胰脂肪酶

摘要： 目的:探讨烘干和硫熏的加工方法对山楂质量的影响。方法:采用HPLC指纹图谱方法,对烘干山楂以及硫熏山楂化学成分进行分析比较;以对硝基苯基丁酸酯作为底物,在405 nm波长测定烘干山楂和硫熏山楂饮片的水提物对胰脂肪酶体外活性的抑制作用。结果:山楂烘干品和硫熏品指纹图谱相似度较高,硫熏山楂对胰脂肪酶活性的抑制作用显著低于烘干山楂。结论:硫熏降低山楂的药理活性,影响山楂饮片质量,建议在山楂的加工干燥过程中尽量不采用硫磺熏蒸的加工方法。

摘要： 为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))为0.99μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki=0.58μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为-30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。

摘要： 目的:研究乳杆菌发酵对坛紫菜发酵上清液营养成分及其抗氧化和抑制糖脂代谢关键酶活性的影响。方法:采用福林-酚法和亚硝酸钠-硝酸铝法分析乳杆菌发酵坛紫菜上清液中总酚和总黄酮含量;基于1H核磁共振代谢组学技术分析发酵上清液中的主要代谢产物;通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基、羟自由基清除能力实验和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶活力分析实验,评价发酵清液的抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶的活性。结果:乳杆菌发酵可有效提高坛紫菜发酵上清液中总酚和总黄酮的含量,促进乳酸、精氨酸、脯氨酸等代谢产物的释放。乳杆菌发酵增强坛紫菜上清液的抗氧化活性,其中乳杆菌发酵对羟自由基的清除效果最为显著,相当于700μg/mL VC对羟自由基的清除能力。此外,乳杆菌发酵坛紫菜上清液对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较未发酵坛紫菜上清液提高了2.1~2.2倍,对胰脂肪酶的抑制活性最高可达(95.3±1.3)%,相比于未发酵坛紫菜上清液提高了95.7%;上清液中总酚和总黄酮的增加是其抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶抑制活性增强的主要原因。结论:乳杆菌发酵可提高坛紫菜发酵上清液的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶抑制活性,具有减缓和辅助治疗糖尿病、肥胖等慢性疾病的潜在功效。

摘要： 采用酶动力学法探讨枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性的抑制作用。采用紫外、荧光和红外光谱研究枸杞叶黄酮与胰脂肪酶相互作用的机理。结果表明:枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性有抑制作用,半抑制浓度(IC_(50))为(0.910±0.008)mg/mL,抑制类型为可逆非竞争抑制,抑制常数为6.04 mg/mL。紫外和荧光光谱显示:枸杞叶黄酮能使胰脂肪酶芳香氨基酸暴露,微环境和酶构象改变,内源荧光猝灭,猝灭类型为动态猝灭为主的混合型猝灭。热力学参数显示:枸杞叶黄酮与胰脂肪酶的相互作用力主要为疏水相互作用。红外光谱显示:枸杞叶黄酮对酶蛋白二级结构的影响,主要表现为复合物结构变得有序化,β-折叠向α-螺旋的转化。枸杞叶黄酮通过改变胰脂肪酶结构和微环境,进而抑制胰脂肪酶活性。

摘要： 脏象学说是中医辨证论治的依据,但在中医典籍中没有关于胰的记载,为了完善脏象学说仅对胰的归属做一初步探讨,内容如下。一、现代医学对胰的认识胰是人体仅次于肝的第二大腺,由外分泌部和内分泌部混合构成。外分泌部分泌胰液。胰液中含有胰蛋白酶元、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,在消化过程中起重要作用。

