胶体金免疫层析

摘要： 在全球一体化的背景下,社会各界针对食品质量和安全提出了更严格的要求。本文介绍了胶体金免疫层析技术的原理与特点,说明了该技术的应用策略,展望了该技术未来的发展趋势,旨在为该技术在食品检测方面的科学应用提供参考。

摘要： 现阶段,农药残留快速检测技术应用最广泛的是酶抑制率法,此法在市场监管的基层执法中应用最多,但其先天存在很多不足,也使其使用效果大打折扣。而胶体金免疫层析法的优势虽然在于定性能力强、检出限更低,但其成本较高且只能做单一农药残留,在基层应用中效率太低从而未被广泛应用。微流控技术可以结合酶抑制率法的优势,在短时间内完成全自动检测,具有较好的应用前景。

摘要： 为了解商品化甲氧苄啶胶体金快检试剂盒对动物源性食品的快检效果,探讨目前动物源性食品中甲氧苄啶快速检测方法存在的问题,确定下一步的研究方向。本文通过对国内快检产品生产企业技术实力的资格审查,择优筛选出5个品牌试剂盒进行质量评价,并对相对准确度较高的3个品牌试剂盒产品进行绝对灵敏度研究。质量评价结果显示,5个品牌试剂盒产品的假阴性率在9.1%~25.0%,均不符合假阴性率应≤5%的考察要求,其中3个品牌产品假阴性率在20%左右,漏检风险较高。因此,有必要进行甲氧苄啶快检方法研究,提高试剂盒产品实际检测灵敏度,确保试剂盒产品的快检监管效果。

摘要： 为保证克百威胶体金快检试剂盒质量评价工作的顺利开展,本研究依据《食品快速检测方法评价技术规范》制定制样方案,对克百威制备样品进行均一性和稳定性考察。考察结果显示,克百威制备样品的均匀性和稳定性均符合要求,在制备完成的10 d内可用于克百威快检试剂盒的质量评价。

摘要： 研究旨在丰富猫细小病毒流行毒株资料和提高防控措施。试验收集猫细小病毒粪便样本,利用胶体金免疫层析和PCR扩增技术对样本检测,并对扩增产物的测序结果进行分析。结果显示,检测到1例猫细小病毒变异Fechavirus样本,传统的猫细小抗原检测试纸无法鉴别变异猫瘟样本,需要利用特异性更高的PCR技术加以鉴定。通过序列比对分析和构建猫细小家族进化树,发现FPV和FeBuV的亲缘关系更近,FBoV和Fechavirus在同一进化支上,具有较高的自展支持率。研究表明,我国感染猫科动物宿主的新型细小病毒Fechavirus存在。

摘要： 依据食药监办科[2017]43号《食品快速检测方法评价技术规范》和KJ 201708《食用油中黄曲霉毒素B;的快速检测胶体金免疫层析法》制定评价方案,对目前福建省内应用较广的4种食用油中黄曲霉毒素B_(1)快速检测胶体金试剂盒产品进行质量评价。结果表明:4个品牌产品中,只有2个品牌产品符合要求,不同品牌产品的黄曲霉毒素B;检测效果存在差异。为确保食用油中黄曲霉毒素B;的快检监管效果,结合试剂盒评价结果和市场调研情况,建议快检试剂盒产品须经质量评价合格再投入使用,并不定期对产品进行跟踪评价。

摘要： 为了解导致市售甲氧苄啶快检试剂盒产品实际检测灵敏度不够的原因,本研究对检出限符合要求且适用于动物源性食品中甲氧苄啶检测的胶体金快检产品进行绝对灵敏度研究。结果显示,试剂盒的绝对灵敏度和实际检测灵敏度不成正比。因此,有必要进行甲氧苄啶快检方法研究,提高试剂盒产品实际检测灵敏度,并进一步优化试剂盒产品中胶体金标记的抗原抗体,提高产品对0.5倍检测限和1倍检测限的识别差异,以提高快检准确度,确保试剂盒产品的快检监管效果。

摘要： 为确保对食用农产品中克百威农药残留的快检监管效果,本研究组织对5个入围品牌的克百威胶体金快检试剂盒产品进行统一的质量评价。质量评价结果显示,5个品牌试剂盒产品均符合考察要求,有2个品牌试剂盒产品的相对准确度为100%;试剂盒产品对0.5倍检测限和1倍检测限的识别差异大小,将直接影响快检结果的准确度。克百威胶体金快检技术已比较成熟,质量评价合格的胶体金试剂盒产品可替代传统的酶抑制率法试剂盒产品进行食用农产品中克百威农药残留的快速检测。

