:与乌头汤高剂量组比较,甲氨蝶呤组、乌头汤低剂量组、四妙散低剂量组IL-17表达明显升高(P<0.05或P<0.01);乌头汤低剂量组TNF-α表达升高(P<0.05),其余均无统计学差异。结论 乌头汤及四妙散给药均能改善CIA小鼠模型的症状。对相关炎症因子的抑制,可能是乌头汤及四妙散的作用机制之一,推测DBA/1小鼠CIA模型或许兼有“寒痹”与“热痹”的属性。

摘要： 目的观察加味芍甘附子汤通过早期生长反应蛋白2(early growth responseprotein 2,Egr2)调控胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)老年大鼠炎症反应的作用。方法选用清洁Wistar大鼠96只,其中青年鼠与老年鼠各48只。随机将老年鼠与青年鼠分为正常组、模型组、对照组、中药组,每组各12只。正常组常规饲养,其余3组复制CIA大鼠模型后分别给予生理盐水、雷公藤多苷片及加味芍甘附子汤灌胃4周,每周评价各组大鼠关节炎症指数(arthritis index,AI);4周后苏木精—伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)检测踝关节组织的病理变化;RT-qPCR检测大鼠膝关节滑膜Egr2 mRNA表达;Elisa法测定外周血白细胞介素-17A(interleukin 17A,IL-17A)、γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)表达。结果(1)各组大鼠AI评价:给药期间,青年鼠和老年鼠的AI评分均降低,且在四周后中药组的评分最低(P<0.05),而老年鼠和青年鼠的组间比较差异无统计学意义。(2)HE检测大鼠踝关节组织的病理变化:四周后取材,踝关节病理学提示除正常组外,各组均有滑膜组织增生及炎性细胞浸润,老年鼠模型组的炎性细胞浸润明显重于青年鼠模型组,且中药组均明显轻于模型组。(3)RT-qPCR检测大鼠膝关节滑膜Egr2 mRNA表达:对照组和中药组的大鼠膝关节滑膜Egr2 mRNA表达高于模型组(P<0.05),老年鼠模型组的大鼠膝关节滑膜Egr2 mRNA表达明显低于青年鼠模型组(P<0.05),而老年鼠中药组的表达明显高于青年中药组(P<0.05)。(4)Elisa法测定大鼠外周血IFN-γ、IL-17A、IL-6的表达:老年鼠中药组IL-17A的表达低于模型组与对照组(P<0.05);青年鼠中药组IL-17A的表达低于模型组(P<0.05),但高于对照组(P<0.05)。老年鼠模型组及对照组外周血IL-17A的表达均高于青年鼠相应组别(P<0.05),而老年鼠中药组的表达低于青年鼠中药组(P<0.05)。结论(1)老年CIA大鼠Egr2的低表达为参与炎症过程可能因素之一;(2)加味芍甘附子汤可能通过对Egr2的调控改善CIA老年鼠关节滑膜炎症,还需进一步开展机制研究。

摘要： 目的观察苗药五香血藤提取物对Ⅱ型胶原性关节炎(CIA)大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)及三型酸敏感离子通道(ASIC3)表达的影响。方法成年SD大鼠60只,随机分为空白对照组(正常组),模型对照组(模型组),地塞米松对照组(阳性药物组),五香血藤提取物低、中、高剂量治疗组,每组10只,采用牛Ⅱ型胶原诱导建造大鼠模型,阳性药物组灌胃剂量为0.35 mg/kg;五香血藤提取物低、中、高剂量组灌胃剂量分别为63、126、252 mg/kg,模型组与正常组给予灌胃同体积的蒸馏水;各组大鼠给药次数为1次/d,连续给药28 d;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠血清VEGF、ASIC3含量,观察各组大鼠足肿胀度、关节炎症指数(AI)、脏器指数及踝关节组织病理学改变。结果与模型组比较,各给药组大鼠在第21、28天右后足肿胀度、关节总AI均显著好转(P0.05),脏器指数比较显示,与模型组比较,各给药组大鼠脾脏、胸腺指数均显著降低(P<0.05);病理观察显示,与模型组、五香血藤提取物低、中剂量组比较,五香血藤提取物高剂量组和阳性药物组大鼠踝关节均可见明显新生血管,滑膜组织及周围组织内水肿明显缓解。结论五香血藤提取物能够通过抑制VEGF及ASIC3的表达,对CIA大鼠关节起到保护作用。