摘要： 目的分析胆囊收缩素(CCK)对胰腺及胰腺癌发生的影响,并探讨绿茶成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的抗癌作用。方法将生长期小鼠随机分为4组,分别给予含大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)0 g/L(11只)、2 g/L(11只)、4 g/L(10只)和8 g/L(11只)的饮水,2周后处死小鼠,记录胰腺湿质量。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆CCK水平;测定胰腺组织中蛋白质、DNA、胰蛋白酶和脂肪酶含量;免疫组织化学染色检测胰腺组织增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞百分比。采用胰腺内包埋化学致癌物二甲基苯并蒽(DMBA)法建立癌发生模型。将15只小鼠随机均分为正常对照组、DMBA包埋组、DMBA+2 g/L STI组、DMBA+8 g/L STI组、DMBA+8 g/L STI+EGCG组,6周后处死小鼠,取胰腺进行组织学分析。结果2 g/L STI组CCK水平高于0 g/L STI组,8 g/L STI组高于0、2和4 g/L STI组(P<0.05)。2、4 g/L STI组胰腺湿质量高于0 g/L STI组,8 g/L STI组高于0、2 g/L STI组(P<0.05)。2、4 g/L STI组胰腺蛋白质和DNA含量高于0 g/L STI组,8 g/L STI组高于0、2和4 g/L STI组(P<0.05)。0、2、4和8 g/L STI组胰蛋白酶含量依次升高;2、4、8 g/L STI组胰脂酶含量高于0 g/L STI组(P<0.05)。0、2、4、8 g/L STI组小鼠胰腺组织PCNA阳性细胞比例依次升高(P<0.05)。胰腺癌前病变程度随饮水中的STI剂量增大而加重,EGCG可减轻此病变。结论STI可诱发梯度CCK血症,并刺激胰腺增生、胰酶生成及胰腺癌发生,而EGCG具有减轻胰腺癌前病变的作用。

摘要： 目的探讨联合检测胰脂肪酶、血淀粉酶和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平对急性胰腺炎(AP)诊断的价值。方法选择2019年1月至2020年6月确诊为AP患者40例作为观察组,选择同期间消化科非胰腺炎急腹症住院患者40例作为对照组。检测2组患者之间胰脂肪酶、血淀粉酶和hs-CRP水平,并检测AP患者发病初期、中期以及恢复期hs-CRP水平变化。结果观察组患者胰脂肪酶水平[(1443±1445)U/L]高于对照组[(139±196)U/L],差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者动态检测3次的hs-CRP水平间差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者胰脂肪酶水平检测的敏感度为92%,特异度为98%,血淀粉酶水平检测的敏感度为82%,特异度为95%。结论联合检测胰脂肪酶、血淀粉酶水平对AP诊断的有重要的临床价值,而动态检测hs-CRP的水平可以作为胰腺炎进展与转归的一个重要的参考指标。

摘要： 目的观察雪莲果浸膏对高脂模型大鼠的降脂作用及机制。方法利用网络药理学方法对雪莲果干预高脂血症的可能分子机制进行预测,确定脂质代谢研究对象;80只SD大鼠随机选取20只作为空白组(普通饲料饲养8周),60只作为高脂模型组(用高脂高糖饲料饲养8周建模);建模成功后高脂模型组大鼠再分为阳性对照组、模型组及雪莲果浸膏(高、中、低)剂量组,雪莲果浸膏3个剂量组给予相应浓度雪莲果浸膏灌胃、阳性对照组给予奥利司他灌胃、其余各组给予生理盐水灌胃,连续8周,观察各组大鼠的体质量变化;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,实时荧光定量PCR及免疫印迹法分别检测各组大鼠胰腺组织中胰脂肪酶、辅脂酶的m RNA及蛋白水平。结果通过网络药理学对雪莲果干预高脂血症的可能分子机制进行预测分析,确定胰脂肪酶和辅脂酶为脂质代谢研究的目标;动物实验结果显示,与模型组比较,雪莲果浸膏可降低高脂大鼠胰腺组织中胰脂肪酶、辅脂酶m RNA及蛋白表达水平(P<0.05),能改善高脂模型大鼠的血脂情况。结论雪莲果浸膏具有降脂作用,其机制为抑制胰脂肪酶、辅脂酶表达,抑制胰腺中胰脂肪酶、辅脂酶的合成,降低大鼠肠道对脂质的吸收。

摘要： 抑制胰脂肪酶的活性能够有效地减少肥胖的发生。该研究从酶学动力学、荧光猝灭和分子对接的不同角度研究柚皮素对胰脂肪酶的抑制作用。抑制酶活性试验结果表明,柚皮素以可逆竞争性方式抑制胰脂肪酶的活性,且半数抑制浓度为2.413 mmol/L。荧光猝灭试验结果显示,柚皮素与胰脂肪酶结合后酶的荧光被猝灭,胰脂肪酶的构象发生变化。分子对接结果显示,柚皮素与胰脂肪酶形成了酶-抑制剂复合物,阻止了酶和底物的结合,从而导致酶催化活性降低。

摘要： 胰脂肪酶家族包括三酰甘油脂肪酶及其相关蛋白1、相关蛋白2、羧基酯脂肪酶,各成员的功能与高脂饮食所致的急性胰腺炎和肥胖的发生发展密不可分.本文总结胰脂肪酶家族主要成员对脂类代谢吸收的特点,阐述胰脂肪酶家族在脂代谢相关的急性胰腺炎和肥胖疾病中的研究进展.

