胶原Ⅱ型

摘要： 目的探讨78c对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)模型小鼠的治疗作用及其机制。方法将18只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、CIA对照组、CIA治疗组。CIA对照组和CIA治疗组小鼠尾根部皮内均先注射鸡Ⅱ型胶原与弗氏佐剂等量混合液进行模型制备。建模成功后,CIA治疗组小鼠腹腔注射78c 20 mg/kg,正常对照组、CIA对照组小鼠腹腔注射等量溶剂,每周2次,连续给药3周。利用游标卡尺测量各组小鼠足趾厚度;利用苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠关节组织病理学变化;采用流式细胞仪检测各组小鼠外周血中淋巴细胞亚型、血清中Th1/Th2比值。结果CIA治疗组与CIA对照组相比,足趾厚度显著降低(F=41.38,P<0.05);外周血中NK细胞、CD38+NK细胞比例显著降低(F=5.42、10.21,P<0.05),Treg细胞比例显著升高(F=10.50,P<0.05);血清中Th1/Th2比值显著下降(F=7.67、16.33,P<0.05)。病理检查结果显示,CIA治疗组与CIA对照组相比,滑膜增生程度减轻,炎性细胞浸润减少。结论78c可能通过抑制CD38+NK细胞比例,升高Treg细胞比例,恢复Th1/Th2细胞的平衡对CIA发挥治疗作用。

摘要： 目的研究富血小板血浆(PRP)中血小板源性生长因子(PDGF)对促进家兔椎间盘Ⅱ型胶原蛋白(collagenⅡ)及蛋白多聚糖(aggrecan)表达的作用及其机制。方法对13只3月龄新西兰大白兔椎间盘细胞进行分离培养,随机将培养细胞分成对照组、PRP组、PRP+AG1296组(PDGF因子抑制剂AG1296)、AG1296组,n=12。检测4组髓核细胞7 d中的生存率。荧光定量RT-PCR法检测collagenⅡ、aggrecan的mRNA表达。在上述分组基础上,加入PRP+PD98059组[细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路抑制剂PD98059]、PRP+Wortmannin组[磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/Akt)通路抑制Wortmannin]、PRP+PD98059+Wortmannin组,共7组;Western-blot法检测7组细胞磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、泛细胞外调节蛋白激酶(panERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、collagenⅡ、aggrecan的蛋白表达。结果与对照组相比,PRP组可显著增加家兔髓核细胞的生存率、collagenⅡ及aggrecan的mRNA表达水平(P均<0.05);与PRP组相比,PRP+AG1296组的上述指标均显著下降(P均<0.05)。PRP组的p-ERK、p-Akt、collagenⅡ及aggrecan蛋白表达明显高于对照组(P均<0.05);与PRP组比较,PRP+AG1296组4种蛋白表达均明显降低(P均<0.05);加入ERK和PI-3-K/Akt通路抑制剂PD98059及Wortmannin处理的各组p-ERK、p-Akt、collagenⅡ及aggrecan蛋白的表达均降低(P均<0.05)。结论PRP中PDGF可促进家兔髓核细胞的生存,并通过激活ERK和Akt信号通路上调髓核细胞collagenⅡ及aggrecan的表达。

摘要： 目的 研究富血小板血浆(PRP)中血小板源性生长因子(PDGF)对促进家兔椎间盘Ⅱ型胶原蛋白(collagen Ⅱ)及蛋白多聚糖(aggrecan)表达的作用及其机制.方法 对13只3月龄新西兰大白兔椎间盘细胞进行分离培养,随机将培养细胞分成对照组、PRP组、PRP+AG1296组(PDGF因子抑制剂AG1296)、AG1296组,n=12.检测4组髓核细胞7 d中的生存率.荧光定量RT-PCR法检测collagen Ⅱ、aggrecan的mRNA表达.在上述分组基础上,加入PRP+PD98059组[细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路抑制剂PD98059]、PRP+Wortmannin组[磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/Akt)通路抑制Wortmannin]、PRP+PD98059+Wortmannin组,共7组;Western-blot法检测7组细胞磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、泛细胞外调节蛋白激酶(panERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、collagen Ⅱ、aggrecan的蛋白表达.结果 与对照组相比,PRP组可显著增加家兔髓核细胞的生存率、collagenⅡ及aggrecan的mRNA表达水平(P均＜0.05);与PRP组相比,PRP+AG1296组的上述指标均显著下降(P均＜0.05).PRP组的p-ERK、p-Akt、collagen Ⅱ及aggrecan蛋白表达明显高于对照组(P均＜0.05);与PRP组比较,PRP+AG1296组4种蛋白表达均明显降低(P均＜0.05);加入ERK和PI-3-K/Akt通路抑制剂PD98059及Wortmannin处理的各组p-ERK、p-Akt、collagen Ⅱ及aggrecan蛋白的表达均降低(P均＜0.05).结论 PRP中PDGF可促进家兔髓核细胞的生存,并通过激活ERK和Akt信号通路上调髓核细胞collagen Ⅱ及aggrecan的表达.