摘要： 本试验旨在建立一种能快速定量检测乳制品中牛乳铁蛋白(BLF)含量的胶体金免疫层析方法。以BLF为免疫原免疫BLAB/c小鼠,用间接ELISA筛选、鉴定获得单克隆抗体;继而用胶体金免疫层析技术建立BLF的检测方法,并对研制的胶体金定量检测试剂卡进行重复性、线性、样本测试相关性和特异性评估。结果显示:本试验制得BLF单克隆抗体2株,效价均大于3.2×10^(6);基于这2株单抗建立的BLF胶体金定量检测试剂卡的空白限为21.86μg/mL,变异系数(CV)<13%,线性测试其直线拟合线性回归相关系数R=0.9977,与液相色谱法检测样本结果的相关系数R=0.9885,与α-乳白蛋白和β-乳球蛋白均无交叉反应。综上,本试验研制的BLF胶体金定量检测试剂卡可为乳制品中BLF含量的检测提供一种准确、灵敏的方法。

摘要： 为做好商品化甲氧苄啶胶体金快速检测试剂盒质量评价工作,本文采用参比方法,参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》(CNAS-GL003-2018)对甲氧苄啶评价样品进行稳定性和均匀性考察。结果显示,甲氧苄啶制备样品稳定性符合要求,在14 d考察期内可用于试剂盒质量评价,制备样品均匀性符合要求,可用于试剂盒质量评价。

摘要： 目的：应用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测烟叶中三唑残留量的方法.方法：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并将其与抗三唑酮抗体标记制备得金标抗体.三唑酮-OVA偶联物和羊抗鼠IgG抗体分别结合于醋酸纤维膜上,依次将样品垫、醋酸纤维膜和吸水纸组装,切割成胶体金试纸条.结果：测试结果表明,三唑酮胶体金试纸条检测烟叶中三唑酮、三唑醇残留量的灵敏度为1mg/kg,检测时间为5～10min,特异性高,重复性好,与气相色谱-串联质谱检测法符合率为98％.

摘要： 目的：建立胶体金免疫层析快速检测东部马脑炎病毒抗体的方法。方法：利用纳米胶体金标记葡萄球菌A蛋白抗原和免疫层析技术，建立东部马脑炎病毒抗体的快速检测方法，评价其敏感性和特异性，并拟合检测曲线进行定量检测。在健康人血清中添加东部马脑炎病毒抗体模拟污染样品，评价该方法的检测能力。结果：该法可在10min内完成定性和定量检测，灵敏度为60 ng/ml，线性范围60-300ng/ml、回收率90.6％-122.1％。结论：所建立的检测东部马脑炎病毒抗体的胶体金免疫层析方法，能快速、敏感、特异地检测样品中的东部马脑炎病毒，适用于现场快速检测。

摘要： 霉菌毒素至今仍是全球畜禽饲料无时不在的威胁因素。每年大约有25％的农作物受到霉菌毒素的危害，其检测方法显得尤为重要。近来发展起来的胶体金免疫层析试纸条能对其进行快速灵敏的检测。本文主要介绍了霉菌毒素胶体金免疫层析技术的研究进展，综述了它在饲料霉菌毒素检测中的应用，并对其进一步的发展进行了展望。

摘要： 本文用本实验室建立的胶体金免疫层析试纸条法检测了鸡血清中的禽流感病毒抗体,并与传统的血凝抑制试验、琼脂扩散法检测结果进行了比较.结果表明,胶体金免疫层析试纸条具有特异性强、灵敏度高、方法简便、快速等优点,适合于鸡禽流感病毒抗体的现场快速检测.

摘要： 菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus，BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物。为解决普通RT-PCR不能直接检测大豆病种子中该病毒的问题，将简便快速的胶体金免疫层析技术(GICA)和高灵敏度的普通RT-PCR检测技术有机地结合起来，建立了GICA-RT-PCR检测新方法。即先用GICA捕获病毒，将捕获的病毒直接进行RT-PCR扩增，简化了检测的步骤，提高了检测的灵敏度。结果表明：用该方法检测提纯病毒灵敏度达到0.01μg/mL、检测大豆病叶和病大豆种皮，灵敏度达到10-4，分别比GICA检测提高了20倍、10倍和100倍。GICA-RT-PCR可进一步确认GICA的结果。

摘要： 禽流感呈世界性分布,对养禽业危害极大,常呈毁灭性的爆发与流行,该病血清亚型众多,抗原变异性强,宿主广泛,无交叉保护性,因此给防制带来困难.面对禽流感的流行态势,快速诊断是实现疫情预警、监控的有效手段,可为及时控制疫情赢得宝贵时间.本研究利用ELISA技术、乳胶凝集技术以及胶体金免疫层析技术开展了禽流感快速诊断的研究，包括检测H5亚型及通用型，既能检测抗原，也能检测抗体的系列诊断试剂，能够适应不同检测目的需要。该系列快速检测试剂特异性好、敏感性高，能及时、快速地检测包括排泄物、口鼻腔分泌物、鸡胚及细胞培养的病毒，最快在1分钟，最迟在3个小时内可确定诊断结果。