摘要： 目的探讨臭氧(O_(3))关节腔注射对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜、脾脏、淋巴结中破骨细胞相关分子的影响,阐明臭氧治疗RA骨破坏的潜在作用机制。方法32只Wistar大鼠随机分为4组:即正常对照组、CIA模型组(CIA组)、甲氨蝶呤组(MTX组)和臭氧组(O_(3)组),每组8只。免疫组化法检测各组大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠滑膜、淋巴结、脾脏组织中核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、RANKL/OPG、TRAF6 mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,CIA组大鼠滑膜组织内可见明显滑膜增生,TRAF6蛋白表达水平升高,滑膜组织、淋巴结中RANKL、TRAF6 mRNA及RANKL/OPG水平显著升高(P0.05)。结论O_(3)关节腔注射可以减轻CIA大鼠的滑膜增生,其作用机制可能与O_(3)抑制滑膜、淋巴结和脾脏组织RANKL、OPG、RANKL/OPG、TRAF6 mRNA表达水平有关,为O_(3)治疗RA相关骨侵蚀的机制提供了实验依据。

摘要： 目的观察芍甘附子汤加味对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠肺间质病理及血清KL-6、IL-6与IL-17表达水平的影响。方法60只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为空白组10只,造模组50只。空白组予以正常饮食喂养,直至试验结束。造模组复制胶原诱导性关节炎模型。造模持续2周,将造模成功的40只大鼠随机分为5组,每组8只,分别为对照组、大、中、小剂量中药组及雷公藤组。空白组与对照组蒸馏水灌胃,其余4组分别给予相对应的药物进行灌胃。灌胃持续4周后即实验第6周末后将所有大鼠处死。选大鼠血清用ELISA法检测IL-6、IL-17、KL-6水平。取大鼠肺组织HE染色观察肺间质病理变化。结果血清细胞因子IL-6、IL-17、KL-6在对照组中均显著升高(P0.05)。空白组大鼠肺组织结构及肺泡壁完整,未见明显炎性细胞浸润;对照组大鼠肺组织结构大面积破坏,肺泡结构塌陷,肺泡间隙充血水肿,肺泡壁增厚,出现大量纤维瘢痕;中药小剂量组肺泡炎仍然较为明显,肺泡结构紊乱,肺泡间隙仍较宽,较对照组有所改善;中药中、大剂量组及雷公藤组肺泡结构较为清晰,伴有轻微炎症反应及少量纤维增生,与对照组相比有较明显的改善。结论芍甘附子汤加味可以显著抑制IL-6、IL-17、KL-6的高表达,这可能是其延缓RA-ILD进展的有效作用机制之一。

摘要： 目的探讨不同剂量加味芍甘附子汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠炎性细胞因子和安全性指标的影响,研究其疗效和安全性。方法Wistar大鼠36只,根据体重随机分为6组:正常组,CIA模型组,对照组及中药低、中、高剂量组,每组6只。正常组常规饲养,其余各组复制CIA寒证模型后,模型组生理盐水灌胃,对照组雷公藤多苷(6.25 mg·kg^(-1))灌胃,中药组加味芍甘附子汤低、中、高剂量(0.625、1.25、2.5 g·mL^(-1))灌胃,干预4周,测定各组大鼠关节炎症指数评分、踝关节滑膜病理学改变、外周血IL-6水平,心(肌钙蛋白)、肝(CK18、HMGB1、GLDH)、肾(NGAL、胱抑素C)早期预警及常规安全性指标。结果干预4周后,加味芍甘附子汤中、高剂量组AI评分较CIA模型组显著降低(P<0.05);病理结果显示加味芍甘附子汤各剂量组与模型组相比,关节腔狭窄、滑膜细胞增生、淋巴细胞浸润及关节面受损减轻;加味芍甘附子汤中、高剂量组血清IL-6水平较CIA模型组降低(P<0.05);各组大鼠外周血生化指标及CK18、HMGB1、胱抑素C水平组间差异无统计学意义;对照组及中药低、中、高剂量组GLDH水平较正常组降低(P<0.05);对照组NGAL水平较正常组升高(P<0.05);对照组及低剂量组肌钙蛋白水平较正常组降低(P<0.05)。结论不同剂量加味芍甘附子汤均未出现心、肝、肾脏毒性作用,并能减轻关节肿胀,降低IL-6水平,为后续相关研究和临床应用提供实验基础。