摘要： 目的:探讨独活寄生汤治疗大鼠膝骨关节炎(kneeosteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:从66只大鼠中随机选取48只,采用改良Hulth法建立大鼠KOA模型,随机选择3只正常大鼠和3只建模大鼠进行鉴定。证实建模成功后,将剩余的15只正常大鼠纳入正常对照组,采用随机数字表将剩余的45只KOA模型大鼠分为KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组,每组15只。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠均按每天10mL·kg^(-1)分别以0.9%生理盐水、0.9%生理盐水、独活寄生汤(浓度为0.93g·mL^(-1))、盐酸氨基葡萄糖溶液(浓度为0.015g·mL^(-1))灌胃,连续干预12周。12周后,切取大鼠双侧胫骨近端和股骨下端的软骨组织。采用实时定量PCR检测大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)H19及聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)mRNA的表达量,采用蛋白印迹法检测大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan、CollagenⅡ的蛋白表达量。结果:①大鼠饲养结果。KOA模型组大鼠因肺栓塞死亡2只,独活寄生汤治疗组大鼠因腹泻死亡1只,盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠因肺栓塞死亡1只。②大鼠胫骨近端软骨组织中KOA相关基因的RNA表达结果。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNAH19、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=83.050,P=0.000;F=436.003,P=0.000;F=129.212,P=0.000;F=135.844,P=0.000)。KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量均低于正常对照组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.003;P=0.002;AggrecanmRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000);KOA模型组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNAH19的表达量低于正常对照组(P=0.002),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNAH19的表达量与正常对照组比较,差异无统计学意义(P=0.058,P=0.069);独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量均高于KOA模型组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.000;AggrecanmRNA:P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000);独活寄生汤治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNAH19、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.922;P=0.778;P=0.857;P=0.904)。③大鼠股骨远端软骨组织中软骨组成相关基因的蛋白表达结果。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组的大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=58.118,P=0.002;F=16.625,P=0.001)。KOA模型组、独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.003;P=0.004),盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.078),KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中CollagenⅡ的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.000;P=0.028;P=0.018),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量均高于KOA模型组(Aggrecan:P=0.025;P=0.034;CollagenⅡ:P=0.003;P=0.004),独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.999;P=0.775)。结论:独活寄生汤治疗大鼠KOA的作用机制,可能与其能够上调miR-675-3p、lncRNAH19的表达进而促进Aggrecan、CollagenⅡ的表达有关。

摘要： 目的以慢病毒介导人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转染体外培养的人髓核细胞,建立永生化髓核细胞系,为后期转基因与动物实验提供种子细胞。方法利用机械与酶消化的方法获得正常的人椎间盘髓核细胞,将构建好的重组慢病毒-hTERT(pLVX-hTERT)转染第2代体外单层培养的髓核细胞。用重组慢病毒-增强型绿色荧光蛋白作为标记物,在荧光电镜下观察细胞转染效率,按感染复数(MOI)40、60、80、100设组,选择出病毒转染的最佳MOI;设立pLVX-hTERT转染组、空病毒转染对照组及空白细胞对照组。在倒置显微镜下观察髓核细胞的形态,用反转录聚合酶链反应、细胞免疫荧光技术检测转染后hTERT基因在髓核细胞内的表达情况,用反转录聚合酶链反应检测髓核细胞Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达情况。结果慢病毒转染细胞后第6天,MOI为100时转染效率最高,可达82.9%。pLVX-hTERT转染组在转染后第7、15、30、60、90天均可检测到hTERT基因的表达,而两对照组则未见表达。pLVX-hTERT转染组保持了髓核细胞的形态,两对照组的细胞则出现返祖现象。pLVX-hTERT转染组细胞的蛋白多糖及Ⅱ型胶原基因表达水平较其他两组均明显增高(F=173.5、111.1,P0.05)。结论pLVX-hTERT成功转染人椎间盘髓核细胞,转染pLVX-hTERT后的髓核细胞持续表达hTERT,获得永生化的能力,且分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖的量增加。