摘要： 在制备了单克隆抗体的基础上，应用胶体金免疫层析技术。建立了食品中黄曲霉毒素B1快速检测方法。方法：以柠檬酸三钠为还原剂，制备了20nm胶体金颗粒，以此胶体金标记纯化的单抗4G6，喷于玻璃纤维上，黄曲霉毒素B1蛋白偶联物和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上，依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装，切割成胶体金试纸条。组装的试纸条特异性好，与AF类似物无交叉反应，对AFB1标准品最低检测限为3ng／ml，检测时间约为10min，批内和批间重复性为100％，假阳性率和假阴性率均为0。操作简便，成本很低，适于AFB1的现场快速检测。

摘要： 免疫胶体金快速诊断技术(快速斑点免疫金渗滤技术和胶体金免疫层析技术)在生物医学各领域的应用日益广泛，本文重点介绍该技术在动物医学领域猪病、禽病快速诊断中的应用和研究进展，并对该技术将来在动物疾病检测中的应用趋势做出预测。

摘要： 目的:研制乙型肝炎病毒e抗原免疫层析快速检测试剂盒. 方法:应用不同的抗乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)单克隆抗体(2A6and3E5)分别包被硝酸纤维素膜(NCM)和标记胶体金颗粒,建立快速检测血清中HBeAg的胶体金免疫层析检测试剂盒(CGIA). 结果:该试剂盒所检测的结果与酶联免疫吸附实验(ELISA)结果相比较,阳性符合率为97.1﹪,阴性符合率为100﹪,总符合率为99.4﹪.结果统计表明,CGIA与ELISA两种检测HBeAg的方法无显著差异(P＞0.99). 结论:HBeAgCGIA具有简便、快速、特异、灵敏的优点,无需其它贵重仪器设备,可用于基层医院和体检现场使用.

摘要： 本文讨论了用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用,该试纸条适用于猪场现地样品的抗体检测和大面积普查.

摘要： 本发明样本检测领域，公开了一种胶体金免疫检测平台和胶体金免疫检测套件。其中，胶体金免疫检测平台包括操作侧和支撑侧，所述操作侧和所述支撑侧存在高度差，所述操作侧设置有检测区域和存储区域，所述检测区域设置有向下凹陷的检测槽，所述存储区域设置有凹陷的存储位，所述检测槽与所述存储位相互独立，所述存储位包括第一存储槽和第二存储槽，所述第二存储槽呈长条形，所述第二存储槽上设置有缺口，所述缺口在所述第二存储槽宽度方向上尺寸大于所述第二存储槽宽度。分区处理，物品放置整齐，而且减少操作步骤，加快检测进程。

摘要： 本发明属于毒素检测领域，涉及胶体金侧流层析法快速检测蓖麻毒素的方法及胶体金侧流层析试纸和试剂盒。该方法包括以下步骤：(1)将H1‑AuNPs‑FAM抗体、FAM抗体‑AuNPs与含有蓖麻毒素的待测样品孵育；H1的序列如SEQ ID NO：1所示；AuNPs的颗粒尺寸为2‑10nm；(2)将步骤(1)孵育所得混合液滴加至侧流层析试纸上；所述侧流层析试纸包括样品垫、检测区、吸收垫和带塑料背卡NC膜；所述检测区包括T线结合区、C线结合区；所述T线结合区设置有检测线，所述C线结合区设置有控制线；(3)根据检测线和控制线上金纳米粒子的显色值判读检测结果。本发明建立了检测蓖麻毒素的胶体金侧流层析方法，该方法无需制备相应抗体，且操作简单，可满足现场检测的需求。

摘要： 本发明提供一种乳腺癌检测胶体金侧向层析试纸条及其制备方法和同时检测乳腺癌和宫颈癌的胶体金侧向层析试纸条，属于免疫化学检测技术领域，所述胶体金侧向层析试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、样品垫、结合垫和吸收垫；本发明所述胶体金侧向层析试纸能够同时检乳腺癌miRNA标志物(miR‑16、miR‑191)和蛋白类标志物(CA153、CA125)。本发明还提供了一种同时检测乳腺癌和宫颈癌的胶体金侧向层析试纸条，能够克服背景信号的干扰(组分间杂交反应)，实现同时对宫颈癌和乳腺癌miRNA组和蛋白类两种不同类型的肿瘤标志物组的特异性检测，检测特异性达100％。