摘要： 用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取青砖茶水浸提物，分析各萃取层主要活性成分及其对胰脂肪酶活性的影响。结果表明，三氯甲烷层主要含咖啡碱，乙酸乙酯层主要含茶多酚，正丁醇层主要含茶多酚、糖类及茶氨酸，沉淀层主要含多糖及少量茶多酚，剩余水层含较多可溶性糖及少量茶多酚等物质。各萃取层样品除氯仿层外，对胰脂肪酶活性均有一定的抑制作用，其中正丁醇层的抑制作用最显著，半抑制浓度为2.90mg/ml；乙酸乙酯层次之，半抑制浓度为6.11mg/ml；原水提物、沉淀层和剩余水层的抑制作用相对较弱。乙酸乙酯层经Selphadex LH-20柱层析分离出的1号和2号样品对胰脂肪酶活力抑制作用有较大提高，半抑制浓度分别为4.13mg/ml和3.07mg/ml；正丁醇层经Selphadex LH-20柱层析出的样品较原样品对胰脂肪酶的抑制效果下降明显，说明正丁醇层内含各成分对胰脂肪酶有协同抑制作用。

摘要： 目的:西洋参茎叶总皂苷及单体皂苷是否抑制胰脂肪酶活性;西洋参茎叶总皂苷是否可以抑制由于高脂肪饲料引起的小鼠肥胖.方法:西洋参茎叶总皂苷及单体皂苷抑制胰脂肪酶活性是通过体外实验测定油酸的释放率;体内实验应用ICR系雌性小鼠,饲喂含有1﹪或者3﹪西洋参茎叶总皂苷和不含有1﹪或者3﹪西洋参茎叶总皂苷的高脂饲料.结果:体外实验表明,西洋参茎叶总皂苷在0.5g/L浓度时,对胰脂肪酶活性的抑制率为90﹪;人参皂苷Rc,Rb1,Rb2对胰脂肪酶活性均显示很强的抑制作用,在0.5g/L浓度时抑制率分别为100﹪,96﹪,97﹪;体内实验表明,西洋参茎叶皂苷对体重影响变化不大,但可以明显降低子宫周围脂肪重量.结论:西洋参茎叶总皂苷和人参皂苷Rc,Rb1,Rb2可以抑制胰脂肪酶活性.因此西洋参茎叶总皂苷的抗肥胖作用可能是由于西洋参总皂苷中的人参皂苷Rc,Rb1,Rb2抑制小肠吸收食物脂肪的结果.

摘要： 目的:建立灵敏可靠、简单易行、实用性强的胰脂肪酶抑制剂体外筛选模型.方法:采用96孔板比浊法,选择临床注射用静脉脂肪乳剂Intralipid作酶活性测定底物,测定:(1)静脉脂肪乳剂的稳定性;(2)胰脂肪酶对静脉脂肪乳剂的水解;(3)奥利司他对胰脂肪酶活性的抑制;(4)BSA对奥利司他抑制胰脂肪酶活性的影响.结果:(1)该静脉脂肪乳剂稀释500-1000倍后性质依然稳定,可用作胰脂肪酶活性测定底物.(2)胰脂肪酶可水解此乳剂底物,引起浊度下降,其速度随加入酶量的增加而加快.(3)阳性对照药奥利司他(orlistat)可抑制胰脂肪酶对此静脉脂肪乳剂底物的水解,并呈现良好量效关系.(4)蛋白成分(BSA)对奥利司他抑制胰脂肪酶活性的作用影响不大.结论:采用Intralipid作乳剂底物所建立的96孔比浊法胰脂肪酶测定方法灵敏可靠、简便易行,是体外筛选胰脂肪酶抑制剂的良好模型.