摘要： 目的 观察缺氧对软骨细胞体外培养时的失分化过程的影响,探讨胶原蛋白脯氨酰4-羟化酶(collagen prolyl 4-hydroxylases,C-P4Hs)在其中的作用.方法 对软骨细胞进行不同浓度的COCl2处理,筛选用于缺氧诱导的最佳CO-Cl2浓度为100μmol/L后,将小鼠肋软骨细胞分为:常氧组、缺氧组,分别检测第3代0.5-72h及1、3、5、7代于72h的各项指标.使用CCK8法及细胞计数测定增殖率,RT-qPCR、免疫荧光染色、Western blot检测各组HIF-1α、P4Hα1、P4Hα2和Col-Ⅱ的动态变化.结果 肋软骨细胞在不同浓度COCl2条件下培养48 h,100 μmol/L的COCl2组增殖率最高,呈典型的铺路石状;当COCl2浓度＞150 μmol/L时,增殖率(P＜0.05)降低.常氧与缺氧下诱导肋软骨细胞0-72h,RT-qPCR显示缺氧组P4Hα2、ColⅡmRNA表达升高(P＞0.05).免疫荧光显示缺氧下HIF-1α与P4Hα2累积于胞核内,P4Hα2逐渐由胞核进入胞浆中.Western-blot显示缺氧组HIF-1α、P4Hα2蛋白表达(P＜0.05)增高.缺氧组ColⅡ蛋白表达(P＜0.05)在诱导后期增高.常氧与缺氧下培养肋软骨细胞1-7代,CCK8与细胞计数结果显示缺氧组各代细胞增值率及细胞数均增高(P＜0.05),且传至6-7代时仍有增殖的潜力.RT-qPCR显示缺氧组各代细胞中P4Hα2、ColⅡ的mRNA均增高(P＜0.05).Western-blot显示,缺氧组各代HIF-1α、P4Hα2、ColⅡ蛋白表达(P＜0.05)均增高.结论 通过缺氧诱导高表达HIF-1α,从而使P4Hα2表达增高,可加速ColⅡ在软骨细胞内翻译后修饰过程,增加ColⅡ的合成和累积.缺氧条件下体外培养软骨细胞增殖率增高、失分化过程延缓可能与P4Hα2有关.

摘要： 背景:前期研究利用低温生物3D打印技术制备了丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架,并证明其具有良好的力学性能;研究表明,力学刺激有利于骨骼重塑,并且梯度变化的加载应变有利于成骨细胞和破骨细胞的活化。目的:在压缩应变下,将丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架与软骨细胞共培养,观察细胞增殖变化,并观察丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架修复软骨缺损的效果。方法:采用低温3D打印技术制备丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架,检测支架的孔隙率。将第3代小鼠软骨细胞ADTC-5接种于丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架上,分别进行静态培养与力学载荷下培养:①静态培养:设置空白支架为对照,接种1,3,5,7,10,14 d,采用MTT法检测细胞增殖;②力学载荷下培养:设置空白支架为对照,接种1 d后,对细胞-支架复合物分别施加0%,1%,5%,10%,15%,20%的压缩应变,持续加载3 d,采用MTT法检测细胞增殖,扫描电镜和苏木精-伊红染色观察支架上的细胞分布、黏附和形态。在新西兰兔双侧膝关节制作直径3.5 mm的软骨缺损,左侧植入丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架,右侧不植入材料,术后8周观察修复部位。结果与结论:①支架孔隙率为(89.3±3.26)%,有利于细胞附着;②静态培养5 d后,软骨细胞在复合支架表面增殖良好;③施加0%,1%,5%,10%,15%,20%压缩应变组支架上的细胞增殖先升高后降低,其中施加10%压缩应变组细胞增殖效果最显著,施加20%压缩应变组增殖效果最低;④扫描电镜可见,施加0%压缩应变组软骨细胞多分布在支架表面有凹凸的地方,细胞形态明显,细胞触角伸展充分;施加10%压缩应变组支架受力接触表面上的软骨细胞极少,甚至没有,支架上首层侧面和内部表面细胞分布较多,细胞形态多为扁平状,触角明显;⑤苏木精-伊红染色显示,施加0%压缩应变组软骨细胞集中分布在支架表面,孔隙中几乎没有细胞;施加10%压缩应变组软骨细胞分布在支架孔隙内;⑥未植入支架的缺损处仍为圆形缺损模型,没有明显修复;植入支架的缺损处出现了类似透明软骨,但与周边缺损软骨没有发生粘连结合,新生的类透明软骨独立存在;⑦结果表明,在10%压缩应变作用下,软骨细胞在丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架上增殖良好;丝素蛋白/Ⅱ型胶原蛋白复合支架可用于修复软骨缺损。