摘要： 本发明涉及一种胶体金免疫层析的胶体金标记液及其制备方法和应用，所述胶体金标记液中包含胶体金复合物，所述胶体金复合物为外侧连接有包裹蛋白的胶体金与抗25羟基维生素D抗体交联得到的复合物。将所述标记液喷涂于结合垫上并与硝酸纤维素膜、吸水垫和样品垫组装即得到25羟基维生素D胶体金免疫层析试纸条，可用于检测25羟基维生素D的含量。本发明通过包裹蛋白实现了胶体金与抗体的间接标记，包裹蛋白不仅显著提高了胶体金溶液的稳定性，而且包裹蛋白和抗体共价交联使得连接更紧密，且相比于胶体金直接标记，对抗体构象和免疫活性的影响更小，进而显著提高了检测试纸条的灵敏度和重复性，有效改善了试纸条的检测性能。

摘要： 本发明提供一种检测金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的胶体金免疫层析方法，能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)，并可实现定量，适用于现场快速检测。

摘要： 本发明建立的检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析方法，能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的单增李斯特菌，并可实现定量，适用于现场快速检测。本发明属于生物检测领域，具体涉及单增李斯特菌的检测快速定性和定量检测方法以及胶体金免疫检测试纸条。

摘要： 本发明涉及一种胶体金免疫层析的胶体金标记液及其制备方法和应用，所述胶体金标记液中包含胶体金复合物，所述胶体金复合物为外侧连接有包裹蛋白的胶体金与抗25羟基维生素D抗体交联得到的复合物。将所述标记液喷涂于结合垫上并与硝酸纤维素膜、吸水垫和样品垫组装即得到25羟基维生素D胶体金免疫层析试纸条，可用于检测25羟基维生素D的含量。本发明通过包裹蛋白实现了胶体金与抗体的间接标记，包裹蛋白不仅显著提高了胶体金溶液的稳定性，而且包裹蛋白和抗体共价交联使得连接更紧密，且相比于胶体金直接标记，对抗体构象和免疫活性的影响更小，进而显著提高了检测试纸条的灵敏度和重复性，有效改善了试纸条的检测性能。

摘要： 本实用新型公开了一种检测链格孢毒素AME的胶体金免疫层析试纸条及胶体金试剂卡，所述胶体金免疫层析试纸条包括PVC底板、样品垫、胶体金结合垫、NC膜和吸水膜，所述NC膜粘附在PVC底板上，胶体金结合垫和吸水垫分别粘附在NC膜的两端，样品垫粘附在胶体金结合垫的另一端，胶体金结合垫上包被有胶体金修饰的AME单克隆抗体，NC膜上设置了检测线和质控线，还可在所述试纸条的外部包裹塑料外壳构成胶体金试剂卡。该试纸条可以定性或半定量检测样本中的链格孢毒素AME的含量，可在5‑10min内实现AME的可视化检测，检测灵敏度达到10ng/mL，并且检测专一性强，操作简单，经济实用，适合于现场检测，可广泛应用于蔬菜、水果等大批量样本中AME的分析检测及快速筛查。

摘要： 本实用新型涉及一种用于胶体金免疫层析检测仪的层析柱固定装置，主要由固定座、层析柱、固定销构成，固定座上设有供层析柱一端伸入的插槽，固定座用于与胶体金免疫层析检测仪的电机连接，随所述电机一同转动；固定座上于插槽的侧槽壁上开设有贯通固定座外侧壁的安装孔，使用时，固定销卡在安装孔内，层析柱上开设有卡止槽，固定销内端伸入插槽内并卡入层析柱内的卡止槽内。本实用新型提供了一种安装方便、装入后稳定牢固的用于胶体金免疫层析检测仪的层析柱固定装置，有利于提高检测准确度。

摘要： 本实用新型涉及划膜喷金标机技术领域，且公开了一种胶体金免疫层析试纸条用划膜喷金标机，包括喷金机主体和与喷金机主体固接的划膜针管，所述喷金机主体上固接有若干安装板，所述安装板的一侧设有与之相匹配的划膜夹具，所述划膜夹具与划膜针管相匹配，所述安装板的下端开设有定位孔，所述安装板的下端滑动连接有两个对称设置的固定螺栓，所述划膜夹具靠近安装板的一端开设有螺纹孔。该种胶体金免疫层析试纸条用划膜喷金标机，通过划膜夹具对划膜针管进行夹持固定，随后拧动固定螺栓，使固定螺栓松开，然后转动划膜夹具，调整划膜夹具的角度，尽可能的使划膜针管弯曲的方向统一朝上，避免划膜针管的弯曲方向不同，影响划膜喷金标机的使用效果。