摘要： 将茯砖茶提取物依次用三氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇萃取后，测定各部分对α–淀粉酶及胰脂肪酶活性的影响，研究发现茯砖茶各部分对酶活性的影响程度不同，各部分对α–淀粉酶活性均有激活作用，其中以乙酸乙酯萃取部位的激活作用最强，激活倍数为对照的4.09倍，其次是水提物，其激活倍数为对照的2.99倍；水层的激活作用最弱，其激活倍数为1.20倍；三氯甲烷萃取层稍有抑制作用。茯砖茶各部分对胰脂肪酶活性的影响程度也不同，三氯甲烷萃取层稍有抑制作用，水提物、乙酸乙酯萃取层及正丁醇萃取层有较明显的激活作用，正丁醇萃取层部分激活作用最明显，达2.54倍。乙酸乙酯及正丁醇萃取层部分经过HP-20树脂再分离后，各样品仍有较高的活性。

摘要： 目的:本课题根据中医传统理论,结合现代相关研究,就具有运脾消积法之功效的三术减肥汤对单纯营养型肥胖大鼠血清胰脂肪酶(LPS)、甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量的影响进行了实验研究,并对该方剂治疗单纯营养型肥胖的作用机理进行了理论研究.方法:实验选取40只SD大鼠,雌雄各半,体重45g-55g,随机分为五组,每组8只,对于模型组采用单纯营养型肥胖大鼠的造模方法,每天给予高脂饲料喂食,45天后,缎带实验动物灌服实验药及对照药,30天后检测各组血清LPS、TG、TC、LDL、HDL含量.结果:三术减肥汤高剂量组LPS、TG、TC、LDL较月见草油组明显降低(P<0.05=,HDL明显高于月见草油组(P<0.05),两组比较有显著差异.而三术减肥汤低剂量组与月见草油组比较无明显差异,但从统计学中显示:低剂量组略优于月见草油组有,物LPS、TG、TC、LDL均低于模型空白组(P<0.01),HDL值均高于模型空白组(P<0.01),比较有显著差异.结论:三术减肥汤对血清LPS、TG、TC、LDL、HDL的影响,可以降低LPS、TG、TC、LDL水平,升高HDL水平.从而具有减轻体重,改善血脂水平的异常,对单纯营养型肥胖直到治疗作用.

摘要： 本发明涉及使用酵母表面展示载体筛选具有改良的酶活性的脂肪酶的方法和通过该方法制备的该突变脂肪酶，更具体地涉及包含：1)将脂肪酶基因克隆到表面展示载体中，2)通过诱变PCR制备步骤1的脂肪酶的突变基因文库，3)将步骤2的突变脂肪酶基因文库和表面展示载体转化到宿主细胞中，和4)测量在转化的宿主细胞的表面展示的突变脂肪酶的活性并选择如此制备的突变脂肪酶的方法。本发明的方法可筛选具有改良的酶活性的脂肪酶。因此，其可有效用于各种领域，如食品和洗涤剂工业。

摘要： 一种属于假单胞菌属(Pseudomonas)的细菌、该细菌所产生的具有如下性质的脂肪酶、该脂肪酶的制造方法及含该脂肪酶的洗涤剂组合物。;以三油酸甘油酯乳液为基质，其作用pH为3.5-12，最佳pH为10-12；其作用温度为30-80°C，最佳温度为55-65°C；以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得的分子量为31000±2000；由等电点聚丙烯酰胺凝胶电泳法所测得的等电点为5.2±0.5。本发明的脂肪酶在各种市售的洗涤剂溶液中，又在与表面活性剂、蛋白酶等的洗涤剂成分共存时，具有较高的稳定性和活性，可以在洗涤条件下有效地去除油脂污垢，可增加洗涤剂的洗净力。

摘要： 本发明涉及使用酵母表面展示载体筛选具有改良的酶活性的脂肪酶的方法和通过该方法制备的该突变脂肪酶，更具体地涉及包含：1)将脂肪酶基因克隆到表面展示载体中，2)通过诱变PCR制备步骤1的脂肪酶的突变基因文库，3)将步骤2的突变脂肪酶基因文库和表面展示载体转化到宿主细胞中，和4)测量在转化的宿主细胞的表面展示的突变脂肪酶的活性并选择如此制备的突变脂肪酶的方法。本发明的方法可筛选具有改良的酶活性的脂肪酶。因此，其可有效用于各种领域，如食品和洗涤剂工业。

摘要： 本发明公开了一种抑制胰脂肪酶活性的酶解燕麦乳及其制备方法。包括：(1)浸泡；(2)打浆；(3)淀粉全酶解和葡聚糖的限制性酶解；(4)蛋白酶酶解；(5)碱性蛋白酶复合酶解；(6)均质灭菌。本发明在保证燕麦乳生产品质的同时，提高了燕麦乳的胰脂肪酶抑制活性，起到抑制脂肪分解吸收、防止肥胖的效果，工艺简单，适合工业化生产。