摘要： 背景:以往研究证实,龙鳖胶囊与骨髓间充质干细胞单独应用均对膝骨关节炎具有一定的治疗作用。目的:观察龙鳖胶囊联合骨髓间充质干细胞移植修复膝骨关节炎的效果。方法:将96只成年雄性SD大鼠随机分为4组,分别为造模组、药物组、干细胞组与药物+干细胞组,每组24只。4组均采用膝关节腔注射木瓜蛋白酶的方法复制骨关节炎模型,造模后第3天,干细胞组膝关节腔内注射0.1mL骨髓间充质干细胞悬液,1次/周;药物组灌胃龙鳖胶囊水溶液0.9375g/kg,2次/周;药物+干细胞组膝关节腔内注射0.1mL骨髓间充质干细胞,1次/周,同时灌胃龙鳖胶囊水溶液0.9375g/kg,2次/周,各组连续处理4周。造模前、造模后第3天及给药4周后,ELISA法检测血清白细胞介素1β与白细胞介素6水平;给药4周后,取大鼠右侧膝关节软骨标本,进行苏木精-伊红染色病理观察,同时RT-PCR、Westernblot检测Ⅱ型胶原、Hur、XIAP基因及蛋白的表达。结果与结论:①造模后第3天,各组白细胞介素1β、白细胞介素6水平均较造模前明显升高;给药4周后,造模组白细胞介素1β、白细胞介素6水平明显高于其他3组(P<0.05),药物组、干细胞组白细胞介素1β、白细胞介素6水平明显高于药物+干细胞组(P<0.05);②造模组关节软骨组织表面粗糙且破坏严重,裂隙较多,软骨细胞聚集分布且排列混乱;药物组、干细胞组均可见部分软骨修复,软骨组织表面较造模组平整,软骨细胞增多且分布较均匀,裂隙较造模组减少;药物+干细胞组关节软骨组织表面光滑平整,软骨细胞形态规则且排列均匀,无关节裂隙;③造模组Ⅱ型胶原、Hur、XIAP蛋白和基因表达均低于其余3组(P<0.05);药物组、干细胞组Ⅱ型胶原、Hur、XIAP蛋白和基因表达明显低于药物+干细胞组(P<0.05);④结果说明,龙鳖胶囊联合骨髓间充质干细胞移植修复膝骨关节炎的效果更优。

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明公开了一种液化动物软骨的设备，包括：外腔体，其上端可拆卸密封设有上盖、下端可开启/关闭密封设有下封盖，所述上盖开有投料口和第一进汽口；第一液化腔，其同轴且可上下滑动地设置在所述外腔体内；第二液化腔，其顶面固接在所述外腔体的外侧壁上，以使所述外腔体下端伸入第二液化腔内。本发明还公开了一种液化动物软骨的设备联产硫酸软骨素、Ⅱ型胶原寡肽、Ⅱ型胶原多肽的方法。本发明的液化动物软骨的设备，能对动物软骨进行第一次液化和第二次液得到液化物，从而简化动物软骨的加工流程、提高生产效率。

摘要： 本发明属于医学生物材料领域，具体公开了一种改性I型胶原蛋白及改性方法和利用该改性I型胶原蛋白制备的胶原凝胶，该改性方法包括：在2～10°C的温度下(1)将弱酸与I型胶原蛋白混合均匀，制得酸性胶原溶液；(2)利用磷酸盐缓冲液对酸性胶原溶液进行透析，直到获得中性胶原溶液；(3)去除中性胶原溶液中的气泡；(4)在液封条件下，利用旋转流变仪对脱除了气泡的中性胶原溶液进行剪切，剪切完成后静置，即可制得改性I型胶原蛋白。本发明通过利用机械剪切的方式对胶原蛋白进行改性，该方法简便高效，可以在不需要引入其他物质的基础上，减少胶原分子的三螺旋结构，增多无规卷曲结构，使得组装得到的胶原纤维直径、孔隙和粘弹性可控。