摘要： 目的研究温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠炎症及N6-甲基腺苷(m6A)甲基化的影响。方法选用雌性Wistar大鼠50只,随机分为正常组(n=10)和造模组(n=40)。采用尾部皮内多点注射乳化剂的方法建立CIA模型。采用容积法(排水体积)和关节炎指数(AI)评分法对模型进行评估,足肿胀体积>1.6 mL、AI评分≥4分视为造模成功。将造模成功的30只CIA大鼠随机分为模型组(n=10)、温化蠲痹方组(中药组,n=10)、甲氨蝶呤(MTX)组(n=10)。中药组给予温化蠲痹方,剂量为22.9 g·kg^(-1)·d^(-1);MTX组给予甲氨蝶呤混悬液,剂量为0.78 mg·kg^(-1),每周1次;正常组和模型组给予等量质量分数为0.9%的氯化钠溶液,每日1次。治疗30 d取各组大鼠膝关节滑膜。采用HE染色法检测滑膜病理情况,以realtime PCR法检测滑膜中甲基转移酶样蛋白3(Mettl3)、甲基转移酶样蛋白14(Mettl14)、肥胖相关蛋白(Fto)、Alkb同系物5(Alkbh5)、Yth N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(Ythdf1)、Yth N6-甲基腺苷RNA结合蛋白2(Ythdf2)基因表达及关节炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)基因表达水平,并采用Western blot法检测Mettl3、Fto蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠足肿胀体积、AI评分明显升高,Mettl3、Mettl14、Fto、Alkbh5、Ythdf1基因表达增加,Ythdf2基因表达降低,TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增加,Mettl3、Fto蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,中药组和MTX组足肿胀体积、AI评分均随时间延长逐渐降低,Mettl3、Mettl14、Fto、Alkbh5、Ythdf1基因表达降低,Ythdf2基因表达增加,TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达降低,Mettl3、Fto蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与MTX组比较,中药组Mettl3、Mettl14、Fto、Alkbh5、Ythdf1基因表达降低,Ythdf2基因表达增加,TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达降低,Mettl3、Fto蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中药温化蠲痹方可能通过影响m6A甲基化来发挥抗炎作用,从而对CIA起到治疗效果。

摘要： 目的 探讨内皮细胞发育调节基因-1(Del-1)对胶原诱导性关节炎(CIA)的作用及机制。方法 构建CIA小鼠模型,分为CIA组、Del-1组(Del-1干预CIA),并另设正常对照组。Del-1组给予每只小鼠尾静脉注射Del-1,2μg/次,共2次。采用关节炎指数(AI)评估关节炎病情进展;采用苏木精-伊红染色(HE染色)观察小鼠关节病变;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。结果 初次免疫后第34、36、38、40天,Del-1组AI评分依次为(3.80±1.17)、(3.80±1.17)、(4.20±1.17)、(4.20±1.17)分,低于CIA组的(6.80±1.94)、(8.80±3.19)、(9.60±3.61)、(9.40±3.61)分,差异有统计学意义(P<0.05)。初次免疫后第42天,HE染色显示Del-1组小鼠较CIA组关节局部炎症浸润和滑膜增生明显减轻,软骨破坏明显减少。初次免疫后第42天,ELISA结果显示CIA组小鼠血清IL-6、MMP-9表达较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而Del-1组小鼠血清IL-6、MMP-9表达较CIA组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Del-1能改善CIA模型小鼠关节症状,减轻炎症和骨破坏,抑制关键细胞因子IL-6和MMP-9的表达,可能在RA治疗中发挥一定的作用。

摘要： 目的：近年来,临床上运用IPJB治疗类风湿性关节炎取得良好疗效,本文通过考察IPJB对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用以及对关节损伤等的影响,为其临床运用提供药理学基础. 方法：通过足跖注射牛Ⅱ型胶原建立大鼠胶原诱导性关节炎模型(CIA).50只造模成功的SD雄性大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(雷公藤多苷)以及IPJB高、中、低剂量组;另取10只正常大鼠为正常对照组.IPJB三个剂量组连续灌胃给药4周,定期考察一般行为学、关节炎指数(AI)评分、足肿胀度、痛阈值,同时检测肝功能(ALT、AST)和肾功能(Cr、BUN)指标.给药结束后,采用HE染色观察大鼠踝关节病理组织学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清C反应蛋白(CRP)及类风湿因子(RF)水平. 结果：与模型对照组比,连续给药3周,IPJB中、低剂量均能显著降低胶原诱导性关节炎大鼠的足肿胀度(P＜0.05)及关节炎指数(AI)评分(P＜0.05,P＜0.01).连续给药4周,IPJB中剂量显著降低大鼠足肿胀度、AI评分、血清CRP及RF含量(P＜0.05或P＜0.01),显著升高痛阈值(P＜0.05),减少关节软骨损伤.IPJB高、中、低剂量对肝功能(ALT、AST)及肾功能指标(Cr、BUN)均无显著影响. 结论：IPJB通过降低CRP水平,调节炎症反应,缓解关节软骨损伤;升高痛阈值,产生镇痛作用,且无肝肾毒性.不同剂量药效显示,中剂量组效果最优.