摘要： 本发明抗犬胰脂肪酶特异性单链抗体、质粒载体及方法，提供了一种重组蛋白，该重组蛋白氨基酸序列由犬胰脂肪酶的两个优势表位重复串联组成，并采用大肠杆菌偏爱密码子将重组蛋白氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成核苷酸序列并构建重组表达载体，从而提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。本发明还涉及用该重组蛋白免疫小鼠建立噬菌体库，经淘选筛选得到对应cPL单链抗体scfv序列，将得到的scfv序列构建成完整鼠IgG抗体序列表达载体，通过瞬转HEK293F细胞表达单克隆抗体，纯化单克隆抗体，通过免疫荧光正交实验确定最佳单抗配对组合。

摘要： 本发明涉及一种具有抑制胰脂肪酶活性的N6‑乙酸乙酯基‑3’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。N6‑乙酸乙酯基‑3’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷为黄色油状物质，经一维和二维核磁共振、精确质谱鉴定分别得到N6‑乙酸乙酯基‑3’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷结构式。本发明的N6‑乙酸乙酯基‑3’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷通过培养蝉花真菌，然后提取分离得到。本发明的N6‑乙酸乙酯基‑3’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷可用于制备胰脂肪酶抑制剂，具有治疗肥胖作用的潜力，同时还可能对糖尿病有潜在作用。本发明的制备方法采取微生物发酵生产，环境友好，不受自然环境和资源影响，易实现工业化、自动化、连续化生产。

摘要： 本发明涉及具有抑制胰脂肪酶活性的N6‑羟乙基‑5’‑乙酰基‑β‑核糖腺苷及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。N6‑羟乙基‑5’‑乙酰基‑β‑核糖腺苷为白色粉末状物质，经一维和二维核磁共振、精确质谱鉴定分别得到N6‑羟乙基‑5’‑乙酰基‑β‑核糖腺苷结构式。本发明的N6‑羟乙基‑5’‑乙酰基‑β‑核糖腺苷通过培养蝉花，然后提取分离得到。本发明的N6‑羟乙基‑5’‑乙酰基‑β‑核糖腺苷可用于制备胰脂肪酶抑制剂，具有治疗肥胖作用的潜力，同时还可能对糖尿病有潜在作用。本发明的制备方法采取微生物发酵生产，环境友好，不受自然环境和资源影响，易实现工业化、自动化、连续化生产。

摘要： 本发明公开了胰脂肪酶抑制肽及其应用，所述胰脂肪酶抑制肽的氨基酸序列分别为：Trp‑Asp‑Val‑Ser‑Leu‑Gly‑Pro‑Val‑Leu‑Pro‑Val、Glu‑Trp‑His‑Leu‑Thr‑Glu‑Leu‑Phe、Glu‑Tyr‑Pro‑Gln‑Ser‑Phe‑Leu‑Arg，纯度依次为95.95％、96.23％、95.98％。本发明肽使用多肽合成仪，采用固相合成法合成。体外胰脂肪酶的抑制活性检测表明：三条合成肽的50％抑制浓度(IC50)依次为0.4796mM、0.5634mM、0.4948mM。本发明提供三条具有潜在胰脂肪酶抑制活性的合成肽，可应用于生物制药领域。

摘要： 本发明涉及一种具有抑制胰脂肪酶活性的N6‑乙酸乙酯基‑5’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。N6‑乙酸乙酯基‑5’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷为黄色油状物质，经一维和二维核磁共振、精确质谱鉴定分别得到N6‑乙酸乙酯基‑5’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷结构式。本发明通过培养蝉花真菌，然后提取分离得到所需的化合物。本发明制备的N6‑乙酸乙酯基‑5’‑乙酯基‑β‑核糖腺苷可用于制备胰脂肪酶抑制剂，对治疗肥胖具有潜力作用，同时还可能对糖尿病有潜在作用。本发明的制备方法采取微生物发酵生产，环境友好，不受自然环境和资源影响，易实现工业化、自动化、连续化生产。

摘要： 本申请提供了具有胰脂肪酶抑制剂效果的肽，其序列选自SEQ ID NO.1‑5；本申请还提供了上述肽在制备治疗高脂血症的药物、食品、保健品中的应用。本申请的肽为植物源的、无毒无害的天然物质，实验证明了其具备显著的胰脂肪酶抑制活性和降脂功效；其作用机理清楚、靶点明确，有望成为预防和治疗高脂血症的替代药物，在医药和功能性食品行业具有良好的市场前景。