摘要： 本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种医用级Ⅲ型胶原蛋白的制备方法，包含如下步骤：动物胎盘组织预处理、脱细胞、脱脂、除杂、酶切、盐析纯化、脱盐浓缩；所述的盐析方法为：在碱性条件下对含有Ⅲ型胶原蛋白的动物源胶原蛋白混合物进行盐析，一步盐析即可得到高纯度的Ⅲ型胶原蛋白，纯度达到95％以上；制备得到的动物胎盘Ⅲ型胶原蛋白具有良好的三螺旋结构以及特征性的纤维网状结构；内毒素含量低于0.5Eu/mL，达到医用标准；可应用于活性护肤品、皮肤修复敷料、植入剂、人工皮肤、医疗器械、保健食品等领域。

摘要： 提供以新的作用机制为指标的成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选方法。通过以神经激活作为指标，能够进行成纤维细胞I型胶原产生促进剂的筛选。

摘要： 本发明创造提供了一种融合蛋白酶及其制备方法、其在提取I型胶原蛋白中的应用以及该I型胶原蛋白的用途，所述融合蛋白酶包括蛋白酶7片段mmp7C和/或蛋白酶9片段mmp9C；所述蛋白酶7片段mmp7C的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述蛋白酶9片段mmp9C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的融合蛋白酶在提取动物皮和肌腱组织的I型胶原蛋白的过程中，I型胶原蛋白空间结构不会被破坏，且能够去除终产品中的杂蛋白，提高了I型胶原蛋白的提取率。

摘要： 本发明涉及一种将选自I型胶原酶、II型胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶构成的组的至少一种酶从物质的混合物中纯化出来的方法，作为方法步骤，所述方法包括至少一个疏水作用色谱过程，其特征在于，疏水作用色谱过程中的固定相包括从聚丙二醇和丁基琼脂糖构成的组中选出的材料。本发明还涉及以这种方法纯化的酶用于制药、化妆品和/或生化目的的用途。

摘要： 本发明公开了IV型胶原、层粘连蛋白和III型前胶原氨基端肽三联检测定试剂盒的制备方法，包括以下步骤：S1：样品垫的制备；S2：结合垫的制备；S3：NC膜的制备；S4：装配。本发明利用荧光免疫层析技术，采用双抗体夹心法原理进行检测，在层析过程中，样本中的CIV/LN/PIIINP抗原与结合垫上的荧光微球标记的CIV/LN/PIIINP单克隆抗体反应形成复合物，在层析作用下沿着硝酸纤维素膜向前移行至检测区域，被硝酸纤维素膜上包被的另一株CIV/LN/PIIINP单克隆单克隆抗体捕获并形成复合物沉积在T区，在激发光源的作用下，荧光物质发射特定波长的荧光信号，荧光免疫分析仪俘获荧光信号，通过信号转化及设定的定标曲线自动转化为定量数值。

摘要： 本发明公开了一种液化动物软骨的设备，包括：外腔体，其上端可拆卸密封设有上盖、下端可开启/关闭密封设有下封盖，所述上盖开有投料口和第一进汽口；第一液化腔，其同轴且可上下滑动地设置在所述外腔体内；第二液化腔，其顶面固接在所述外腔体的外侧壁上，以使所述外腔体下端伸入第二液化腔内。本发明还公开了一种液化动物软骨的设备联产硫酸软骨素、Ⅱ型胶原寡肽、Ⅱ型胶原多肽的方法。本发明的液化动物软骨的设备，能对动物软骨进行第一次液化和第二次液得到液化物，从而简化动物软骨的加工流程、提高生产效率。

摘要： 本申请涉及重组III型胶原蛋白技术领域，尤其涉及重组人源III型胶原蛋白注射剂及其在在皮肤胶原再生中的应用。通过构建Col IIIɑ‑1和P4HA融合表达的毕赤酵母X33，制备了能够胞外表达III胶原蛋白ɑ链，对该基因工程菌进行发酵培养，能够大量收获胞外表达的III胶原蛋白ɑ链，极大地利于该蛋白的下游纯化和提取。本申请公开的重组人源III型胶原蛋白注射剂，以独立包装的Col III‑ɑ1‑DOPA和葡萄糖亚铁摩尔比例为5:1的条件下形成具有三螺旋和铁离子配位交联结构的水凝胶，能够增强胶原的粘合性，还能够在体内具有优良的生物相容性，非常适合应用在于中创伤部位的胶原再生和组织填充。