摘要： 目的：研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(collagen-inducing arthritis,CIA)大鼠滑膜基因表达谱的影响,探讨其治疗CIA的作用机制. 方法：选用健康雄性Wistar大鼠40只,采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型.随机选取造模成功大鼠16只随机分为模型组(n=8)、温化蠲痹方组(n=8,简称中药组).中药组按22.9g/kg·d剂量灌胃温化蠲痹方,模型组按22.9g/kg·d剂量灌胃生理盐水,每日1次.给药30天后,提取两组大鼠滑膜总RNA,运用Illumina基因表达谱芯片分析每个样本基因变化. 结果：温化蠲痹方干预后大鼠滑膜差异表达基因有222条,其中上调基因76条,下调基因146条,差异表达基因主要涉及细胞凋亡、血管生成素、防御素基因、细胞因子、信号转导、癌基因等. 结论：中药温化蠲痹方可能通过对多基因表达进行调控,诸如下调Ankept12、Muc1、Bcl-2等基因表达,上调RatNP-3b等基因表达,发挥多靶点治疗CIA作用.

摘要： 目的:在胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠模型中,观察中药青藤碱(sinomenine,SIN)对髓系来源的抑制性细胞(myeloid derived suppressor cell,MDSCs)及亚群(M-MDSCs和G-MDSCs)的影响,探讨MDSCs在CIA发病中的作用.rn 方法：C57BL/6雄性小鼠30只，8～10周龄。用2mg/mlⅡ型胶原与弗氏完全佐剂等体积混合乳化，于小鼠尾根部多点皮内注射100ul乳剂，诱导CIA模型。免疫后第14d，行加强免疫一次。将造模成功小鼠分为实验组(n=10)和对照组(n=9)，实验组于初次免疫后的第30d起每日给予SIN100mg/kg 灌胃，对照组给予PBS，至第42d观察结束。初次免疫后每周3次进行小鼠关节炎评分。观察结束后，乙醚麻醉后脱臼处死小鼠，收集小鼠双侧后肢，常规脱钙，随后进行关节滑膜组织的固定、脱水、透明、透蜡、包埋、切片以及H&E染色。对炎症细胞的浸润、软骨的破坏和骨侵蚀三方面进行关节滑膜病理评分。流式细胞术检测小鼠外周血和脾细胞MDSCs及脾细胞G-MDSCs和M-MDSCs水平。采用SPSS13.0统计软件进行数据分析，计量资料用（x±s）表示。正态分布计量资料总体比较采用独立样本t检验和重复测量的方差分析，以双侧P＜0.05为差异有统计学意义。rn 结果：①与对照组相比，SIN干预后CIA小鼠外周血、脾细胞MDSCs水平下降（P均＜0.05），差异具有统计学意义。②SIN干预后CIA小鼠脾细胞G-MDSCs水平与对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05），而脾细胞M-MDSCs水平降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）。③治疗组和对照组关节炎评分各时间点之间差异具有统计学意义（F=11.15，P=0.001），时间和分组之间存在交互作用（F=6.93，P=0.005），治疗组随着干预时间的延长，关节炎评分逐渐降低（F=6.01，P=0.02），而对照组则无变化。d35和d38时，SIN干预组与对照组相比，关节炎评分无差异（P=0.90和P=0.16）；d41时，与对照组相比，SIN干预组显著降低关节炎评分（P=0.04）。SIN干预组，d35与d38、d38与d41之间关节炎评分无差异（P=0.51和P=0.10），而d35与d41之间关节炎评分显著降低（P=0.04）。④SIN干预可显著降低关节病理评分，该组关节炎性细胞的浸润、软骨破坏及骨侵蚀改善均优于对照组，差异具有统计学意义（P均＜0.05）。rn 结论：SIN干预可减少MDSCs及亚群M-MDSCs在CIA小鼠体内的聚集，减轻CIA的严重程度，MDSCs可能成为类风湿关节炎新的治疗靶点。

摘要： 目的:探讨温阳散寒除湿法对类风湿关节炎滑膜炎症的控制作用。rn 方法:复制胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠,随机分为蠲痹颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组,甲氨蝶呤组、模型组及空白对照组.致炎第21天起每天给药干预,从第1天初次免疫前开始,每隔7天采用关节炎指数(AI)评分法及足趾容积测量法评价关节炎病变的发生及严重程度.并于第35天和第49天各处死一半动物,腹主动脉采血测血清IL-1β水平,取踝关节滑膜组织行HE染色。rn 结果:①35天时,蠲痹低剂量组、甲氨蝶呤组CIA大鼠AI评分与空白对照组比较显著增加(P＜0.05),其他组AI评分有增加趋势,但差异无统计学意义;49天时,甲氨蝶呤组CIA大鼠AI评分与空白对照组比较显著增加(P＜0.05),蠲痹高剂量组与甲氨蝶呤组比较,在改善AI评分上明显优于甲氨蝶呤组(P＜0.05).②35天时,蠲痹低剂量组CIA大鼠足趾容积与空白对照组比较显著增加(P＜0.05),其他组足趾容积有增加趋势,但差异无统计学意义;49天时,各给药组与模型组比较,足趾容积有减小趋势,但差异无统计学意义.③35天时血清IL-1β水平,蠲痹低、中、高剂量组、甲氨蝶呤组、空白组与模型组相比,差异有显著统计学意义(P＜0.01);蠲痹高剂量组在改善血清IL-1β水平上优于甲氨蝶呤组(P＜0.05).49天时,各组与模型组相比,差异有显著统计学意义(P＜0.01),蠲痹中、高剂量组在改善血清IL-1β水平上明显优于甲氨蝶呤组(P＜0.01).④CIA大鼠滑膜组织炎症评分,35天时蠲痹低、中、高剂量组、甲氨蝶呤组、空白对照组与模型组比较差异无统计学意义;49天时,蠲痹中剂量组在改善滑膜组织炎症评分上优于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05),蠲痹高剂量组明显优于模型组,差异有显著统计学意义(P＜0.01)。rn 结论:温阳散寒除湿法能对抗胶原诱导性关节炎大鼠的炎症病变进展,减轻滑膜炎症.

摘要： 目的:观察化痰通络方对胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用.rn 方法:选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,建立CIA模型,选取40只造模成功的大鼠随机分为4组:生理盐水(A)组、化痰通络方(B)组、甲胺喋呤(C)组、化痰通络方+甲胺喋呤(D)组,每组各10只.采用关节炎指数评分(AI)对大鼠关节炎程度进行评分;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、血管内皮生长因子(VEGF),根据滑膜病理评估滑膜炎指数积分.rn 结果:AI评分:B组AI低于A组(P＜0.05);C组与D组AI低于A组(P＜0.01);D组AI低于B组(P＜0.05).A组治疗前后AI明显升高(P＜0.01),C与D组治疗前后AI明显降低(P＜0.01),B组治疗前后AI变化不显著(P＞0.05).血清VEGF、MMP-3检测结果显示B、C、D组均显著低于A组(P＜0.01);D组显著低于B组(P＜0.05),而B组与C组、C组与D组差异不显著(P＞0.05).滑膜炎指数积分(SMII)评估结果;SMII评估显示:B、C、D组SMII均低于A组(分别P＜0.05,＜0.01,＜0.01);D组SMII低于B组(P＜0.05);D组SMII低于C组,C组SMII低于B组,但差异不显著(P＞0.05).rn 结论: ①化痰通络方能减轻CIA炎症②化痰通络方能明显降低血清VEGF、MMP-3水平③化痰通络方与MTX联合使用可进一步增强疗效.

摘要： 目的:探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、组织蛋白酶G(cathepsin G,Cat-G)及组织蛋白酶S(cathepsinS,Cat-S)表达的影响. 方法:选用SPF级雄性Wistar大鼠60只,随机分为6组,每组10只.正常组普通喂养,不予处理,其余5组前20d建立CIA模型,后20d进行药物干预.SIN高、中、低剂量组分别给予SIN120mg·kg-1、90mg·kg-1、60mg·kg-1灌胃.醋酸地塞米松组给予地塞米松7.5mg·kg-1灌胃.模型组给予等量(2mL)生理盐水灌胃.40d后处死大鼠,分析各组大鼠足爪X-ray与足爪图片;检测血清中TNF-α、Cat-G及Cat-S的含量;切片观察关节炎病变在滑膜组织和脾脏的表达情况. 结果:X-ray结果显示,正常组未见异常,模型组大鼠足爪部出现明显软组织肿胀、关节畸形及溶骨现象,各给药组上述症状较之模型组均有不同程度减轻.大鼠足爪图片结果与X-ray结果相符.ELISA检测结果显示:模型组血清中TNF-α、Cat-G及Cat-S的含量均显著高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05),SIN高、中、低剂量组上述基因的表达均低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果显示,正常组大鼠滑膜组织形态正常,模型组大鼠滑膜组织细胞受损,炎性细胞表达显著增多,血管翳增生,给药后各组炎性细胞浸润和血管翳增生均有减少.免疫组化染色结果显示:模型组大鼠脾脏组织中TNF-α、Cat-S及Cat-G的阳性表达均明显高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05),给药后各组较模型组均有减少(P＜0.01),尤其是ISN中剂量组减少最多,表达比较接近正常组(与模型组比P＜0.01,与正常组比P＞0.05). 结论:SIN对类风湿关节炎具有防治作用,其机制与抑制TNF-α、Cat-G及Cat-S的表达有关.

摘要： 目的：观察电针对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的痛阈和滑膜组织炎症因子的双重调控作用,并探索产生该作用的内源性阿片机制. 方法：实验分两部分进行.第一部分,大鼠完全随机为空白对照组(N组)、模型对照组(CIA组)和电针治疗组(EA组),采用牛Ⅱ型胶原建立大鼠CIA模型,造模后16d开始电针干预,选取双侧“足三里”、“昆仑”穴,每日1次,共治疗10次;第二部分,大鼠分为模型对照组(CIA+saline组)和beta-内啡肽组(CIA+beta-END组).模型制备同第一部分,CIA+beta-END组大鼠于造模后16d进行β-END腹腔,每日1次,共治疗10次.均动态观察造模后16d、20d、23d和25d大鼠痛阈、关节炎指数、足跖肿胀度变化;采用放射免疫法检测大鼠滑膜组织β-内啡肽(β-END)、甲硫脑啡肽(met-ENK)、强啡肽A(Dyn A)的含量;采用PCR法检测大鼠滑膜组织u阿片受体(MOR)、κ阿片受体(KOR)、σ阿片受体(DOR)、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平,采用ELISA法检测大鼠足爪炎症组织IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白. 结果：在造模后16d、20d、23d和25d,与N组比较,CIA大鼠痛阈降低(P＜0.01),关节炎指数和足跖肿胀度升高(P＜0.01).造模后23d和25d,电针提高了CIA大鼠痛阈(P＜0.01),降低了CIA大鼠关节炎指数和足跖肿胀度(P＜0.01).与N组比较,造模后25d,CIA大鼠膝关节滑膜组织Dyn A含量升高(P＜0.01),MOR、KOR、DOR mRNA表达均降至正常水平0.5倍以下.电针能增加CIA大鼠膝关节滑膜组织β-END含量(P＜0.05),2倍以上上调MOR、KORDOR mRNA表达水平.与CIA+saline组比较,CIA+beta-END组大鼠的关节炎指数和足跖肿胀度显著降低(P＜0.01),痛阈显著增高(P＜0.01),IL-1β、TNF-αmRNA和蛋白表达降低(P＜0.01). 结论：电针对CIA大鼠慢性痛和局部炎性细胞因子均有良好的干预作用,这可能与其上调外周局部阿片肽和阿片肽受体表达有关.

摘要： 目的:探讨芍甘附子汤(SGFZ)加味对CIA大鼠模型OPG、RANKL表达的影响.rn 方法:选用牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂充分乳化后,于模型组大鼠左足跖及尾根部进行皮内免疫,并于第7天加强免疫,建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型.造模成功后,正常组和模型组给予0.9％氯化钠溶液灌胃,雷公藤组给予雷公藤多甙灌胃,芍甘附子汤加味组分别按小、中、大剂量灌胃干预;同时观察各组大鼠关节炎指数AI评分及足跖肿胀度,治疗结束后,观察其病理改变,并用Elisa法检测血清OPG、RANKL表达水平.rn 结果:SGFZ大、中剂量组可减轻CIA大鼠关节肿胀度(P＜0.01),减轻关节病理损害,上调OPG表达,降低RANKL、RANKL/OPG表达水平(P＜0.01).rn 结论:芍甘附子汤加味对CIA大鼠关节骨破坏有保护作用,其机制可能通过调节OPG与RANKL表达水平实现的.

摘要： 目的:探讨乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白(ZCⅡ)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNLs)中Treg和Th17细胞及其细胞因子TGF-β和IL-17的影响.rn 方法:限制性胃蛋白酶消化法提取干预药物ZCⅡ.将小鼠随机分为正常组、模型组、ZCⅡ高剂量组(40μg·kg-1 d-1)、中剂量组(20μg·kg-1 d-1)、低剂量组(10μg·kg-1 d-1),鸡CⅡ与完全弗氏佐剂乳化后于C57BL/6小鼠尾根部皮下注射,诱导CIA模型,造模成功后连续给药1周,正常组和CIA模型组以生理盐水代替.给药1周后处死小鼠，关节炎指数评分评估关节肿胀度，HE染色及病理学评分观察关节组织病理学变化。分离小鼠MLNLs，流式细胞术检测MLNLs中Treg和Th17细胞的比率，酶联免疫吸附测定法检测MLNLs培养上清中TGF-β和IL-17的表达。数据分析采用SPSS13.0软件处理，实验数据以均数标准差（±s）表示，不同组差异采用多因素方差分析法，两两比较采用LSD法，以双侧P<0.05为有统计学差异。rn 结果:与正常组比较，CIA组关节肿胀及组织病理学评分升高（P<0.05），MLNLs中Treg和Th17的比率及其分泌TGF-β和IL-17水平上升（P<0.05）。与模型组相比，ZCⅡ干预可减轻CIA小鼠关节肿胀度，降低关节组织病理学评分，不同剂量组间足爪肿胀改善有差异（P＜0.05）。与模型组比较，ZCⅡ干预可以上调MLNLs中Treg细胞的比率, 下调Th17细胞的比率,不同剂量组间差异有统计学意义（P<0.05）。与CIA模型组比较，ZCⅡ干预可以上调MLNLs分泌TGF-β的水平，并下调IL-17的浓度，且不同剂量组间差异具有统计学意义（P<0.05）。rn 结论:口服ZCⅡ能够改善CIA小鼠关节炎及组织病理学评分。ZCⅡ可能通过调节MLNLs中Treg/Th17比率及其细胞因子的水平，重新诱导CIA小鼠的免疫平衡，缓解关节炎症。

摘要： 目的：探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR∶Fc)对CIA模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号的影响.rn 方法：将40只6周龄的雌性Wistar大鼠按照随机数表法随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松对照组和rhTNFR∶Fc治疗组,每组10只.制备CIA模型,以Western blot法检测关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-IκBα表达的情况.rn 结果：rhTNFR∶Fc治疗组和醋酸泼尼松对照组可下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κB/P65、p-IκBα的表达,与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05).rn 结论：rhTNFR∶Fc可通过降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-IκBα蛋白表达以达到缓解炎症的作用.

摘要： 本发明公开了一种治疗颈椎、肩周炎、腰椎间盘突出、风湿性关节炎和类风湿性关节炎的中药内服药剂和膏剂，内服药是由按重量份的猫骨头30‑60，狗头骨30‑70，泡桐树花30‑70，香蕉外皮30‑70,茉莉花根30‑70，胡椒树根30‑70、白椿树根外皮30‑70、独一味20‑60、红花15‑50、防风20‑60、天麻20‑60、土元15‑30、全蝎15‑30、川牛膝20‑60、穿山甲20‑60、骨碎补20‑60、三七15‑30、茯苓20‑60、伸筋草20‑60、茜草15‑60、透骨草15‑60、无名异20‑60等配制而成；将中草药研成细粉，用7号过筛后即为药粉，经高温蒸馏风干后装入胶囊即成内服药。膏药是在内服药剂增加按重量份的冰片 15‑70、麻油 2500‑5000、黄丹1500‑2500制成。该药剂消肿止痛，拔毒生肌，活血化瘀，舒筋活络，袪风除湿，补肾壮骨，无毒副作用，对皮肤无刺激，药物能渗透皮肤到达骨内，修复骨骼、溶化骨刺，愈后不易复发。

摘要： 本发明涉及新型的类风湿性关节炎的检查方法、及用于该检查方法的类风湿性关节炎检查用试剂盒。本发明涉及的类风湿性关节炎的检查方法的特征在于，包括测定受试动物的血浆中或血清中的踝蛋白量的步骤。该测定例如可利用使用了与踝蛋白结合的抗体的免疫学手段进行。本发明涉及的类风湿性关节炎检查用试剂盒用于在上述检查方法中使用，例如，包含固定有与踝蛋白结合的抗体的固相载体。

摘要： 本发明涉及一种治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的风湿祛痛药物及制备方法。①取苍术、威灵仙和姜黄、独活、羌活分别蒸馏提取挥发油；②苍术、威灵仙的药渣与红花加水煎煮提取；③将姜黄、独活、羌活的药渣与黄柏、鸡血藤加水煎煮提取；④药渣乙醇提取；⑤将步骤②和步骤③中的滤液加入步骤①蒸馏后的水溶液，浓缩至浸膏，备用；⑥蜂房、乳香（炒）加入乙醇提取，浓缩至稠膏状；⑦金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇、土鳖虫、没药（炒）、全蝎、蜈蚣、地龙、桂枝九味原料药粉碎，过筛，备用；将步骤④、⑤、⑥所得稠膏合并，取步骤⑦生药粉干混，再加入上述浸膏湿混，混匀，制成颗粒，喷入挥发油，闷润，分装，即得。具有有效成分的提取率增高的特点。

摘要： 本发明公开了一种治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎和骨质增生的中药，包括如下中药原料药制成：甘草5-50克、川芎10-50克、通草15-80克、延胡索10-75克、防风10-60克、王不留行10-70、克薏苡仁20-80克、五灵脂10-50克、羌活10-70克、独活10-65克、土茯苓10-60克、牛膝15-70克；本发明减少不良反应，疗效高，无明显副作用。

摘要： 本发明涉及一种治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎的药物及其制备方法。它主要由鼎突多刺蚁、乌梢蛇、制川乌、生地、昆明山海棠、威灵仙、徐长卿、鸡血藤、淫羊藿、知母、鹿角、全蝎、蜈蚣地龙、三七、黄芪、木瓜、桑寄生、杜仲、牛膝、川芎等药物配制而成。本发明用于手指晨僵、肌肉关节疼痛，屈仲不利和肌肉瘦削，关节僵硬畸形的类风湿性关节炎、风湿性关节炎的治疗，具有补肾壮骨、活血搜风、散寒祛湿的作用，疗效确切且无毒副作用。

摘要： 本发明提供没有副作用、能够使类风湿性关节炎的免疫异常正常化的类风湿性关节炎抑制剂、预防剂及治疗剂。本发明是作为有效成分含有来自于裸藻的物质的类风湿性关节炎抑制剂、预防剂或治疗剂。可以作为通过改善类风湿性关节炎的免疫异常来控制类风湿性关节炎的活动性的抗风湿药使用。另外，可以用于没有接受类风湿性关节炎的确诊的生物体用途。可以从类风湿性关节炎的确诊前到接受确诊后的任意的时间点，对生物体持续施用。来自于裸藻的物质是选自裸藻的藻体、来自于所述裸藻的裸藻淀粉、对该裸藻淀粉实施碱处理及中和处理而得的水溶性的非晶裸藻淀粉、以及实施以超高压使所述裸藻淀粉水溶液从细孔喷嘴中喷出后与被碰撞物碰撞的处理而得的乳液裸藻淀粉中的至少一种物质。

摘要： 本发明公开了一种治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎的中药制剂，其包括以下重量份数的原料：600～1000份的红鱼眼、600～1000份的九层风、400～700份的三叶青藤、400～700份的山风、150～300份的两面针以及20～100份的三七茎叶；其中，山风经过水蒸汽蒸馏处理。本发明选用红鱼眼、九层风、三叶青藤、山风、两面针和三七茎叶几种纯壮草药进行配伍使用，并采用水蒸气蒸馏法提取山风中的固体挥发性成分，其可促进本发明其他药物成分快速吸收，更好发挥本发明驱风祛湿、通络除痹、消肿止痛之功效，提高药物疗效，且本发明具有无毒副作用，使用安全的优点。

摘要： 本发明涉及一种治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的风湿祛痛药物及制备方法。①取苍术、威灵仙和姜黄、独活、羌活分别蒸馏提取挥发油；②苍术、威灵仙的药渣与红花加水煎煮提取；③将姜黄、独活、羌活的药渣与黄柏、鸡血藤加水煎煮提取；④药渣乙醇提取；⑤将步骤②和步骤③中的滤液加入步骤①蒸馏后的水溶液，浓缩至浸膏，备用；⑥蜂房、乳香（炒）加入乙醇提取，浓缩至稠膏状；⑦金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇、土鳖虫、没药（炒）、全蝎、蜈蚣、地龙、桂枝九味原料药粉碎，过筛，备用；将步骤④、⑤、⑥所得稠膏合并，取步骤⑦生药粉干混，再加入上述浸膏湿混，混匀，制成颗粒，喷入挥发油，闷润，分装，即得。具有有效成分的提取率增高的特点。

摘要： 本发明公开了一种治疗颈椎、肩周炎、腰椎间盘突出、风湿性关节炎和类风湿性关节炎的中药内服药剂和膏剂，内服药是由按重量份的猫骨头30-60，狗头骨30-70，泡桐树花30-70，香蕉外皮30-70,茉莉花根30-70，胡椒树根30-70、白椿树根外皮30-70、独一味20-60、红花15-50、防风20-60、天麻20-60、土元15-30、全蝎15-30、川牛膝20-60、穿山甲20-60、骨碎补20-60、三七15-30、茯苓20-60、伸筋草20-60、茜草15-60、透骨草15-60、无名异20-60等配制而成；将中草药研成细粉，用7号过筛后即为药粉，经高温蒸馏风干后装入胶囊即成内服药。膏药是在内服药剂增加按重量份的冰片15-70、麻油2500-5000、黄丹1500-2500制成。该药剂消肿止痛，拔毒生肌，活血化瘀，舒筋活络，袪风除湿，补肾壮骨，无毒副作用，对皮肤无刺激，药物能渗透皮肤到达骨内，修复骨骼、溶化骨刺，愈后不易复发。

摘要： 本发明提供一种胶原诱导性关节炎动物模型的制备方法，选取6‑8周、雄性、DBA/1小鼠；将步骤（1）所选取的小鼠置于温度为20‑24°C，相对湿度50%‑60%，12小时明暗交替的清洁级动物房中饲养，自由摄食饮水，适应环境三天后用于制备模型；以鸡II型胶原免疫DBA/1小鼠诱导CIA模型，向小鼠尾根部皮内注射进行免疫；经三次免疫，本发明对关节炎的病理过程机制的研究和药物开发等具有重要意义；同时，本发明的评价胶原诱导性关节炎动物模型的方法，通过关节炎临床指数评分、踝关节病理学检查、血清中抗CII‑IgG抗体水平等指标验证模型是否成功，对胶原诱导性关节炎动物模型进行全面评价。